復(fù)配型生物交聯(lián)劑交聯(lián)殼聚糖的緩控釋微球及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，設(shè)及一種緩控釋微球及其制備方法，具體設(shè)及一種復(fù)配型 生物交聯(lián)劑交聯(lián)殼聚糖的緩控釋微球及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前，在殼聚糖利用乳化交聯(lián)法制備緩控釋微球的領(lǐng)域中，大部分交聯(lián)劑采用的 是化學(xué)合成的交聯(lián)劑，如甲醒、戊二醒、乙二醒等醒類化合物，其特征反應(yīng)為碳氧雙鍵的親 核加成反應(yīng)，交聯(lián)鍵是亞胺鍵，由于交聯(lián)劑都是直鏈結(jié)構(gòu)，因此交聯(lián)比較容易，成球效果較 好。運(yùn)些化學(xué)合成的醒類交聯(lián)劑被歸為有毒試劑，使制得的殼聚糖微球在體內(nèi)釋放過(guò)程中 存在一定的安全問(wèn)題，使其市場(chǎng)應(yīng)用受到極大的限制。
[0003] 京尼平為一種天然交聯(lián)劑，具有徑基、醋基W及縮醒等多個(gè)活性官能團(tuán)，其中主要 是京尼平的醋基和締碳原子分別與殼聚糖分子中氨基發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)，交聯(lián)鍵主要是酷胺 鍵，因此形成的微球網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)非常緊密，硬度較大，在體內(nèi)對(duì)藥物的釋放主要通過(guò)微球溶脹 后的孔道，因此，不容易被降解而使釋放過(guò)于緩慢，如文獻(xiàn)Zhang Y,化Y, Shi X，et al. Study on the preparation of genipincrossI inked chitosan microspheres of resveratrol and in vitro release[J]. Journal of Polymer Research, 2013, 20 (7): 1-10.中所述的京尼平單一交聯(lián)的殼聚糖緩控釋微球在pH7.4時(shí)釋放藥量約為10%左 右，在抑3.6時(shí)釋放藥量約為30%左右，W此可得知單一京尼平交聯(lián)殼聚糖微球的溶脹性較 差，微球釋放藥物緩慢且釋放量低。另一種生物交聯(lián)劑香草醒也被用于制備殼聚糖的緩控 釋微球中。香草醒的活性基團(tuán)幾基與殼聚糖分子中氨基發(fā)生ScMff反應(yīng)形成亞胺，同時(shí)香 草醒中的徑基與殼聚糖之間形成氨鍵，由于在此交聯(lián)過(guò)程中形成的氨鍵的強(qiáng)度低，對(duì)環(huán)境 條件非常敏感，容易被破壞，使得微球進(jìn)入人體后極短的時(shí)間內(nèi)迅速溶脹降解，將藥物釋 放，往往達(dá)不到預(yù)期的緩釋時(shí)間。比如單一香草醒交聯(lián)殼聚糖的緩控釋微球加入到在水溶 液中，10分鐘后已經(jīng)完全崩解成不均勻的液態(tài)物，因此香草醒交聯(lián)殼聚糖微球的緩釋性能 差，不適合制備包覆藥物的微球。由上述可知，京尼平和香草醒均為在植物中分離純化得到 的天然生物提取物，較化學(xué)交聯(lián)劑的毒性均低，但是單獨(dú)使用京尼平或單獨(dú)使用香草醒制 備出的緩控釋微球的緩控釋效果較差，要么釋放太慢，要么釋放太快，因此研究一種能夠控 制緩控釋釋放時(shí)間的微球具有重要的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題，是提供一種復(fù)配型生物交聯(lián)劑交聯(lián)殼聚糖的緩控釋微 球及其制備方法，使用京尼平和香草醒復(fù)配作為交聯(lián)劑與殼聚糖共同交聯(lián)得到緩控釋微 球，其緩控釋性能介于京尼平或香草醒單一交聯(lián)殼聚糖微球的緩控釋性能之間，使用復(fù)配 交聯(lián)劑制備的微球進(jìn)入人體后經(jīng)酶代謝釋放出的殼聚糖具有生物相容性和生物可降解性， 交聯(lián)劑京尼平無(wú)任何細(xì)胞毒性，香草醒作為國(guó)家規(guī)定允許的食用香料，具有無(wú)毒無(wú)害等特 點(diǎn)。