夠幫助還原肌膚并令其保持理想水潤狀態(tài)。具有修護(hù)功效,能夠保護(hù)肌膚免 受侵害,并且強(qiáng)化肌膚的自我抵御機(jī)制。 具體實(shí)施例
[0036] 所述植物乳桿菌為CGMCC 11763。
[0037] 植物乳桿菌益生特性如下:
[0038]本發(fā)明所提供的植物乳桿菌CGMCC NO. 11763經(jīng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)能夠在pH為1.50的條件 下存活,在1%膽鹽培養(yǎng)4小時(shí)后仍處于存活狀態(tài);植物乳桿菌CGMCC NO. 11763降解亞硝酸 鹽速度快,分解能力達(dá)到10.9mg/h/kg,該菌種在生產(chǎn)泡菜時(shí),整個(gè)發(fā)酵過程中亞硝酸鹽濃 度在4.8mg/kg以下;CGMCC NO. 11763在發(fā)酵60h小時(shí)后,對(duì)膽固醇降解率可達(dá)到64.76%。 CGMCC NO · 11763黏附能力測(cè)定的自凝集率為95 · 71 %。
[0039] CGMCC NO. 11763菌株對(duì)膽固醇降解能力研究和測(cè)定:
[0040] 取Iml CGMCC NO. 11763母液接種于IOmL的MRS膽固醇液體培養(yǎng)基(膽固醇含量 0.1mg/ml,pH 6.2)中,37°C的恒溫靜置分別培養(yǎng)20h、40h、60h備用,以接入ImL無菌水的MRS 膽固醇培養(yǎng)基為對(duì)照,取以上培養(yǎng)不同時(shí)間的菌液樣品及對(duì)照液各lml,9000r/min,4°C下 離心10min,得到發(fā)酵上清液,鄰苯二甲醛法測(cè)定上清液中膽固醇含量(具體為:取各上清液 0 . Iml于相應(yīng)的試管中,加冰醋酸0.3ml,lmg/ml的鄰苯二甲醛0.15ml,緩緩加入濃硫酸 I.Oml,混合均勻。室溫靜置IOmin,于550nm下測(cè)吸光值)。每一處理3個(gè)重復(fù),以同樣方法制 作膽固醇標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算上清液中膽固醇含量及降解率,結(jié)果見表1??芍?,CGMCC NO. 11763 對(duì)膽固醇有很好的降解作用,在發(fā)酵60h小時(shí)后,降解率可達(dá)到64.76%。
[0041 ]表1對(duì)膽固醇的降解情況。
[0043] CGMCC NO · 11763菌株的耐膽鹽試驗(yàn):
[0044] 取CGMCC NO. 11763菌液ImL接種菌種于含有不同膽鹽(含量梯度為0.0%、0.2%、 0.4%、0.6%、0.8%、1%)的1011^]\?5液體培養(yǎng)基(?!1=6.4),置于37°(:下分別培養(yǎng)0、2、411, 每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。各取Iml樣品菌液于9ml生理鹽水中混勻,制備稀釋度溶液,取0.1ml稀釋 液于MRS中涂布,于37°C生化培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)48小時(shí)(每個(gè)稀釋度做3個(gè)平行)記錄計(jì)算平 板上的菌數(shù)個(gè)數(shù)。結(jié)果見表2??芍摼谀扄}濃度為1 %處理4h后菌的生長量依然達(dá)到 0· 59±0·92 X 107(cfu/ml),有很好的耐膽鹽能力。
[0045] 表2耐膽鹽能力檢測(cè)[(土s) X 107cfu/ml]
[0047] CGMCC NO.11763菌株的耐酸試驗(yàn)
[0048] 取CGMCC腸.11763母液按11111接種菌種于不同口!1值(口!1梯度為1.5、2.0、2.5、3.0、 3.5、4.0)的IOmL MRS液體培養(yǎng)基,置于37°C下分別培養(yǎng)0、2、4h,每一處理3個(gè)重復(fù)。各取Iml 樣品菌液于9ml生理鹽水中混勻,制備稀釋溶液,取0.1ml稀釋液于MRS中涂布,于37°C生化 培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)48小時(shí)(每個(gè)稀釋度做3個(gè)平行)記錄平板上的菌落個(gè)數(shù)。結(jié)果見表3。說 明該菌具有很強(qiáng)的耐酸能力。
