淫羊藿苷、補(bǔ)骨脂素、 異補(bǔ)骨脂素、五味子醇甲、寶藿苷I、蛇床子素為目標(biāo)物進(jìn)行峰面積的比較。特征圖譜方法及 色譜條件：色譜柱：Phenomenex Gemini C18 5ym，4.6X250mm;254nm，流動(dòng)相:A乙臆;B水， 梯度洗脫：
[0034]比較的結(jié)果見附圖1-附圖3。
[0035] 根據(jù)對不同功率時(shí)間段的考察，確定的超聲條件為40kHz，35 ± 5°C，60min。取實(shí)施 例1相同原料及重量配比，粉碎成最粗粉，用以上確定的條件進(jìn)行超聲提取，加含醇量55% 的蒸餾酒2.5倍進(jìn)行超聲提取，提取后濾取同等重量的體積藥液，經(jīng)離心(5000r/min)，以提 取用酒、蒸餾水、適量蜂蜜調(diào)整至含乙醇量40%，靜置，過濾，即得。
[0036]采用HPLC特征圖譜(流動(dòng)相:A乙腈;B水，梯度洗脫)對比分析該實(shí)施例樣品與《中 國藥典》2015年版第1050頁同處方樣品，經(jīng)乙醇稀釋后分析。
[0038]結(jié)果見附圖4本發(fā)明樣品HPLC特征圖譜、圖5對比樣品HPLC特征圖譜?？芍摌悠?間相似度很高，但制備方法簡單、高效。
[0039] 以應(yīng)激性大鼠性功能下降腎陽虛模型證明酒劑的作用，檢測指標(biāo)包括對大鼠性行 為、性激素、性器官的影響。大鼠性行為的影響主要包括:騎跨潛伏期、射精潛伏期、射精間 隔期、騎跨總次數(shù)等。性激素的影響主要包括:睪酮含量、卵泡生成激素 (FSH)、黃體生成激 素 (LH)的檢測。性器官的影響主要包括:睪丸比重、前列腺比重、精囊比重、附睪比重。
[0040] 試驗(yàn)方法：
[0041] 去勢雌性大鼠的制備:取雌性大鼠200只，經(jīng)4%水合氯醛腹腔麻醉（lml/lOOg)后， 作腹部正中切口，在無菌條件下進(jìn)入腹腔，完整摘除雙側(cè)卵巢。術(shù)后連續(xù)肌肉注射青霉素抗 感染3日，5萬U/只，每日1次。術(shù)后所有動(dòng)物在同一條件(室溫19°C~24°C，相對濕度40%左 右)用普通飼料飼養(yǎng)，自由飲水。
[0042]發(fā)情雌鼠的制備:雌鼠去勢2周后用于交配實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)前48小時(shí)皮下注射20yg苯甲 酸雌二醇，實(shí)驗(yàn)前4小時(shí)皮下注射500yg黃體酮催情，以備交配實(shí)驗(yàn)使用。
[0043] 雄性大鼠性能力的篩選:將雄性大鼠單獨(dú)置于鼠透明塑料籠具內(nèi)，保持安靜，使用 安全監(jiān)控錄像系統(tǒng)進(jìn)行錄像，將光線調(diào)暗至能夠觀察和錄像即可。10分鐘后將1只發(fā)情雌性 大鼠輕放入雄鼠籠內(nèi)，隨即攝下90分鐘內(nèi)大鼠的交配活動(dòng)。將無交配記錄的雄性大鼠剔除。
[0044] 腎虛雄性大鼠的制備:將具有性能力的168只雄性大鼠隨機(jī)均分為12組，分別為模 型組、白酒組、高低劑量SJl組、高低劑量SJ2組、高低劑量SJ3組、高低劑量SJ4組、高低劑量 SJ5組。各組大鼠均采用慢性不可預(yù)知刺激，使大鼠長期處于應(yīng)激狀態(tài)，制備應(yīng)激所致大鼠 腎虛模型。造模組按以下方法進(jìn)行造模:①冰水游泳:將大鼠放入冷水桶中，15min/次。②禁 水:從早上8:00開始斷水到次日8:00，共24小時(shí)。③禁食:從早上8:00開始斷食到次日8:00， 共24小時(shí)。④熱應(yīng)激:取暖器調(diào)到約40攝氏度恒定，將大鼠放入取暖器中，15分鐘后取出。