一種具有易吸收低殘留功效的滅活疫苗佐劑專用白油的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及疫苗佐劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種具有易吸收低殘留功效的滅活疫苗 佐劑專用白油。
【背景技術(shù)】
[0002] 白油又名液體石蠟，是以石油為原料精制所得的礦物油，屬液態(tài)烴類混合物。白油 無色無味，化學(xué)穩(wěn)定性及光安定性好，由于白油來源廣泛、價格適宜，因此被廣泛應(yīng)用于動 物油乳劑疫苗的生產(chǎn)。作為油乳劑疫苗的主要成份，白油可增強滅活疫苗的免疫原性，誘導(dǎo) 機體產(chǎn)生有效的免疫應(yīng)答。目前，我國重大禽病防控的疫苗多為油乳劑滅活疫苗，所采用的 佐劑多為白油，而白油在肉雞體內(nèi)完全代謝需要較長時間。在家禽飼養(yǎng)過程中，為了降低禽 病爆發(fā)的風險，疫苗使用較為頻繁，由此所導(dǎo)致的畜禽體內(nèi)白油殘留問題日趨嚴重。
[0003] 此外，由于礦物油不能被機體代謝，因此會產(chǎn)生一系列副作用，導(dǎo)致注射部位肉芽 腫現(xiàn)象，出現(xiàn)炎癥，疫苗被包裹起來形成游離的腫塊，不僅起不到免疫的預(yù)期效果，反而還 會引起肉雞出現(xiàn)精神不振，采食下降等免疫應(yīng)激癥狀，還易引起其他疾病。為了克服這一問 題，一方面應(yīng)當注重疫苗的合理使用（2009年歐盟食品安全局發(fā)表了關(guān)于白油添加劑的科 學(xué)使用意見，即每天食物中白油總量不得超過12mg/kg · bw;FA0及WHO食品添加劑聯(lián)合委員 會也聲明，高粘度的白油在食品中的添加不得超過20mg/kg)，但更為重要的是應(yīng)當針對佐 劑成分加以改進，以緩解其體內(nèi)代謝緩慢的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明旨在針對現(xiàn)有技術(shù)的技術(shù)缺陷，提供一種具有易吸收低殘留功效的滅活疫 苗佐劑專用白油，以解決現(xiàn)有技術(shù)中用于疫苗佐劑的白油在生物體內(nèi)殘留時間較長、殘留 量較大。
[0005] 本發(fā)明要解決的另一技術(shù)問題是現(xiàn)有技術(shù)中用于疫苗佐劑的白油不易被動物吸 收。
[0006] 為實現(xiàn)以上技術(shù)目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：
[0007] -種具有易吸收低殘留功效的滅活疫苗佐劑專用白油，所述白油中不含有碳原子 數(shù)大于24的烴類化合物。
[0008] 作為優(yōu)選，所述白油由碳原子數(shù)為15~24的烴類化合物組成。
[0009] 進一步優(yōu)選的，所述烴類化合物是烷烴。
[0010] 進一步優(yōu)選的，所述白油中鏈烷烴含量為67~70% (w/w)。
[0011 ] 在此基礎(chǔ)上可以分別執(zhí)行以下優(yōu)選:所述白油中正構(gòu)烷經(jīng)含量為10~25 % (w/w); 所述白油的傾點為-3~12°C;所述白油在40°C時的運動粘度為3.5~8mm2/s。
[0012] 作為優(yōu)選，所述烴類化合物不是芳烴。
[0013] 在以上技術(shù)方案中，用于白油制備的原料均屬于常規(guī)有機化合物，可以利用有機 化學(xué)領(lǐng)域的一般技術(shù)方法獲得。所述白油亦可依照本領(lǐng)域中通用的白油制備方法制備。本 發(fā)明通過實驗手段明確了白油中導(dǎo)致生物殘留問題的最主要成分是C24以上的烴類化合 物，進一步發(fā)現(xiàn)從白油中剔除此類成分不會影響其作為疫苗佐劑的性能，同時有助于提升 吸收效率。基于以上積極的發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明獲得了更易吸收、殘留量更低的油乳滅活疫苗專用 白油。
