一種用于治療奶牛乳腺炎的復方制劑及其制備方法
【技術領域】
[0002] 本發(fā)明涉及獸藥技術領域，具體涉及一種用于治療奶牛乳腺炎的復方制劑及其制 備方法。
【背景技術】
[0003] 奶牛乳腺炎最常見的發(fā)病原因是病原微生物通過奶牛乳頭管侵入乳腺，原奶為病 原微生物生長提供了優(yōu)越的環(huán)境，病原微生物在乳腺內(nèi)大量繁殖，產(chǎn)生毒素與酶，刺激脆弱 的乳腺組織，使乳腺發(fā)炎。據(jù)報道，引起奶牛乳腺炎的病原微生物多達150余種，較常見的有 20余種，其中，金黃色葡萄球菌、鏈球菌具有國際廣泛性，約占整個奶牛乳腺炎病例的70%， 占我國病例的90%以上。
[0004] 抗生素療法目前仍是國內(nèi)外所采用的治療乳腺炎最常用的方法，在乳腺炎治療及 控制奶品質(zhì)量的綜合防治中具有重要作用。對于臨床型乳腺炎目前國內(nèi)外都選用抗生素進 行治療，抗生素療法作用快速，可直接殺滅病原菌，但有的病原菌易產(chǎn)生耐藥性，對于泌乳 期奶牛來說，大量應用抗生素還會導致抗生素在乳中殘留，對人類健康造成威脅。因此近年 來人們逐漸把目光轉移到了中藥治療上，中藥屬純天然物質(zhì)，毒性低，不會造成嚴重的藥物 殘留，不易產(chǎn)生抗藥性，克服了使用抗生素的不足，應用復方中藥制劑替代抗生素，預防藥 物，已逐漸被廣大用戶所接受。國內(nèi)外研究表明，天然植物精油對日常生產(chǎn)生活中的致病菌 有很好的抑制作用。如薰衣草精油對單核細胞增多性李斯特菌、沙門氏菌等常見的食物傳 播性致病菌有很強的抑菌活性。肉桂精油對腸炎沙門氏菌和單核細胞增多性李斯特單核細 胞菌具有抑制作用。其后又通過對抑菌范圍的測定，發(fā)現(xiàn)牛至精油可以在食品中起到抑菌 作用。研究發(fā)現(xiàn)，牛至精油對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、酵母、黑曲霉、青 霉等食品常見污染菌有廣譜抑菌作用。
[0005] 透皮吸收促滲劑有助于藥物克服皮膚角質(zhì)層的障礙，其促滲機制是溶解皮膚脂質(zhì) 或使皮膚蛋白變性，可逆地改變皮膚角質(zhì)層的屏障作用，且不損傷任何活性細胞，達到增加 藥物在皮膚的溶解度，使藥物透皮吸收率增加的目的。早期的透皮促滲劑研究多限于有機 溶劑如丙二醇、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜等，這類化合物使用濃度較高，其中以二甲基亞 砜促滲效果最好，但其毒性和對皮膚的刺激性限制了它的臨床應用。目前多采用添加氮酮 等化學性促滲劑，近年來氮酮已廣泛應用于藥物的外用制劑，在提高治療效果、減少藥物的 不良反應、開發(fā)制劑新品種等方面起了重要作用，但是在對中藥透皮促滲劑中因為中藥成 分復雜故效果一般。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的就是針對上述現(xiàn)有技術中的缺陷，提供了一種用于治療奶牛乳腺炎 的復方制劑及其制備方法。主要是利用植物揮發(fā)油即有抗菌作用又有促進滲透作用的特 性，研制動物乳腺的局部用藥，可以有效治療感染性疾病。
[0007] 為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的技術方案為:一種用于治療奶牛乳腺炎的復方 制劑，是由按照重量份計的以下物質(zhì)組成的：薰衣草精油1份，肉桂精油1-2份，牛至精油1-3 份，輔料3_6份。
[0008] 進一步的，上述的一種用于治療奶牛乳腺炎的復方制劑，是由按照重量份計的以 下物質(zhì)組成的：薰衣草精油1份，肉桂精油2份，牛至精油3份，輔料6份。
[0009] 進一步的，上述的一種用于治療奶牛乳腺炎的復方制劑，所述輔料中各物料的重 量比為硬脂酸:甘油:單硬脂酸甘油酯:尼泊金乙酯：十二烷基硫酸鈉:凡士林:蒸餾水為20: 40:2:2:20:1:200。
[0010] 進一步的，上述的一種用于治療奶牛乳腺炎的復方制劑，所述復方制劑的劑型為 軟膏劑。
[0011] 本發(fā)明得第二個目的是提供了上述一種用于治療奶牛乳腺炎的復方制劑的制備 方法，包括以下步驟： 1) 于無菌條件下，按配比稱取薰衣草精油、肉桂精油和牛至精油，水浴加熱，70~80°C 水浴保溫〇. 5小時，得到主料混合物； 2) 按配比稱取輔料中各物料并混合，水浴加熱至融化得到輔料液，在70~80°C保溫 0.5小時后將輔料液緩緩加入步驟1)得到的主料混合物中，邊加邊向一個方向攪拌，3000 轉/分鐘攪拌乳化15分鐘，冷凝即得到復方制劑半成品； 3) 將步驟2)得到的復方制劑半成品分裝到固定容器后，蒸汽滅菌，滅菌溫度為HKTC， 時間為10分鐘，得到用于治療奶牛乳腺炎的復方制劑。
