去除 溶劑得到產(chǎn)物粗品。因?yàn)榛プ儺悩?gòu)作用，在反應(yīng)條件下會生成1H-四氮唑基和2H-四氮唑 基兩種取代產(chǎn)物。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油醚/丙酮=100:1，v/V)， 收集黃色集中洗脫帶，再將洗脫帶濃縮，用硅膠柱層析純化（流動相為：石油醚/丙酮= 100:0. 5, v/v)，依次收集兩個淡黃色的洗脫帶，濃縮前1個洗脫帶即得到化合物IV的黃色 粉末（85.7mg，42% )。
[0028] 4 NMR (500MHz，Chloroform-dl) δ 10.21 (s，1H)，6.53 (d，J = 95.4Hz，1H)，6.31 (s ,1H), 5. 73 (s, 1H), 4. 41 (t, J = 7. 8Hz, 4H), 4. 04 (s, 1H), 2. 09 (s, 1H), 1. 98 (s, 1H), 1. 85 (s, 1H), 1. 59 (s, 1H), 1. 33 (s, 3H), 1. 02 (s, 6H), 0. 93 (s, 6H).
[0029] 13C NMR(125MHz, DMS0-d6) δ 188. 01 (s)，183. 52 (s)，154. 09 (s)，147. 15 (s)，144. 6 0(s), 140. 11 (s), 136. 23 (s), 134. 42 (s), 130. 84 (s), 127. 86 (s), 118. 73 (s), 66. 79 (s), 46. 45 (s), 45. 42 (s), 37. 35 (s), 33. 27 (s), 25. 74 (s), 24. 62 (s), 24. 60 (s), 23. 32 (s), 22. 86 (s) ,22. 22 (s).
[0030] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for C23H29N403:409 . 2 2 40 ;found:409. 2245。
[0031]
[0032] 實(shí)施例5本發(fā)明組合物對卵白蛋白引起大鼠過敏性鼻炎的影響
[0033] 雄性SD大鼠，體重180~220g，腹腔注射卵白蛋白lmg及氫氧化鋁凝膠10mg，其 后隔日注射1次，共7次。從第14天始，每日在大鼠兩側(cè)鼻腔內(nèi)滴入lmg/ml卵白蛋白生理 鹽水溶液l〇ul，共7次。末次滴注后立刻觀察30分鐘內(nèi)大鼠打噴嚏及擦鼻的次數(shù)，試驗(yàn)藥 物于卵白蛋白末次滴注前1小時口服給予。
[0034] 組合物的制備：將研磨之后過200目網(wǎng)的95mg化合物III的粉末和研磨之后過 200目網(wǎng)的5mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到lOOmg組合 物，使用時用水溶解這l〇〇mg的組合物即得到組合物的溶液。
[0035] 由表1可見，組合物（10mg/kg)明顯抑制卵白蛋白所致過敏性鼻炎大鼠的噴嚏和 搔抓鼻部反應(yīng)?；衔颕II和化合物IV無此作用。
[0036] 表1本發(fā)明組合物對卵白蛋白引起大鼠過敏性鼻炎的影響
[0039] *ρ〈0· 05,與對照組比較
[0040] 實(shí)施例6本發(fā)明組合物對組胺引起的大鼠鼻炎的影響
[0041] 雄性SD大鼠，體重180~220g，口服給予試驗(yàn)藥物后1小時，兩側(cè)鼻腔內(nèi)滴入1Μ 組胺生理鹽水溶液l〇ul，觀察30分鐘內(nèi)大鼠打噴嚏及擦鼻的次數(shù)。
[0042] 由表2可見，本發(fā)明組合物（lOmg/kg)明顯減少組胺所致鼻炎大鼠的噴嚏次數(shù)，對 搔抓鼻部反應(yīng)呈抑制趨勢?；衔颕II和化合物IV無此作用。
[0043] 表2本發(fā)明組合物對組胺引起大鼠鼻炎的影響
[0045] *ρ〈0· 05,與對照組比較
[0046] 實(shí)施例7本發(fā)明組合物對卵白蛋白、組胺引起大鼠鼻腔血管通透性升高的影響
[0047] 雄性SD大鼠，體重180~220g，分別以主動致敏大鼠和正常大鼠觀察卵白蛋白及 組胺引起的鼻腔血管通透性升高，大鼠的致敏方法同過敏性鼻炎試驗(yàn)，在初次免疫后第14 天，大鼠腹腔注射戊巴比妥鈉40mg/kg，麻醉后自氣管向鼻腔插管，固定后將此插管與恒流 栗相連（0. 25ml/min0,以37°C生理鹽水沖洗鼻腔10分鐘，其后大鼠尾靜脈注射1% Evans 藍(lán)生理鹽水溶液5ml/kg，3分鐘后收集灌流液10分鐘。在致敏大鼠和正常大鼠，灌流液中分 別含卵白蛋白lmg/ml和組胺40ug/ml，自鼻腔收集的灌流液經(jīng)1200Xg離心10分鐘，620nm 處比色測定上清液中的Evans藍(lán)濃度，受試藥物與抗原或組胺灌流前1小時口服給藥。
