一種多功能探針及其制備方法、用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及納米材料的制備領(lǐng)域，具體涉及一種多功能探針及其制備方法、用途， 具體的涉及一種具有淋巴靶向的兼具磁共振成像和熱療功能的納米金棒診療探針的制備 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 在腫瘤的治療和診斷方面，能夠?qū)⒅委熀驮\斷結(jié)合起來實(shí)現(xiàn)診療一體化很有意 義。而隨著醫(yī)學(xué)工程和計(jì)算機(jī)技術(shù)的發(fā)展，分子影像學(xué)為腫瘤臨床診斷提供了更為快捷、直 觀的判斷依據(jù)。這其中，磁共振成像由于其具有軟組織分辨率高、成像參數(shù)多、圖像信息量 大和無電離損害等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)在臨床上廣泛應(yīng)用。熱療作為一種治療腫瘤的新療法，在腫瘤 的治療中取得的療效是毋庸置疑的，而且腫瘤熱療技術(shù)以其無創(chuàng)或微創(chuàng)、安全性較好的特 點(diǎn)而受關(guān)注。合理、有效地利用熱療，可以明顯提高對(duì)常規(guī)放、化療不敏感腫瘤控制率，改善 治愈率和生存率。同時(shí)，熱療在不增加或降低現(xiàn)有治療手段毒性反應(yīng)的基礎(chǔ)上，還可有效地 緩解癥狀，改善全身狀況，增加機(jī)體免疫功能。由此，熱療在腫瘤的綜合治療中具有極大的 發(fā)展空間。
[0003] 而在近幾年來，單一功能的造影劑和熱療材料已不能滿足醫(yī)療多樣化的需求， 因而同時(shí)具備造影和熱療兩種功能的診療探針備受關(guān)注。目前具備造影和熱療的診療 探針主要有Fe304@Cu2-xS的核殼結(jié)構(gòu)，F(xiàn)e304@Austar核殼結(jié)構(gòu)等。其中，由Li等 (JingchaoLi,YongHu,JiaYang,etal.Hyaluronicacid-modifiedFe304iAucore/ shellnanostarsformultimodalimagingandphotothermaltherapyoftumors[J]. Biomaterials，2015, 10-21)用種子生長法在Fe304表面生長出了星狀的金，整個(gè)納米顆粒 呈現(xiàn)出了星狀。其顆粒較小，在體內(nèi)的穩(wěn)定性能好，能實(shí)現(xiàn)磁共振成像和熱療兩種功能。但 是其制備過程較為繁瑣，且產(chǎn)量不高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，本發(fā)明的目的是提供一種多功能探針及其制備方法、用 途，具體是以臨床使用最廣泛的造影劑為基礎(chǔ)，提供一種具有淋巴靶向的磁共振成像和熱 療功能的納米金棒診療探針的制備方法。
[0005] 本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
[0006] 第一方面，本發(fā)明提供一種多功能探針的制備方法，包括：
[0007] 納米金棒濃縮液制備：將表面活性劑加入到水中，溶解；再加入氯金酸溶液，混 合；繼而加入硝酸銀溶液，混合；繼續(xù)加入還原劑，混合得溶膠混合物，洗滌即得；
[0008] 表面修飾氨基的納米金棒濃縮液制備：將所述納米金棒濃縮液分散于水中，然后 加入含巰基和氨基的配體，混合，洗滌，即得；
[0009] 透明質(zhì)酸鈉溶液制備：將交聯(lián)劑加入到水中，溶解；再加入透明質(zhì)酸鈉，混合即 得；
[0010] 修飾透明質(zhì)酸的納米金棒濃縮液制備：將所述表面修飾氨基的納米金棒濃縮液分 散于水中，然后加入所述透明質(zhì)酸鈉溶液，混合，洗滌，即得；
[0011] 多功能探針制備：將所述修飾透明質(zhì)酸的納米金棒濃縮液分散于水中，然后加入 含釓離子化合物，混合，洗滌，即得多功能探針溶液。
[0012] 優(yōu)選地，納米金棒濃縮液制備的步驟中，所用組分及重量分?jǐn)?shù)如下：
[0013] 表面活性劑 10~30份， 7 與 150-200, 氯金酸溶液 5~1:S份， 硝酸銀溶液 0.15~0.3份， 還原劑 0,1~0,2份；
[0014] 其中，所述氯金酸溶液的摩爾分?jǐn)?shù)為10μΜ;
[0015] 所述硝酸銀溶液的摩爾分?jǐn)?shù)為0· 25mM;
[0016] 所述表面活性劑為為十六烷基三甲基溴化銨、十二烷基三甲基溴化銨、雙十八烷 基二甲基溴化銨、十二烷基硫酸鈉、十二烷基磺酸鈉、四丁酚醛、十二烷基苯磺酸鈉、聚乙二 醇辛基苯基醚、聚氧乙烯、山梨醇酐單油酸酯、山梨醇酐單硬脂酸酯、椰油脂肪酸二乙醇酰 胺、脂肪醇聚氧乙烯醚、月桂醇聚氧乙烯醚中的至少一種；
[0017] 所述還原劑為硼氫化鈉、硼氫化鉀、乙硼烷、9-硼雙環(huán)（3,3, 1)-壬烷、兒茶酚硼 烷、氫化鋁鋰（四氫鋁鋰）、二氫雙（2-甲氧乙氧基）鋁酸鈉、抗壞血酸、檸檬酸、水合肼中的 至少一種。
