一種奧沙利鉑脂質(zhì)體凍干粉針劑的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，設(shè)及祀向藥物和脂質(zhì)體領(lǐng)域，尤其設(shè)及奧沙利銷脂質(zhì) 體制劑的制備。
【背景技術(shù)】
[0002] 奧沙利銷（oxaliplatin)是繼順銷和卡銷之后的第Ξ代銷類抗癌藥，也是迄今為 止唯一對(duì)結(jié)直腸癌具有顯著活性的絡(luò)銷類藥物。與前兩代銷類藥物相比，奧沙利銷在體內(nèi) 及體外的抗腫瘤作用效果好，且用藥相對(duì)安全。它對(duì)結(jié)直腸癌、非小細(xì)胞肺癌、卵巢癌等實(shí) 體瘤有明顯的抑制作用。然而奧沙利銷具有特異的屯、臟和神經(jīng)系統(tǒng)毒性，且注射入體內(nèi)后 在腫瘤組織蓄積較少，難W達(dá)到有效治療濃度。
[0003] 脂質(zhì)體（liposome)作為一具有類生物膜雙分子層結(jié)構(gòu)的藥物載體，具有低毒、細(xì) 胞親和性和祀向性等特點(diǎn)，在新型抗癌藥物的研究中具有廣闊的應(yīng)用前景。脂質(zhì)體是將脂 質(zhì)在水中再分散時(shí)形成脂質(zhì)雙分子層膜小泡，將藥物包封入類脂雙分子層形成的超微球 體。它通過外層類似細(xì)胞的雙層憐脂膜與人體細(xì)胞發(fā)生吸附、融合、脂交換和內(nèi)吞等相互作 用，將脂質(zhì)體內(nèi)包封的藥物導(dǎo)入細(xì)胞中發(fā)揮作用。脂質(zhì)體所載藥物廣泛，并能夠減少所需藥 量，增強(qiáng)藥物體內(nèi)穩(wěn)定性和藥理作用，降低毒副作用，使藥物具有被動(dòng)祀向性特征。
[0004] 奧沙利銷作為一種新型抗腫瘤藥物，已在臨床應(yīng)用中顯現(xiàn)出其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)。將 脂質(zhì)體技術(shù)應(yīng)用于奧沙利銷新制劑中，進(jìn)一步降低其不良反應(yīng)，增強(qiáng)藥物的祀向性，提 高生物利用度，減小給藥劑量，是近年來研究的熱點(diǎn)。上海醫(yī)藥工業(yè)研究院申報(bào)的專利 CN101897668A，一種奧沙利銷脂質(zhì)體及其制備方法和用途；陳祥峰、蔡課霞申報(bào)的專利 CN101103972A，一種奧沙利銷脂質(zhì)體葡萄糖制劑及其制備方法、應(yīng)用，國(guó)立大學(xué)法人德島大 學(xué)、大鵬藥品工業(yè)株式會(huì)社申報(bào)的專利CN101925356,包含奧沙利銷脂質(zhì)體制劑的抗腫瘤效 果增強(qiáng)劑和包含該脂質(zhì)體制劑的抗腫瘤劑等，均提出了奧沙利銷脂質(zhì)體的制備方法。 陽〇化]然而由于脂質(zhì)體劑型穩(wěn)定性較差，易發(fā)生聚集和滲漏，同時(shí)奧沙利銷也極易降解， 因此通常須將奧沙利銷脂質(zhì)體制成凍干粉針劑W延長(zhǎng)制劑的保存時(shí)間。然而奧沙利銷脂質(zhì) 體在僅采取常規(guī)保護(hù)措施的情況下進(jìn)行凍干將產(chǎn)生嚴(yán)重的滲漏，致使奧沙利銷的保留率降 低為20%甚至更低。在凍干過程中，預(yù)凍、冷凍干燥、復(fù)溶等步驟均不利于脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)和功 能的穩(wěn)定。冰晶的形成、滲透壓的改變、相分離及相轉(zhuǎn)變等因素均可導(dǎo)致脂質(zhì)體膜折疊、融 合、破裂及藥物滲漏，運(yùn)些現(xiàn)象在包載水溶性藥物的脂質(zhì)體身上尤為嚴(yán)重。多數(shù)有關(guān)奧沙利 銷脂質(zhì)體的文獻(xiàn)中制備得到的奧沙利銷脂質(zhì)體保留率約在30%~50%左右，難W滿足運(yùn) 輸、膽藏和臨床使用的要求。另一方面，包括上述專利在內(nèi)，此領(lǐng)域內(nèi)也尚未有專利解決奧 沙利銷脂質(zhì)體的凍干滲漏問題，運(yùn)極大限制了奧沙利銷脂質(zhì)體的臨床價(jià)值。本專利詳細(xì)考 察了奧沙利銷脂質(zhì)體的工藝，在凍干復(fù)溶的過程中采用了專屬的凍干保護(hù)劑和專屬的復(fù)溶 溶劑，顯著減少了奧沙利銷脂質(zhì)體的凍干滲漏，為奧沙利銷脂質(zhì)體的工業(yè)生產(chǎn)和臨床應(yīng)用 打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明旨在提供一種注射用奧沙利銷脂質(zhì)體凍干粉針劑。
