比克白芷內(nèi)酯的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及比克白芷內(nèi)酯的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 腎臟是人體的重要器官，用于保證機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，是新陳代謝得以正常進(jìn)行。 腎損傷時(shí)泌尿外科常見的急癥之一，對腎損傷做出適當(dāng)?shù)闹委煼桨?，對減輕患者的傷情，改 善預(yù)后情況至關(guān)重要。因此，近年來腎損傷保護(hù)藥物在不斷的研究和開發(fā)中。
[0003] 研究發(fā)現(xiàn)中藥對腎損傷具有明顯的保護(hù)作用，而且相對于西藥來說，中藥更加溫 和安全，副作用較小。羌活，傘形科、羌活屬植物，性溫，散表寒；祛風(fēng)濕；利關(guān)節(jié)；止痛。主 外感風(fēng)寒；頭痛無汗；風(fēng)水浮腫；瘡瘍腫毒。用于陽痿遺精，遺尿尿頻，腰膝冷痛，腎虛作喘， 五更泄瀉；外用治白癜風(fēng)，斑禿。解表散寒，祛風(fēng)勝濕，止痛。羌活中含有多種活性物質(zhì)，如 凱林內(nèi)酯、紫花前胡苷元、異虎耳草素、茴香酸對羥基苯乙酯、比克白芷內(nèi)酯（白當(dāng)歸素）、 佛手酚等，這些活性物質(zhì)具有多種藥用作用。其中，比克白芷內(nèi)酯被報(bào)道可治療胰腺炎和膽 囊炎，如專利CN104188960A公開了一種白當(dāng)歸素在制備治療胰腺炎藥物中的應(yīng)用。此外， 其組合物用于預(yù)防和/或治療由氣滯血瘀所致的多種疼痛，如胃痛、脅痛、頭痛及痛經(jīng)等， 尤其適用于緊張性頭痛，還可用于預(yù)防和/或治療抑郁癥，如專利201110332447. 5公開了 一種中藥成分組合物及其用途。但是，尚未見文獻(xiàn)報(bào)道比克白芷內(nèi)酯具有防止腎損傷的功 效。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供比克白芷內(nèi)酯的新應(yīng)用，比克白芷內(nèi)酯具有防 止腎損傷、保護(hù)腎損傷細(xì)胞的功效，使其能夠應(yīng)用于腎損傷保護(hù)藥物的制備中。
[0005] 比克白芷內(nèi)酯，別名白當(dāng)歸素，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：
[0007] 其中，作為優(yōu)選，所述腎損傷為順鉑所致腎損傷。
[0008] 比克白芷內(nèi)酯獲取途徑既可以從含有該成分的天然物質(zhì)如白芷、羌活中提取，也 可以利用化學(xué)合成方法加以人工合成。作為優(yōu)選，本發(fā)明所述比克白芷內(nèi)酯從羌活中提取 獲得，更進(jìn)一步優(yōu)選地，米取以下方法獲得：
[0009] 步驟1、粉碎羌活根莖，加入乙醇溶液提取，提取液過濾、濃縮后加鹽酸調(diào)節(jié)pH為 2,加熱回流并濃縮蒸干獲得粗提物；
[0010] 步驟2、粗提物加入乙醇溶液復(fù)溶，通過大孔樹脂柱吸附，依次水洗脫4個(gè)柱體積， 40%乙醇洗脫3個(gè)柱體積，60%乙醇洗脫6個(gè)柱體積，收集60%乙醇洗脫液，除去溶劑，濃縮 至浸膏，然后加入乙酸乙酯溶解、過濾，濾液除去溶劑，濃縮、干燥，獲得羌活提取物；
[0011] 步驟3、羌活提取物加甲醇溶解后，加入等量的粗硅膠中攪拌均勻，烘干后倒入到 含4~5倍量的200-300目硅膠柱中；石油醚平衡D-101柱子以后，利用石油醚-乙酸乙酯 50:1、20:1、10:1各洗脫4個(gè)柱體積，收集10:1洗脫部位濃縮蒸干，加甲醇溶解后，離心，取 上清液，利用高壓制備液相色譜進(jìn)行制備分離，獲得比克白芷內(nèi)酯。
[0012] 其中，步驟1所述羌活根莖與乙醇溶液的體積質(zhì)量比優(yōu)選為lg:6-10mL。
[0013] 高壓制備液相色譜條件優(yōu)選如下：
[0014] 安捷倫1260型制備色譜儀，色譜柱為Fuji C18 (250 X 50mm);流動相為乙腈-水； 檢測波長為310nm ;洗脫程序?yàn)?~60min，乙腈30%，水70% ;流速為30mL ? min-1;柱溫 為 30°C。
[0015] 步驟2所述粗提物加入乙醇溶液復(fù)溶優(yōu)選為粗提物加入羌活根莖總重1倍量的 40%乙醇溶液溶解。
[0016] 述大孔樹脂柱優(yōu)選為D-101型大孔樹脂柱。