[0018] 所述溶解的具體方式為50°C以上攪拌至少1小時(shí)；
[0019] 所述混合的具體方式為攪拌；
[0020] 所述溶膠混合物在洗滌前需在35°C以上保溫至少10個(gè)小時(shí)；
[0021] 所述洗滌的方式具體為向所述溶膠混合物中加入水后于8000轉(zhuǎn)/min以上離心。
[0022] 更優(yōu)選地，所述所述溶解的具體方式為在50~80°C攪拌1~2小時(shí)；加入氯金酸 溶液后混合攪拌的時(shí)間為10~30秒；所述溶膠混合物在洗滌前需在35~40°C保溫10~ 15個(gè)小時(shí)；所述洗滌的方式具體為向所述溶膠混合物中加入水后于8000~10000轉(zhuǎn)/min 離心。
[0023] 本步驟在實(shí)施過程中使用的水包括去離子水，最終得到的是去除表面活性劑的納 米金棒濃縮液。
[0024] 優(yōu)選地，表面修飾氨基的納米金棒濃縮液制備的步驟中，所用組分及重量分?jǐn)?shù)如 下：
[0025] 納米金棒濃縮液 5~10份，
[0026]水 10~20份，
[0027] 含巰基和氨基的配體 0· 01~0· 1份；
[0028] 所述含巰基和氨基的配體為巰基胺、氨基硫代乙酸、巰基乙胺、belta-巰基丙酰 胺、D1-α-氨基硫代丙酸、2-氨基-1- 丁硫醇、1-氨基-1- 丁硫醇、2-氨基-2-甲基-1-丙 硫醇、3-氨基-2-丁硫醇、dl-半胱氨酸、L-半胱氨酸、L(+)-3-氨基-4-巰基-1-丁醇中 的至少一種。
[0029] 所述混合具體包括攪拌3個(gè)小時(shí)以上；所述洗滌具體包括向所述混合后的產(chǎn)物中 加水后于8000轉(zhuǎn)/min以上離心；
[0030] 更優(yōu)選地，所述所述混合具體包括攪拌3~5個(gè)小時(shí)；所述洗滌具體包括向所述混 合后的產(chǎn)物中加水后于8000~10000轉(zhuǎn)/min離心。
[0031] 優(yōu)選地，透明質(zhì)酸鈉溶液制備的步驟中，所用組分的重量分?jǐn)?shù)包括：
[0032] 交聯(lián)劑 100~200份，
[0033]水 10 ~20 份，
[0034] 透明質(zhì)酸鈉 300~500份；
[0035] 所述交聯(lián)劑為四異氰酸酯、丙二胺、聚乙二醇、聚丙二醇、三羥甲基丙烷、聚丙二醇 縮水甘油醚、a_甲基苯乙烯、丙烯腈、丙烯酸、甲基丙烯酸、乙二醛、正硅酸乙酯、正硅酸甲 酯、三甲氧基硅烷、對(duì)甲苯磺酸、對(duì)甲苯磺酰氯、二丙烯酸-1，4-丁二醇酯、二甲基丙烯酸乙 二醇酯、丙烯酸丁酯、過氧化二異丙苯、過氧化雙2,4 一二氯苯甲酰、丙烯酸、丙烯酸羥乙 酯、丙烯酸羥丙酯、甲基丙烯酸、甲基丙烯酸羥乙酯、甲基丙烯酸羥丙酯、二乙烯基苯、N-羥 甲基丙烯酰胺、雙丙酮丙烯酰胺、1-(3-二甲氨基丙基）-3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽中的至少 一種；
[0036] 所述混合具體指攪拌至少3個(gè)小時(shí)，所述透明質(zhì)酸鈉為粉末狀，所得透明質(zhì)酸鈉 溶液具體為羧基活化的透明質(zhì)酸鈉溶液。
[0037] 更優(yōu)選地，所述混合具體指攪拌3~5個(gè)小時(shí)。
[0038] 優(yōu)選地，修飾透明質(zhì)酸的納米金棒濃縮液制備的步驟中，所用組分及重量分?jǐn)?shù)包 括：
[0039] 表面修飾氨基的納米金棒濃縮液 5~10份，
[0040]水 10 ~20 份，
[0041] 透明質(zhì)酸鈉溶液 0· 5~1份；
[0042] 所述混合的方式具體包括攪拌24小時(shí)以上；
[0043] 所述洗滌具體包括向所述混合后的產(chǎn)物中加水后于7000轉(zhuǎn)以上離心。
[0044] 更優(yōu)選地，所述混合的方式具體包括攪拌24~28小時(shí)；
[0045] 所述洗滌具體包括向所述混合后的產(chǎn)物中加水后于7000~9000轉(zhuǎn)離心。
[0046] 優(yōu)選地，多功能探針制備的步驟中，所用組分及重量分?jǐn)?shù)如下：
[0047] 修飾透明質(zhì)酸的納米金棒濃縮液 5~10份，
[0048]水 10 ~20 份，
[0049] 含釓離子化合物 0. 1~1份；
[0050] 所述含釓離子的化合物為釓弗塞胺、釓雙胺、釓噴酸葡胺、釓貝葡胺、釓塞酸二鈉 鹽、釓磷維塞三鈉、釓特醇（釓替醇）、釓布醇、釓特酸葡甲胺、Gd-DTPA-PGM、Gd-DTPA-McAb 中的至少一種；
[0051] 所述混合的方式具體包括攪拌24個(gè)小時(shí)以上；
[0052] 所述洗滌的方式具體包括向所述混合所得產(chǎn)物中加水后于7000轉(zhuǎn)/min以上離 心。
[0053]更優(yōu)選地，所述混合的方式具體包括攪拌24~28個(gè)小時(shí)；
[0054] 所述洗滌的方式具體包括向所述混合所得產(chǎn)物中加水后于7000~900