[0012] 本發(fā)明的有益效果為： 本發(fā)明提供的一種用于治療奶牛乳腺炎的復方制劑及其制備方法，具有以下優(yōu)點： 1、 采用植物精油作為有效成分，具有很好的清熱解毒、抗菌消炎的作用，治療奶牛臨床 型乳腺炎效果極好，治愈率80%以上，有效率90%以上；由于采用純植物精油制劑，不含任何 化藥成分，故有利于奶制品的安全，也不易產(chǎn)生耐藥性； 2、 通過軟膏攪拌得均用的固體，性質(zhì)穩(wěn)定且質(zhì)量可控，非常有利于工業(yè)化生產(chǎn)； 3、 作為一種有效治療奶牛乳腺炎的中藥，其效果確切，從實施例提供的藥效學試驗及 臨床可以看出，復方軟膏在獸醫(yī)臨床上使用方便、安全、不污染奶源有較高的應用價值。
【具體實施方式】
[0013] 實施例1: 1、復方軟膏的配方(W/W):主料精油的配方及來源如表1所示。
[0014] 表1
2、復方軟膏的制備： 2.1通過多年的試驗及應用，已經(jīng)確定了最佳的復方軟膏輔料的配方(重量比）為:硬脂 酸1，甘油2,單硬脂酸甘油酯0.1，尼泊金乙酯0.1，十二烷基硫酸鈉1，凡士林0.05,蒸餾水 10。
[0015] 2.2按照表1中精油的比例，總精油與總軟膏輔料量的配比為1:1(W/W)。
[0016] 2.3制法:無菌條件下，按比例稱取各種精油，水浴上加熱，70~80°C水浴保溫0.5 小時。另取輔料中各成分加在一起，水浴加熱至融化，在70~80°C，0.5小時后將該液體緩 緩加入精油中，邊加邊向一個方向攪拌，3000轉/分鐘攪拌乳化15分鐘，冷凝即得。分裝到固 定容器后，蒸汽滅菌的溫度為l〇〇°C，時間為10分鐘。
[0017] 實施例2: 體外抑菌試驗： 為了評價3種精油及復合后的抑菌效果，從中篩選藥物的配方，故進行了的精油及復方 精油的抑菌試驗。
[0018] 1、材料與方法： 1.1試驗藥品： 試驗樣品1、2、3號藥均由中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州畜牧與獸藥研究所新獸藥工程研究室制 備，按表1中購得后精油，并按照不同比例配制，不加輔料。對照藥:乳立寧(雙丁注射液），河 北遠征藥業(yè)生產(chǎn)(生產(chǎn)批號20131622)。
[0019] 1.2奶牛乳腺炎病原菌的分離鑒定： 1.2.1樣品的采集： 乳樣采自蘭州市某奶牛場，共采集5頭有明顯乳腺炎癥狀患牛的牛乳各一份。奶牛乳腺 按常規(guī)消毒后，每個乳頭擠去頭2把乳，后無菌取乳樣約15mL于滅菌采乳管中，標明牛號和 日期后放入冰桶，送回實驗室進行細菌檢驗，如當天不能檢驗，則放入40°C保存，不超過 48h〇
[0020] 1.2.2病原菌的分離： 將乳樣分別劃線接種于普通瓊脂培養(yǎng)基、鮮血瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，置37 °(：溫箱培養(yǎng)24h后觀察菌落形態(tài)特征，挑取典型菌落涂片，革蘭氏染色，鏡檢。根據(jù)菌體形態(tài) 及染色特性初步判定細菌類屬，然后進一步純化培養(yǎng)，培養(yǎng)方法同上，鏈球菌需要用血平板 培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，純培養(yǎng)后進行鏡檢細菌，將無雜菌者保存于試管斜面培養(yǎng)基內(nèi)，然后可按 有關生化鑒定方法進行鑒定。
[0021 ] 1.2.3供試菌液的制備： 將本試驗中分離鑒定的臨床型奶牛乳腺炎主要致病菌無乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌、 大腸桿菌3種細菌液，用接種環(huán)輕取接種于肉湯瓊脂培養(yǎng)基，按照菌種所需的培養(yǎng)條件進行 培養(yǎng)，在37°C恒溫培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)18-20h后，稀釋，用分光光度計在波長為625nm處比 色，吸光度為〇. 08-0.1時的稀釋濃度為所需濃度，即含細菌數(shù)約為1-2 X IO8個/mL，備用。
[0022] 1.2.4抑菌試驗： 將藥品精油相應濃度，用管碟法進行試驗，抑菌圈的大小表示抑菌作用的強弱；用二倍 稀釋法測定精油的最低抑菌濃度，抑菌濃度的高低表示抑菌作用的弱強。
[0023] 2、結果： 2.1體外抑菌試驗： 經(jīng)過預實驗確定植物精油配比3號抑菌效果最好，故正式試驗以3號配比為準。試驗結 果表明，本發(fā)明的植物精油不同配比對無乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的體外抑菌 效果和對照藥抑菌效果比較結果如表2、3所示。經(jīng)過試驗結果證明配比3號對三種抑菌效果 最好，故以中藥復方軟膏選用3號的配比，再賦予輔料為制備的藥物。
[0024] 表2
3、結論： 從表2、3精油的體外抑菌試驗和體內(nèi)抗菌活性試驗結果可以看出，復方3號精油的抑菌 作用較乳立寧強，特別是對大腸埃希氏菌，故對奶牛乳腺炎有治療作用。
[0025] 實施例3: 抗炎試驗： 無論臨床型還是隱性奶牛乳腺炎，其臨床表現(xiàn)癥狀都是炎性反應。炎癥是引起乳房損 傷和產(chǎn)奶量下降的直接原因。而許多中藥具有非特異性抗炎作用而緩解臨床癥狀。中藥抗 炎作用也是中藥抗感染作用機理的重要組成部分。所以，中藥抗炎作用是一項必不可少的 指標，故對該藥進