組合物及其在抗急性痛風(fēng)藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 痛風(fēng)（gouty)，又稱痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎（gouty arthritis)，是體內(nèi)噪呤代謝紊亂所致 的疾病，表現(xiàn)為血中尿酸過多，易于使尿酸鹽（MSU)在關(guān)節(jié)等組織析出結(jié)晶。痛風(fēng)的急性發(fā) 作是由于沉積在關(guān)節(jié)的MSU引起中性粒細(xì)胞局部浸潤和炎性反應(yīng)。
[0003] 西藥在痛風(fēng)急性發(fā)作期選用三種藥：秋水仙堿、非留體抗炎藥和腎上腺皮質(zhì)激素。 秋水仙堿的作用機(jī)制是與中性粒細(xì)胞的微管蛋白結(jié)合，從而妨礙粒細(xì)胞的活動，抑制粒細(xì) 胞浸潤。非留體抗炎藥如吲哚美辛，抑制環(huán)氧酶（C0X)活性而發(fā)揮抗炎作用，以及選擇性 C0X2抑制藥。它們雖然消炎止痛作用快，但毒副作用也相當(dāng)明顯，如秋水仙堿的有效劑量與 產(chǎn)生腹瀉等胃腸道癥狀的劑量相近，非留體抗炎藥在有活動性消化性潰瘍、胃腸道出血情 況下絕對禁用，而保泰松用藥短至3周也可致嚴(yán)重的粒細(xì)胞減少癥或再生障礙性貧血。
[0004] 從天然產(chǎn)物中尋找化合物或先導(dǎo)化合物并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到 高效低毒的潛在藥物最有重要價值。
[0005] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個2011年發(fā)表（Antonella Maggio et al.，2011. Artalbic acid, a sesquiterpene with an unusual skeleton from Artemisia alba(Asteraceae)from Sicily. Tetrahedron Letters, 52(2011)4543 - 4545)的化合物， 我們對化合物I進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾，獲得了兩個新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化 合物III和化合物IV制備了組合物并對該組合物抗抗急性痛風(fēng)活性進(jìn)行了評價，其具有抗 急性痛風(fēng)活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明公開了一個新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合 物中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為10%和90%。
[0007]
[0008] 本發(fā)明公開的組合物可以制成藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的載體。
[0009] 本發(fā)明用尿酸鈉（MSU)致人血管內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC)損傷的急性痛風(fēng)模型評價顯 示，本發(fā)明組合物對MSU致HUVEC損傷具有保護(hù)作用，并抑制ICAM-1表達(dá)，可用于制備治療 急性痛風(fēng)炎癥藥物。本發(fā)明的目的在于提供本發(fā)明組合物在醫(yī)學(xué)中的新用途，具體地說是 涉及本發(fā)明組合物在制備治療急性痛風(fēng)藥物中的應(yīng)用。
[0010] 本發(fā)明的目的是通過以下的技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：
[0011] 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)病理研究說明，痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎是MSU引起中性粒細(xì)胞局部浸潤和炎 性反應(yīng)，急性痛風(fēng)產(chǎn)生的本質(zhì)是中性粒細(xì)胞（PMN)-血管內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC)黏連增強(qiáng) (Terkeltaub R，et al. The murine homolog of the interleukin-8 receptorcxcr-2 is essential for the occurrence of neutrophilic inflammation in air pouch model of acute urate crystal-induced gouty synovitis.Arthritis Rheum，1998, 41 (5) :900-909.)，HUVEC損傷，其分子生物學(xué)基礎(chǔ)在于PMN與HUVEC表面黏 附分子的相互作用（FujiwaraY，et al. Interleukin-8 stimulates leukocyte migration across amonolayer of cultured rabbit NF_a，IL-1β，IL-8,and IL-lrain Monosodium Urate Crystal induced rabbit arthritis. Labinvest，19998, 78 (5): 559-569·)，其中細(xì) 胞間黏附分子-1 (ICAM-1)與粘附功能關(guān)系最密切，是急性痛風(fēng)炎癥的重要指標(biāo)之一（張 春，唐怡，劉軍，等.痛風(fēng)靈方對尿酸鈉致大鼠模型關(guān)節(jié)軟組織ICAM-1表達(dá)的影響，重慶醫(yī) 學(xué)，2002, 31 (12) :1211-1213.)。