[0014] 在此基礎(chǔ)上，以《中華人民共和國獸藥典》（2010版)和《中華人民共和國獸用生物 制品規(guī)程》(2000年版)為標準考察了本發(fā)明白油與現(xiàn)有技術(shù)產(chǎn)品的性能特點：利用不同白 油產(chǎn)品進行呼腸孤滅活疫苗的制備、檢驗、免疫試驗，分別對免疫雞進行采血、分離血清，檢 測抗體效價，同時剖檢注射部位，觀察吸收情況和藥物殘留情況。實驗結(jié)果表明，相對于現(xiàn) 有技術(shù)產(chǎn)品，本發(fā)明提供的專用白油不僅能夠滿足滅活疫苗佐劑使用要求，同時吸收更快、 殘留量少，不吸收情況發(fā)生率極低。
【附圖說明】
[0015] 圖1是本發(fā)明實施例1中以不同白油佐劑所制備的滅活疫苗胸肌注射肉雞后，其體 內(nèi)抗體消長曲線。
[0016] 圖2是本發(fā)明實施例1中以不同白油佐劑所制備的滅活疫苗頸部皮下注射肉雞后， 其體內(nèi)抗體消長曲線。
[0017] 圖3是本發(fā)明實施例1中以不同白油佐劑所制備的滅活疫苗胸肌注射蛋雞后，其體 內(nèi)抗體消長曲線。
[0018] 圖4是本發(fā)明實施例1中以不同白油佐劑所制備的滅活疫苗頸部皮下注射蛋雞后， 其體內(nèi)抗體消長曲線。
【具體實施方式】
[0019] 以下將對本發(fā)明的【具體實施方式】進行詳細描述。為了避免過多不必要的細節(jié)，在 以下實施例中對屬于公知的結(jié)構(gòu)或功能將不進行詳細描述。
[0020] 以下實施例中所使用的近似性語言可用于定量表述，表明在不改變基本功能的情 況下可允許數(shù)量有一定的變動。因此，用"大約"、"左右"等語言所修正的數(shù)值不限于該準確 數(shù)值本身。在一些實施例中，"大約"表示允許其修正的數(shù)值在正負百分之十（10%)的范圍 內(nèi)變化，比如，"大約100"表示的可以是90至IjllO之間的任何數(shù)值。此外，在"大約第一數(shù)值到 第二數(shù)值"的表述中，大約同時修正第一和第二數(shù)值兩個數(shù)值。在某些情況下，近似性語言 可能與測量儀器的精度有關(guān)。
[0021] 除有定義外，以下實施例中所用的技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域技術(shù)人 員普遍理解的相同含義。
[0022] 以下實施例中所用的試驗試劑耗材，如無特殊說明，均為常規(guī)生化試劑;所述實驗 方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法；以下實施例中的定量試驗，均設(shè)置三次重復(fù)實驗，結(jié)果 取平均值;以下實施例中的％，如無特別說明，均為質(zhì)量百分含量。
[0023] 實施例1
[0024]選擇的佐劑專用白油ZY-WI技術(shù)指標如下：
[0025] (a)芳烴含量為零(質(zhì)譜法）；
[0026] (b)碳分布 C15-24;
[0027] (c)正構(gòu)烷烴含量10%;
[0028] (d)C24以上組分含量為0;
[0029] (e)傾點 12°C;
[0030] (〇40。(3運動粘度4.0臟2/8;
[0031] (g)無色無味液體。
[0032] 4種白油（ZY-WI，JK-WM，JK-WD，GC-W;其中JK-WM和JK-WD屬于市售進口白油產(chǎn)品， GC-W屬于市售國產(chǎn)白油產(chǎn)品）佐劑呼腸孤滅活疫苗檢驗結(jié)果外觀均為乳白色，劑型油包水， 穩(wěn)定性合格，其他檢驗項目：無菌、安全、甲醛含量、硫汞含量均合格。
[0033] 4種白油佐劑呼腸孤滅活疫苗免疫效果實驗。每個白油樣品呼腸孤滅活疫苗分別 以0.5mL/只劑量，經(jīng)胸部肌肉、頸部皮下注射途徑分別接種15日齡白羽肉雞15只和30日齡 蛋雞20只，分別于接種免疫后14、28、42、56(1進行隨機抽樣5只，無菌采血分離血清檢測血清 礦體(HI)效價和疫苗注射部位藥物殘留情況檢查。胸肌免疫吸收剖檢結(jié)果見表1。
[0034]表1不同來源白油佐劑呼腸孤滅活疫苗胸肌免疫吸收剖檢結(jié)果
[0036] 注：吸收完全無殘留物痕跡；"+"藥物殘留物為少量的針尖大小的乳白色細小 顆粒；"++"藥物殘留物為小米粒大小的乳白色顆粒，且有綠豆粒大小的黃色液體包裹1-2 個；"+++"藥物殘留為如大米粒樣的白色干酪樣顆粒、胸肌殘留面積1/4左右、有條索狀的黃 色液體包裹2-3個、有出血性炎癥。
[0037] 根據(jù)胸肌注射藥物殘留剖檢情況，綜合分析結(jié)果是：肉雞對實驗白油ZY-WI吸收情 況明顯優(yōu)于其他