一種宿苞豆根提取物、其制備方法及其用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種宿巷豆根提取物、其制備方法及其用途，屬于中藥現(xiàn)代化領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 宿巷豆根來源于豆科宿巷豆屬植物中國宿巷豆化uteriasinensis化msl，別名 銅錢麻黃、野魏豆，為俸族習(xí)用民族藥，俸藥名為托葉努滕。該藥味苦、性涼，入±塔，具有清 火解毒，桂風(fēng)止痛的功效，主治"兵哇皇，唉乎火接"（風(fēng)熱感冒，咳嗽咽痛）。該植物主要分 布于濱中和濱南和廣西地區(qū)，此外越南、柬捕寨、泰國、印度尼西亞、尼泊爾等地也有分布。
[0003] 中國宿巷豆也是彝族、化族等多個(gè)少數(shù)民族常用藥材。彝藥名為野梭努，在彝族驗(yàn) 方中被稱為繫眼草；在《中國化族醫(yī)藥》被記載為"銅錢藤"。具有清熱解毒，止咳化疲，平喘 的功效，用于治療外感風(fēng)熱，肺熱咳喘，喉搏，肺癡，乳癡，目赤腫痛，瘡瘍。宿巷豆根曾被收 載于《云南省藥品標(biāo)準(zhǔn)》（1974)和《云南常用中藥材提升標(biāo)準(zhǔn)》（未出版）。
[0004] 有研究報(bào)道，宿巷豆根乙醇提取物在動(dòng)物氣管炎模型篩選中具有明顯的鎮(zhèn)咳、桂 疲和平喘作用，并且對(duì)兔的血壓、呼吸、屯、率、血常規(guī)和肝腎功能無明顯改變，對(duì)小鼠灌胃的 LDso為 105. 2g/kg。 陽0化]迄今已從中國宿巷豆中分離出多個(gè)黃酬類成分，而從同屬植物光宿巷豆 S.vestita.和毛宿巷豆S.pampaniniana中也分離出多種黃酬類物質(zhì)，表明黃酬類成分是 該屬植物的主要成分類型，同時(shí)，黃酬類成分具有多種藥效活性，如抗氧化、提高機(jī)體免疫 力和作用于屯、腦血管系統(tǒng)等作用。目前尚未見宿巷豆根黃酬類成分提取物的研究報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明要解決的第一個(gè)技術(shù)問題是提供一種富含黃酬類成分的宿巷豆根提取物。
[0007] 本發(fā)明要解決的第二個(gè)技術(shù)問題是提供上述宿巷豆根提取物的制備方法。
[0008] 本發(fā)明要解決的第Ξ個(gè)技術(shù)問題是提供上述宿巷豆根提取物的制藥用途。
[0009] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用W下技術(shù)方案：
[0010] 本發(fā)明W宿巷豆根為原料，經(jīng)乙醇水提取，回收溶劑，得總提物浸膏；總提物浸膏 經(jīng)水分散后離屯、，離屯、液經(jīng)石油酸脫脂，后用乙酸乙醋萃取，回收萃取劑得乙酸乙醋浸膏， 浸膏稀釋后通過柱層析分離，經(jīng)薄層層析分析和紫外分光光度法測(cè)定收集黃酬部位并濃縮 得提取物。
[0011] 一種宿巷豆根提取物，提取物含總黃酬的重量百分比> 50%，優(yōu)選> 65%。
[0012] 一種宿巷豆根提取物的制備方法，包括如下步驟：
[0013] (1)取干宿巷豆根粉碎至粒度為40-60目；
[0014] 似宿巷豆根粉末用70~90%v/v的乙醇水溶液回流或冷浸提取2~4次，合并 乙醇水提取液，回收提取溶劑得到總提物浸膏；
[001引 做總提物浸膏用水分散，用離屯、機(jī)離心離心液用3倍體積石油酸脫脂2~3次， 后用乙酸乙醋萃取3~4次，合并乙酸乙醋層，回收萃取劑得乙酸乙醋浸膏；
[0016] (4)所得乙酸乙醋浸膏用水稀釋至質(zhì)量百分比濃度為2~6%，取浸膏量30~50 倍的樹脂加壓裝柱，用體積百分比濃度為35-50%的甲醇或乙醇水溶液平衡柱子，然后將上 樣液緩慢滴加上樣，上樣完畢靜置1-1.化后用體積百分比濃度為60~90%的甲醇或乙醇 水溶液洗脫，測(cè)定收集黃酬部位并濃縮。