[0012] 因此，針對急性痛風(fēng)MSU致HUVEC損傷，ICAM-1表達(dá)增多的病理特征，本發(fā)明用 MSU致HUVEC損傷的體外急性痛風(fēng)模型（楊妍華，尹蓮，王明艷，等.尿酸鈉誘導(dǎo)HUVEC損傷 的急性痛風(fēng)模型研究，中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2010, 28(3) :592-594.)，評價本發(fā)明組合物抗急性 痛風(fēng)炎癥活性。MSU致人血管內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC)損傷的急性痛風(fēng)模型評價顯示，本發(fā)明組合 物對MSU致HUVEC損傷具有保護(hù)作用，并抑制ICAM-1表達(dá)。
[0013] 有益效果
[0014] 研究結(jié)果表明，用MSU致HUVEC損傷的急性痛風(fēng)模型評價顯示，本發(fā)明組合物可保 護(hù)MSU致HUVEC損傷，減少細(xì)胞凋亡，提高細(xì)胞活性，抑制ICAM-1表達(dá)，具有抗急性痛風(fēng)炎 癥的活性，本發(fā)明組合物可用于制備治療急性痛風(fēng)炎癥藥物。
[0015] 以下通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 實(shí)施例1化合物Artalbic acid的制備
[0017] 化合物Artalbic acid(I)的制備方法參照Antonella Maggio等人發(fā)表的 文南犬(Antonella Maggio et al. , 2011. Artalbic acid, a sesquiterpene with an unusual skeleton from Artemisia alba(Asteraceae)from Sicily. Tetrahedron Letters, 52(2011)4543 - 4545)的方法。
[0019] 實(shí)施例2 Artalbic acid的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0020] 將化合物I (266mg，1. OOmmol)溶于10mL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（TBAB) (0. 08g)，1，2-二溴乙烷（3. 760g，20.0 Ommol)和6mL的50 %氫氧化鈉溶液?；旌衔镌?0 攝氏度攪拌16h。16h之后將反應(yīng)液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機(jī)相 溶液。然后對有機(jī)相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌5次，再用無水硫酸鈉干燥，最后減 壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油醚/丙酮 =100:1.0, v/v)，收集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末（272mg， 73% ) 〇
[0021] 4 NMR (500MHz，DMS0-d6) δ 11. 41 (s，1H)，6. 06 (s，1H)，5. 76 (s，1H)，4. 99 (s，1H)，4 .71 (s, 1H), 4. 56 (s, 1H), 3. 86 (s, 2H), 3. 54 (s, 2H), 2. 65 (s, 1H), 2. 43 (s, 2H), 2. 33 (s, 2H), 2 .10 (s, 1H), 1. 64 (s, 3H), 1. 54 (s, 1H), 1. 44 (s, 2H), 0. 95 (s, 3H).
[0022] 13C NMR(125MHz，DMS0-d6) δ 201. 95(s), 175. 93(s), 149. 13(s), 148. 15(s), 117. 0 5 (s), 109. 43 (s), 81. 86 (s), 70. 27 (s), 57. 68 (s), 41. 26 (s), 39. 07 (s), 38. 86 (s), 35. 69 (s) ,33. 36 (s), 30. 72 (s), 20. 44 (s), 18. 42 (s).
[0023] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcd for C17H26Br04:3 7 3. 10 1 4 ；found 373. 1017.
[0025] 實(shí)施例3 Artalbic acid的0_(哌嗪基）乙基衍生物（III)的合成
[0026] 將化合物II (187mg，0. 5mmol)溶于25mL乙腈當(dāng)中，向其中加入無水碳酸鉀 (345mg，2. 5mmol)，碘化鉀（84mg，0. 5mmol)和無水哌嗪（3446mg，40mmol)，混合物加熱回流 4h。反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入20mL冰水中，用等量二氯甲烷萃取2次，合并有機(jī)相。依次 用水和飽和食鹽水洗滌合并之后的有機(jī)相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到 產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油醚/丙酮=100:1. 5, v/v)，收集 淡棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物III的棕色粉末（124. 7mg，66% )。
[0027] NMR(500MHz, DMS〇-d6) δ 11. 56(s, 1Η), 6. 22(dt, J = 3. 9, 1. 8Hz, 1H) , 5. 92 (dt, J = 4. 0, 1. 9Hz, 1H) , 4. 9 1 - 4. 80 (m, 2H) , 4. 76 - 4. 67 (m, 1H), 3. 65 (t, J = 7. 6Hz, 2H), 2. 80 (m, 5H), 2. 70-2. 62 (m, 6H), 2. 45 (td, J = 12. 2, 0. 6Hz, 4H), 2. 23 (dd, J = 24. 7, 17. 4Hz, 1H), 1. 79 (t, J = 2. 0Hz, 3H)