一種制備抗疲勞的中藥提取物的方法
【專利說明】-種制備抗疲勞的中藥提取物的方法
[0001] 本申請是申請人崔銀方提出的發(fā)明專利申請(發(fā)明名稱為:一種抗疲勞的中藥提 取物及其制備工藝和應(yīng)用，申請?zhí)枮?2014103992846，申請日為:2014年8月14日）的分案申 請。
技術(shù)領(lǐng)域
[0002] 本發(fā)明屬于中藥材提取技術(shù)領(lǐng)域，設(shè)及一種制備抗疲勞的中藥提取物的方法。
【背景技術(shù)】
[0003] 隨著社會(huì)的發(fā)展，生活壓力、就業(yè)壓力增加，越來越多的人在生活和工作中感到疲 勞，疲勞是一種亞健康狀態(tài)，嚴(yán)重影響生活質(zhì)量。臨床應(yīng)用于緩解體力疲勞的藥物和補(bǔ)品很 多，但運(yùn)些品種有的含有激素，毒副作用較大，而且不方便服用。
[0004] 還亮草(Del地inium anthriscifolium Hance)，別名魚燈蘇，毛良科翠雀屬一年 生草本。高30~70厘米;葉片菱狀卵形或S角狀卵形，2~3回羽狀全裂；總狀花序具2~15 花，花淡青紫色;膏葵果。分布于廣東，廣西，貴州，湖南，江西，福建，浙江，江蘇，安徽，河南， 山西南部。生于海拔200-1200米間丘陵或低山的山坡草叢或溪邊草地。易于種植，分布范圍 廣，有較高的藥用價(jià)值，目前被用于中風(fēng)半身不遂，風(fēng)濕筋骨疼痛，尚無文獻(xiàn)報(bào)道還亮草或 其提取物具有抗疲勞的功效。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種W還亮草作為原料制備的抗疲勞中藥提取物及其制 備工藝和應(yīng)用。
[0006] 為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，發(fā)明人通過大量試驗(yàn)研究并不懈探索，最終獲得了如下 技術(shù)方案： 一種抗疲勞的中藥提取物，所述的中藥提取物為還亮草的甲醇浸提物。需要說明的是， 本發(fā)明所述的中藥材還亮草選用毛良科翠雀花屬植物還亮草Delphinium ant虹iscifoli皿化nce的全草，可W為剛采摘的鮮品，也可W為曬干后的干品。
[0007] -種上述抗疲勞的中藥提取物的制備工藝，該工藝包括如下步驟:將還亮草用體 積濃度為72-78%的甲醇溶液浸提，提取液濃縮成稠膏，冷凍干燥，即得。
[000引優(yōu)選地，如上所述抗疲勞的中藥提取物的制備工藝，其中所述的浸提步驟為:將還 亮草在體積濃度為72-78%的甲醇溶液中振蕩0.5-1.化，然后在室溫下放置40-200h。
[0009] 優(yōu)選地，如上所述抗疲勞的中藥提取物的制備工藝，其中所述的濃縮步驟在42°C W下進(jìn)行。
[0010] 優(yōu)選地，如上所述抗疲勞的中藥提取物的制備工藝，其中甲醇溶液的用量為還亮 草質(zhì)量的3-6倍(v/w)。
[0011] 優(yōu)選地，如上所述抗疲勞的中藥提取物的制備工藝，其中該工藝具體包括如下步 驟:將還亮草研成粉末，浸泡于體積百分濃度為75 %的甲醇水溶液中并進(jìn)行振蕩0.8-1.化， 隨后在室溫下放置60-9化后進(jìn)行過濾，將濾液在40°C條件下減壓濃縮成稠膏，冷凍干燥，得 還亮草的甲醇浸提物。
[0012]本發(fā)明通過設(shè)計(jì)試驗(yàn)觀察小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，檢測小鼠負(fù)重游泳后血漿中乳酸的 含量，證實(shí)了還亮草提取物具有提高小鼠運(yùn)動(dòng)耐力、降低運(yùn)動(dòng)后小鼠血清血中乳酸的作用。 本發(fā)明試驗(yàn)還證明還亮草提取物組小鼠運(yùn)動(dòng)后肝糖元含量明顯高于空白對照組，血清尿素 氮明顯低于空白對照組，說明還亮草提取物有較好維持肝糖元含量，提高動(dòng)物對運(yùn)動(dòng)負(fù)荷 的適應(yīng)能力?；诖搜芯拷Y(jié)果，本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種制藥用途，即：上述的還 亮草提取物在制備抗疲勞的藥物中的應(yīng)用。
