>[0114] 5、試驗(yàn)結(jié)論
[0115] 試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，與正常對(duì)照組比較，大鼠血疲模型組的血液流變學(xué)指標(biāo)均顯著性 增高（P0. 05)，與血疲型疾病的血液流變學(xué)特征相一致，可用于研究本發(fā)明藥物組合物對(duì) 腦血栓的治療效果。
[0116] 與模型對(duì)照組比較，本發(fā)明藥物組合物A組，即本發(fā)明實(shí)施例1制得的藥物組合物 高劑量組與中劑量組均能顯著改善血疲模型大鼠的血液流變學(xué)指標(biāo)（PO. 05)，作用效果優(yōu) 于陽(yáng)性對(duì)照組，低劑量組也能在一定程度上降低各血液流變學(xué)指標(biāo)的水平。
[0117] 與模型對(duì)照組比較，本發(fā)明藥物組合物B組，即本發(fā)明實(shí)施例2制得的藥物組合物 高劑量組能顯著降低大鼠的血液流變學(xué)指標(biāo)水平（P0.05)，效果優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照組，而中劑 量組和低劑量組對(duì)血液流變學(xué)指標(biāo)水平也具有一定的降低效果。
[0118] 綜上，本發(fā)明藥物組合物對(duì)血疲的治療效果顯著，可用于腦血栓的臨床治療。
[0119] 試驗(yàn)本發(fā)明藥物組合物對(duì)腦血栓形成模型大鼠血漿溶血憐脂酸和憐脂酸水平 的影響
[0120] 1、試驗(yàn)原理及目的：溶血憐脂酸（LPA)和憐脂酸（PA)都是憐脂代謝的中間產(chǎn)物。 正常情況下，LPA在血漿中的含量很低，人或動(dòng)物的血小板在受到凝血酶刺激激活后可通過 憐脂酶的作用釋放LPA，使血漿中LPA水平升高。LPA可刺激血小板聚集和平滑肌收縮，促進(jìn) 血管內(nèi)皮增生，在凝血和血栓形成過程中起著重要作用。PA是一種腦缺血的早期釋放物，在 缺血的24h內(nèi)產(chǎn)生，其水平的增高反映了腦缺血缺氧的程度，與氧自由基的過度形成有關(guān)。 本試驗(yàn)通過研究本發(fā)明藥物組合物對(duì)腦血栓形成模型大鼠血漿中LPA和PA水平的影響來 證明其對(duì)腦血栓的預(yù)防效果。
[0121] 2、大鼠腦血栓模型的建立
[012引將大鼠用3%戊己比妥鋼（40mg/kg)腹腔注射麻醉后，仰邸位固定于手術(shù)臺(tái)上。頸 正中部縱向切開皮膚，切口長(zhǎng)約2cm，分離頸部肌肉，游離出右側(cè)頸總動(dòng)脈，從頸總動(dòng)脈分叉 處向上分離頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈。結(jié)扎頸外動(dòng)脈，然后向煩底方向分離頸內(nèi)動(dòng)脈，在煩底 處分離出翼聘動(dòng)脈，并結(jié)扎其根部，僅保留頸內(nèi)動(dòng)脈入煩底主干。結(jié)扎頸總動(dòng)脈，暫用2只 微型動(dòng)脈夾間隔一定距離夾閉頸內(nèi)動(dòng)脈，在近屯、端血管夾下方頸總動(dòng)脈處用眼科剪剪一小 口，插入內(nèi)已抽好血栓誘導(dǎo)劑凝血酶IOU和生理鹽水0.Olml的導(dǎo)管固定后，移去近屯、端血 管夾，少量血液流入導(dǎo)管頭端，放置約IOmin形成一小血栓，然后移去另一只血管夾，緩慢 將此血栓和凝血酶注入頸內(nèi)動(dòng)脈，拔出導(dǎo)管，并將頸總動(dòng)脈切口處結(jié)扎，縫合切口；術(shù)后單 籠飼養(yǎng)。
[0123] 假手術(shù)組手術(shù)操作過程同上，注入等量生理鹽水而非血栓栓子和凝血酶。
[0124] 3、試驗(yàn)分組及給藥方案：
[01巧]18~20周齡，SD大鼠70只，體重280~350g，18~20周齡，雌雄各半，隨機(jī)分成 7組，每組10只。
[0126] 模型對(duì)照組：取1組大鼠，等容積生理鹽水每天灌胃1次，連續(xù)灌胃7天。
