一種冷凍超微振蕩法制備麥冬總皂苷的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種冷凍超微振蕩法制備麥冬總皂苷的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 麥冬為百合科植物麥冬Ophiopogon japonicus (L. f. )Ker-Gawl.的干燥塊根，為 常用中藥之一。麥冬具有養(yǎng)陰生津，潤肺清心之功效，用于肺燥干咳，虛癆咳嗽，津傷口渴， 心煩失眠，內(nèi)熱消渴等癥。麥冬具有悠久的用藥歷史，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，歷代 本草均有記載，亦為《中國藥典》所收載。
[0003] 現(xiàn)代研究表明，留體皂苷類化合物是麥冬的主要藥效成分之一。由于麥冬中含有 大量多糖類成分，提取麥冬總皂苷時多糖類成分也會溶出，導(dǎo)致總皂苷部位純化難度較大。 另外，由于含有大量多糖類成分，麥冬藥材質(zhì)地較黏，粉碎操作也存在一定困難，通常是將 飲片直接提取，提取效率不高。目前，麥冬總皂苷提取大多是采用水或乙醇溶液在常溫下或 加熱條件下提取，再應(yīng)用正丁醇萃取和/或過大孔樹脂除去多糖類及其他成分進(jìn)行純化， 具有耗時、耗力、效率低以及容易帶入污染物等缺點。
[0004] 中國專利申請CN201010117049. 7公開了一種麥冬總皂苷超聲強化提取的制備方 法，將麥冬藥材粉碎成一定目數(shù)的粉末，置于超聲提取器中，用水或醇溶液作為溶劑，在超 聲頻率20~150kHz，溫度20~80°C下，提取20~200min后出料，濾過，清液濃縮，經(jīng)正丁 醇萃取制備后得稠膏干燥，即得麥冬總皂苷。該方法采用常規(guī)提取方法，麥冬中的化學(xué)成 分，包括大量非皂苷類成分被充分溶出；再經(jīng)正丁醇萃取，不僅增加了操作步驟，消耗更多 具有污染性的試劑成本，而且麥冬總皂苷也會進(jìn)一步損失。
[0005] 中國專利申請CN200910142488. 0公開了一種短葶山麥冬中總皂苷及其制備方 法，包括：以短葶山麥冬根為原料，以濃度多51wt%的乙醇提取，提取液用正丁醇萃取，得 粗總皂苷；取粗總皂苷加水溶解，過非極性大孔樹脂柱，先后以水、乙醇水溶液洗脫，收集洗 脫液，得總皂苷。該方法同樣操作繁瑣，試劑消耗量大，且麥冬總皂苷成分損失較多。
[0006] 中國專利申請CN200610014213. 5公開了一種麥冬總皂苷的制備方法，包括：（1) 取麥冬藥材，加入溶劑，將溶液調(diào)至堿性后再進(jìn)行提取，得提取液；（2)提取液上大孔型堿 性陰離子交換柱，先用堿水和純水沖洗，沖洗液棄去，再用含水乙醇洗脫，洗脫液濃縮，即得 麥冬總皂苷。該方法同樣存在操作繁瑣、麥冬總皂苷損失大的缺陷。
[0007] 上述提取方法均需將麥冬提取液經(jīng)樹脂柱純化，耗時、耗力、效率低。因此，需要建 立一種簡便、高效的麥冬總皂苷提取物制備方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的在于提供一種麥冬總皂苷提取物的制備方法，該方法簡單、高效，麥 冬總皂苷提取率高，純度高。
[0009] 本發(fā)明的另一目的在于提供上述制備方法制得的麥冬總皂苷提取物。
[0010] 本發(fā)明提供一種制備麥冬總皂苷提取物的方法，包括如下步驟：
[0011] (1)將麥冬冷凍至0°C~-25°c ;
[0012] (2)將冷凍后的麥冬進(jìn)行超微粉碎，得到粉碎后的麥冬；
[0013] (3)將所述粉碎后的麥冬采用60vt%~85vt%的乙醇溶液超微振蕩提取，得到麥 冬提取液；
[0014] (4)將所述麥冬提取液濃縮，得到麥冬總皂苷提取物。
[0015] 根據(jù)本發(fā)明所述的方法，優(yōu)選地，在步驟（1)中，將麥冬冷凍至_5°C~_20°C。