[0013]疲勞最主要的表現(xiàn)是運(yùn)動(dòng)耐力的下降，運(yùn)動(dòng)耐力是反映機(jī)體疲勞最直接的指標(biāo)， 運(yùn)動(dòng)時(shí)間的長短可反映動(dòng)物運(yùn)動(dòng)疲勞的程度;而乳酸是機(jī)體內(nèi)糖無氧酵解的產(chǎn)物，體內(nèi)乳 酸的積累，是引起運(yùn)動(dòng)性疲勞的一個(gè)重要原因，而本發(fā)明設(shè)及的中藥提取物具有提高機(jī)體 運(yùn)動(dòng)耐力、降低運(yùn)動(dòng)后機(jī)體血清血中乳酸的作用。另外，糖是肌肉組織的重要能量來源，糖 元耗竭可影響運(yùn)動(dòng)能力，大量的研究表明，隨著肌糖元消耗的不斷增加，肌體為維持血糖水 平，將動(dòng)用肝糖元而導(dǎo)致肝糖元的減少。因此，肝糖元的含量是反映疲勞程度的敏感指標(biāo)。 運(yùn)動(dòng)后肝糖元含量越高，證明抗疲勞功效越好。當(dāng)糖、脂肪分解代謝不能獲得足夠能量來源 時(shí)，蛋白質(zhì)分解代謝增強(qiáng)并伴隨血清尿素氮產(chǎn)生增多，機(jī)體血清尿素氮含量隨運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的 增加而增加，而本發(fā)明所制備的還亮草提取物具有較好維持肝糖元含量，提高動(dòng)物對運(yùn)動(dòng) 負(fù)荷的適應(yīng)能力。
【具體實(shí)施方式】
[0014] W下是本發(fā)明還亮草提取物干粉的制備實(shí)施例和效果試驗(yàn)例，對本發(fā)明做進(jìn)一步 說明。但是，本發(fā)明的保護(hù)范圍并不受限于W下實(shí)施例，凡是基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的 技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
[0015] 實(shí)施例1還亮草提取物的制備 將Ikg還亮草干品研成粉末，浸泡于化體積百分濃度為75%的甲醇水溶液中并進(jìn)行振 蕩Ih，隨后在室溫下放置72h后進(jìn)行過濾，將濾液在40°C條件下減壓濃縮成稠膏，冷凍干燥， 粉碎成細(xì)粉，過100目篩，得還亮草提取物干粉。
[0016] 對比例還亮草提取物的制備 將Ikg還亮草干品研成粉末，用化體積百分濃度為75%的甲醇水溶液加熱回流提取2 次，合并2次濾液，將濾液在40°C條件下減壓濃縮成稠膏，冷凍干燥，粉碎成細(xì)粉，過100目 篩，得還亮草提取物干粉。
[0017] 實(shí)施例2還亮草提取物對小鼠抗疲勞試驗(yàn)研究 健康昆明種小鼠108只，體重1?~22g，雌雄各半。預(yù)飼7d后，隨機(jī)分為如下S組，空白 對照組、試驗(yàn)A組、試驗(yàn)B組，每小組36只。并進(jìn)行如下灌胃處理：W體質(zhì)量為基準(zhǔn)，空白對照 組灌胃0.9%生理鹽水，劑量為0.15ml/10g;試驗(yàn)A組灌胃本發(fā)明實(shí)施例1制備的還亮草提取 物，試驗(yàn)B組灌胃對比例制備的還亮草提取物，劑量均為1.72g/kg/d，每天上午9點(diǎn)和下午5 點(diǎn)左右各灌胃一次，共給藥30d。實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物自由攝食和飲水，末次灌胃前一天晚上停食。 [00 1引 （1)運(yùn)動(dòng)耐力實(shí)驗(yàn) 末次灌胃后30min，各組分別隨機(jī)取12只小鼠置于游泳箱中游泳。水深40cm，水溫(25± I) °C，距鼠尾尖I cm處，用細(xì)棉繩系5 %體重的鉛皮。記錄小鼠入水至頭部全部入水持續(xù)8s不 能浮出水面為止的時(shí)間，即小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，W此考察還亮草提取物水提物對小鼠負(fù)重 游泳時(shí)間的影響。
[0019] 還亮草提取物對小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響結(jié)果見表1。根據(jù)表1的試驗(yàn)結(jié)果可看 出，各組小鼠的體質(zhì)量無明顯差別，但是試驗(yàn)A組小鼠負(fù)重游泳時(shí)間均高于對照組和試驗(yàn)B 組，差異具有極顯著意義(P<〇.01)。運(yùn)說明通過浸提得到的還亮草提取物具有延長小鼠負(fù) 重游泳時(shí)間的功效。
[0020] 表1各組小鼠體重和負(fù)重游泳時(shí)間比較
與空白對照組比較，??<〇. 05，???<0.01; 與試驗(yàn) B 組比較，Ap<〇. 05，AAp<〇. Oi。