[0048] 由表3可見，本發(fā)明組合物（10mg/kg)明顯抑制卵白蛋白所致過敏性鼻炎大鼠的 鼻腔血管通透性?；衔颕II和化合物IV無此作用。
[0049] 表3本發(fā)明組合物對卵白蛋白引起大鼠鼻腔血管通透性升高的影響
[0051] #ρ〈0· 01，與對照組比較
[0052] 由表4可見，本發(fā)明組合物1 Omg/kg明顯降低組胺所致大鼠的鼻腔血管通透性?；?合物III和化合物IV無此作用。
[0053] 表4本發(fā)明組合物對組胺引起大鼠鼻腔血流通透性升高的影響
[0055] **ρ〈0· 01，與對照組比較
[0056] 結(jié)論：組合物口服給藥，對抗原（卵白蛋白）和組胺所致大鼠搔抓鼻部、打噴嚏反 應(yīng)及鼻腔血管通透性升高具有顯著抑制作用，因此，可用于制備治療鼻炎的藥物。化合物 III和化合物IV對抗原（卵白蛋白）和組胺所致大鼠搔抓鼻部、打噴嚏反應(yīng)及鼻腔血管通 透性升高沒有顯著抑制作用，因此，不可用于制備治療鼻炎的藥物。
[0057] 實(shí)施例8本發(fā)明所涉及組合物片劑的制備
[0058] 取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機(jī)制成100片。
[0059] 實(shí)施例9本發(fā)明所涉及組合物膠囊的制備
[0060] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100 粒。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為95%和5%，2. 如權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為：將化合物III的粉末和化合物 IV的粉末按照質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為95%和5%充分混合。3. -種如權(quán)利要求1所述的組合物在抗鼻炎藥物中的應(yīng)用。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物在抗鼻炎藥物中的應(yīng)用，其特征為：所述鼻炎為抗原 所致的鼻炎。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合物在抗鼻炎藥物中的應(yīng)用，其特征為：所述抗原為卵白 蛋白。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物在抗鼻炎藥物中的應(yīng)用，其特征為：所述組合物可以 抑制卵白蛋白所致搔抓鼻部次數(shù)及打噴嚏反應(yīng)。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物在抗鼻炎藥物中的應(yīng)用，其特征為：所述組合物可以 抑制卵白蛋白所致鼻腔血管通透性的升高。8. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物在抗鼻炎藥物中的應(yīng)用，其特征為：所述鼻炎為組胺 所致的鼻炎。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的組合物在抗鼻炎藥物中的應(yīng)用，其特征為：所述組合物可以 抑制組胺所致搔抓鼻部次數(shù)及打噴嚏反應(yīng)。10. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的組合物在抗鼻炎藥物中的應(yīng)用，其特征為：所述組合物可以 抑制組胺所致鼻腔血管通透性的升高。
【專利摘要】本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及組合物及其在制備抗鼻炎藥物上的用途。本發(fā)明公開了一種組合物及其制備方法。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的組合物具有抗鼻炎作用，具有開發(fā)抗鼻炎藥物的價(jià)值。
【IPC分類】A61K31/495, A61K31/41, C07D257/04, C07D295/088, A61P11/02
【公開號】CN105287568
【申請?zhí)枴緾N201510742197
【發(fā)明人】王卓婷
【申請人】南京賦海澳賽醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2016年2月3日
【申請日】2015年11月4日