孔鰩提取物在酒精性腦損傷保護(hù)藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種孔鰩提取物對(duì)酒精性腦損傷保護(hù)藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 酒精中毒是過(guò)量飲酒引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)由興奮轉(zhuǎn)為抑制的狀態(tài)，長(zhǎng)期大量飲酒可 引起全身多器官的損害，特別對(duì)腦的損害更明顯。目前酒精中毒及成癮已經(jīng)成為嚴(yán)重危及 人類健康的世界性的社會(huì)問(wèn)題。
[0003] 當(dāng)大量酒精蓄積在體內(nèi)，超過(guò)肝臟的分解代謝能力時(shí)，可直接吸收入血，酒精是親 脂的小分子化學(xué)物質(zhì)，易于通過(guò)血腦屏障作用于腦。有文獻(xiàn)報(bào)道酒精中毒后會(huì)引起腦血管 自身的病變影響腦血流情況，造成缺血缺氧改變，這可能是酒精中毒后腦損傷的機(jī)制之一； 此外，酒精的直接作用、酒精的代謝產(chǎn)物的影響及自由基的損害也是引起腦損傷的因素。慢 性酒精中毒腦損傷病理學(xué)觀察可發(fā)現(xiàn)血管的改變、大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目的減少、神經(jīng)細(xì) 胞排列不規(guī)則、細(xì)胞核輕度固縮等改變。
[0004] 對(duì)于慢性酒精中毒的治療，臨床上多采用納洛酮靜滴催醒以及一些能量合劑對(duì)癥 治療，但是納洛酮對(duì)于酒精代謝無(wú)明顯影響，而且患者醒后存在不適癥狀，因此尋找一種純 天然無(wú)毒副作用的活性物質(zhì)甚為必要和迫切。
[0005] 孔鰩（Raja porosa Gilnther)，軟骨魚綱、鰩形目、鰩科。黃、渤海中一年四季 皆有，產(chǎn)量大，為重要的漁業(yè)捕撈對(duì)象，其內(nèi)骨骼全是軟骨，鰭條為角質(zhì)鰭條，本發(fā)明人從 孔鰩軟骨中提取得到孔鰩提取物，并證實(shí)該提取物對(duì)酒精性肝損傷具有保護(hù)作用（參見 ZL201310513265. 7)，但其對(duì)酒精性腦損傷的作用未見報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種孔鰩提取物在制備酒精性腦損傷保護(hù)藥物中的應(yīng)用，以 滿足現(xiàn)有技術(shù)的上述需求。
[0007] 采用大鼠酒精性腦損傷動(dòng)物模型測(cè)試了制備的孔鰩提取物對(duì)谷胱甘肽過(guò)氧化物 酶（6311^^)、超氧化物歧化酶（300)、丙二醛（10^)及|3-內(nèi)啡肽（|3 4?)的作用。實(shí)驗(yàn)表 明，本發(fā)明孔鰩提取物可使SOD、GSH-PX含量升高，MDA、P-EP含量明顯降低，從而發(fā)揮對(duì) 酒精性腦損傷保護(hù)作用，因此本發(fā)明的孔鰩提取物可用作酒精性腦損傷保護(hù)劑。
【具體實(shí)施方式】
[0008] 下面通過(guò)實(shí)施例和試驗(yàn)例進(jìn)一步闡述本發(fā)明孔鰩提取物的制備，以及其在對(duì)酒精 性腦損傷保護(hù)應(yīng)用的有益效果。
[0009] 實(shí)施方案 實(shí)施例1:制劑的制備 (1)本發(fā)明孔鰩提取物膠囊制劑的制備 分別稱取上述步驟制備的孔鰩提取物l〇〇mg、淀粉395mg、硬脂酸鎂5mg，均勾混合，填 充成膠囊。
[0010] (2)本發(fā)明孔鰩提取物片劑的制備 分別稱取上述步驟制備的孔鰩提取物l〇〇mg、淀粉295mg、乳糖100mg，均勾混合，用濕 法制粒、干燥，整粒后與5mg硬脂酸鎂混合，壓成片劑。
[0011] 試驗(yàn)例1 :孔鰩提取物治療酒精性腦損傷作用的藥效學(xué)研究 1、 試驗(yàn)材料 (1) 孔鰩 (2) 超氧化物歧化酶（SOD)試劑盒、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-PX)試劑盒及丙二醛 (MDA)試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所，P -內(nèi)啡肽試劑盒購(gòu)自美國(guó)RB公司 (3)雄性Wistar大鼠，華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部提供 2、 試驗(yàn)方法： 雄性Wistar大鼠40只，按體重隨機(jī)分為4組，A組為空白對(duì)照組，B組為酒精模型組， C、D組分別為本發(fā)明孔鰩提取物低、高劑量干預(yù)組，分別給予50、100 mg Ag1 41灌胃， 除空白組外，其余實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給予50%乙醇8 ml ? kg 1 ? d 1灌胃，持續(xù)2周；第3周把乙醇劑 量遞增為12 ml ? kg 1 ? d \持續(xù)灌胃2周，第4周把乙醇劑量遞增為16 ml ? kg 1 ? d \持 續(xù)灌胃4周。