一種腦靶向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明設及一種量子點脂質(zhì)體及其制備方法，具體設及一種腦祀向的塞來昔布量 子點脂質(zhì)體混懸液及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 塞來昔布是輝瑞公司1999年上市的治療風濕性關節(jié)炎、類風濕性關節(jié)炎和骨關節(jié) 炎的藥物，分子式為Cl?出4F3N3O2S，由于晶體結構的原因，其理化性質(zhì)較差，主要表現(xiàn)在:在 水中不溶，堆密度低，易粘結，可壓性差。目前塞來昔布的上市制劑主要為塞來昔布膠囊，缺 點比較突出：首先，塞來昔布的低溶解度導致其口服制劑的生物利用度很低，所W 口服吸收 很慢;其次，塞來昔布膠囊不具備緩釋特征和示蹤特征;再者，易產(chǎn)生胃腸道不良反應，并對 屯、血管、肝膽及腎臟都存在一定危害。因此，需要一種能夠克服塞來昔布口服制劑的缺點， 在增加塞來昔布生物利用度的同時兼具緩釋特征和失蹤特征的制劑將會給患者提供更好 的治療選擇。輝瑞的C0X-2抑制劑Celecoxib用于老年癡呆的治療，曾進入S期臨床研究， 后來由于結果不理想而被終止了，它給了我們一種提示，即可W通過制劑學手段，利用載體 的優(yōu)勢，改善塞來昔布的劑型后充分發(fā)揮并發(fā)掘其治療作用。
[0003] 量子點，又可稱為納米晶，是一種由II-VI族或HI-V族元素組成的納米顆粒。量 子點的粒徑一般介于1~IOnm之間，由于電子和空穴被量子限域，連續(xù)的能帶結構變成具有 分子特性的分立能級結構，受激后可W發(fā)射巧光?；诹孔有孔狱c在太陽能電池，發(fā) 光器件，光學生物標記等領域具有廣泛的應用前景。1997年W來，隨著量子點制備技術的不 斷提高，量子點己越來越可能應用于生物學研究。1998年，Alivisatos和Nie兩個研究小組 分別在Science上發(fā)表有關量子點作為生物探針的論文，首次將量子點作為生物巧光標記， 并且應用于活細胞體系，他們解決了如何將量子點溶于水溶液，W及量子點如何通過表面 的活性基團與生物大分子偶聯(lián)的問題，由此掀起了量子點的研究熱潮。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對塞來昔布現(xiàn)有制劑的缺點，并結合量子點的一系列優(yōu)點，本發(fā)明提供一種腦 祀向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液及其制備方法。脂質(zhì)體由于其具有能夠和細胞膜融 合，緩慢釋放藥物，穩(wěn)定性高等優(yōu)勢，成為本發(fā)明的優(yōu)勢載體。它可W將藥物粉末或溶液包 埋在直徑為納米級的微粒中，運種微粒具有類細胞結構，進入人體內(nèi)主要被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng) 吞隧而激活機體的自身免疫功能，并改變被包封藥物的體內(nèi)分布，從而提高藥物的治療指 數(shù)，減少藥物的治療劑量和降低藥物的毒性。本發(fā)明W塞來昔布脂質(zhì)體為出發(fā)點，并利用量 子點的光學特性，研究塞來昔布脂質(zhì)體載藥系統(tǒng)鼻飼后腦部的吸收分布情況，進一步發(fā)掘 并發(fā)揮塞來昔布對阿爾茨海默癥的治療前景。
[0005] 本發(fā)明的技術方案為： 一種腦祀向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液，按照重量百分比的成分為：塞來昔布 0.055~0.55%，量子點0.^0.55%，憐脂1~3%，膽固醇0.2~1.5%，緩沖液90~98〇/〇。
[0006] 所述量子點為簇基化CdSeS/aiS，Aem =490~665nm。
[0007] 所述憐脂可選用天然憐脂和/或合成憐脂，所述天然憐脂選自蛋黃卵憐脂、氨化蛋 黃憐脂、蛋黃憐脂酷甘油、蛋黃憐脂酷絲氨酸、蛋黃憐脂酷肌醇、大豆卵憐脂、氨化大豆憐 月旨、大豆憐脂酷甘油、大豆憐脂酷絲氨酸、大豆憐脂酷肌醇中的一種或幾種;所述合成憐脂 選自二油酷憐脂酷膽堿、二硬脂酸憐脂酷膽堿、二棟桐酷憐脂酷膽堿、二肉豆違酷憐脂酷膽 堿、二月桂酷憐脂酷膽堿、二油釀憐脂酷甘油、二硬脂酸憐脂酷甘油、二棟桐酷憐脂酷甘油、 二肉豆違酷憐脂酷甘油、二月桂酷憐脂酷甘油中的一種或幾種，優(yōu)選為大豆卵憐脂。
[000引所述緩沖液選自pH值為6.0~6.5的憐酸鹽緩沖液、構祿酸鹽緩沖液、碳酸鹽緩沖 液、棚酸鹽緩沖液、醋酸鹽緩沖液中的一種或幾種，優(yōu)選為憐酸二氨鋼-憐酸氨二鋼緩沖液。
