五環(huán)三萜烯和羥基酪醇及其衍生物的組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種包括五環(huán)Ξ祗締和徑基酪醇或其衍生物的產(chǎn)品，其應(yīng)用、藥物組 合物和試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002] 徑基酪醇是一種植物次級(jí)代謝產(chǎn)物，其幾乎只發(fā)現(xiàn)于橄攬葉和果實(shí)中（Olea europaea L.)。特別是大量存在于橄攬工廠的廢水中（.FerMiidez-BolafiOS,〇live Oil-Constituents,quality,health properties and bioconversions.Ed.Boskow Dimitrios, ISBN:978-953-307-921-9.Chapter 20)。徑基酪醇被報(bào)告存在于葡萄中（Vitis vinifera L.)，盡管只占車交小t：t例（Fernandez ,MI. , et al. , "Bioactive compounds in wine:Resveratrol,hydroxytyrosol and melatonin:A review''，F(xiàn)ood Chemistry,130 (2012)，pp.797-813)。
[0003] 徑基酪醇是一種苯乙醇，2-(3,4-二徑基苯基）乙醇。它是橄攬苦巧的代謝產(chǎn)物(? 基酪醇、攬香醇酸（elenolic acid)和葡萄糖的醋），可W通過水解得到（0mar，SH.， "C曰rdioprotective 曰nd neuroprotective roles of oleuropein in olive"，S曰udi Pharmaceutical Journal,18(2010),pp.111-121)。
[0004] 徑基酪醇的衍生物包括酪醇、橄攬苦巧、毛蕊花巧W及源自簡單酪酸(例如五倍子 酸W及其他)的相關(guān)化合物。毛蕊花巧的相關(guān)化合物中值得注意的例子是屬于苯丙素巧類 的那些，其在結(jié)構(gòu)上的特征在于存在與e-(D)-化喃葡萄糖巧結(jié)合的咖啡酸部分和2-(3,4-二美圣基苯基）乙醇（徑基酪醇）部分（Ve;r1:uani,S., "Activity and Stability Studies of Verbascoside,A Novel Antoxidant,in Dermo-Cosmetic and Pharmaceutical Topical 化rmulations"，Molecules，16(2011)，pp. 7068-7080)。由于其化學(xué)結(jié)構(gòu)，毛蕊花巧(也稱為 麥角醬巧)極易溶于親水性溶液，例如甲醇或水醇混合物。毛蕊花巧的相關(guān)化合物包括海膽 巧、地黃巧、天人草巧W及其他相關(guān)的苯丙素類。
[000引毛蕊花巧是植物中的次級(jí)代謝產(chǎn)物，毛蕊花巧的相關(guān)化合物在自然界中廣泛分 布。主要來源包括黑夏至草(Ballot nigra L.)、淡紫錐花化chinacea pallida(NUTT.))、 南非鉤麻化arpagoph}ftum p;rocumbens(BURCH))、苦瓜（Momordica charantia L.)、橄攬 (Olea europaea subsp.Europaea)、玄參（Scrophularia scorodonia L.)、貝加爾湖黃琴 (Scutellaria baicalensis(GEORGI))、芝麻（Sesamum indicum L.)和普通毛蕊花 (Verbascum thapsus L.)[Source Dr.Duke's Phytochemical and Etnobotanical 化化base]。因此，毛蕊花巧的相關(guān)化合物可化學(xué)合成或從相應(yīng)的植物提取物中得到。
[0006]五環(huán)Ξ祗締是廣泛存在于植物中的次級(jí)植物代謝產(chǎn)物，主要分布在果皮、葉片和 莖皮。它們是Ξ祗類化合物的化學(xué)家族的一部分，具有30個(gè)碳原子的多環(huán)結(jié)構(gòu)。Ξ祗類化合 物根據(jù)它們的骨架結(jié)構(gòu)主要細(xì)分為Ξ個(gè)族類:羽扇燒、齊墳果燒、烏蘇燒(如下表1所示）。由 于它們的結(jié)構(gòu)，五環(huán)Ξ祗類化合物在親水性溶劑例如水中呈現(xiàn)非常低的溶解度。另一方面， 它們在有機(jī)溶劑例如丙酬或甲醇中的溶解性已被證明是中到高化iu，L.，et al.， ('Solubility of Oleanolic Acid in Various Solvents from(288.3to 328.3)K，'， Journal of Chemical and Engineering Data，52(2007)，pp.2527-2528)d
[0007] 五環(huán)蘭聰締廣泛分布于自然中，齊it果酸存在于橄攬葉（Olea europaea L.)、金 盞花（Calendula officinalis L.)、迷迭香葉（民osmarinus officinalis L.)、下香花 (Syzygium aromaticum L.)中，山檀酸存在于熊果葉（Arctostaph^dos uva-ursi L.)和橄 攬果(Olea europaea L.)中，枠木醋醇存在于枠樹皮(Betula alba L.)中，枠木酸存在于 梭樹葉（Eucalyptus )、懸鈴樹皮（Plat anus acerifolia)、迷迭香葉（Rosmarinus officinalis L. ) ψ ( Jager, S.et al.，"Pentacyclic Triterpene Distribution in Various Plants-民ich sources for a New Group of Multi-Potent Plant Extracts，'， Molecules ,14(2009),pp.2016-2031 land clove leaves(Syzygium aromaticum L.) [Aisha，AFA.，et al.，"Syzigium aromaticum extracts as good source of betulinic acid and potential anti breast c過ncer>'，Brazilian Journal of Ph過rm過cognosy，22 (2012)，pp.335-343)。