⑤ 明暗顛倒:從早上8:00開始將大鼠放入自制的暗箱中，晚上8:00取出，后將大鼠放置在單獨(dú) 的實(shí)驗(yàn)室中，并通宵照明，至第二天早上8:00結(jié)束。⑥夾尾:用大鼠夾尾夾夾在距尾根約Icm 處，每次持續(xù)1分鐘，一共3次。⑦潮濕墊料:使大鼠置于潮濕環(huán)境中持續(xù)24小時(shí)(潮濕墊料按 每100g墊料加水200ml)。⑧電擊每次5分鐘，一共3次。⑨束縛每次20分鐘。每日隨機(jī)安排給 予1種刺激交替刺激大鼠21天，同1種刺激出現(xiàn)不超過3次，并且不連續(xù)出現(xiàn)，使其不能預(yù)知 給予的刺激。
[0045] 性行為學(xué)觀察:給藥第4周后，同方法3觀察大鼠交配情況，攝下40分鐘內(nèi)大鼠的交 配行為?；胤配浵裼涗浺韵聟?shù):①騎跨潛伏期:雌雄鼠同籠至雄鼠第1次騎跨所需的時(shí)間； ②騎跨總次數(shù):雌雄鼠同籠后雄鼠出現(xiàn)騎跨行為的總次數(shù);③騎跨活動(dòng)鼠數(shù):有騎跨行為的 雄性鼠數(shù);④射精活動(dòng)鼠數(shù):有射精行為的雄性鼠數(shù);⑤射精潛伏期;⑥射精間隔期。（注意： 雄鼠的每一次騎跨并不一定伴有插入）以上參數(shù)用以評價(jià)大鼠性欲，性喚醒的啟動(dòng)速度，勃 起功能的高低。
[0046] 性器官檢測：性行為觀察結(jié)束次日，將大鼠稱取體重，用3%的異戊巴比妥麻醉大 鼠，行腹主動(dòng)脈取血，并立即離心取血清在于_80°C冰箱備用；再取出睪丸，附睪，前列腺以 及精囊，稱量并記錄，計(jì)算性器官的相應(yīng)指數(shù)。
[0047] 性激素的檢測：取Iml血清，于全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)進(jìn)行睪酮、促卵泡 刺激素、黃體生成素的檢測。
[0048] 給藥方法:雄性大鼠應(yīng)激21天后開始給藥，受試藥物組大鼠每日灌胃給藥1次，分 別灌胃高劑量白酒，高低劑量(分別相當(dāng)于人日用量折合原料量62g和30g)試驗(yàn)樣品，空白 組和模型組大鼠每日灌胃給予等容積蒸餾水，灌胃量為6ml/kg，連續(xù)給藥4周。
[0049]結(jié)果表明，本發(fā)明酒劑對實(shí)驗(yàn)性性功能的恢復(fù)具有顯著的促進(jìn)作用。低劑量下，具 有強(qiáng)壯作用。結(jié)合原料處方及應(yīng)用分析，本發(fā)明用于腎陽虧虛、精氣不足所致的陽痿遺精、 腰腿酸痛、精神不振、夜尿頻多、畏寒怕冷、月經(jīng)過多，白帶清稀等，且具有飲酒習(xí)慣的人群。 低劑量條件下可以提高耐受力、緩解體力疲勞，且具有飲酒習(xí)慣人群。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種中藥酒劑，其特征在于，所述酒劑用以下重量配比的中藥原料藥制備而成:淫羊 藿3-9份、胡蘆巴3-9份、金櫻子3-9份、熟地黃3-9份、補(bǔ)骨脂1-4份、蛇床子1-4份、制何首烏 2-8份、肉灰蓉1-6份、枸杞子2-7份、英絲子2-7份、五味子1-6份、覆盆子1-6份、黃苗2-8份、 紅參0.5-3份、白術(shù)0.5-3份、山藥1-6份、茯苓0.5-5份、當(dāng)歸1-6份、川；0.5-4份、小茴香 0.5-3份、車前子0.5-3份、炙甘草0.5-3份。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的酒劑，其特征在于:所述酒劑用以下重量配比的中藥原料藥制 備而成:淫羊藿6.7份、胡蘆巴6.6份、金櫻子6.7份、熟地黃6.6份、補(bǔ)骨脂2.0份、蛇床子2.0 份、制何首烏5.2份、肉灰蓉3.3份、枸杞子4.6份、寬絲子4.6份、五味子2.5份、覆盆子2.3份、 黃芪3.6份、紅參1.4份、白術(shù)1.0份、山藥3.3份、茯苓2.1份、當(dāng)歸3.3份、川考2.0份、小茴香 1.0份、車前子1.2份、炙甘草1.0份。