一種魚(yú)眼草提取物及其降血脂的醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，具體涉及一種降血脂的魚(yú)眼草提取物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 魚(yú)眼草為菊科植物小魚(yú)眼草或菊葉魚(yú)眼草的全草。夏季采收，曬干。
[0003] 原植物為小魚(yú)眼草，又名白芽草、白頂草或地細(xì)辛，一年生草本，高10~25厘米。莖 略帶紫色，密被白色柔毛。葉互生，倒卵形或矩圓狀橢圓形，長(zhǎng)3.5~7厘米，寬1.2~2.4厘 米，先端銳尖，基部漸狹成耳形，邊緣有不規(guī)則齒缺，在莖中部以下者，常成琴狀羽裂，兩面 均被柔毛;無(wú)柄。頭狀花序極小，排列成圓錐花序，異型，球狀或半球狀;總苞不明顯，苞片2 列，卵狀披針形或卵形，綠色，緣膜質(zhì)，少被絨毛;花托半球形，具多數(shù)橢圓形突起;花管狀， 外緣為雌花，多列，花冠白色，圓錐形，先端2裂;中部為兩性花，花冠綠黃色，鐘狀，先端4裂； 雄蕊4,花藥基部2齒裂;雌蕊I，花柱伸出花冠之外。瘦果扁平，無(wú)冠毛。花期春末至夏、秋。生 于溪邊、路旁、山坡。分布云南、貴州等地。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種魚(yú)眼草提取物;本發(fā)明的另一個(gè)發(fā)明目的在于提供一 種上述魚(yú)眼草提取物的制備方法，以及含有該提取物的藥物制劑及利用該提取物制備降血 脂藥物的用途。
[0005] 本發(fā)明的上述目的是通過(guò)下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0006] -種魚(yú)眼草提取物，該提取物由以下方法制備：
[0007] (a)以重量計(jì)，每100份藥材包含干燥的魚(yú)眼草成熟果實(shí)80~90份和干燥的黃芪10 ~20份，混合粉碎；（b)用乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液；（c)對(duì)步 驟(b)濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙 酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（d)正丁醇萃取物用大孔樹(shù)脂富集，先用15~25%乙醇沖洗 8~10個(gè)柱體積除去多糖，再用60~70 %乙醇洗脫8~10個(gè)柱體積，收集60~70%乙醇洗脫 液，減壓濃縮，噴霧干燥。
[0008] 進(jìn)一步地，步驟(d)中所述大孔樹(shù)脂為AB-8型大孔樹(shù)脂。
[0009] 進(jìn)一步地，步驟(b)中所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為70~80%。
[0010] 進(jìn)一步地，步驟(b)中所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為75%。
[0011] 進(jìn)一步地，步驟(d)為用正丁醇萃取物用大孔樹(shù)脂富集，先用20%乙醇沖洗9個(gè)柱 體積除去多糖，再用65 %乙醇洗脫9個(gè)柱體積，收集65 %乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。
[0012] 為了能夠通過(guò)建立HPLC指紋圖譜的方法控制不同產(chǎn)地、批次藥材制備的魚(yú)眼草提 取物批間差異，所述提取物的液相分析方法為：
[0013] 色譜柱：Agilent Zorbax Extent C18柱（4.6mmX250mm，5ym);
[0014] 流動(dòng)相:A為甲醇，B為0.1 %甲酸水溶液；
[0015] 梯度洗脫程序：0.01 ~5min，A 25%~35% ;5~10min，A 35%~50% ;10~25min， A 50%;25~26min，A 50%~25%;26~30min，A 25%;
[0016] 流動(dòng)相流速：1 · OmL · min-1;
[0017] 檢測(cè)波長(zhǎng)：252nm;
[0018] 柱溫：30cC ;
[0019] 進(jìn)樣量：l〇yL。
[0020] 藥物制劑，含有治療有效量的所述魚(yú)眼草提取物和藥學(xué)上可接受的載體。
[0021] 所述的魚(yú)眼草提取物在制備降血脂的藥物中的應(yīng)用。
[0022] 所述的藥物制劑在制備降血脂的藥物中的應(yīng)用。
[0023] 本發(fā)明提取物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物制劑的形式使用。
[0024] 所述藥物制劑含有治療有效量的本發(fā)明魚(yú)眼草提取物，其余為藥物學(xué)上可接受 的、對(duì)人和動(dòng)物無(wú)毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0025] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物制劑以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明提取物可 通過(guò)口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等;用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無(wú)菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
[0026]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明通過(guò)對(duì)魚(yú)眼草藥材進(jìn)行提取、除雜、富集處理，能得到降血 脂的提取物;本發(fā)明提供的液相分析方法可以用于建立該提取物的指紋圖譜，用于控制不 同產(chǎn)地、批次藥材制備的提取物的批間差異。
【附圖說(shuō)明】
[0027]圖1為魚(yú)眼草提取物HPLC液相圖譜。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0029] 實(shí)施例1:魚(yú)眼草提取物制備(85份魚(yú)眼草，15份黃芪）
[0030] 藥材來(lái)源:魚(yú)眼草和黃芪購(gòu)自安徽亳州中藥材市場(chǎng)。