[0016] 根據(jù)本發(fā)明所述的方法，優(yōu)選地，在步驟（1)中，冷凍時間為2~24小時。
[0017] 根據(jù)本發(fā)明所述的方法，優(yōu)選地，在步驟（2)中，所述超微粉碎是干法粉碎，粉碎 時間為2~8分鐘。
[0018] 根據(jù)本發(fā)明所述的方法，優(yōu)選地，在步驟（2)中，所述超微粉碎步驟為將所述冷凍 后的麥冬分散于60vt%~85vt%的乙醇溶液中進(jìn)行超微振蕩粉碎。
[0019] 根據(jù)本發(fā)明所述的方法，優(yōu)選地，在步驟（2)中，所述乙醇溶液的濃度為65vt%~ 80vt %，所述乙醇溶液的用量為麥冬重量的0. 5~2. 5倍，超微振蕩粉碎時間為3~10分 鐘。
[0020] 根據(jù)本發(fā)明所述的方法，優(yōu)選地，在步驟（2)中，所述粉碎后的麥冬的粒徑范圍為 5~20微米，所述的粒徑范圍采用激光衍射粒度分析儀進(jìn)行測試。
[0021] 根據(jù)本發(fā)明所述的方法，優(yōu)選地，在步驟（3)中，所述乙醇溶液的濃度為65vt%~ 80vt % 〇
[0022] 根據(jù)本發(fā)明所述的方法，優(yōu)選地，在步驟（3)中，乙醇溶液的用量為麥冬重量的 2~5倍，提取次數(shù)為1~3次。
[0023] 根據(jù)本發(fā)明所述的方法，優(yōu)選地，步驟（3)還包括固液分離操作，固液分離的方式 為離心、過濾或沉淀。
[0024] 本發(fā)明的麥冬總皂苷提取物的制備方法，通過首先將麥冬進(jìn)行冷凍處理，然后對 麥冬進(jìn)行超微振蕩粉碎，有利于麥冬中的皂苷類成分的充分溶出；另外，通過采用特定濃度 的乙醇溶液進(jìn)行超微振蕩提取，使麥冬中的皂苷類成分充分溶出，同時麥冬中含有的另一 類主要成分一一多糖類成分卻幾乎不能溶出，從而省去了現(xiàn)有技術(shù)中需要對提取液進(jìn)行正 丁醇萃取、大孔樹脂柱除糖等常規(guī)除雜操作。本發(fā)明的制備方法皂苷類成分損失少，得率 高；所得提取物中總皂苷純度高，雜質(zhì)少；且本發(fā)明提取方法操作十分簡單，耗時短，無需 加熱，無需大孔樹脂、正丁醇等純化，使麥冬總皂苷的大規(guī)模提取制備的成本大幅降低，具 有重要的產(chǎn)業(yè)意義。
【具體實施方式】
[0025] 下面對本發(fā)明的【具體實施方式】做進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不因此 受到任何限制。
[0026] 本發(fā)明中，所述"乙醇溶液"是指含乙醇的水溶液。除非特別說明，乙醇溶液的濃 度" ％ "具有本領(lǐng)域公知的含義，是指體積百分?jǐn)?shù)"vt % "。
[0027] 本發(fā)明中，所述"倍量"為重量比例。
[0028] 本發(fā)明中，總皂苷得率（wt% )為麥冬總皂苷提取物中的總皂苷含量與麥冬藥材 中的總皂苷含量之比。
[0029] 本發(fā)明的麥冬總皂苷的制備方法包括（1)冷凍步驟；（2)超微粉碎步驟；(3)提取 步驟；（4)濃縮步驟。以下進(jìn)行詳細(xì)描述。
[0030] 〈冷凍步驟〉
[0031] 本發(fā)明的步驟（1)為將麥冬冷凍至0°C至_25°C。優(yōu)選地，在步驟（1)中，將麥冬冷 凍至-5°C至-20°C。更優(yōu)選地，在步驟（1)中，將麥冬冷凍至-10°C至-18°C。本發(fā)明中，為 了增加藥材的脆性，步驟（1)優(yōu)選將麥冬冷凍2~24小時。根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的實施方式， 步驟（1)的麥冬的冷凍時間為5~20小時。根據(jù)本發(fā)明更優(yōu)選的實施方式，步驟（1)的麥 冬的冷凍時間為8~18小時，更優(yōu)選為12~15小時。
