一種對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎具有治療作用的敗醬草提取物的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎具有治療作用的敗醬草提取物的制備方法及由 該方法制備的敗醬草提取物的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 敗醬草為敗醬科多年生草本植物黃花敗醬、白花敗醬的根莖或帶根全草，是一味 古老而常用的中藥。敗醬草具有清熱解毒、排膿破瘀、活血化瘀之功效。臨床常用于慢性胃 炎、胃食管反流、放射性直腸炎等。敗醬草提取物的抑菌、抗病毒、降血脂及中樞抑制等作用 已有現(xiàn)代藥理研究報(bào)道，但未見單獨(dú)使用敗醬草對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎治療方面的報(bào)道。
[0003] 現(xiàn)有的中藥提取物，普遍缺乏科學(xué)的提取方法，依然以傳統(tǒng)的水煎、乙醇提取等常 規(guī)方法進(jìn)行提取，藥物中的雜質(zhì)含量多，甚至含有對(duì)人體有害的成分，這嚴(yán)重影響了中藥提 取物的療效。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎具有治療作用的敗醬草提取物的制 備方法。
[0005] 本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是： 一種敗醬草提取物的制備方法，包括如下步驟： 1) 將敗醬草粉碎，加水浸提，將浸提液濃縮，得濃縮液； 2) 將濃縮液用水飽和正丁醇萃取，將萃取液合并，去除溶劑，得殘?jiān)?3) 將殘?jiān)盟芙?，將溶液用聚酰胺樹脂吸附，用水洗脫，收集水洗液，干燥，得干粉?4) 將干粉溶解，將溶液用大孔吸附樹脂吸附，用水洗脫，棄水洗液，再以30~95%乙醇 洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮干燥即得敗醬草提取物。
[0006] 作為上述制備方法的進(jìn)一步改進(jìn)，濃縮液的制備操作為：將敗醬草粉碎，加藥材體 積2~5倍量的水浸泡，浸泡時(shí)間0. 5~2h，再用藥材質(zhì)量6~14倍量的水提取1~3次， 每次提取0. 5~2小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮成濃度為0. 5~Ig原藥/mL的濃縮液。
[0007] 作為上述制備方法的進(jìn)一步改進(jìn)，殘?jiān)闹苽洳僮鳛椋喝饪s液用1~3倍體積的 水飽和正丁醇反復(fù)萃取1~3次，合并正丁醇萃取液，回收溶劑至干。
[0008] 作為上述制備方法的進(jìn)一步改進(jìn)，殘?jiān)c聚酰胺樹脂的用量比為：Ig原藥八1~ 3) g聚酰胺樹脂。
[0009] 作為上述制備方法的進(jìn)一步改進(jìn)，干粉與大孔吸附樹脂的用量比為：lg原藥/ (1~3) g大孔吸附樹脂。
[0010] 作為上述制備方法的進(jìn)一步改進(jìn)，大孔吸附樹脂的型號(hào)為D101、D140、D141、AB-8 中的一種。
[0011] 作為上述制備方法的進(jìn)一步改進(jìn)，制備方法包括如下步驟： 1) 將敗醬草粉碎，加藥材體積2~3倍量的水浸泡，浸泡時(shí)間0. 5~2h，再用藥材質(zhì)量 8~12倍量的水提取1~2次，每次提取1~1. 5小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮成濃度 為0. 6~0. 9原藥g/mL的濃縮液； 2) 取濃縮液用1~2倍體積的水飽和正丁醇反復(fù)萃取1~3次，合并正丁醇萃取液，回 收溶劑至干，得殘?jiān)?3) 取殘?jiān)盟芙獬?. 6~0. 9g原藥/mL的溶液，將溶液用聚酰胺樹脂吸附，用水洗 脫，收集水洗液，干燥，得干粉； 4) 將干粉溶解成0. 6~0. 9g原藥/mL的溶液，將溶液用大孔吸附樹脂吸附，用水洗脫， 棄水洗液，再以55~75v/v%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮干燥即得敗醬草提取物。
[0012] -種治療潰瘍性結(jié)腸炎的組合物，其活性成分為敗醬草提取物，敗醬草提取物的 制備方法如上所述。
[0013] 優(yōu)選的，組合物的劑型為口服制劑。
[0014] 優(yōu)選的，口服制劑選自片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑。
[0015] 本發(fā)明的有益效果是： 本發(fā)明方法提取得到的敗醬草提取物，主要含有黃花敗醬皂苷A、黃花敗醬皂苷B、黃 花敗醬皂苷C、齊墩果酸、α-常春藤皂苷、常春藤皂苷等皂苷類成分，且這些有效成分 的總含量在50%到100%之間。該敗醬草提取物作為唯一的活性成分，可升高潰瘍性結(jié)腸 炎大鼠 SOD值，降低MDA值，降低MPO活性，從而清除氧自由基，減少過氧化脂質(zhì)生成，減少 中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，改善或減輕結(jié)腸炎癥狀。同時(shí)能降低TNF-a、IL-I β水平，從而對(duì)TNBS 或乙醇法誘導(dǎo)的大鼠結(jié)腸炎有明顯的改善作用，是現(xiàn)有技術(shù)所無(wú)法實(shí)現(xiàn)的，擴(kuò)大了敗醬草 使用范圍。有望開發(fā)為新型的高效潰瘍性結(jié)腸炎治療藥物。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 下面結(jié)合實(shí)施例，進(jìn)一步說明本發(fā)明的技術(shù)方案。
