用超臨界流體從貝母花中提取貝母總生物堿的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及貝母總生物堿的提取，具體涉及用超臨界流體從貝母花中提取貝母總生物堿的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]貝母是百合科(ZiWaceae)貝母屬{Fritillarii)植物，傳統(tǒng)藥用部位為其鱗莖，貝母主治傷寒煩熱、咳嗽止氣、安五臟、利骨髓、消痰潤心肺，兼有消炎退腫、治療痛癤腫毒等功效。1982年版《中藥志》述:有“清熱潤肺、化痰止咳、散結(jié)功能等功效”，臨床用于痰熱咳嗽、臉色悶痰，治瘰癘和瘡瘍腫毒。貝母主要藥用成份為貝母生物堿，包括貝母甲素、貝母乙素等，貝母生物堿具有自由基清除活性。目前從貝母中提取總生物堿的方法為傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑萃取，如公告號(hào)為CN1146425的發(fā)明專利，就公開了先將貝母用95%乙醇回流，加2%鹽水溶解后，依次用石油醚、醋酸乙酯萃取多次，再用氯仿萃取，得到貝母總生物堿。但傳統(tǒng)方法萃取復(fù)雜，需反復(fù)萃取，萃取時(shí)間長，萃取效率低，且是以貝母鱗莖作為原料，而貝母花大多腐爛在田野中，得不到利用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種提取簡單、時(shí)間短、效率高的用超臨界流體從貝母花中提取貝母總生物堿的方法。
[0004]本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為:用超臨界流體從貝母花中提取貝母總生物堿的方法，其步驟如下:
a、將當(dāng)日摘取的鮮貝母花風(fēng)干后粉碎，過45?60目篩，得到貝母花粉末，裝入超臨界萃取爸中；
b、在超臨界萃取釜中，萃取溫度為30?50°C，C(V流體壓力為20?40MPa，夾帶劑乙醇流速0.2?0.5ml/min,萃取時(shí)間I?3h，萃取物用甲醇吸收后得吸收液，其中10g貝母花粉末萃取后要用20?30ml甲醇吸收；
C、吸收液用DlOl型大孔樹脂層析柱層析，層析速度為每小時(shí)兩個(gè)柱床體積流速，層析后先用蒸餾水洗層析柱，洗至流出液無色，然后用2個(gè)柱床體積的質(zhì)量百分濃度50%乙醇洗層析柱，再用8個(gè)柱床體積的質(zhì)量百分濃度95%乙醇洗脫，收集95%乙醇洗脫的洗脫液得到貝母花洗脫液，貝母花洗脫液在450?500Pa條件下減壓濃縮至近干，再在105°C條件下干燥24h，得到主要成份為貝母總生物堿的淺黃色貝母花提取物。
[0005]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于用超臨界流體從貝母花中提取貝母總生物堿的方法，貝母花粉末在超臨界萃取釜中，萃取溫度為30?50°C，C(V流體壓力為20?40MPa，夾帶劑乙醇流速0.2?0.5ml/min，萃取時(shí)間I?3h，再用甲醇吸收，然后用大孔樹脂層析柱層析，乙醇洗脫，95%乙醇洗脫的貝母花洗脫液減壓濃縮，再105°C條件下干燥24h，得到主要成份為貝母總生物堿的淺黃色貝母花提取物。該方法步驟簡單，提取時(shí)間縮短，提取效率較高，每公斤貝母花可以提取貝母總生物堿17g左右，純度也較高，貝母總生物堿重量占60%以上，且將貝母花充分利用，提高種植貝母的價(jià)值。
【具體實(shí)施方式】
[0006]以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
[0007]實(shí)施例1