[0021] (2)小鼠運(yùn)動(dòng)后肝糖元和血清尿素測定 末次灌胃后30 min,各組分別隨機(jī)取12只小鼠，在溫度為（25±1)°C的水中不負(fù)重游 90min，休息60min后采血。拔眼球采全血（不加抗凝劑）置4°C冰箱約化，血凝固后，200化/ min離屯、15min，取血清測定血清尿素含量。采血結(jié)束后，立即處死動(dòng)物，取肝臟經(jīng)生理鹽水 漂洗后用濾紙吸干，精確稱取肝臟IOOmg，測定肝糖元含量。
[0022] 還亮草提取物對小鼠肝糖元、血清尿素含量的影響結(jié)果見表2。根據(jù)表2的試驗(yàn)結(jié) 果可看出，試驗(yàn)A組小鼠的肝糖元水平大幅度高于對照組和試驗(yàn)B組(P<0.01)，血清尿素水 平顯著低于對照組和試驗(yàn)B組(P<0.05)。運(yùn)說明通過浸提得到的還亮草提取物具有提升小 鼠運(yùn)動(dòng)后肝糖元含量和降低小鼠運(yùn)動(dòng)后血清尿素含量的功效。
[0023] 表2各組小鼠運(yùn)動(dòng)后肝糖元和血清尿素含量比較
與空白對照組比較，?P<0.05，**P<0.01; 與試驗(yàn) B 組比較，Ap<〇. 05，AAp<〇. Oi。
[0024] (3)小鼠運(yùn)動(dòng)后血乳酸的測定 末次灌胃后30min，各組分別隨機(jī)取12只小鼠，第1次眼眶采血備用，然后在溫度為(25 ±1)°C的水中不負(fù)重游泳IOmin后，立即第2次采血，離屯、后取血清備用。測定游泳前后兩次 血乳酸含量。
[0025] 還亮草提取物水提物對血乳酸含量的影響結(jié)果見表3。根據(jù)表3的試驗(yàn)結(jié)果可看 出，通過測試小鼠運(yùn)動(dòng)前、運(yùn)動(dòng)后的血乳酸含量，發(fā)現(xiàn)與對照組相比，各給藥組小鼠游泳前 血乳酸的差異不顯著(P>〇.05);然而，試驗(yàn)A組小鼠游泳后O min血乳酸含量均低于對照組 (P<0.05)和試驗(yàn)B組(P<0.01)。運(yùn)說明通過浸提得到的還亮草提取物有抑制小鼠運(yùn)動(dòng)后 血乳酸增加的功效。
[00%]表3各組小鼠運(yùn)動(dòng)后血乳酸含量比較
與空白對照組比較，??<〇. 05，???<0.01; 與試驗(yàn) B 組比較，Ap<〇. 05，AAp<〇. Oi。
[0027] 通過W上試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，通過浸提得到的還亮草提取物具有延長小鼠負(fù)重游泳時(shí)間、 提升小鼠運(yùn)動(dòng)后肝糖元含量和降低小鼠運(yùn)動(dòng)后血清尿素含量，W及抑制小鼠運(yùn)動(dòng)后血乳酸 增加的功效。但是通過加熱回流提取得到的還亮草提取物不具有上述生物活性，運(yùn)可能與 高溫易破壞還亮草中抗疲勞的活性成分有關(guān)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種制備抗疲勞的中藥提取物的方法，其特征在于包括如下工藝步驟:將lkg還亮草 干品研成粉末，浸泡于4L體積百分濃度為75%的甲醇水溶液中并進(jìn)行振蕩lh，隨后在室溫 下放置72h后進(jìn)行過濾，將濾液在40°C條件下減壓濃縮成稠膏，冷凍干燥，粉碎成細(xì)粉，過 100目篩，得還亮草提取物干粉。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種制備抗疲勞的中藥提取物的方法，所述的中藥提取物為還亮草的甲醇浸提物。本發(fā)明制備的中藥提取物不僅具有提高機(jī)體運(yùn)動(dòng)耐力、降低運(yùn)動(dòng)后機(jī)體血清血中乳酸的作用，而且能夠較好維持肝糖元含量，提高動(dòng)物對運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的適應(yīng)能力。
【IPC分類】A61P39/00, A61K36/71
【公開號】CN105535139
【申請?zhí)枴緾N201610045284
【發(fā)明人】石廷琪
【申請人】青島華之草醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2016年5月4日
【申請日】2014年8月14日
【公告號】CN104173476A, CN104173476B