[0008] 鞋基酷醇和相關(guān)多m作為有效的抗氧化劑和細(xì)胞保護(hù)劑是已知的。不同的科學(xué)論 文和專利公開了它們的神經(jīng)保護(hù)性質(zhì)，其主要目標(biāo)被認(rèn)為是與線粒體靴向相關(guān)，細(xì)胞成分 之一主要涉及神經(jīng)元變性疾?。⊿chaffer S/'Hydro;xytyrosol-rich olive wastewater extract protects brain cells in vitro and ex vivo，'J.Agricul.Food Chem.，55 (2007)，pp.5043-5049)。在其他研究中，鞋基酷醇和相關(guān)m類顯示出保護(hù)神經(jīng)元抵御缺氧-復(fù)氧（Gonzalez-Correa JA. ('Neuroprotect ive effect of hydroxy tyrosol and hydroxytyrosol 過cet過te in r過t br過in slices subjected to hypoxi過一 reoxygenation，'Neurosci Lett · ,446(2008)，ρρ· 143-6.)，在阿爾茨海默氏病中作為化11 蛋 白聚集抑制齊。（0過〇〇過〇]16 A. ('Oleuropein and derivatives from olives as Tau aggregation inhibitors，'Neurochem Int. ,58(2011)，pp. 700-7)，或減少在亨廷頓氏病的 動(dòng)物模型中的氧化性損傷（Tasset I ."Olive oil reduces oxidative damage in a3-nitropropionic acid-induced Huntington's disease-1 ike rat model，'Nutr Neurosci .，14(2011)，pp. 106-11)。它們用于神經(jīng)保護(hù)的應(yīng)用也在不同的專利申請中被廣 泛地描述（US 2003/0236202Al，W0 2006/114467 A1W及US 2010/130621 A1)。這些衍生物 還表現(xiàn)出能夠介導(dǎo)間接神經(jīng)保護(hù)的抗炎作用（Zhang X. "Hydro巧tyrosol inhibits pro-inflammatory cytokines，iNOS，and C0X-2expression in human monocytic cells，' Naunyn Schmiedebe:rgs Arch Pharmacol.，379(2009)，pp.581-6)d
[0009] 鞋基酷醇主要從植物中提取，其作為抗氧化劑、細(xì)胞保護(hù)劑和抗炎劑，也展示出了 神?圣?呆護(hù)申莫式（Wang HQ. "Upregulation of heme oxygenase-lby acteoside through ERK and PI3K/Akt pathway confer neuroprotection against beta-amyloid-induced neurotoxicity^^Neurotox 民es .，21 (2012)，pp . 368-78 ;Koo KA. ('Acteoside and its aglycones protect primary cultures of rat cortical cells from glutamate-induced excitotoxicity，'Life Sci . , 79(2006) ,pp . 709-16 ；Esposito E. ('Protective effect of verbascoside in activated C6glioma cells: possible molecular mechanisms，'Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. , 381 (2010) ,pp. 93-105) 〇
[0010] 源自植物提取物的蘭聰類酸，例如齊it果酸或山檀酸，因其神經(jīng)保護(hù)和抗神經(jīng)發(fā) 炎的性質(zhì)也被廣泛所知（Mart化 E. "Beneficial actions of oleanolic acid in an experimental model of multiple sclerosis: A potential therapeutic role''， Biochem Pharmacol ,79(2010) ,pp. 198-208)，主要針對神經(jīng)元調(diào)亡途徑，抑制神經(jīng)元炎癥 信號(hào)，如小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞合成一氧化氮（Qian Y."Maslinic acid,a natural triterpenoid compound from Olea europaea,protects cortical neurons against oxygen-glucose depriv曰tion-induced injury''Eur J Ph曰rm曰col.,670(2011),pp.148-53.；Cho SO."Aralia cordata protects against amyloid beta protein(25-35)-induced neurotoxicity in cultured neurons and has antidementia activities in mice"J Pharmacol Sci. ,111(2009)，卵.22-32)。^祗類化合物或其衍生物的運(yùn)些屬性也 已在專利申請例如W0 2011/015692 A2中描述。
[0011] 包含五環(huán)Ξ祗締、徑基酪醇或其衍生物的組合的產(chǎn)品已經(jīng)被公開了，例如在W0 2007/096446 A1和EP2 033 620 A1中。所述專利分別公開了所述產(chǎn)品組合作為前營