[0037] 表2奧沙利鉬脂質(zhì)體樣品按照曲線2冷凍干燥所得樣品加水重建后指標(biāo)
[0039] 表3奧沙利鉬脂質(zhì)體樣品按照曲線3冷凍干燥所得樣品加水重建后指標(biāo)
[0040]
[0041] 由表1~3可見(jiàn)，不同冷凍干燥工藝制得的樣品在復(fù)溶后包封率明顯不同，采用本 發(fā)明的冷凍干燥條件（圖1)制得的樣品復(fù)溶后包封率可達(dá)80%以上，與冷凍干燥前相比略 有降低，而常規(guī)工藝下制得的樣品包封率明顯降低，不符合脂質(zhì)體制劑的包封率要求從。
[0042] 實(shí)施例2
[0043] 1、處方：
[0044] 大豆卵磷脂 2.00 g 氫化大豆磷脂 1.50g 奧沙利柏 LOOg 膽固醇硫酸酯鈉 1.00 g 乳糖 lO.OOg 1,1-丙二醇 30 mL
[0045] 2、奧沙利鉬前體脂質(zhì)體的制備：
[0046] 制備方法與實(shí)施例1相同。
[0047] 3、加水重建后包封率的檢測(cè)
[0048] 結(jié)果見(jiàn)下表4。
[0049] 表4奧沙利鉬脂質(zhì)體樣品按照曲線1冷凍干燥所得樣品加水重建后指標(biāo)
[0051] 實(shí)施例3
[0052] 1、處方：
[0053] 大豆卵磷脂 3.0Qg 磷脂酰乙醇胺 0,56容 奧沙利怕 LOOg 膽固醇磷酸鈉 OOg 乳糠： 嫌刀％ 1.,2.-丙.醇： 30 HiL
[0054] 2、奧沙利鉬前體脂質(zhì)體的制備：
[0055] 除冷凍干燥曲線如圖4所示外，制備方法中的其它步驟與實(shí)施例1相同。
[0056] 3、加水重建后包封率的檢測(cè)
[0057] 結(jié)果見(jiàn)下表5。
[0058] 表5奧沙利鉬脂質(zhì)體樣品按照曲線4冷凍干燥所得樣品加水重建后指標(biāo)
[0060] 實(shí)施例4
[0061] 1、處方
[0062] 奧沙利鉑 1,00 g 大豆卵磷脂 3.60 g DSPE-PEG(2000) 0.35g 膽固醇 0.20 g 膽固醇硫酸酯鈉 0.65 g 乳糖 lO.OOg 1,2-丙二醇 30_mL
[0063] 2、奧沙利鉬前體脂質(zhì)體的制備：
[0064] 除冷凍干燥曲線如圖5所示外，制備方法中的其它步驟與實(shí)施例1相同。
[0065] 3、加水重建后包封率的檢測(cè)
[0066] 結(jié)果見(jiàn)下表6。
[0067] 表6奧沙利鉬脂質(zhì)體樣品按照曲線5冷凍干燥所得樣品加水重建后指標(biāo)
[0070] 實(shí)施例5
[0071] 1、處方：
[0072] 澳沙利鉑 1.0〇g 大豆卵磷脂 3.60 g DSPE-PEG(2000) OJOg 膽固醇 0.10 g 膽固醇硫酸酯鈉 0.80 g 乳糠 10;00g 甘油 30 niL.