末次灌胃后禁食不禁水12h，給予戊巴比妥納麻醉，在冰臺(tái)上取出腦組織，采用 二硫代二硝基苯甲酸法測(cè)定GSH-PX，用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定腦組織中S0D，采用硫代巴比 妥酸法測(cè)定MDA，固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA)測(cè)定P -EP。
[0012] 3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果 本發(fā)明孔鰩提取物對(duì)酒精中毒大鼠腦組織中GSH-PX、SOD MDA及P-EP含量影響 與空白對(duì)照組比較，酒精模型組血清中GSH-PX、S0D含量降低MDA、I3-EP含量升高； 與酒精模型組比較，本發(fā)明孔鰩提取物低、高劑量組均能抑制GSH-PX、SOD的降低及MDA、 0-EP含量的升高。
[0013] 表1本發(fā)明孔鰩提取物對(duì)酒精中毒大鼠腦組織中GSH-PX、SOD、MDA及0 -EP含 量影響
試驗(yàn)例2:本發(fā)明孔鰩提取物的急性毒性試驗(yàn) 1、 試驗(yàn)動(dòng)物： 昆明種小鼠，體重20±2g，由青島市藥檢所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供 2、 藥物： 本發(fā)明的孔鰩提取物 3、 試驗(yàn)方法： 根據(jù)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局頒布修訂的"中藥新藥研究技術(shù)要求"，對(duì)本發(fā)明的孔鰩提取 物進(jìn)行急性毒性實(shí)驗(yàn)。因受藥物濃度及體積限制，無(wú)法測(cè)定LD50，故進(jìn)行最大給藥量實(shí)驗(yàn)。 取昆明種小鼠30只，雌性各半，ig，給予膠囊劑中藥物lg/mL，每只0.8 mL，即小鼠的最大 灌胃體積，用藥后觀察小鼠活動(dòng)狀態(tài)、飲食、糞便、呼吸、體重及死亡情況，連續(xù)觀察14d. 4、試驗(yàn)結(jié)果： 各組小鼠灌胃給藥后生長(zhǎng)良好，體重增加，行為正常，均未見死亡及明顯反應(yīng)。將動(dòng)物 處死后，肉眼觀察各主要臟器無(wú)異?，F(xiàn)象。
[0014] 結(jié)果表明，本發(fā)明的孔鰩提取物最大劑量口服應(yīng)用，對(duì)動(dòng)物無(wú)明顯損害，未發(fā)現(xiàn)對(duì) 機(jī)體產(chǎn)生的毒性反應(yīng)，是一種安全可靠的藥物。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 孔鰩提取物在在酒精性腦損傷保護(hù)藥物中的應(yīng)用。2. 根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其特征在于：將孔鰩提取物與藥學(xué)上可接受的載體一起制 成膠囊劑、片劑、丸劑、散劑、顆粒劑。
【專利摘要】一種孔鰩提取物對(duì)酒精性腦損傷保護(hù)藥物中的應(yīng)用，所述的孔鰩提取物是孔鰩軟骨提取制得的，孔鰩提取物可增加慢性酒精中毒大鼠腦組織中SOD和GSH-PX活性，降低腦組織中MDA和β-EP，對(duì)酒精中毒大鼠腦損傷具有保護(hù)作用，可將其制成多種劑型，可用作酒精性腦損傷保護(hù)劑，具有療效顯著、無(wú)副作用，價(jià)格低廉、安全方便優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)。
【IPC分類】A61P25/00, A61K35/60
【公開號(hào)】CN105193851
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510607244
【發(fā)明人】高華, 劉坤, 王威, 于茲東, 劉小紅, 石振艷
【申請(qǐng)人】青島大學(xué)
【公開日】2015年12月30日
【申請(qǐng)日】2015年9月22日