[0017] 所述步驟（2)中乙醇水溶液為生藥量的5~10倍，冷浸提取條件為溫度15~ 25°C，每次24~4她；回流提取條件為溫度60~70°C，每次1~化。 陽01引所述步驟（3)中離屯、機(jī)的離屯、率為2萬轉(zhuǎn)/分鐘。
[0019] 所述步驟（4)中的樹脂為聚陰離子纖維素。
[0020] 所述步驟（4)測(cè)定收集黃酬部位采用薄層層析和紫外分光光度法。
[0021] 所述步驟（4)中的薄層層析條件為Ξ氯甲燒：甲醇為展開劑，硅膠G板層析，Ξ氯 化侶試劑顯色。
[0022] 所述步驟（4)紫外分光光度法的紫外燈鑒別波長(zhǎng)為365nm。
[0023] 一種宿巷豆根提取物，采用上述方法制得，提取物含總黃酬的重量百分比>50%， 優(yōu)選> 65%。
[0024] 宿巷豆根提取物用于制備鎮(zhèn)咳、桂疲藥物的用途。
[00巧]宿巷豆根提取物用于制備預(yù)防和治療感冒和慢性支氣管炎藥物中的用途。
[00%] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：本發(fā)明提供的提取方法首次建立了對(duì)宿巷豆根部的提取方法， 操作簡(jiǎn)便、條件溫和、成本較低，本發(fā)明提取方法效率高，黃酬類成分的分離所采用的柱材 料為聚陰離子纖維素，該材料是由天然纖維素經(jīng)化學(xué)改性而制得的水溶性纖維素酸類衍生 物，性質(zhì)穩(wěn)定，無毒無害，應(yīng)用范圍廣，所吸附的黃酬類物質(zhì)純度較高，因此所得提取物中總 黃酬的含量達(dá)到了 50%W上，符合"中藥注冊(cè)管理辦法"的標(biāo)準(zhǔn)，可直接用于制成藥物制劑。 研究發(fā)現(xiàn)本發(fā)明宿巷豆根提取物具有顯著的鎮(zhèn)咳桂疲活性，特別是宿巷豆根總黃酬部位在 低劑量下桂疲效果優(yōu)異，安全有效，可用于制備預(yù)防和治療感冒和慢性支氣管炎藥物。
[0027] 下面結(jié)合附圖和【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說明，并非對(duì)本發(fā)明的限制，凡 依照本發(fā)明公開內(nèi)容所做的本領(lǐng)域等同替換，均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【附圖說明】
[0028] 圖1為蘆下標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
[0029] 圖2為小鼠酪紅桂疲實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線
【具體實(shí)施方式】
[0030] 下面通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明方法作進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不局限于 所述內(nèi)容，實(shí)施例中如無特殊說明，使用試劑為常規(guī)市售試劑，或按常規(guī)方法制得的試劑。 [00川實(shí)施例1:宿巷豆根提取物的制備
[0032] 1、取宿巷豆根102g粉碎至粒度為40目；
[0033] 2、宿巷豆根粉末用1L70% (v/v)的乙醇水溶液回流提取3次，溫度65°C，每次2 小時(shí)，合并Ξ次提取液，回收提取溶劑得到總提物浸膏13. 3g;
[0034] 3、總提物浸膏用500ml水分散，用管式離屯、機(jī)2萬轉(zhuǎn)/分鐘離心得離心液420ml， 離屯、液用1.化石油酸脫脂2次，后用1L乙酸乙醋萃取3次，合并乙酸乙醋層，回收萃取劑 得乙酸乙醋浸膏8. 16g;