[0127] 藥物試驗(yàn)組：將本發(fā)明實(shí)施例3制得的膠囊劑，用水調(diào)配成濃度為0. 6g/ml、0. 4g/ ml和0. 2g/ml的混懸液，備用。取3組大鼠，標(biāo)記為藥物試驗(yàn)組高劑量組（I. 2g/kg)、中劑 量組化8g/kg)和低劑量組（0. 4g/kg)，高劑量組用濃度為0. 6g/ml的藥物混懸液，中劑量 組用濃度為0. 4g/ml的藥物混懸液，低劑量組用濃度為0. 2g/ml的藥物混懸液，按劑量每天 灌胃1次，連續(xù)給藥7天。
[012引陽(yáng)性對(duì)照組：陽(yáng)性對(duì)照藥為血栓屯、脈寧片（國(guó)藥準(zhǔn)字Z20030145,吉林華康藥業(yè)股 份有限公司），用水調(diào)配成60 %的混懸液，取1組大鼠，按1. 2g/kg的劑量每天灌胃給藥1 次，連續(xù)給藥7天。
[0129] 假手術(shù)組：取1組大鼠，等容積生理鹽水每天灌胃1次，連續(xù)灌胃7天。
[0130] 正常對(duì)照組：取1組大鼠，等容積生理鹽水每天灌胃1次，連續(xù)灌胃7天。
[0131] 4、試驗(yàn)方法：
[0132] 模型對(duì)照組：末次灌胃后禁飲食12h，參照上述大鼠腦血栓模型的建立方法建立 模型。術(shù)后化，用3%戊己比妥鋼（40mg/kg)腹腔注射麻醉，經(jīng)腹主動(dòng)脈取血4ml，檢測(cè)血漿 中LPA和PA的水平。
[0133] 藥物試驗(yàn)組：試驗(yàn)方法同模型對(duì)照組。
[0134] 陽(yáng)性對(duì)照組：試驗(yàn)方法同模型對(duì)照組。
[0135] 假手術(shù)組：末次灌胃后禁飲食12h，進(jìn)行假手術(shù)。術(shù)后化，用3%戊己比妥鋼（40mg/ kg)腹腔注射麻醉，經(jīng)腹主動(dòng)脈取血4ml，檢測(cè)血漿中LPA和PA的水平。
[0136] 正常對(duì)照組：末次灌胃后禁飲食12h，用3%戊己比妥鋼（40mg/kg)腹腔注射麻醉， 經(jīng)腹主動(dòng)脈取血4ml，檢測(cè)血漿中LPA和PA的水平。
[0137] 5、試驗(yàn)結(jié)果：如表5所示。
[0138] 表5各組大鼠血漿LPA、PA水平比較
[0139]
[0140] 注：與模型對(duì)照組比較，*P0. 05,叩0.Ol;與正常對(duì)照組比較，AAp0. 01。
[0141] 6、試驗(yàn)結(jié)論
[0142] 試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，與正常對(duì)照組相比，假手術(shù)組大鼠的LPA和PA水平無明顯變化，而 模型對(duì)照組大鼠的LPA和PA水平均極顯著降低（P0.01)。與模型對(duì)照組比較，經(jīng)高、中劑 量的本發(fā)明藥物組合物提前干預(yù)后，大鼠LPA和PA水平的升高趨勢(shì)得到明顯的抑制，效果 優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照組。而低劑量組也有一定的抑制LPA、PA水平升高的作用，效果與陽(yáng)性對(duì)照組 相當(dāng)。
[0143] 綜上，本發(fā)明藥物組合物具有抑制LPA和PA水平升高的作用，對(duì)于血栓形成及腦 缺血損傷具有顯著的預(yù)防效果。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種藥物組合物在制備治療腦血栓藥物中的用途，其特征在于，所述的藥物組合物 主要由以下重量份數(shù)的原料制備而成： 牡荊24-36份、葛根16-24份、川芎16-22份、桃仁12-18份、乳香10-20份、藜蘆12-22 份、澤瀉16-24份、蒲公英18-26份、連翹8-14份、金盞菊花6-12份、辣木葉10-16份、桔梗 12-18份、熟地黃10-16份和甘草8-16份。2. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物在制備治療腦血栓藥物中的用途，其特征在于，所 述的藥物組合物主要由以下重量份數(shù)的原料制備而成： 牡荊24份、葛根16份、川考16份、桃仁12份、乳香10份、藜蘆12份、澤瀉16份、蒲公 英18份、連翹8份、金盞菊花6份、辣木葉10份、桔梗12份、熟地黃10份和甘草8份。3. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物在制備治療腦血栓藥物中的用途，其特征在于，所 述的藥物組合物主要由以下重量份數(shù)的原料制備而成： 牡荊36份、葛根24份、川考22份、桃仁18份、乳香20份、藜蘆22份、澤瀉24份、蒲公 英26份、連翹14份、金盞菊花12份、辣木葉16份、桔梗18份、熟地黃16份和甘草16份。4. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物在制備治療腦血栓藥物中的用途，其特征在于，所 述的藥物組合物主要由以下重量份數(shù)的原料制備而成： 牡荊30份、葛根22份、川芎18份、桃仁14份、乳香15份、藜蘆16份、澤瀉20份、蒲公 英24份、連翹10份、金盞菊花8份、辣木葉12份、桔梗14份、熟地黃14份和甘草14份。5. 如權(quán)利要求1-4任一所述的藥物組合物在制備治療腦血栓藥物中的用途，其特征在 于，所述的藥物組合物被制成顆粒劑、丸劑、散劑、片劑或膠囊劑。6. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物在制備治療腦血栓藥物中的用途，其特征在于，所 述的藥物組合物的制備方法包括以下步驟： S1取牡荊粉碎，將粗粉置于超臨界二氧化碳萃取裝置中，加入粗粉總量35-50%體積 分?jǐn)?shù)為65-75%的乙醇，調(diào)控二氧化碳流量為16-18L/h，萃取壓力為14-16MPa，萃取溫度為 45-55Γ，萃取時(shí)間為2-4h，減壓分離制得到牡荊提取物，保留牡荊殘?jiān)? S2取葛根、川芎、桃仁、連翹、金盞菊花、辣木葉和桔梗，粉碎后過170-230目篩，加入 上述粗粉總重量的6-10倍濃度為65%-75%的乙醇溶液，回流提取2-3次，每次回流時(shí)間 為2-3h，過濾，保留濾渣，合并提取液，回收乙醇，減壓濃縮至60-65Γ環(huán)境下相對(duì)密度為 1. 20-1. 25的浸膏，噴霧干燥，得浸膏細(xì)粉A; S3取乳香、藜蘆、澤瀉、蒲公英、熟地黃和甘草，粉碎，與步驟S1得到的牡荊殘?jiān)筒襟ES2得到的濾渣混合，加入上述藥材總重量6-8倍量的水煎煮3-4h，過濾；再加入上述濾渣總 重量4-6倍量的水煎煮2-3h，過濾；合并兩次濾液，減壓濃縮至60-65Γ環(huán)境下相對(duì)密度為 1. 20-1. 25的浸膏，噴霧干燥，得浸膏細(xì)粉B; S4將步驟S1得到的牡荊提取物與步驟S2得到的浸膏細(xì)粉A和步驟S3得到的浸膏細(xì) 粉B混合，干燥，粉碎，即得。
【專利摘要】本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，涉及一種藥物組合物在制備治療腦血栓藥物中的用途。所述的藥物組合物主要由以下重量份數(shù)的原料制備而成：牡荊24-36份、葛根16-24份、川芎16-22份、桃仁12-18份、乳香10-20份、藜蘆12-22份、澤瀉16-24份、蒲公英18-26份、連翹8-14份、金盞菊花6-12份、辣木葉10-16份、桔梗12-18份、熟地黃10-16份和甘草8-16份。本發(fā)明涉及的藥物組合物具有活血祛瘀，行氣止痛，益氣養(yǎng)血等功效，用于預(yù)防和治療腦血栓的效果顯著。
【IPC分類】A61K36/896, A61P3/06, A61P7/02, A61P3/10, A61P9/10, A61P9/12
【公開號(hào)】CN105343449
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510709554
【發(fā)明人】葉宗耀, 鄒錦新
【申請(qǐng)人】葉宗耀
【公開日】2016年2月24日
【申請(qǐng)日】2015年10月28日