[0009] 所述塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液的制備方法，按照W下工藝步驟進行： (1) 室溫下將量子點、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺、N-徑基班巧酷亞胺與去 離子水超聲至溶解； (2) 加入塞來昔布攬拌反應，反應完成后降溫至0~5° C過夜； (3) 離屯、出沉淀，將沉淀用去離子水清洗、離屯、=次后，干燥得到塞來昔布-量子點復合 物； (4) 將塞來昔布-量子點復合物、憐脂和膽固醇溶于有機溶劑中，蒸除有機溶劑，得到脂 質(zhì)膜； 巧)將緩沖液預熱至50~60°C，加入到脂質(zhì)膜中，保溫水化10~60min，得到脂質(zhì)體初乳； (6)采用薄膜超聲分散法將脂質(zhì)體初乳分散，得到塞來昔布-量子點脂質(zhì)體混懸液。
[0010] 所述步驟(2)的反應條件為:溫度35~40° C，反應時間^化。
[0011] 所述步驟(3)的離屯、條件為:轉(zhuǎn)速13000~15000巧m，時間5~30min。
[0012] 所述步驟(3)的干燥條件為:溫度35~40°C。
[0013] 所述步驟(4)的有機溶劑選自氯仿、乙醇、甲醇、叔下醇、正下醇、異丙醇、丙酬、乙 酸、苯甲醇、正己燒中的一種或幾種，優(yōu)選為按體積比為IA~9/1的氯仿/甲醇混合溶劑。
[0014] 本發(fā)明的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液在動物模型試驗中經(jīng)鼻飼給藥后具有明 顯的腦祀向性，對阿爾茨海默病有潛在的治療作用。
[0015] 本發(fā)明的有益效果如下： 1. 本發(fā)明將塞來昔布-量子點包裹于脂質(zhì)體內(nèi)，改善了塞來昔布的非水溶特性，并且使 塞來昔布具備緩釋特征； 2. 本發(fā)明采用量子點作為巧光生物標記物，可實時監(jiān)控塞來昔布脂質(zhì)體載藥系統(tǒng)鼻飼 給藥后在腦部的吸收分布情況，使塞來昔布給藥系統(tǒng)具備示蹤特征； 3. 本發(fā)明的塞來昔布-量子點藥物載體脂質(zhì)體具有優(yōu)異的穩(wěn)定性，可在體內(nèi)降解、無毒 性和無免疫原性，而且可W提高藥物治療指數(shù)、降低藥物毒性和減少藥物副作用。
[0016] 4.本發(fā)明的塞來昔布量子點脂質(zhì)體的腦部吸收分布結果顯示其在腦組織中廣泛 分布，藥物的吸收分布情況良好，有望開發(fā)成腦祀向的制劑，而應用于阿爾茨海默癥的治 療。此外，本發(fā)明的研究過程也為脂質(zhì)體的給藥方式提供了新思路。
【附圖說明】
[0017] 圖1為塞來昔布的紅外分析圖譜； 圖2為本發(fā)明實施例1制備的塞來昔布量子點的紅外分析圖譜； 圖3為本發(fā)明實施例1制備的塞來昔布量子點的脂質(zhì)體混懸液在不同時間點的累積釋 放率對時間的變化曲線圖。
[0018] 圖4為動物模型試驗中本發(fā)明的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液在大腦及各組織中 的分布情況對比圖，其中，A為小鼠大腦的嗅球、腦前部、腦中部、腦后部和小腦的系統(tǒng)劃分 圖；B為塞來昔布-量子點和本發(fā)明的塞來昔布-量子點脂質(zhì)體在A圖中各區(qū)域的分布情況對 比圖，白色箭頭指向處為巧光點;C為塞來昔布-量子點和本發(fā)明的塞來昔布-量子點脂質(zhì)體 經(jīng)小鼠鼻飼給藥后在不同時間段在小鼠不同組織中的濃度對比圖。
【具體實施方式】
[0019] 本發(fā)明實施采用的塞來昔布原料為市購純度在99%W上的原料藥，使用前先進行 重結晶純化處理，待液相歸一化純度達到99.9%后再作為原料進行塞來昔布量子點的脂質(zhì) 體混懸液的制備。
[0020] 本發(fā)明實施采用的量子點，憐脂，膽固醇均為市售醫(yī)藥級原料藥。
[0021] 本發(fā)明實施采用的緩沖液為自制產(chǎn)品，其中的緩沖鹽均為市售醫(yī)藥級原料藥。
[0022] 實施例1 一種腦祀向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液，按照重量百分比的成分為：塞來昔布 0.055%，簇基化CdSeS/aiS (Aem=540nm)量子點0.1%，蛋黃卵憐脂1%，膽固醇0.2%，構祿酸 鋼緩沖液98.645%。
[0023] 所述腦祀向的塞來昔布量子點脂質(zhì)體混懸液的制備方法，按照W下工藝步驟進 行： (1) 室溫下將簇基化CdSeS/化S^em 54化m)量子點、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二 亞胺、N-徑基班巧酷亞胺與去離子水超聲至溶解； (2) 加入塞來昔布在溫度為35~40° C的條件下攬拌反應化，反應完成后降溫至0~5° C過 夜； (3) 離屯、出沉淀，將沉淀用去離子水清洗、離屯、S次后，其中離屯、條件為：轉(zhuǎn)速 1500化pm，時間IOmin，35~40° C干燥得到塞來昔布-量子點復合物； (4) 將塞來昔布-量子點復合物、蛋黃卵憐脂和膽固醇溶于氯仿/甲醇（V/V 9/1)中，減 壓蒸除有機溶劑，得到脂質(zhì)膜；