復(fù)配交聯(lián)劑制備的微球與傳統(tǒng)的單一交聯(lián)劑所制備的微球相比，克服了京尼平交聯(lián)微 球強(qiáng)度過(guò)高而釋放緩慢W及香草醒交聯(lián)微球極低的溶脹耐受性等缺點(diǎn)，使得微球的釋放時(shí) 間更適合在人體對(duì)藥物的釋放要求，同時(shí)調(diào)整復(fù)配交聯(lián)劑的比例，提高了微球釋放的可控 性，有利于殼聚糖緩控釋劑型在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用。
[0005 ]為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是： 一種復(fù)配型生物交聯(lián)劑交聯(lián)殼聚糖的緩控釋微球，所述微球?yàn)榍蛐危⑶虮砻鏋槎嗫?型結(jié)構(gòu)，制成其有效成分的原料包括： 殼聚糖 3~20重量份，京尼平 0.1~1重量份， 香草醒 0.01~25重量份，乳化劑20~30體積份， 分散介質(zhì)1000~3000體積份； 上述重量份數(shù)與體積份數(shù)的比例關(guān)系為克:毫升； 所述的分散介質(zhì)為紫蘇巧油，或?yàn)樽咸K巧油與其它分散介質(zhì)組成的復(fù)配型分散介質(zhì)； 所述的其它分散介質(zhì)為大豆油、橄攬油、月見(jiàn)草油或棲子油中的一種，或至少兩種的混合 物。
[0006] 作為本發(fā)明的一種限定，所述的乳化劑為Span-80、Span-85、Twen-80、Twen-85、 Poloxamer、0P-10中的一種，或至少兩種的混合物。
[0007] 作為本發(fā)明的另一種限定，所述的復(fù)配型分散介質(zhì)為體積比為1:1~25的紫蘇巧 油和其它分散介質(zhì)。
[0008] 本發(fā)明還提供了上述的復(fù)配型生物交聯(lián)劑交聯(lián)殼聚糖緩控釋微球的一種制備方 法，按照W下步驟順序進(jìn)行： (1) 殼聚糖溶液的配制 將質(zhì)量濃度為1~20%的乙酸溶液60~1 OOOml和殼聚糖混合攬拌均勻，靜置待氣泡消 去，得重量體積比濃度為2~5%的殼聚糖溶液A; (2) 京尼平溶液的配制 將京尼平加入到蒸饋水中，25~60 °C下攬拌0.5~3 h，降至室溫，得重量體積比濃度 為0.5~2%的京尼平溶液B; (3) 香草醒溶液的配制 將香草醒加入到丙酬中，室溫下攬拌，得重量體積比濃度為1~5%的香草醒溶液C; (4) 乳化制備緩控釋微球 將殼聚糖溶液A加入到事先配好的含乳化劑的分散介質(zhì)中，攬拌，調(diào)節(jié)混合物的溫度， 得混合均勻的混合液D; 另取上述京尼平溶液B和香草醒溶液C加入混合液D中，攬拌，進(jìn)行固化，控制固化過(guò)程 中的溫度和固化時(shí)間，離屯、分離，乙酸乙醋清洗，抽濾，干燥，即得復(fù)配型生物交聯(lián)劑交聯(lián)殼 聚糖的緩控釋微球。
[0009] 作為本發(fā)明的一種限定，所述的步驟(4)中調(diào)節(jié)混合物的溫度為15~60 °C;固化 溫度為25~50 °C;固化時(shí)間為2~lOh。
[0010] 作為本發(fā)明的另一種限定，所述的步驟(4)中的乳化劑與分散介質(zhì)的體積份數(shù)比 為1:50~100。
