中藥在制備用于消除抗腫瘤藥的心臟毒性副作用藥物或與阿霉素協(xié)同抗腫瘤作用藥物中應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，更具體地，本發(fā)明涉及一種中藥組合物提取液在制備 用于消除抗腫瘤藥的心臟毒性副作用藥物或具有與阿霉素協(xié)同抗腫瘤作用的藥物中的應(yīng) 用。
【背景技術(shù)】
[0002] 阿霉素是蒽環(huán)類抗生素，自20世紀(jì)60年代發(fā)現(xiàn)并應(yīng)用于多種癌癥的治療，現(xiàn)在仍 然是最有效的抗癌藥物之一，適用于惡性淋巴瘤、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、骨及軟組織肉瘤等 多種腫瘤。但由于嚴(yán)重的心臟毒性，其臨床應(yīng)用受到一定影響。近年來，對(duì)阿霉素心臟毒性 的研究較多，阿霉素中毒分為急性毒性、亞急性毒性和慢性毒性。急性中毒發(fā)生于單次使用 或一個(gè)療程后，常見癥狀有低血壓、心律失常、心臟功能不全等，偶爾可發(fā)生心肌梗死，常伴 有肝、腎功能損傷。因此評(píng)估阿霉素心臟毒性程度及尋找可以有效解除其心臟毒性的物質(zhì) 就成為目前亟待解決的問題，但目前尚缺乏有效預(yù)防和治療方法。
[0003] 有文獻(xiàn)報(bào)道幾種中藥單體成分如丹參(丹參酮IIA)、人參(人參阜苷Rbl，Rgl， Rg3)、麥冬(麥冬皂苷D)、黃芪(黃芪甲苷）等均在一定程度上減輕阿霉素誘導(dǎo)的心肌損傷， 但療效不佳。目前臨床上主要使用國家級(jí)新藥芪冬顧心口服液用于治療病毒性心肌炎（國 家級(jí)新藥，2015版藥典一部920頁記載，商品名稱：芪冬顧心口服液。），它的活性成分是由 黃芪36重量份、麥冬18重量份、人參9重量份、茯苓18重量份、地黃13重量份、龜板9重 量份、紫石英26重量份、桂枝13重量份、淫羊藿18重量份、金銀花18重量份、丹參13重量 份、郁金9重量份和枳殼9重量份制成的，它具有明顯改善心悸、胸悶、胸痛及氣短乏力的作 用，臨床具有補(bǔ)中益氣，增強(qiáng)患兒免疫力，降低心肌耗氧量，改善心肌缺血缺氧，具有較強(qiáng)的 心肌保護(hù)作用，特別對(duì)病毒性心肌炎效果顯著。但是從未報(bào)道過該藥物具有治療抗腫瘤藥 的心臟毒性副作用的功效，為此，本發(fā)明人經(jīng)過大量系統(tǒng)研究發(fā)現(xiàn)本發(fā)明中藥組合物制成 提取液對(duì)阿霉素誘導(dǎo)的正常BALB/c小鼠心肌毒性的保護(hù)作用，該中藥組合物提取液與阿 霉素聯(lián)合用藥能夠顯著減輕阿霉素誘導(dǎo)的心臟毒性，提高小鼠心肌收縮功能，從而發(fā)現(xiàn)本 發(fā)明中藥組合物對(duì)抗腫瘤藥阿霉素誘導(dǎo)的心臟毒性副作用具有顯著治療作用完成本發(fā)明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種中藥組合物在制備用于消除抗腫瘤藥心臟毒性副 作用藥物中的應(yīng)用。
[0005] 本發(fā)明的另外一個(gè)目的是提供一種中藥組合物在制備具有與阿霉素協(xié)同抗腫瘤 藥物中的應(yīng)用。降低了阿霉素心臟毒性副作用，同時(shí)協(xié)同增效。
[0006] 技術(shù)方案：中藥組合物在制備具有消除抗腫瘤藥心臟毒性副作用藥物中的應(yīng)用， 其中所述的中藥組合物是由下列用量的中藥原料組成：黃芪35-40重量份、麥冬15-20重 量份、人參5_10重量份、茯等15-20重量份、地黃10-15重量份、龜板5_10重量份、紫石英 25-30重量份、桂枝10-15重量份、淫羊藿15-20重量份、金銀花15-20重量份、丹參10-15 重量份、郁金5-10重量份和枳殼5-10重量份。
[0007] 為了獲得更好的療效，其中所述的中藥組合物優(yōu)選是由下列用量的中藥原料組 成：黃芪36重量份、麥冬18重量份、人參9重量份、茯苓18重量份、地黃13重量份、龜板9 重量份、紫石英26重量份、桂枝13重量份、淫羊藿18重量份、金銀花18重量份、丹參13重 量份、郁金9重量份和枳殼9重量份。
