一種治療胃潰瘍的櫻桃葉提取物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，具體涉及一種治療胃潰瘍的櫻桃葉提取物及其制備方法
【背景技術(shù)】
[0002] 櫻桃葉為薔薇科植物櫻桃的葉。夏、秋季采葉曬干。
[0003] 原植物櫻桃為落葉灌木或喬木，高3-8m。樹皮灰白色，有明顯的皮孔；幼枝無毛或 被疏柔毛。葉互生；葉柄長〇. 7-1. 5cm，被疏柔毛，先端有1或2個(gè)大腺體；托葉披針形，有 羽裂腺齒，早落；葉片卵形或長圓狀卵形，長5-12cm，寬3-5cm，先端漸尖或尾狀漸尖，基部 圓形，邊有尖銳重鋸齒，齒端有小腺體，上面暗綠色，近無毛，下面淡綠色，沿脈或脈間有稀 疏柔毛；花兩性，花序傘房狀或近傘形；有花3-6朵，先葉開放；花梗長8-19mm，被疏柔毛； 萼筒鐘狀，外被疏柔毛；萼片5,三角卵圓形或卵狀長圓形；先端急尖或鈍；花瓣5,白色，卵 圓形，先端下凹或二裂；雄蕊30-35,栽培者可達(dá)50枚；花柱與雄蕊近等長，無毛雌蕊1，子 房下位。核果近球形，紅色，直徑9-13mm，種子1顆，包圍于黃白色木質(zhì)內(nèi)果皮中。花期3-4 月。果期5-6月。生于海拔300-600m的山坡向陽處或溝邊。分布華東及遼寧、河北、甘肅、 陜西、湖北、四川、廣西、山西、河南等地。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種櫻桃葉提取物，該提取物的制備方法和液相分析方 法，含有該提取物的藥物制劑及利用該提取物制備治療胃潰瘍藥物的用途。
[0005] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0006] -種櫻桃葉提取物，該提取物由以下方法制備：
[0007] (a)以重量計(jì)，每100份藥材包含干燥的櫻桃葉80~90份和干燥的苦參10~20 份，混合粉碎；(b)用乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液；（c)對步驟 (b)濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸 乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（d)正丁醇萃取物用大孔樹脂富集，先用20~30%乙醇沖洗 7~9個(gè)柱體積除雜，再用55~65%乙醇洗脫9~11個(gè)柱體積，收集55~65%乙醇洗脫 液，減壓濃縮，噴霧干燥。
[0008] 進(jìn)一步地，步驟（d)中所述大孔樹脂為AB-8型大孔樹脂。
[0009] 進(jìn)一步地，步驟（b)中所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為65~75%。
[0010] 進(jìn)一步地，步驟（b)中所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為70%。
[0011] 進(jìn)一步地，步驟（d)為用正丁醇萃取物用大孔樹脂富集，先用25%乙醇沖洗8個(gè)柱 體積除雜，再用60%乙醇洗脫10個(gè)柱體積，收集60%乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。
[0012] 為了能夠通過建立HPLC指紋圖譜的方法控制不同產(chǎn)地、批次藥材制備的櫻桃葉 提取物批間差異，所述提取物的液相分析方法為：
[0013] 色譜柱：Agilent Zorbax SB C18 柱（4. 6mmX 250mm，5 μ m);
[0014] 流動(dòng)相：A為乙腈，B為0. 1 %甲酸溶液（三乙胺調(diào)節(jié)pH值至6. 0);
[0015] 梯度洗脫程序：0 ~5min，A 35%;5 ~10min，A 35%-70%;10 ~15min，A 70% -35% ;15 ~20min，A 35% ;
[0016] 流動(dòng)相流速：1. OmL · min S
[0017] 檢測波長：274nm;
[0018] 柱溫：30°C ;
[0019] 進(jìn)樣量 10 μ L。
[0020] 藥物制劑，含有治療有效量的所述櫻桃葉提取物和藥學(xué)上可接受的載體。
[0021] 所述的櫻桃葉提取物在制備治療胃潰瘍的藥物中的應(yīng)用。
[0022] 所述的藥物制劑在制備治療胃潰瘍的藥物中的應(yīng)用。
[0023] 本發(fā)明提取物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物制劑的形式使用。
[0024] 所述藥物制劑含有治療有效量的本發(fā)明櫻桃葉提取物，其余為藥物學(xué)上可接受 的、對人和動(dòng)物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0025] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物制劑以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明提取物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