[0073] 2、奧沙利鉬前體脂質(zhì)體的制備：
[0074] 除輔助溶劑用甘油、冷凍干燥曲線如圖6所示外，制備方法中的其它步驟與實(shí)施 例1相同。
[0075] 3、加水重建后包封率的檢測(cè)
[0076] 結(jié)果見(jiàn)下表7。
[0077] 表7奧沙利鉬脂質(zhì)體樣品按照曲線5冷凍干燥所得樣品加水重建后指標(biāo)
[0079] 實(shí)施例6 (藥效實(shí)驗(yàn)）
[0080] 按實(shí)施例1制備奧沙利鉬前體脂質(zhì)體，用注射用水復(fù)溶后給SD雌性大鼠尾靜脈注 射，與對(duì)照組注射奧沙利鉬注射液比較本發(fā)明的前體脂質(zhì)體注射液與普通注射液的藥代參 數(shù)。
[0081] 方法與結(jié)果
[0082] 溶液的配制：
[0083] 奧沙利鉬標(biāo)準(zhǔn)液：精密稱取IOmg奧沙利鉬原料藥放入IOmL容量瓶中，加水定容至 刻度，得Img · mL-1的奧沙利鉬貯備液。再取ImLlmg · mL-1的奧沙利鉬貯備液置于IOOmL 容量瓶中，加水定容至刻度，即得。
[0084] 卡鉬內(nèi)標(biāo)溶液：精密稱取IOmg卡鉬原料藥放入IOmL容量瓶中，加水定容至刻度， 得Img · mL-1的奧沙利鉬貯備液。再取ImLlmg · mL-1的奧沙利鉬貯備液置于IOOmL容量 瓶中，加水定容至刻度，即得。
[0085] 動(dòng)物試驗(yàn)用樣品
[0086] 奧沙利鉬注射液：精密稱取適量的奧沙利鉬，加水溶解，搖勻，超聲，即得奧沙利鉬 注射溶液。
[0087] 奧沙利鉬脂質(zhì)體注射液：取實(shí)施例1制備奧沙利鉬前體脂質(zhì)體，加水復(fù)溶重建，即 得奧沙利鉬脂質(zhì)體注射液。
[0088] 奧沙利鉬體內(nèi)分析方法：
[0089]儀器：HPLC-MS 條件
[0090] 質(zhì)譜條件：
[0092] 離子對(duì)的選擇：
[0094] 色譜條件：
[0095] 色譜柱：Thermo 超高壓色譜柱；Particle size ( μ m) :I. 9 ;Pore Size (A) : 175 ; Material :Hypersil GOLD ;Column Dimensions : 100*2. lnm〇
[0096] 預(yù)柱：柱套：Phenomenex Securityguard ULTRA HDDER for UHPLC Columns2. lto4. 6mm ID〇
[0097] 柱芯：Phenomenex Securityguard ULTRA Cartridges UHPLC C18for2. 1 mm ID Columns。
[0098] 流動(dòng)相：甲醇：0.1 %甲酸水=15:85
[0099] 進(jìn)樣量：10 μ L
[0100] 流速：300uL · min-1
[0101] 柱溫：常溫
[0102] 血漿樣品的處理
[0103] 精密量取50uL血漿樣品，加入50uL卡鉬內(nèi)標(biāo)物溶液，再加入蛋白沉淀劑80%的乙 腈400uL，渦旋30s，靜置5min ; HOOOr ·π?η-1離心10min沉淀蛋白。精密移取離心后的上 清液400uL，置于自動(dòng)進(jìn)樣瓶中，氮?dú)獯蹈?，加?00uL水復(fù)溶，渦旋30s，得供試品溶液。
[0104] 藥物動(dòng)力學(xué)結(jié)果
[0105] 藥物濃度的測(cè)定結(jié)果：
[0106] 奧沙利鉬注射液組和奧沙利鉬脂質(zhì)體注射液組血藥濃度-時(shí)間曲線見(jiàn)圖7和圖8。
[0107] 藥動(dòng)學(xué)參數(shù)：
[0108] 血藥濃度時(shí)間數(shù)據(jù)采用PK Solverf. 0 [79]藥代動(dòng)力學(xué)計(jì)算程序進(jìn)行房室模型擬 合。通過(guò)對(duì)血藥濃度-時(shí)間進(jìn)行一室、二室、三室模型進(jìn)行擬合并計(jì)算藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)，選 擇AIC最小者為最優(yōu)擬合，結(jié)果表明奧沙利鉬脂質(zhì)體組和奧沙利鉬注射液組均符合一室模 型，兩種制劑的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)見(jiàn)下表8。
[0109] 表8奧沙利鉬注射液組和奧沙利鉬脂質(zhì)體組的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)
[0111] 藥物動(dòng)力學(xué)測(cè)定的結(jié)果表明，奧沙利鉬脂質(zhì)體組的血藥濃度明顯高于奧沙利鉬注 射液組的濃度。奧沙利鉬注射液組的濃度在IOmin時(shí)已經(jīng)非常低，這可能與奧沙利鉬注射 液藥品說(shuō)明書(shū)中提到的藥物注射后在人體內(nèi)代謝很快有關(guān)。當(dāng)奧沙利鉬被包裹于脂質(zhì)體內(nèi) 時(shí)，能使奧沙利鉬在體內(nèi)的濃度維持在較高的水平，在體內(nèi)起到減慢藥物釋放的效果，從而 延長(zhǎng)了藥物被代謝所需的時(shí)間，達(dá)到緩釋的效果。