[0031]主要試劑:食品級(jí)乙醇購(gòu)自上海凌峰化學(xué)試劑有限公司；醫(yī)藥級(jí)AB-8大孔樹(shù)脂購(gòu) 自天津波鴻樹(shù)脂有限公司；甲醇為HPLC級(jí)，購(gòu)于TEDIA;甲酸為HPLC級(jí)，購(gòu)于TEDIA;色譜用純 凈水為哇哈哈純凈水。
[0032] 將8.5kg干燥的魚(yú)眼草成熟果實(shí)和1.5kg干燥黃芪混合粉碎，用75%乙醇熱回流提 取(25LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液(6L);對(duì)濃縮液依次用石油醚(6LX3 次）、乙酸乙酯（6L X 3次)和水飽和的正丁醇(6L X 3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸 乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔樹(shù)脂（2kg， 柱體積1.5L)富集，先用20 %乙醇沖洗9個(gè)柱體積（12L)，再用65 %乙醇洗脫9個(gè)柱體積 (15L)，收集65%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得魚(yú)眼草提取物浸膏粉約155g。
[0033]實(shí)施例2:魚(yú)眼草提取物②制備(80份魚(yú)眼草，20份黃芪）
[0034] 制備方法:將8. Okg干燥的魚(yú)眼草成熟果實(shí)和2. Okg干燥黃芪混合粉碎，用75%乙 醇熱回流提取(25LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液(6L);對(duì)濃縮液依次用石 油醚(6L X 3次）、乙酸乙酯(6L X 3次)和水飽和的正丁醇(6L X 3次)萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔 樹(shù)脂(2kg，柱體積1.5L)富集，先用20 %乙醇沖洗9個(gè)柱體積（12L)，再用65 %乙醇洗脫9個(gè)柱 體積（15L)，收集65 %洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得魚(yú)眼草提取物浸膏粉約155g。
[0035] 實(shí)施例3:魚(yú)眼草提取物③制備(90份魚(yú)眼草，10份黃芪）
[0036]制備方法:將9. Okg干燥的魚(yú)眼草成熟果實(shí)和1.0 kg干燥黃芪混合粉碎，用75%乙 醇熱回流提取(25LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液(6L);對(duì)濃縮液依次用石 油醚(6L X 3次）、乙酸乙酯(6L X 3次)和水飽和的正丁醇(6L X 3次)萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔 樹(shù)脂(2kg，柱體積1.5L)富集，先用20 %乙醇沖洗9個(gè)柱體積（12L)，再用65 %乙醇洗脫9個(gè)柱 體積（15L)，收集65 %洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得魚(yú)眼草提取物浸膏粉約155g。
[0037]實(shí)施例4:魚(yú)眼草提取物④制備(75份魚(yú)眼草，25份黃芪）
[0038]制備方法:將7.5kg干燥的魚(yú)眼草成熟果實(shí)和2.5kg干燥黃芪混合粉碎，用75%乙 醇熱回流提取(25LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液(6L);對(duì)濃縮液依次用石 油醚(6L X 3次）、乙酸乙酯(6L X 3次)和水飽和的正丁醇(6L X 3次)萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔 樹(shù)脂(2kg，柱體積1.5L)富集，先用20 %乙醇沖洗9個(gè)柱體積（12L)，再用65 %乙醇洗脫9個(gè)柱 體積（15L)，收集65 %洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得魚(yú)眼草提取物浸膏粉約155g。
[0039] 實(shí)施例5:魚(yú)眼草提取物⑤制備(95份魚(yú)眼草，5份黃芪）
[0040] 制備方法:將9.5kg干燥的魚(yú)眼草成熟果實(shí)和0.5kg干燥黃芪混合粉碎，用75%乙 醇熱回流提取(25LX3次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味得到濃縮液(6L);對(duì)濃縮液依次用石 油醚(6L X 3次）、乙酸乙酯(6L X 3次)和水飽和的正丁醇(6L X 3次)萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔 樹(shù)脂(2kg，柱體積1.5L)富集，先用20 %乙醇沖洗9個(gè)柱體積（12L)，再用65 %乙醇洗脫9個(gè)柱 體積（15L)，收集65 %洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得魚(yú)眼草提取物浸膏粉約155g。
[0041 ]實(shí)施例6:液相色譜分析
[0042]供試品溶液配制：取實(shí)施例1方法制得的提取物浸膏粉5mg至50mL棕色容量瓶中， 加30mL 25%甲醇水溶液超聲溶解，冷卻至室溫后，繼續(xù)加25%甲醇水溶液定容。
[0043]分析方法：
[0044] 高效液相色譜儀:Agilent 1100,二元栗；
[0045] 色譜柱：Agilent Zorbax Extent C18柱（4.6mmX250mm，5ym);
[0046] 流動(dòng)相:A為甲醇，B為0.1 %甲酸水溶液；
[0047]梯度洗脫程序：〇.〇1 ~5min，A 25%~35% ;5~10min，A 35%~50% ;10~25min， A 50%;25~26min，A 50%~25%;26~30min，A 25%;
[0048]流動(dòng)相流速：1 · OmL · min-1;
[0049] 檢測(cè)波長(zhǎng):252nm;
[0050] 柱溫:30°C;
[0051 ]進(jìn)樣量：10yL。
[0052]對(duì)用10批不同產(chǎn)地、批次魚(yú)眼草制備的提取物進(jìn)行分析，建立指紋圖譜進(jìn)行匹配， 結(jié)果1~10號(hào)峰在10批樣品色譜圖中均出現(xiàn)。因此標(biāo)定10個(gè)峰為共有指紋峰，據(jù)此建立該提 取物的HPLC指紋圖譜，結(jié)果見(jiàn)圖1。
[0053]實(shí)施例7:魚(yú)眼草提取物藥理試驗(yàn)
[0054] 一、材料
[0055] 1.1受試物與試劑:魚(yú)眼草提取