[0032] 本發(fā)明中，步驟（1)所述麥冬可以是麥冬飲片或麥冬飲片切片。根據(jù)本發(fā)明的一 種實施方式，所述麥冬采用麥冬飲片切片形式，從而有利于后續(xù)步驟中的粉碎和活性成分 的溶出。根據(jù)本發(fā)明另一種實施方式，所述麥冬直接采用麥冬飲片形式。由于經(jīng)過冷凍后 的麥冬黏性很小，麥冬飲片也易于被粉碎，因此直接采用麥冬飲片更易于操作。本發(fā)明中， 可通過將麥冬置于冷凍設(shè)備中進(jìn)行冷凍。本發(fā)明中，通過步驟（1)的冷凍操作，使麥冬黏性 變小，脆性增強，從而有利于后續(xù)的粉碎操作。
[0033] 〈超微粉碎步驟〉
[0034] 本發(fā)明的步驟（2)為將冷凍后的麥冬進(jìn)行超微粉碎。本發(fā)明中，步驟（2)的超微 粉碎操作可以在超微粉碎機中進(jìn)行，也可以在超微振蕩磨中進(jìn)行，只要能夠?qū)崿F(xiàn)麥冬的超 微粉碎即可。
[0035] 本發(fā)明中，步驟（2)的超微粉碎操作可以是將麥冬直接置于粉碎機器內(nèi)進(jìn)行干法 粉碎。干法粉碎的時間優(yōu)選為2-8分鐘，更優(yōu)選為2-4分鐘。
[0036] 根據(jù)本發(fā)明的另一種實施方式，步驟（2)也可以同時加入60vt%~85vt%的乙醇 溶液進(jìn)行超微振蕩粉碎，在粉碎的同時進(jìn)行預(yù)提取，即采用濕法粉碎。優(yōu)選地，所述乙醇溶 液的濃度為65vt%~80vt%，更優(yōu)選為65vt%~75vt%。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，采用這樣的乙醇濃 度，有利于溶出麥冬中的皂苷類成分，而作為雜質(zhì)的多糖類成分溶出卻很少。當(dāng)加入所述乙 醇溶液粉碎時，所述乙醇溶液的用量可以為麥冬重量的〇. 5~2. 5倍，優(yōu)選為0. 5~1. 5倍。 在本發(fā)明的一種優(yōu)選的實施方式中，所述乙醇溶液的用量為麥冬重量的1倍量。采用這樣 的用量，更有利于麥冬的粉碎，同時有利于麥冬中皂苷成分的提取。本發(fā)明中，所述乙醇溶 液的溫度可以為常溫，也可以為低于常溫的溫度。上述濕法超微粉碎的時間優(yōu)選為3~10 分鐘，優(yōu)選為3~8分鐘，更優(yōu)選為3~6分鐘。當(dāng)步驟（2)中加入乙醇溶液進(jìn)行粉碎和預(yù) 提取時，所得產(chǎn)物可以經(jīng)過固液分離將提取液分離出來；所得產(chǎn)物也可以不經(jīng)分離，直接再 加入乙醇溶液進(jìn)行步驟（3)的提取操作。
[0037] 在本發(fā)明中，步驟（2)粉碎后的麥冬的粒徑范圍為5-20微米，優(yōu)選為5-10微米。 上述粒徑可采用Mastersizer 3000激光衍射粒度分析儀進(jìn)行測試。
[0038] 〈提取步驟〉
[0039] 本發(fā)明的步驟（3)為將粉碎后的麥冬加入60vt %~85vt %的乙醇溶液提取，得 到麥冬提取液。本發(fā)明中，步驟（3)的乙醇溶液的濃度優(yōu)選為65vt%~80vt%，更優(yōu)選為 65vt%~75vt%。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，采用這樣的乙醇濃度有利于麥冬中的阜苷類成分的充分溶 出，而多糖類成分溶出很少，從而使麥冬總皂苷的提取效率提高，同時純度較高。
[0040] 本發(fā)明中，步驟（3)的乙醇溶液的用量為麥冬重量的2~5倍量，優(yōu)選為3~5倍 量。本發(fā)明中，步驟（3)的提取次數(shù)為1~3次，優(yōu)選為1~2次，更優(yōu)選為1次。由于經(jīng) 過步驟（2)的超微粉碎操作，麥冬的粒徑被粉碎至低于