[0035] 4、所得乙酸乙醋浸膏用150ml水稀釋至質(zhì)量百分比濃度為5%。取400g聚陰離子 纖維素加壓裝柱，用體積百分比濃度為40%的甲醇水溶液平衡柱子，然后將上樣液緩慢滴 加上樣，上樣完畢靜置1.化后用體積百分比濃度為60~90%的甲醇水溶液洗脫，通過Ξ氯 甲燒：甲醇巧：1)硅膠G板薄層層析和紫外燈在365nm波長(zhǎng)鑒別收集黃酬部位并濃縮得提 取物6. 8地。
[0036] W上所得提取物按紫外分光光度法測(cè)定，含總黃酬W無水蘆下也化。〇18)計(jì)為 68%。
[0037] 實(shí)施例2 :宿巷豆根提取物的制備 陽03引 1、取宿巷豆根94g粉碎至粒度為40目；
[0039]2、宿巷豆根粉末用1L80%的乙醇水溶液冷浸提取3次，溫度20°C，每次24小時(shí)， 合并Ξ次提取液，回收提取溶劑得到總提物浸膏11. 2g;
[0040] 3、總提物浸膏用500ml水分散，用管式離屯、機(jī)2萬轉(zhuǎn)/分鐘離屯、，得離屯、液430ml， 離屯、液用1.化石油酸脫脂2次，后用1L乙酸乙醋萃取3次，合并乙酸乙醋層，回收萃取劑 得乙酸乙醋浸膏6.52g;
[0041] 4、所得乙酸乙醋浸膏用110ml水稀釋至質(zhì)量百分比濃度為6%。取400g聚陰離子 纖維素加壓裝柱，用體積百分比濃度為40%的甲醇水溶液平衡柱子，然后將上樣液緩慢滴 加上樣，上樣完畢靜置1.化后用體積百分比濃度為60~90%的甲醇水溶液洗脫，通過Ξ氯 甲燒：甲醇巧：1)硅膠G板薄層層析和紫外燈在365nm波長(zhǎng)鑒別收集黃酬部位并濃縮得提 取物6.Ug。
[00創(chuàng) W上所得提取物按紫外分光光度法測(cè)定，含總黃酬W無水蘆下也化。018)計(jì)為 65%。 陽0創(chuàng)實(shí)施例3 : W44] 1、取干宿巷豆根lOOg粉碎至粒度為60目； W45] 2、宿巷豆根粉末用0.化90%v/v的乙醇水溶液回流提取4次，溫度70°C，每次1 小時(shí)，合并4次提取液，回收提取溶劑得到總提物浸膏12. 3g;
[0046] 3、總提物浸膏用500ml水分散，用管式離屯、機(jī)2萬轉(zhuǎn)/分鐘離屯、，得離屯、液，離屯、 液用1.化石油酸脫脂3次，后用1L乙酸乙醋萃取4次，合并乙酸乙醋層，回收萃取劑得乙 酸乙醋浸膏7.77g;
[0047] 4、所得乙酸乙醋浸膏用400ml水稀釋至質(zhì)量百分比濃度為2%。取浸膏量30倍的 聚陰離子纖維素加壓裝柱，用體積百分比濃度為35%的甲醇水溶液平衡柱子，然后將上樣 液緩慢滴加上樣，上樣完畢靜置1.化后用體積百分比濃度為60%的甲醇水溶液洗脫，經(jīng)Ξ 氯甲燒：甲醇巧：1)硅膠G板薄層層析和紫外燈在365nm波長(zhǎng)鑒別收集黃酬部位并濃縮得 提取物。 W48] W上所得提取物按紫外分光光度法測(cè)定，含總黃酬W無水蘆下（C2化。〇18)計(jì)為 65%。 W例實(shí)施例4 : 陽化0] 1、取干宿巷豆根98g粉碎至粒度為50目；
[0051] 2、宿巷豆根粉末用0.化85%v/v的乙醇水溶液回流提取2次，溫度65°C，每次 1. 5小時(shí)，合并2次提取液，回收提取溶劑得到總提物浸膏12. 4g;
[0052] 3、總提物浸膏用500ml水分散，用管式離屯、機(jī)2萬轉(zhuǎn)/分鐘離屯、，得離屯、液，離屯、 液用1.化石油酸脫脂2次，后用1L乙酸乙醋萃取3次，合并乙酸乙醋層，回收萃取劑得乙 酸乙醋浸膏8. 16g;
[0053] 4、所得乙酸乙醋浸膏用140ml水稀釋至質(zhì)量百分比濃度為6%。取50倍量聚陰 離子纖維素加壓裝柱，用體積百分比濃度為50%的甲醇水溶液平衡柱子，然后將上樣液緩 慢滴加上樣，上樣完畢靜置比后用體積百分比濃度為90%的甲醇水溶液洗脫，通過Ξ氯甲 燒：甲醇巧：1)硅膠G板薄層層析和紫外燈在365nm波長(zhǎng)鑒別收集黃酬部位并濃縮得提取 物。
[0054] W上所得提取物按紫外分光光度法測(cè)定，