[0008] 本發(fā)明所述的中藥組合物可以采用常規(guī)的中成藥水提醇沉或醇提水沉法制備成 提取液直接用作藥物；也可以將提取液與一種或多種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑制成藥 物劑型優(yōu)選口服劑型。本發(fā)明劑型可使用藥物制劑工藝學(xué)本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員所公知的慣 常使用的任何方法產(chǎn)生并且對(duì)此沒有特別限制。所述的藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑可選 自適用于口服制劑的藥用賦形劑，包括填充劑、粘合劑、潤滑劑、崩解劑、助溶劑、表面活性 劑、吸附載體等。所述的□服劑型為片劑、膠囊、軟膠囊、□服液、糖衆(zhòng)、顆粒、滴丸、□崩片、 緩釋片、緩釋膠囊、控釋片或控釋膠囊等常規(guī)劑型。
[0009] 本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)是：實(shí)驗(yàn)表明，采用本中藥組合物提取液與阿霉素結(jié)合使用，降低阿霉 素毒性，提高阿霉素抗腫瘤療效。
【附圖說明】
[0010] 圖1中藥組合物提取液與阿霉素聯(lián)合用藥對(duì)荷瘤小鼠心臟功能的影響；腫瘤對(duì)照 組、模型組、中藥組合物提取液10ml/kg、25ml/kg、50ml/kg劑量組、右丙亞胺陽性藥組小鼠 給藥結(jié)束后分別進(jìn)行小動(dòng)物心動(dòng)超聲。
[0011] 圖2中藥組合物提取液和阿霉素聯(lián)合用藥對(duì)荷瘤小鼠心電圖變化的影響；腫瘤對(duì) 照組、模型組、中藥組合物提取液10ml/kg、25ml/kg、50ml/kg劑量組、右丙亞胺陽性藥組小 鼠給藥結(jié)束后分別進(jìn)行II導(dǎo)聯(lián)電圖檢測(cè)。比較小鼠的心率和ST段。
[0012] 圖3中藥組合物提取液和阿霉素聯(lián)合用藥對(duì)荷瘤小鼠心肌三酶的影響；腫瘤對(duì)照 組、模型組、中藥組合物提取液10ml/kg、25ml/kg、50ml/kg劑量組、右丙亞胺陽性藥組小鼠 給藥結(jié)束后分別取血，采用分光光度計(jì)法比較血清中LDH、CK、AST的活力。
[0013] 圖4:中藥組合物提取液和阿霉素聯(lián)合用藥對(duì)荷瘤小鼠心肌病理損傷的影響；月中 瘤對(duì)照組、模型組、中藥組合物提取液10ml/kg、25ml/kg、50ml/kg劑量組、右丙亞胺陽性藥 組小鼠給藥結(jié)束后取心臟，多聚甲醛固定，進(jìn)行組織切片及HE染色，顯微鏡下觀察心肌病 理變化。
[0014] 圖5中藥組合物提取液和阿霉素聯(lián)合用藥對(duì)荷瘤小鼠心肌細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān) 蛋白表達(dá)的影響；腫瘤對(duì)照組、模型組、中藥組合物提取液10ml/kg、25ml/kg、50ml/kg劑 量組、右丙亞胺陽性藥組小鼠給藥結(jié)束后取心臟，分別多聚甲醛固定和-80°C保存，進(jìn)行 TUNEL法檢測(cè)心肌組織凋亡和Westernblot法檢測(cè)caspase3/9，Bax及Bcl-2蛋白表達(dá)。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說明，不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步限 制。
[0016] 表1 :中藥組合物提取液與阿霉素聯(lián)合用藥在第7、9、12天對(duì)荷瘤小鼠腫瘤長軸長 度的影響；腫瘤對(duì)照組、模型組、中藥組合物提取液l〇ml/kg、25ml/kg、50ml/kg劑量組、右 丙亞胺陽性藥組小鼠在第7、9、12天分別用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤的長軸長度。
