一種具有抗皺祛皺功能的護(hù)膚化妝品組合物及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種具有抗皺祛皺功能的護(hù)膚化妝品組合物及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]皮膚老化是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程，主要發(fā)生在真皮層。皮膚真皮的主體部分是由成纖維細(xì)胞調(diào)控分泌的膠原纖維等基質(zhì)成分，和成纖維細(xì)胞一起構(gòu)成的。成纖維細(xì)胞的衰老，直接導(dǎo)致了皮膚的主體部分發(fā)生變化，從而引起皮膚老化。因此，成纖維細(xì)胞的衰老是皮膚老化的最根本原因。而膠原纖維是皮膚真皮的主要組成部分之一，其含量與皮膚皺紋、松弛等老化特征具有直接的關(guān)系。而膠原纖維的生化成分主要是I型膠原蛋白(CollagenI)，它由成纖維細(xì)胞分泌，于細(xì)胞外聚合成膠原原纖維，再經(jīng)少量黏合成膠原纖維。研究表明，真皮層膠原蛋白含量的減少和結(jié)構(gòu)的破壞，是導(dǎo)致皮膚老化的另一個(gè)重要原因。如何有效提高皮膚成纖維細(xì)胞的活力和延緩其衰老，以及促進(jìn)膠原蛋白等基質(zhì)的分泌，是老化皮膚修復(fù)的關(guān)鍵。
[0003]研究表明，許多天然化合物在提高皮膚成纖維細(xì)胞活力，或促進(jìn)膠原蛋白分泌的方面具有顯著作用，如肽、萜類(lèi)、黃酮類(lèi)、生物堿類(lèi)等天然產(chǎn)物。積雪草中的三萜皂苷(積雪草苷、羥基積雪草苷)因其在促進(jìn)皮膚成纖維細(xì)胞分泌膠原蛋白的作用，越來(lái)越受到關(guān)注，并已開(kāi)始在化妝品中得到應(yīng)用。而積雪草中還含有非常低含量的三萜酸，三萜酸(積雪草酸和羥基積雪草酸等)是三萜皂苷經(jīng)酶或酸解等方法，完全去掉糖基之后，生成的相應(yīng)苷元。三萜酸在化妝品的產(chǎn)品開(kāi)發(fā)上，多用于美白功能護(hù)膚品的開(kāi)發(fā)。但至今為止還未公開(kāi)過(guò)積雪草中三萜皂苷和三萜酸在具有抗皺祛皺功能的化妝品中的應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明主要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種具有抗皺祛皺功能的護(hù)膚化妝品組合物及其應(yīng)用，其能全方位對(duì)老化皮膚進(jìn)行修復(fù)，可應(yīng)用于抗皺祛皺護(hù)膚化妝品的開(kāi)發(fā)。
[0005]為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的一個(gè)技術(shù)方案是:提供一種具有抗皺祛皺功能的護(hù)膚化妝品組合物，所述護(hù)膚化妝品組合物包括:a)積雪草中三萜皂苷和三萜酸的復(fù)合物；b)分子量小于5000Da的大豆小分子肽。
[0006]在本發(fā)明一個(gè)較佳實(shí)施例中，所述三萜皂苷為積雪草苷、羥基積雪草苷中的一種或兩種。
[0007]在本發(fā)明一個(gè)較佳實(shí)施例中，所述三萜酸為積雪草酸、羥基積雪草酸中的一種或兩種。
[0008]在本發(fā)明一個(gè)較佳實(shí)施例中，所述大豆小分子肽為來(lái)源于大豆蛋白的提取物或水解物。
[0009]在本發(fā)明一個(gè)較佳實(shí)施例中，所述護(hù)膚化妝品組合物在抗皺祛皺護(hù)膚化妝品中的應(yīng)用。
[0010]在本發(fā)明一個(gè)較佳實(shí)施例中，在所述抗皺祛皺化妝品中，所述復(fù)合物中的三萜皂苷的質(zhì)量含量為0.001-10%，三萜酸的質(zhì)量含量為0.001-10%。
[0011 ] 在本發(fā)明一個(gè)較佳實(shí)施例中，在所述抗皺祛皺化妝品中，所述大豆小分子肽的質(zhì)量含量為0.001-10%。
[0012]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明的具有抗皺祛皺功能的護(hù)膚化妝品組合物及其應(yīng)用，積雪草中的三萜皂苷和三萜酸組合使用時(shí)，相比單獨(dú)使用三萜皂苷或三萜酸時(shí)，可以進(jìn)一步顯著提高促進(jìn)人皮膚成纖維細(xì)胞分泌I型膠原蛋白等的作用。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)分子量小于5000Da的大豆小分子肽，具有顯著提高人皮膚成纖維細(xì)胞的活性。將大豆小分子肽和積雪草中的萜類(lèi)化合物進(jìn)行組合，能全方位對(duì)老化皮膚進(jìn)行修復(fù)，可應(yīng)用于抗皺祛皺護(hù)膚化妝品的開(kāi)發(fā)。
【具體實(shí)施方式】
[0013]下面將對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅是本發(fā)明的一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。基于本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其它實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0014]實(shí)施例一:
