天胡荽愈肝片在制備抑制淋巴細胞瘤細胞ramos b細胞增殖藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種天胡荽愈肝片在制備抑制淋巴細胞瘤細 胞RAMOS B細胞增殖藥物中的應(yīng)用及天胡荽愈肝片的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 天胡荽愈肝片標準號WS-10213(ZD-0213)-2002,記載于國家中成藥標準匯編內(nèi)科 肝膽分冊。由天胡荽699g、杏葉防風1398g、酢衆(zhòng)草699g、虎掌草209g作為原料藥制成，具有 清熱解毒，疏肝利膽的功效，用于肝膽濕熱所致的急、慢性肝炎。
[0003] 現(xiàn)有技術(shù)中，尚未有天胡荽愈肝片在在制備抑制人淋巴細胞瘤細胞RAMOS B細胞 增殖藥物中的應(yīng)用的報道，也未見有天胡荽愈肝片提取制備方面采用超臨界萃取的報道， 而傳統(tǒng)水煎煮的方法，工藝粗糙、落后，雜質(zhì)多，導致患者用量過大，不方便服用，嚴重影響 了本品在臨床上應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 發(fā)明目的:本發(fā)明的目的在于提供一種天胡荽愈肝片在制備抑制淋巴細胞瘤細胞 RAMOS B細胞增殖藥物中的應(yīng)用。
[0005] 本發(fā)明的另一個目的在于提供一種天胡荽愈肝片的制備方法。
[0006] 本發(fā)明的目的是通過如下的方案實現(xiàn)的： 天胡荽愈肝片在制備抑制淋巴細胞瘤細胞RAMOS B細胞增殖藥物中的應(yīng)用，所述天胡 荽愈肝片由天胡荽699g、杏葉防風1398g、酢衆(zhòng)草699g、虎掌草209g作為原料藥制成，所述天 胡荽愈肝片的制備方法包括如下步驟:取天胡荽699g、杏葉防風1398g、酢漿草699g、虎掌草 209g，加入到C0 2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為 4-6%，萃取壓力15-30MPa，溫度30-50°C，C〇2流量l_3ml/g生藥· min，萃取時間800-lOOOmin，得超臨界萃取物，將超臨界萃取物加入淀粉，70%乙醇制顆粒，干燥，壓片，制成500 片，每片重0.30g。
[0007] 優(yōu)選的，上述的天胡荽愈肝片在制備抑制淋巴細胞瘤細胞RAMOS B細胞增殖藥物 中的應(yīng)用，所述天胡荽愈肝片的制備方法包括如下步驟:取天胡荽699g、杏葉防風1398g、酢 漿草699g、虎掌草209g，加入到C0 2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑 的體積百分比為5%，萃取壓力25MPa，溫度40°C，C〇2流量2ml/g生藥· min，萃取時間900min， 得超臨界萃取物，將超臨界萃取物加入淀粉，70%乙醇制顆粒，干燥，壓片，制成500片，每片 重0.30g。
[0008] 現(xiàn)有技術(shù)中，天胡荽愈肝片口服，一次6片，一日3次。天胡荽愈肝片服藥量大。采用 本發(fā)明方法制備成的天胡荽愈肝片每片重0.30g，每次僅需3片，一日服用3次。在具有更多 活性成分的條件下大大減少了服用量。此結(jié)論可以通過下述試驗證明。
[0009] 試驗一、不同方法制備的天胡荽愈肝片中齊墩果酸含量的比較 1、儀器及試藥本發(fā)明天胡荽愈肝片:按實施例1方法制備，使用3005g原料藥，經(jīng)提取制 成500片，每片重0.30g。原天胡荽愈肝片，按照WS-10213(ZD-0213)-2002標準方法制備。 Agi 1 ent 1200高效液相色譜儀;METTLER AE240電子分析天平;齊墩果酸對照品（中國藥品生 物制品檢定所）。
[0010] 2、方法 照高效液相色譜法(中國藥典2015年版第四部凡例十五)測定。
[0011]色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.1 %磷 酸(80:20)為流動相;檢測波長為210nm。理論板數(shù)按齊墩果酸峰計算應(yīng)不低于3000。
[0012] 對照品溶液的制備精密稱取齊墩果酸對照品適量，加甲醇制成每lml含0.2mg的 溶液，即得。
[0013] 本發(fā)明的天胡荽愈肝片供試品溶液的制備取本發(fā)明的天胡荽愈肝片，研細，取 0.75g( 2.5片的量），精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙醇25ml，密塞，稱定重量，加熱 回流1小時，放冷，再稱定重量，用乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液l〇ml， 加20 %鹽酸溶液5ml，加熱回流2.5小時，加水30ml，水浴上濃縮至無醇味，放冷，用二氯甲烷 振搖提取3次(40ml、30ml、30ml )，合并二氯甲烷提取液，蒸干，殘渣加甲醇適量使溶解，轉(zhuǎn)移 至l〇ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0014] 對照產(chǎn)品供試品溶液的制備取對照的天胡荽愈肝片20g，研細，取1.5g(5片的 量），精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙醇25ml，密塞，稱定重量，加熱回流1小時，放 冷，再稱定重量，用乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液l〇ml，加20 %鹽酸溶 液5ml，加熱回流2.5小時，加水30ml，水浴上濃縮至無醇味，放冷，用二氯甲烷振搖提取3次 (40ml、30ml、30ml )，合并二氯甲烷提取液，蒸干，殘渣加甲醇適量使溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶 中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0015] 測定法分別精密吸取對照品溶液與本發(fā)明的天胡荽愈肝片供試品溶液、對照產(chǎn) 品供試品溶液各1〇μ1，注入液相色譜儀，測定，即得。
[0016] 3、結(jié)果 結(jié)果表明，本發(fā)明天胡荽愈肝片中齊墩果酸的含量為3.22-6.45mg/片；而原天胡荽愈 肝片中齊墩果酸的含量為〇.81mg/片，每次服用量3片的齊墩果酸含量為原片劑6片含量的 2-4倍，在服用量減少的情況下，齊墩果酸含量有很大提高。
[0017] 上述研究表明，采用本發(fā)明制備方法制備的天胡荽愈肝片，有效成分含量遠遠高 于WS-10213(ZD-0213)-2002標準記載的方法制備的天胡荽愈肝片。
【具體實施方式】
[0018] 下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作更進一步的說明，以便本領(lǐng)域的技術(shù)人員更了解 本發(fā)明，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例，凡基于本發(fā)明上述 內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
[0019] 實施例1 取天胡荽699g、杏葉防風1398g、酢漿草699g、虎掌草209g，加入到C02超臨界萃取器中， 乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%，萃取壓力25MPa，溫度40°C，C02 流量2ml/g生藥· min，萃取時間900min，得超臨界萃取物，將超臨界萃取物加入淀粉，70%乙 醇制顆粒，干燥，壓片，制成500片，每片重0.30g。
[0020]經(jīng)檢測，成品中齊墩果酸的含量為6.45mg/片。
[0021] 實施例2 取天胡荽699g、杏葉防風1398g、酢漿草699g、虎掌草209g，加入到C02超臨界萃取器中， 乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4%，萃取壓力15MPa，溫度30°C，C02 流量lml/g生藥· min，萃取時間lOOOmin，得超臨界萃取物，將超臨界萃取物加入淀粉，70% 乙醇制顆粒，干燥，壓片，制成500片，每片重0.30g。
[0022]經(jīng)檢測，成品中齊墩果酸的含量為4.98mg/片。
[0023] 實施例3 取天胡荽699g、杏葉防風1398g、酢漿草699g、虎掌草209g，加入到