[0112] 以上的實(shí)施例表明：利用本發(fā)明制備的注射用奧沙利鉬脂質(zhì)體，由于采用獨(dú)特的 處方及工藝，具有載藥量高、包封率高、粒徑小的特點(diǎn)，在采用本發(fā)明的冷凍干燥工藝?yán)鋬?干燥后，包封率仍在80%以上，實(shí)現(xiàn)了制備奧沙利鉬前體脂質(zhì)體的目標(biāo)，冷凍干燥步驟在本 發(fā)明中尤為重要，由實(shí)例可見(jiàn)，不同的冷凍干燥工藝對(duì)脂質(zhì)體的包封率甚至外觀影響甚大， 故本實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新的使用了適合本制劑的冷凍干燥工藝，最終制備得到了具有載藥量高、包封 率高、粒徑小、性質(zhì)穩(wěn)定的注射用奧沙利鉬前體脂質(zhì)體。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種注射用奧沙利鉬前體脂質(zhì)體的制備方法，該方法由以下步驟組成： a)將奧沙利鉬溶于含有助溶劑的水混合溶劑中，并使奧沙利鉬在所述溶液中的質(zhì)量濃 度為0. 8~1 %，得水相；其中，所述的輔助溶劑為丙二醇或甘油，該輔助溶劑在水液中的體 積濃度為30% ; b) 將磷脂類(lèi)膜材和兩親膜穩(wěn)定材料按3 : 1~5 : 1的重量比混合，再加入磷脂類(lèi)膜 材重量0~100 %的膜流動(dòng)調(diào)節(jié)劑膽固醇，得總膜材，將所得總膜材溶解于有機(jī)溶劑中，得 到所述總膜材在機(jī)溶劑中的重量濃度為1~4%的油相；其中，所述的兩親膜穩(wěn)定材料為膽 固醇硫酸酯鈉、膽固醇磷酸鈉、膽固醇磺酸鈉和十二烷基磺酸鈉中的一種或兩種以上；所述 的磷脂類(lèi)膜材為蛋黃磷脂、大豆卵磷脂、磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺和氫化卵磷脂中的一種 或兩種以上；所述的有機(jī)述溶劑為二氯甲烷、氯仿、乙醚或乙酸乙酯； c)按水相：油相=1:2~1:4體積比，將步驟b)所得油相加入到步驟a)所得水相中 制成W/0型乳劑； d) 揮去有機(jī)溶劑并采用透析方法除去游離藥物，然后，加入粉針?biāo)璧妮o料，且先 在-5~5°C的條件下放置至奧沙利鉬以結(jié)晶形態(tài)析出后，再冷凍干燥制得奧沙利鉬前體脂 質(zhì)體。 本發(fā)明所述注射用奧沙利鉬前體脂質(zhì)體的制備方法，其中，所述的磷脂膜材優(yōu)選大豆 卵磷脂；所述的有機(jī)述溶劑優(yōu)選二氯甲烷。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種注射用奧沙利鉬前體脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于， 所述的磷脂膜材是大豆卵磷脂。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種注射用奧沙利鉬前體脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于， 所述的有機(jī)述溶劑是二氯甲烷。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種注射用奧沙利鉑前體脂質(zhì)體的制備方法，該方法由以下步驟組成：a)將奧沙利鉑溶于含有輔助溶劑的水混合溶劑中，得水相；b)將磷脂類(lèi)膜材和兩親膜穩(wěn)定材料混合，再加入膜流動(dòng)調(diào)節(jié)劑膽固醇，得總膜材，將所得總膜材溶解于有機(jī)溶劑中，得油相；c)按水相︰油相＝1:2～1:4積比，將步驟b)所得油相加入到步驟a)所得水相中制成W/O型乳劑；d)揮去有機(jī)溶劑并采用透析方法除去游離藥物，然后，加入粉針?biāo)璧妮o料，且先在-5～5℃的條件下放置至奧沙利鉑以結(jié)晶形態(tài)析出后，再冷凍干燥制得奧沙利鉑前體脂質(zhì)體。本發(fā)明所得到的奧沙利鉑前體脂質(zhì)體具有復(fù)溶后包封率高的優(yōu)點(diǎn)。
【IPC分類(lèi)】A61K31/194, A61K31/282, A61J3/00, A61K9/127, A61P35/00
【公開(kāi)號(hào)】CN105267147
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410324031
【發(fā)明人】關(guān)世俠
【申請(qǐng)人】廣州瑞濟(jì)生物技術(shù)有限公司
【公開(kāi)日】2016年1月27日
【申請(qǐng)日】2014年7月8日