(1)正常的人皮膚成纖維細(xì)胞分別以適宜的密度接種于細(xì)胞培養(yǎng)板，用0.25%胰蛋白酶消化細(xì)胞，然后用含體積百分比為10%的胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液配成單細(xì)胞懸液，以每孔1X105個(gè)接種于96孔板或細(xì)胞培養(yǎng)皿(30mm)中，貼壁過(guò)夜，棄上清液。然后加入不含胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，饑餓培養(yǎng)24h，同步化處理各組細(xì)胞，于5%C02、37°C溫箱中培養(yǎng)。
[0015]實(shí)驗(yàn)分未經(jīng)處理的空白對(duì)照組，以及10個(gè)處理組，處理組用不含胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基配制。處理組1含積雪草酸30ug/ml，處理組2含羥基積雪草酸30ug/ml，處理組3含積雪草酸15ug/ml和輕基積雪草酸15ug/ml，處理組4含積雪草苷30ug/ml，處理組5含羥基積雪草苷30ug/ml，處理組6含積雪草苷15ug/ml和羥基積雪草苷15ug/ml，處理組7含積雪草酸15ug/ml和積雪草苷15ug/ml，處理組8含積雪草酸15ug/ml和輕基積雪草苷15ug/ml，處理組9含輕基積雪草酸15ug/ml和積雪草苷15ug/ml，處理組10含輕基積雪草酸15ug/ml和羥基積雪草苷15ug/ml。10個(gè)處理組都用不含胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行配制。細(xì)胞饑餓處理后，分別添加活性成分進(jìn)行處理，并設(shè)置對(duì)照組，分別設(shè)置6個(gè)復(fù)孔，培養(yǎng)48h后，上清液離心，按照I型前膠原蛋白含量檢測(cè)試劑盒(Procollagen Type I C-Peptide(PIP) EIA Kit)說(shuō)明書(shū)，檢測(cè)上清液中I型前膠原蛋白含量。
[0016](2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:基于定量結(jié)果，以空白對(duì)照組培養(yǎng)液中I型前膠原蛋白的含量定義為100%。添加活性成分進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，處理組1的I型前膠原蛋白的含量為121.34±3.01%，處理組2的含量為126.18±4.10%，處理組3的含量為124.551 ±3.15%，處理組4的含量為112.64±4.01%，處理組5的含量為118.67±3.96%，處理組6的含量為110.53 ±2.69%，處理組7的含量為193.32 ±3.41%，處理組8的含量為187.75 ±4.27%，處理組9的含量為176.61 ±2.75%，處理組10的含量為1170.21 ±3.31%。與單獨(dú)使用積雪草中三萜皂苷或三萜酸相比，三萜皂苷和三萜酸同時(shí)使用時(shí)，能顯著提高I型前膠原蛋白分泌的促進(jìn)作用。因此，三萜酸的積雪草酸或羥基積雪草酸，與三萜皂苷的積雪草苷或羥基積雪草苷復(fù)配使用，能顯著提高對(duì)I型前膠原蛋白分泌的促進(jìn)作用。
[0017]實(shí)施例二:
(1)按照實(shí)施例一中細(xì)胞培養(yǎng)的方法進(jìn)行試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)分未經(jīng)處理的空白對(duì)照組，處理組為添加了 0.2mg/ml的分子量小于5000Da的大豆小分子肽，用含有胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基配制。分別孵育5?6天后，每孔加入MTT適量，繼續(xù)培養(yǎng)4 h，棄去上清。每孔加入DMS0，振搖，酶標(biāo)儀檢測(cè)各吸光度值。
[0018](2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:空白組0D檢測(cè)值為0.41土 0.12 ;而處理組0D檢測(cè)值為0.74土0.024。MTT檢測(cè)結(jié)果，顯示0.2mg/ml大豆小分子肽能顯著提高人皮膚成纖維細(xì)胞的活性，延緩細(xì)胞的衰老。
[0019]實(shí)施例三:
(1)按照實(shí)施例一和實(shí)施例二中細(xì)胞培養(yǎng)的方法進(jìn)行試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)分未經(jīng)處理的空白對(duì)照組，處理組分別添加了活性物。處理組1為添加了 0.2mg/ml的分子量小于5000Da的大豆小分子肽；處理組2為添加了積雪草酸15ug/ml和積雪草苷15ug/ml ;處理組3為添