[0017] 表2:中藥組合物提取液與阿霉素聯(lián)合用藥在第7、9、12天對(duì)荷瘤小鼠腫瘤短軸長 度的影響；腫瘤對(duì)照組、模型組、中藥組合物提取液l〇ml/kg、25ml/kg、50ml/kg劑量組、右 丙亞胺陽性藥組小鼠在第7、9、12天分別用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤的短軸長度。
[0018] 表3 :中藥組合物提取液與阿霉素聯(lián)合用藥對(duì)荷瘤小鼠腫瘤重量的影響；腫瘤對(duì) 照組、模型組、中藥組合物提取液10ml/kg、25ml/kg、50ml/kg劑量組、右丙亞胺陽性藥組小 鼠在第12天處死，取腫瘤稱重。
[0019] 表4 :中藥組合物提取液與阿霉素聯(lián)合用藥對(duì)荷瘤小鼠體重的影響；腫瘤對(duì)照組、 模型組、中藥組合物提取液10ml/kg、25ml/kg、50ml/kg劑量組、右丙亞胺陽性藥組小鼠在 第12天稱體重。
[0020] 表5 :中藥組合物提取液與阿霉素聯(lián)合用藥對(duì)荷瘤小鼠心臟重量的影響；腫瘤對(duì) 照組、模型組、中藥組合物提取液10ml/kg、25ml/kg、50ml/kg劑量組、右丙亞胺陽性藥組小 鼠在第12天處死，取心臟稱重。
[0021] 表6 :中藥組合物提取液與阿霉素聯(lián)合用藥對(duì)荷瘤小鼠心臟功能的影響；腫瘤對(duì) 照組、模型組、中藥組合物提取液10ml/kg、25ml/kg、50ml/kg劑量組、右丙亞胺陽性藥組小 鼠給藥結(jié)束后分別進(jìn)行小動(dòng)物心動(dòng)超聲。通過M-mode成像分別對(duì)各組小鼠左室短軸縮短 率（FS%)，心臟射血分?jǐn)?shù)（EF%)，舒張期左室容積（LVVd)及左室實(shí)際重量（LV Mass)，收縮末 期左室容積（LVVs)進(jìn)行比較。
[0022] 實(shí)施例1中藥組合物提取液的制備 稱取黃芪36重量份、麥冬18重量份、人參9重量份、茯苓18重量份、地黃13重量份、 龜板9重量份、紫石英26重量份、桂枝13重量份、淫羊藿18重量份、金銀花18重量份、丹 參13重量份、郁金9重量份和枳殼9重量份，粉碎，混合，采用常規(guī)的中成藥水提醇沉制備 成中藥組合物提取液。
[0023] 以下試驗(yàn)例中使用的中藥組合物提取液都是實(shí)施例1所制備的。
[0024] 試驗(yàn)例1荷瘤小鼠 S180肉瘤接種、阿霉素心肌病模型的建立 將接種了 S180肉瘤的小鼠隨機(jī)分為腫瘤對(duì)照組（生理鹽水組）、阿霉素治療組(阿霉素 lmg/kg)、中藥組合物提取液(實(shí)施例1所制備）與阿霉素聯(lián)用組（10、25、50ml/kg)、陽性對(duì) 照組（右丙亞胺200mg/kg)。接種次日開始給藥，中藥組合物提取液組灌胃給予不同劑量的 中藥組合物提取液，陽性藥組腹腔注射右丙亞胺（200mg/kg)，在給藥Ih后，模型組、中藥組 合物提取液組及陽性藥組小鼠腹腔注射阿霉素（lmg/kg)，對(duì)照組給予同體積的生理鹽水， 連續(xù)給藥12 d。在給藥第7d、9d、12d分別用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤的長軸、短軸長度及并稱量 體重。停藥次日超聲心動(dòng)檢測(cè)、心電監(jiān)測(cè)；眼眶取血用于心肌三酶（LDH、CK、AST)檢測(cè)；斷 椎處死，稱體重，解剖剝離皮下瘤體，稱瘤重。取心臟稱重，左心室部分多聚甲醛固定，用于 HE病理檢測(cè)及TUNEL凋亡檢測(cè)；另一部分保存于-80°C用于凋亡蛋白caspaSe3/9及Bcl-2 家族蛋白Bcl_2、Bax的westernblot分析。
[0025] 試驗(yàn)例2腫瘤大小的測(cè)量與稱重 在給藥第7d、9d、12d分別用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤的長軸、短軸長度及在第12d取腫瘤稱 重。
[0026] 如表1和表2,與腫瘤對(duì)照組相比，阿霉素治療組在給藥第7、9、12天能顯著減少 小鼠腫瘤的長軸和短軸長度，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與阿霉素治療組相比，中藥組合物提取 液與阿霉素聯(lián)用可以