[0026] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明通過對櫻桃葉藥材進(jìn)行提取、除雜、富集處理，能得到對胃 潰瘍具有治療作用的提取物；本發(fā)明提供的液相分析方法可以用于建立該提取物的指紋圖 譜，用于控制不同產(chǎn)地、批次藥材制備的提取物的批間差異。
【附圖說明】
[0027] 圖1為櫻桃葉提取物HPLC液相圖譜。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0029] 實(shí)施例1 :櫻桃葉提取物制備
[0030] 藥材來源：櫻桃葉和苦參購自安徽亳州中藥材市場。
[0031] 主要試劑：食品級乙醇購自上海凌峰化學(xué)試劑有限公司；醫(yī)藥級AB-8大孔樹脂購 自天津波鴻樹脂有限公司；乙腈為HPLC級，購于TEDIA ;85 %磷酸為HPLC級，購于TEDIA ; 色譜用純凈水為哇哈哈純凈水。
[0032] 將8. 5kg干燥的櫻桃葉和1. 5kg干燥苦參混合粉碎，用70%乙醇熱回流提取 (25LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液^L);對濃縮液依次用石油醚（6LX3 次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔樹脂 (2kg，柱體積1. 5L)富集，先用25%乙醇沖洗8個(gè)柱體積（12L)，再用60%乙醇洗脫10個(gè)柱 體積（15L)，收集60%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得櫻桃葉提取物浸膏粉約155g。
[0033] 實(shí)施例2 :櫻桃葉提取物②制備（80份櫻桃葉，20份苦參）
[0034] 制備方法：將8. 0kg干燥的櫻桃葉和2. 0kg干燥苦參混合粉碎，用70%乙醇熱回 流提取（25LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液（6L);對濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大 孔樹脂（2kg，柱體積1. 5L)富集，先用25%乙醇沖洗8個(gè)柱體積（12L)，再用60%乙醇洗脫 10個(gè)柱體積（15L)，收集60%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得櫻桃葉提取物浸膏粉約155g。
[0035] 實(shí)施例3 :櫻桃葉提取物③制備（90份櫻桃葉，10份苦參）
[0036] 制備方法：將9. 0kg干燥的櫻桃葉和1. 0kg干燥苦參混合粉碎，用70%乙醇熱回 流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液（6L);對濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大 孔樹脂（2kg，柱體積1. 5L)富集，先用25%乙醇沖洗8個(gè)柱體積（12L)，再用60%乙醇洗脫 10個(gè)柱體積（15L)，收集60%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得櫻桃葉提取物浸膏粉約155g。
[0037] 實(shí)施例4 :櫻桃葉提取物④制備（75份櫻桃葉，25份苦參）
[0038] 制備方法：將7. 5kg干燥的櫻桃葉和2. 5kg干燥苦參混合粉碎，用70%乙醇熱回 流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液（6L);對濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大 孔樹脂（2kg，柱體積1. 5L)富集，先用25%乙醇沖洗8個(gè)柱體積（12L)，再用60%乙醇洗脫 10個(gè)柱體積（15L)，收集60%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得櫻桃葉提取物浸膏粉約155g。
[0039] 實(shí)施例5 :櫻桃葉提取物⑤制備（95份櫻桃葉，5份苦參）
[0040] 制備方法：將9. 5kg干燥的櫻桃葉和0. 5kg干燥苦參混合粉碎，用70%乙醇熱回 流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液（6L);對濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大 孔樹脂（2kg，柱體積1. 5L)富集，先用25%乙醇沖洗8個(gè)柱體積（12L)，再用60%乙醇洗脫 10個(gè)柱體積（15L)，收集60%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得櫻桃葉提取物浸膏粉約155g。
[0041] 實(shí)施例6 :液相色譜分析
[0042] 供試品溶液配制：取實(shí)施例1方法制得的提取物浸膏粉5mg至50mL棕色容量瓶 中，加30mL 25%乙腈水溶液超聲溶解，冷卻至室溫后，繼續(xù)加25%乙腈水溶液定容。
[0043] 分析方法：
[0044] 高效液相色譜儀：Agilent 1100,二元栗；
[0045] 色譜柱：