[0007] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于制備得到的奧沙利銷脂質(zhì)體凍干粉針劑復(fù)溶后滲漏率較低，月旨 質(zhì)體對(duì)奧沙利銷的保留率達(dá)到65%W上，較佳的，保留率達(dá)到70%W上。本發(fā)明中包封率 的測(cè)定同時(shí)采用透析法及葡聚糖凝膠柱法（S巧hadexG-50)，結(jié)果相互印證，可信度高。
[0008] 本發(fā)明制備得到的奧沙利銷脂質(zhì)體凍干粉針劑復(fù)溶后的粒徑為150nm~200nm， Zeta電位為-35mV~-25mV，不易發(fā)生聚集或沉淀，體系具有良好的穩(wěn)定性。
[0009] 本發(fā)明提供了一種價(jià)格低廉、工藝簡(jiǎn)單的奧沙利銷脂質(zhì)體的制備方法：稱取處方 比例的卵憐脂、膽固醇、DSPE-mPEG2000,混合后加入有機(jī)溶劑溶解，向其中滴加奧沙利銷溶 液，采用探頭超聲或高速剪切機(jī)制備反相膠束，置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上去除有機(jī)溶劑后最終形成 脂質(zhì)體。透析去除游離奧沙利銷，經(jīng)0. 22μm微孔濾膜過濾除菌后得到。
[0010] 本發(fā)明提供了一種奧沙利銷脂質(zhì)體凍干、復(fù)溶的方法：取制備得到的奧沙利銷脂 質(zhì)體，稀釋后加入葡萄糖、薦糖、海藻糖、甘露醇、精氨酸中的一種或幾種作為凍干保護(hù)劑并 凍干，并采用含有葡萄糖、薦糖、海藻糖、甘露醇、精氨酸中的一種或幾種的水溶液復(fù)溶得 到。
[0011] 本發(fā)明詳細(xì)考察了奧沙利銷脂質(zhì)體的凍干、復(fù)溶全過程，提供了一套能夠保證產(chǎn) 品具有良好重復(fù)性的凍干、復(fù)溶參數(shù)。所述的冷凍干燥過程包括預(yù)凍和凍干兩個(gè)步驟。預(yù) 凍過程中將奧沙利銷脂質(zhì)體緩慢降溫至一定溫度后保持一段時(shí)間，再在一定真空度下完成 凍干。
[0012] 本發(fā)明提供的奧沙利銷脂質(zhì)體凍干粉針劑安全、有效、穩(wěn)定、質(zhì)量可控，具有很大 的開發(fā)前景，有望成為一個(gè)新的制劑。
【具體實(shí)施方式】 陽〇1引 實(shí)施例1 :
[0014] 奧沙利銷 30mg
[0015] 大豆卵憐脂 120mg
[0016] 膽固醇 30mg 陽017] 配制6mg/血奧沙利銷9%薦糖水溶液5血。稱取卵憐脂、膽固醇，混合后加入8血Ξ氯甲燒和6mL乙酸的混合溶液溶解，向其中滴加奧沙利銷溶液，使用超聲細(xì)胞破碎儀在 350W功率條件下分散3min后，置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，在30°C，0. 5~0. 6MPa真空度條件下旋轉(zhuǎn) 蒸發(fā)化后最終形成脂質(zhì)體，采用截留分子量為3500化的透析袋透析1化去除游離奧沙利 銷，經(jīng)0. 22μm微孔濾膜過濾除菌。加入甘露醇和薦糖適量，溶解并混勻，使成甘露醇和薦 糖含量均為2 %的脂質(zhì)體溶液，分裝至西林瓶中，每瓶?jī)龈?地，并采用含有0. 2g/M^薦 糖和0.Ig/mL海藻糖的混合溶液復(fù)溶得到奧沙利銷脂質(zhì)體溶液。 陽01引制備得到的奧沙利銷脂質(zhì)體粒徑為196. 0 + 1. 7皿，Zeta電位為-28. 82 + 0. 80mV;奧沙利銷的濃度為0. 387111邑/1^，保留率為70%。
[0019] 實(shí)施例2:
[0020] 奧沙利鉆 40 mg 大