杜仲木脂素提取物在制備肺動脈高壓治療藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及杜仲木脂素提取物在制備肺動脈高壓治療藥 物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 肺動脈高壓是一種以肺小動脈血管重構(gòu)、肺動脈血管平滑肌增殖為病理特征，弓丨 起慢性毛細血管前肺動脈高壓，增強肺動脈血管張力導(dǎo)致右心衰的嚴重威脅人類生命健康 的疾病。與高血壓不同，肺高壓具有生存率低、預(yù)后不良，臨床治療困難的特點?；颊?年 期生存率與乳腺癌相當。降低血壓的常見藥物如ACEI類，ARB類并不能用于肺高壓的治療。 目前針對肺動脈高壓的治療手段主要是通過藥物誘導(dǎo)肺動脈血管舒張，從而直接降低血管 張力，達到降壓目。例如N0吸入劑、內(nèi)皮素拮抗劑以及環(huán)前列素類似物等藥物。這些治療 肺動脈高壓的藥物能一定程度的緩解肺高壓的癥狀，然而患者接受治療情況下的中位生存 數(shù)僅為2. 7年，尋找新的特異性治療藥物是本領(lǐng)域的一大挑戰(zhàn)。
[0003] 近年來，隨著對肺動脈高壓病理機理的研究不斷深入，針對肺高壓的治療手段逐 漸從單純的對癥治療向?qū)σ蛑委熮D(zhuǎn)變，具有新的作用機制的抗壓藥物的發(fā)現(xiàn)和使用、從病 理機制入手，多層次地干擾肺動脈高壓的發(fā)病過程，始終是這類藥物研究的熱點。
[0004] 雖然肺動脈高壓的發(fā)病機制目前還沒有完全搞清楚，但是肺動脈血管重構(gòu)是肺動 脈高壓最為顯著的病理特征，而肺動脈血管平滑肌增殖又在血管重構(gòu)過程中起著至關(guān)重要 的作用，這已經(jīng)成為公認的事實。那么以血管重構(gòu)為基礎(chǔ)的藥物的發(fā)現(xiàn)和使用將屬于治療 肺高壓藥物的新成員。與這類藥物相比，以前的治療藥物僅僅從降壓這一簡單病癥入手，只 能起到緩解病情的作用。
[0005]杜仲（Eucommiaulmoides)，又名思仙、絲棉樹，屬杜仲科（Eucommiaulmoides)， 主要分布于陜西、河南、湖北、湖南、四川、云南、貴州、浙江、甘肅等省。其皮莖、葉均可入藥， 具有補肝腎、強筋骨、降血壓、安胎、輕身耐老等功效?，F(xiàn)代研究表明杜仲含有多種活性成 分，具有降壓、利尿、降糖、降脂、抗氧化、抗腫瘤、抗菌、抗炎、鎮(zhèn)靜、止血、鎮(zhèn)痛等作用。到目 前為止已從杜仲中分離提取了 70余種單體，主要有木脂素類（或稱之為木脂素）、苯丙素 類、環(huán)烯醚萜類、黃酮類等。木脂素是植物體中由雙分子苯丙素聚合而成的化合物，按其結(jié) 構(gòu)特點木脂素包括雙環(huán)氧林脂素類，單環(huán)氧木脂素類、環(huán)木脂素類、新木脂素類等及甙類。 杜仲木脂素提取物是從傳統(tǒng)中藥杜仲中提取出來的有效成分，是一種混合物。
[0006]目前市場尚無以杜仲木脂素或杜仲木脂素提取物為主要成分的肺動脈高壓治療 藥物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明目的旨在提供一種杜仲木脂素提取物的新用途。本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)杜仲木脂 素提取物對肺動脈高壓具有防治作用，可用于制備治療肺動脈高壓的藥物。
[0008] 實現(xiàn)本發(fā)明目的技術(shù)方案是：杜仲木脂素提取物在制備肺動脈高壓治療藥物中的 應(yīng)用。
[0009] 所述杜仲木脂素提取物中木脂素占杜仲木脂素提取物總重量的30% -90%，且木 脂素中有效成分松脂醇二葡萄糖苷的含量占杜仲木脂素提取物總重量的1% -15%。
[0010] 優(yōu)選地，所述木脂素中有效成分松脂醇二葡萄糖苷的含量占杜仲木脂素提取物總 重量的3% -7. 5%。
[0011] 所述杜仲木脂素提取物是以杜仲為原料，通過質(zhì)量濃度為40% -95%的醇提（所 述醇優(yōu)選為甲醇或乙醇），提取液過濾，濃縮，將濃縮液通過大孔樹脂柱，依次用水，質(zhì)量濃 度為15%-25%的甲醇或乙醇，質(zhì)量濃度為45%-55%的甲醇或乙醇溶液洗脫，收集質(zhì)量濃 度為45 % -55 %的醇洗脫液，濃縮，干燥，得到杜仲木脂素提取物粉末。
[0012] 本發(fā)明的杜仲木脂素提取物也可以是專利公開號CN101152234A公開的杜仲木脂 素提取物。
[0013] 優(yōu)選地，本發(fā)明所述杜仲木脂素提取物優(yōu)選的制備方法為：
[0014] a)杜仲皮去外皮后，切段，用質(zhì)量濃度為40% -95%的乙醇溶液回流提取2-3次， 每次l-2h，提取液減壓濃縮至0. 5-1. 5倍藥材量體積；
[0015]b)將濃縮后的藥液通過大孔吸附樹脂柱進行有效成分富集，依次用水，質(zhì)量濃度 為15% -25%的甲醇或乙醇，質(zhì)量濃度為45% -55%的甲醇或乙醇溶液洗脫；