[0017] 所述大孔樹脂柱重量優(yōu)選為羌活根莖總重的2倍。
[0018] 步驟1所述乙醇溶液的體積百分濃度優(yōu)選為70%。
[0019] 順式比克白芷內(nèi)酯以及反式比克白芷內(nèi)酯在對順鉑所致HK-2細(xì)胞腎損傷模型的 試驗(yàn)中均表現(xiàn)出對正常HK-2細(xì)胞的安全性以及對腎損傷細(xì)胞的保護(hù)作用。因此，本發(fā)明提 供比克白芷內(nèi)酯在制備腎損傷保護(hù)藥物中的應(yīng)用。
[0020] 由以上技術(shù)方案可知，本發(fā)明提供了比克白芷內(nèi)酯在保護(hù)腎損傷細(xì)胞中的應(yīng)用， 從而為臨床上防止腎損傷提供多一種安全有效的用藥選擇。比克白芷內(nèi)酯在安全劑量內(nèi)能 夠有效地保護(hù)腎損傷細(xì)胞，可進(jìn)一步開發(fā)為腎損傷保護(hù)藥物，具有廣泛的應(yīng)用前景。
【附圖說明】
[0021] 圖1所示為羌活提取物高壓制備液相色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0022] 本發(fā)明公開了比克白芷內(nèi)酯的應(yīng)用，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改 進(jìn)工藝參數(shù)實(shí)現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯 而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明所述產(chǎn)品和制備方法以及應(yīng)用已經(jīng)通過較 佳實(shí)施例進(jìn)行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本
【發(fā)明內(nèi)容】
、精神和范圍內(nèi)對本文所述的 方法和應(yīng)用進(jìn)行改動或適當(dāng)變更與組合，來實(shí)現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。
[0023] 以下就本發(fā)明所提供的比克白芷內(nèi)酯的應(yīng)用做進(jìn)一步說明。
[0024] 實(shí)施例1 :比克白芷內(nèi)酯的提取分離
[0025] 將羌活根莖粉碎成粗粉，按體積/質(zhì)量加入6~10倍的70%乙醇溶液提取兩次， 每次I. 5小時(shí)，合并過濾液，濃縮至無醇味后加水至藥材重量的1倍；濃縮液加入濃鹽酸調(diào) 節(jié)pH至2,加熱回流0. 5個(gè)小時(shí)，濃縮蒸干，加入藥材重量1倍量的40%乙醇溶液使其完全 溶解。水解液通過2倍藥材重量的D-101大孔樹脂柱（徑高比為1:8)吸附后，水洗脫4個(gè) 柱體積，40 %乙醇洗脫3個(gè)柱體積，60 %乙醇洗脫6個(gè)柱體積。60 %乙醇洗脫液合并，回收溶 劑，濃縮至浸膏。浸膏加入乙酸乙酯溶液，使其溶解完全，濾過，回收溶劑，濃縮至浸膏，60°C 真空干燥，粉碎即得羌活提取物。
[0026] 羌活提取物加適量甲醇溶解后，加入等量的粗硅膠（80-100目）中攪拌均勻，烘干 后倒入到含4~5倍量的硅膠（200-300目）柱中。石油醚平衡D-101柱子以后，利用石油 醚-乙酸乙酯50:1、20:1、10:1各洗脫4個(gè)柱體積，收集10:1部位濃縮蒸干。石油醚-乙 酸乙酯10:1洗脫部位加甲醇溶解后，離心，取上清液，利用高壓制備液相進(jìn)行制備，收集比 克白芷內(nèi)酯色譜峰，濃縮干燥后獲得比克白芷內(nèi)酯。
[0027] 高壓制備液相色譜條件：安捷倫1260型制備色譜儀，色譜柱為Fuji C18(250X50mm);流動相為乙腈（A)-水（B);檢測波長為310nm;洗脫程序?yàn)?~60min， A30%，B70% ;流速為 30mL ? min S柱溫為 30°C。
[0028] 比克白芷內(nèi)酯鑒定結(jié)果如下：
[0029] 1HNMR(400MHz,DMS0) 8 ：6. 34 (1H,d,J= 9. 8Hz,H-3), 8. 19 (1H,d,J= 9. 8Hz,H-4), 4. 17 (3H,s, 5-0CH3), 8. 10 (1H,d,J= 2. 3Hz,H-2r ), 7. 39 (1H,d,J =2. 3Hz,H-3r ),5.00 (1H,d,J= 5. 7Hz,H-2 " )，4. 4 5 (IH,dd,J= 10.0,2.2Hz，H-2