3. 權(quán)利要求1所述的酒劑的制備方法，其特征在于，步驟如下:原料用提取溶劑提取，而 后經(jīng)過常規(guī)過濾、回收溶劑、沉淀、濃縮得到濃縮提取液，再以乙醇調(diào)整至含乙醇量5%-75%的成品。4. 權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟如下：原料經(jīng)含有10%-95%(v/v)乙 醇的提取溶劑進(jìn)行溶劑法提取，提取液經(jīng)過濾、靜置、再過濾，得到藥物活性成分，添加輔 料，經(jīng)調(diào)配使酒精含量為5 % -75 % (v/v)。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于：所述提取溶劑包括谷物來源的蒸餾 酒。6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述提取方式選自：浸泡、滲漉、回流、 超聲方式。7. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述提取方法可以采用一定頻率的超 聲波作為強(qiáng)化措施進(jìn)行輔助提取，較優(yōu)的如采用40kHz浸泡提取。8. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述提取方法，步驟如下:將所有原料 破碎或切絲，以55 % -65 %白酒浸泡，55 %-65 %白酒、蒸餾水調(diào)整量至含乙醇量20 %-50 % 的成品1 〇〇〇ml，靜置，過濾，灌裝即得。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酒劑，其特征在于:所述的藥品酒的功能主治包括溫補(bǔ)腎陽、 固精益氣、扶正固本，用于腎陽虧虛、精氣不足所致的陽痿遺精、腰腿酸痛、精神不振、夜尿 頻多、畏寒怕冷、月經(jīng)過多，白帶清稀等;每日用量折合原料為30_65g。10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的酒劑，其特征在于:所述的保健酒的功能為提高耐受力、緩解 體力疲勞;每日用量折合原料為5-30g。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種中藥酒劑，該酒劑用以下中藥作為原料藥制備而成：淫羊藿、胡蘆巴、金櫻子、熟地黃、補(bǔ)骨脂、蛇床子、制何首烏、肉蓯蓉、枸杞子、菟絲子、五味子、覆盆子、黃芪、紅參、白術(shù)、山藥、茯苓、當(dāng)歸、川芎、小茴香、車前子、炙甘草，采用一定含量乙醇溶劑進(jìn)行溶劑法提取制備成符合酒劑規(guī)范的產(chǎn)品，可以是藥酒和保健酒，具有促進(jìn)性能功能恢復(fù)和強(qiáng)壯作用。
【IPC分類】A61P15/10, A61P13/00, C12G3/04, A61P1/14, A61P29/00, A61K36/8945, A61P15/00
【公開號】CN105434777
【申請?zhí)枴緾N201510945255
【發(fā)明人】耿炤, 周美娟, 周青罡
【申請人】江西匯仁藥業(yè)有限公司, 上海中創(chuàng)醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2016年3月30日
【申請日】2015年12月17日