[0011] 本發(fā)明還有一種限定，所述的步驟(4)中的京尼平溶液B和香草醒溶液C的體積比 為1:0.05~10。
[0012] 由于采用了上述的技術(shù)方案，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，所取得的技術(shù)進(jìn)步在于： 本發(fā)明所提供的微球由香草醒和京尼平復(fù)配交聯(lián)殼聚糖制得，其溶脹性要高于京尼平 單一交聯(lián)殼聚糖微球的溶脹性，并且沒(méi)有出現(xiàn)崩解成不均勻液態(tài)的現(xiàn)象，實(shí)現(xiàn)了制備微球 的緩控釋性能介于京尼平或香草醒單一交聯(lián)殼聚糖微球的緩控釋性能之間；并且微球表面 為多孔型結(jié)構(gòu)，微球品質(zhì)均一，粒徑在1~80微米之間，溶脹率為210~320%。在生物交聯(lián)劑 的選擇過(guò)程中發(fā)現(xiàn)并非所有的生物交聯(lián)劑都能夠制備出粒徑和溶脹率均合適的微球。
[0013] 本發(fā)明反應(yīng)過(guò)程中的操作條件比較容易控制，香草醒和京尼平復(fù)配與殼聚糖分子 之間發(fā)生的交聯(lián)是多基團(tuán)、多種交聯(lián)機(jī)理交聯(lián)，為了保證交聯(lián)的順利進(jìn)行，實(shí)現(xiàn)微球在體內(nèi) 釋放藥物的緩控釋目的，整個(gè)制備過(guò)程需要調(diào)整京尼平和香草醒復(fù)配交聯(lián)劑的比例，并同 時(shí)調(diào)節(jié)復(fù)配交聯(lián)劑與殼聚糖的重量比，控制攬拌的強(qiáng)度和反應(yīng)溫度，調(diào)節(jié)京尼平和香草醒 復(fù)配交聯(lián)劑加入乳化分散介質(zhì)的速度，同時(shí)調(diào)整京尼平和香草醒之間的比例W及加入到乳 化分散介質(zhì)中的先后順序，使殼聚糖緩控釋微球的粒徑和表面狀態(tài)可控，實(shí)現(xiàn)殼聚糖緩控 釋微球溶脹的可控性，從而控制藥物在體內(nèi)達(dá)到更合適的緩慢釋放。
[0014] 本發(fā)明反應(yīng)過(guò)程中使用了復(fù)配型分散介質(zhì)，從而使制備的緩控釋微球分散的更加 均勻，紫蘇巧油中高含量的多元不飽和脂肪酸亞麻酸調(diào)整了原有體系中不飽和脂肪酸的比 例，從而使殼聚糖溶液均勻地分散到分散介質(zhì)中，運(yùn)也是使微球粒徑小且分散均勻的原因 之一。
[0015] 本發(fā)明適用于復(fù)配型生物交聯(lián)劑交聯(lián)殼聚糖的緩控釋微球的制備。
[0016] 本發(fā)明下面將結(jié)合具體實(shí)施例作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。
【具體實(shí)施方式】
[0017] 實(shí)施例1 一種復(fù)配型生物交聯(lián)劑交聯(lián)殼聚糖的緩控釋微球及其制備方法 一種復(fù)配型生物交聯(lián)劑交聯(lián)殼聚糖的緩控釋微球，所述微球?yàn)榍蛐?，微球表面為多?型結(jié)構(gòu)，制成其有效成分的原料包括： 殼聚糖IOg，京尼平0.5g，香草醒6g,Twen-SO 20ml，紫蘇巧油2000ml; 制備上述的復(fù)配型生物交聯(lián)劑交聯(lián)殼聚糖緩控釋微球的方法，按照W下步驟順序進(jìn) 行： (1) 殼聚糖溶液的配制 將質(zhì)量濃度為5%的乙酸溶液200m巧日1 Og的殼聚糖混合攬拌均勻，靜置待氣泡消去，審U 得重量體積比的濃度為5%的殼聚糖溶液A; (2) 京尼平溶液的配制 將〇.5g京尼平加入到25ml蒸饋水中，40°C下攬拌2 h，攬拌均勻后，降至室溫，即得重量 體積比的濃度為2%( g/ml)的京尼平溶液B; (3) 香