將當(dāng)日摘取的鮮貝母花(可以是浙貝母、川貝母等)風(fēng)干后粉碎，過45?60目篩，得到貝母花粉末，稱重50g，裝入超臨界萃取釜中，萃取溫度為38°C，C(V流體壓力為33MPa，夾帶劑乙醇流速0.25ml/min，萃取時(shí)間2h，萃取物用10?15ml甲醇吸收后得吸收液，吸收液DlOl型大孔樹脂層析柱層析，以每小時(shí)兩個(gè)柱床體積流速用蒸餾水洗滌至流出液無色，然后用2個(gè)柱床體積的質(zhì)量百分濃度50%乙醇洗滌，再用8個(gè)柱床體積的質(zhì)量百分濃度95%乙醇洗脫，收集95%乙醇洗脫的貝母花洗脫液，貝母花在450?500Pa條件下減壓濃縮至近干，105°C條件下干燥24h，得到淺黃色的貝母花提取物0.85g，采用溴甲酚綠顯色的紫外可見分光光度法測(cè)定每克提取物中貝母總生物堿含量為613mg。
[0008]實(shí)施例2
與實(shí)施例1基本相同，所不同的只是萃取溫度為30°C，C(V流體壓力為20MPa，夾帶劑乙醇流速0.20ml/min，萃取時(shí)間3h，萃取物用30ml甲醇吸收后得吸收液，貝母花提取物
0.84g，每克提取物中貝母總生物堿含量為608mg。
[0009]實(shí)施例3
與實(shí)施例1基本相同，所不同的只是萃取溫度為50°C，C(V流體壓力為40MPa，夾帶劑乙醇流速0.50ml/min,萃取時(shí)間lh，萃取物用20ml甲醇吸收后得吸收液，貝母花提取物
0.82g，每克提取物中貝母總生物堿含量為601mg。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.用超臨界流體從貝母花中提取貝母總生物堿的方法，其特征在于步驟如下: a、將當(dāng)日摘取的鮮貝母花風(fēng)干后粉碎，過45?60目篩，得到貝母花粉末，裝入超臨界萃取爸中； b、在超臨界萃取釜中，萃取溫度為30?50°C，C(V流體壓力為20?40MPa，夾帶劑乙醇流速0.2?0.5ml/min,萃取時(shí)間I?3h，萃取物用甲醇吸收后得吸收液，其中10g貝母花粉末萃取后需用20?30ml甲醇吸收； C、吸收液用DlOl型大孔樹脂層析柱層析，層析速度為每小時(shí)兩個(gè)柱床體積流速，層析后先用蒸餾水洗層析柱，洗至流出液無色，然后用2個(gè)柱床體積的質(zhì)量百分濃度50%乙醇洗層析柱，再用8個(gè)柱床體積的質(zhì)量百分濃度95%乙醇洗脫，收集95%乙醇洗脫的洗脫液得到貝母花洗脫液，貝母花洗脫液在450?500Pa條件下減壓濃縮至近干，再在105°C條件下干燥24h，得到主要成份為貝母總生物堿的淺黃色貝母花提取物。2.如權(quán)利要求1所述的用超臨界流體從貝母花中提取貝母總生物堿的方法，其特征在于步驟b中，萃取溫度為38°C，C(V流體壓力為33MPa，夾帶劑乙醇流速0.25ml/min，萃取時(shí)間2ho3.如權(quán)利要求1所述的用超臨界流體從貝母花中提取貝母總生物堿的方法，其特征在于步驟b中，萃取溫度為30°C，C(V流體壓力為20MPa，夾帶劑乙醇流速0.20ml/min，萃取時(shí)間3ho
【專利摘要】本發(fā)明公開了用超臨界流體從貝母花中提取貝母總生物堿的方法，貝母花粉末在超臨界萃取釜中，萃取溫度為30～50℃，CO2流體壓力為20～40MPa，夾帶劑乙醇流速0.2～0.5ml/min，萃取時(shí)間1～3h，再用甲醇吸收，然后用大孔樹脂層析柱層析，乙醇洗脫，95%乙醇洗脫的貝母花洗脫液減壓濃縮，再105℃條件下干燥24h，得到主要成份為貝母總生物堿的淺黃色貝母花提取物。該方法步驟簡單，提取時(shí)間縮短，提取效率較高，每公斤貝母花可以提取貝母總生物堿17g左右，純度也較高，貝母總生物堿重量占60%以上，且將貝母花充分利用，提高種植貝母的價(jià)值。
【IPC分類】A61K36/8966
【公開號(hào)】CN105213755
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510676691
【發(fā)明人】王強(qiáng), 戴永峰
【申請(qǐng)人】浙江大學(xué)寧波理工學(xué)院
【公開日】2016年1月6日
【申請(qǐng)日】2015年10月20日