[0016]C)收集質(zhì)量濃度為45% -55%的甲醇或乙醇洗脫液，濃縮，干燥得杜仲木脂素提 取物粉末。
[0017] 優(yōu)選收集步驟b中的水洗脫液，濃縮，干燥，粉碎，粉末用甲醇溶解，棄去不溶物， 回收甲醇并干燥得環(huán)烯醚萜類物質(zhì)。
[0018] 步驟b中所述大孔吸附樹脂柱優(yōu)選為HP系列樹脂、D101樹脂或者AB-8樹脂。
[0019] 在步驟c中的所述干燥可以是多種，如真空干燥、噴霧干燥、凍干，優(yōu)選凍干技術(shù)。
[0020] 下面對本發(fā)明做進一步解釋和說明。
[0021] 所述的杜仲木脂素提取物可以通過采用選自粉碎、壓榨、煅燒、研磨、過篩、滲漉、 萃取、水提、醇提、水沉、醇沉、酯提、酮提、層析、過濾等方法得到。以該提取物為活性物質(zhì)可 制成藥物制劑，所述提取物可以是浸膏形式的物質(zhì)，可以是干浸膏也可以是流浸膏，可以是 粉末狀物質(zhì)，根據(jù)制劑的不同需要制成不同的狀態(tài)。
[0022] 本發(fā)明還提供杜仲木脂素提取物經(jīng)過加工制備的適合服用的任何單位劑量形式 的藥物制劑，這些藥物制劑選自以下劑型：片劑、糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊 劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉 劑、溶液劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜劑、噴霧劑、滴劑、貼劑，需要時可以制成緩釋制劑、腸 溶制劑。
[0023] 本發(fā)明的杜仲木脂素提取物，在制備成藥物制劑時可加入藥物可接受的載體，所 述藥物可接受的載體選自：抗氧劑、鰲合劑表面活性劑填充劑崩解劑潤濕劑分散劑潤滑劑 溶劑緩釋材料腸溶材料pH調(diào)節(jié)劑、矯味劑、色素等，常用的載體如：甘露糖醇、右旋糖苷、乳 糖、葡萄糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、氯化鈉、硅衍生物、纖維素及纖維素衍生物、亞硫酸鈉、 焦亞硫酸鈉、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、吐溫80、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、聚乙二 醇、環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂等。
[0024] 本發(fā)明的杜仲木脂素提取物的藥物制劑，是通過將杜仲原料經(jīng)過提取或其他方式 加工，制成藥物活性物質(zhì)，隨后，以該活性物質(zhì)為原料，需要時加入藥物可接受的載體，按照 制劑學的常規(guī)技術(shù)制成藥物制劑。
[0025] 本發(fā)明通過分別用野百合堿和血小板源性生長因子（PDGF)誘導(dǎo)構(gòu)建大鼠肺動脈 高壓動物模型及體外實驗?zāi)Ｐ停芯堪l(fā)現(xiàn)杜仲木脂素提取物能抑制肺動脈高壓過程中血管 重構(gòu)，表明杜仲木脂素提取物可用于治療肺動脈高壓。
[0026] 本發(fā)明還在構(gòu)建體內(nèi)、體外模型的基礎(chǔ)上通過抑制AR的表達、細胞外基質(zhì)的積累 及肺動脈血管平滑肌原代細胞的增殖過程，研究了杜仲木脂素提取物對肺動脈高壓的治療 作用機制。
【附圖說明】
[0027] 圖1-4、圖5-7分別為實驗例1和實驗例2實驗結(jié)果圖。
[0028] 其中：
[0029] 圖1表示杜仲木脂素提取物大鼠肺高壓模型血液動力學參數(shù)的影響；
[0030] 圖1橫坐標中"Control"指正常對照組大鼠、"MCT"指野百合堿處理組大鼠， "+Lignans"指野百合堿處理加上杜仲木脂素給藥組大鼠";縱坐標中"RVSP"指右心室收縮 壓，"mPAP"指平均肺動脈壓力。
[0031] 圖2表示MCT誘導(dǎo)的PAH模型中杜仲木脂素提取物對血管重構(gòu)的影響；
[0032] 圖2橫坐標中"Control"指正常對照組大鼠、"MCT"指野百合堿處理組大鼠， "+Lignans"指野百合堿處理加上杜仲木脂素給藥組大鼠"；縱坐標中"WT(% )指血管壁厚 度百分比，'1^/1^+3印加111(11^:11^)'指右心室/左心室+室間隔的質(zhì)量比，"€[-3嫩1111?熟 level(relativeunit) "指標準化的α-平滑肌肌動蛋白的信使RNA表達水平，"a-SMA proteinlevel(a-SMA/GAPDH) "指標準化的α-平滑肌肌動蛋白的蛋白表達水平。
[0033] 圖3表示MCT誘導(dǎo)的ΡΑΗ大鼠肺動脈中杜仲木脂素提取物對collagen表達的影 響；
[0034] 圖3橫坐標中"Control"指正常對照組大鼠、"MCT"指野百合堿處理組大鼠， "+Lignans"指野百合堿處理加上杜