[0017] 以下實(shí)施例中所使用的敗醬草藥材購(gòu)自廣州市清平藥材市場(chǎng)。
[0018] 實(shí)施例1 1) 將敗醬草粉碎，加藥材體積2倍量的水浸泡，浸泡時(shí)間0. 5h，再用藥材質(zhì)量12倍量 的水提取1次，提取1小時(shí)，濾過，濾液濃縮成濃度為〇. 6g/mL(相當(dāng)于原藥材）濃度的溶 液； 2) 取上述溶液用1倍體積的水飽和正丁醇萃取1次，收集正丁醇萃取液，回收溶劑至 干，得殘?jiān)?3) 取殘?jiān)盟芙獬?. 6g/mL(相當(dāng)于原藥材）濃度的溶液，將該溶液用聚酰胺樹脂以 水洗脫，收集水洗液，減壓濃縮至干，得干粉； 4) 取干粉用水溶解成0.6g/mL(相當(dāng)于原藥材）濃度的溶液，用DlOl大孔吸附樹脂以 水洗脫，棄去水洗液，再以55%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇，稠膏干燥即得敗醬草 提取物。
[0019] 利用紫外-可見分光光度法（以黃花敗醬皂苷C為對(duì)照品）測(cè)得本實(shí)施例制得敗 醬草提取物中皂苷類成分的總含量為67%。
[0020] 實(shí)施例2 1) 將敗醬草粉碎，加藥材體積3倍量的水浸泡，浸泡時(shí)間lh，再用藥材質(zhì)量8倍量的水 提取2次，每次提取1. 5小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮成濃度為0. 8g/mL(相當(dāng)于原藥 材）濃度的溶液； 2) 取上述溶液用2倍體積的水飽和正丁醇反復(fù)萃取3次，合并正丁醇萃取液，回收溶劑 至干，得殘?jiān)?3) 取殘?jiān)盟芙獬?. 8g/mL(相當(dāng)于原藥材）濃度的溶液，將該溶液用聚酰胺樹脂以 水洗脫，收集水洗液，減壓濃縮至干，得干粉； 4) 取干粉用水溶解成0.8g/mL(相當(dāng)于原藥材）濃度的溶液，用AB-8大孔吸附樹脂以 水洗脫，棄去水洗液，再以75%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇，稠膏干燥即得敗醬草 提取物。
[0021] 利用紫外-可見分光光度法（以黃花敗醬皂苷C為對(duì)照品）測(cè)得本實(shí)施例制得敗 醬草提取物中皂苷類成分的總含量為54%。
[0022] 實(shí)施例3 1) 將敗醬草粉碎，加藥材體積2倍量的水浸泡，浸泡時(shí)間2h，再用藥材質(zhì)量9倍量的水 提取2次，每次提取1小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮成濃度為0. 9g/mL (相當(dāng)于原藥材） 濃度的溶液； 2) 取上述溶液用1倍體積的水飽和正丁醇反復(fù)萃取3次，合并正丁醇萃取液，回收溶劑 至干，得殘?jiān)?3) 取殘?jiān)盟芙獬?.9g/mL(相當(dāng)于原藥材）濃度的溶液。將該溶液用聚酰胺樹脂 以水洗脫，收集水洗液，減壓濃縮至干，得干粉； 4) 取干粉用水溶解成0.9g/mL(相當(dāng)于原藥材）濃度的溶液，用D140大孔吸附樹脂以 水洗脫，棄去水洗液，再以65%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇，稠膏干燥即得敗醬草 提取物。
[0023] 利用紫外-可見分光光度法（以黃花敗醬皂苷C為對(duì)照品）測(cè)得本實(shí)施例制得敗 醬草提取物中皂苷類成分的總含量為72%。
[0024] 對(duì)比例1 1) 將敗醬草粉碎，加藥材體積2倍量的水浸泡，浸泡時(shí)間0. 5h，再用藥材質(zhì)量12倍量 的水提取1次，提取1小時(shí)，濾過，濾液濃縮成濃度為〇. 6g/mL(相當(dāng)于原藥材）濃度的溶 液； 2) 取上述溶液用1倍體積的水飽和正丁醇萃取1次，收集正丁醇萃取液，回收溶劑，稠 膏干燥即得敗醬草提取物。
[0025] 利用紫外-可見分光光度法（以黃花敗醬皂苷C為對(duì)照品）測(cè)得本實(shí)施例制得敗 醬草提取物中皂苷類成分的總含量為18% (含量不到50% )。
[0026] 對(duì)比例2 將敗醬草粉碎，加藥材體積3倍量的水浸泡，浸泡時(shí)間lh，再用藥材質(zhì)量8倍量的水提 取2次，每次提取1. 5小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮成稠膏，干燥、粉碎得敗醬草提取 物。
[0027] 利用紫外-可見分光光度法（以黃花敗醬皂苷C為對(duì)照品）測(cè)得本實(shí)施例制得敗 醬草提取物中皂苷類成分的總含量為12% (含量不到50% )。
[0028] 對(duì)比例3 將敗醬草粉碎，加藥材體積2倍量的95%乙醇浸泡，浸泡時(shí)間2h，再