[0049] 表3 耐酸能力檢測(cè)[(土s) X IO7CfVml]
[0051 ] CGMCC NO.11763菌株的黏附能力測(cè)定
[0052] 培養(yǎng)CGMCC N0.11763(MRS液體培養(yǎng)基)、大腸桿菌DH 5a(LB液體培養(yǎng)基)24h得發(fā) 酵液,分別置于3000r/min、4°C下離心10min,收集菌泥,分別用pH=7.0的無菌磷酸鹽緩沖 液(PBS)洗滌菌泥2次(即在菌落中加入I3BS,震蕩混合均勻后,置于3000r/min、4°C下離心 IOmin,收集菌體)。自凝集率(% :用無菌的I3BS將菌泥CGMCC NO. 11763制成在波長600nm處 的吸光值為〇. 4±0.1 (AO)的懸浮菌液及菌懸液,靜置24h后測(cè)定吸光值A(chǔ)24,自凝集率(% ) 公式為(A0-A24)/A0。;他凝集率(% :將CGMCC NO. 11763和大腸桿菌DH5a的懸菌液調(diào)節(jié)成 在波長600nm處的吸光值為0.6 ± 0.1 (AO)的混合懸浮菌液。靜置24H后測(cè)定吸光值A(chǔ)24,他凝 集率(% )公式為(A0-A24)/A0。測(cè)定結(jié)果見表5,可知CGMCC NO. 11763的自凝集率為 95.71%,有很強(qiáng)的黏附能力。
[0053]表4黏附能力表
菌株生理特性所述植物乳桿菌(LactobaciIlus plantarum)XH于2015年11月30日保藏 于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡稱CGMCC ),保藏號(hào)為CGMCC NO. 11763,保藏地址為:中國北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào),中國科學(xué)院微生物研究所, 郵編:100101。
[0055] 該菌株特點(diǎn)如下:在顯微鏡下觀察,該菌株為短桿狀,革蘭氏染色呈陽性,無鞭毛, 不產(chǎn)芽孢;在固體培養(yǎng)基上,該菌菌落為白色,表面光滑,致密,形態(tài)為圓形,邊緣較整齊。
[0056] 理化特征為:過氧化氫酶(-),明膠液化(-),吲哚實(shí)驗(yàn)( + ),運(yùn)動(dòng)性(-),發(fā)酵產(chǎn)氣 (_),亞硝酸鹽還原(_),發(fā)酵產(chǎn)氣(_),產(chǎn)硫化氫氣體(_),pH4.0MRS培養(yǎng)基中生長(+ )。經(jīng)過 生理生化鑒定為為植物乳桿菌(Lactobaci Ilus plan tarum),命名為植物乳桿菌 (Lactobacillus plantarum)XH〇
[0057] 該菌株能夠在57°C下生長良好,葡萄糖耐受能力為275g/L。
[0058] 本發(fā)明植物乳桿菌由采集人李建樹,從新疆維吾爾族老鄉(xiāng)家中酸奶中分離得到, 采集時(shí)間2015年6月2日。
[0059] 5L發(fā)酵罐試驗(yàn)
[0060] (1)取斜面上的植物乳桿菌CGMCC NO. 11763-環(huán),接入裝有50mL培養(yǎng)基MRS(無瓊 脂)(葡萄糖濃度為150g/L)培養(yǎng)基的250mL三角瓶中,200rpm,37°C培養(yǎng)12h左右,使菌體處 于對(duì)數(shù)生長中期。
[0061 ] (2)將對(duì)數(shù)期的菌種接入裝有3L MRS液體培養(yǎng)基(初始葡萄糖為150g/L)的5L發(fā)酵 罐中。接種量為10%,37°(:下100印111培養(yǎng)8小時(shí),對(duì)數(shù)前期溶氧控制10%(通氣0.5171^11),后 期厭氧培養(yǎng)63小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束后,植物乳桿菌CGMCC NO. 11763的乳酸產(chǎn)量達(dá)到110g/L。這樣 的產(chǎn)乳酸速率利于泡菜的快速發(fā)酵。
[0062] (4)將對(duì)數(shù)期的菌種接入裝有3L亞硝酸鈉液體篩選培養(yǎng)基(單一氮源為2g/L亞硝 酸鈉的改性MRS篩選培養(yǎng)基)的5L發(fā)酵罐中。接種量為10 %,37°C下IOOrpm培養(yǎng)8小時(shí),對(duì)數(shù) 前期溶氧控制10% (通氣〇.5L/min),后期厭氧,發(fā)酵過程根據(jù)亞硝酸鹽的消耗速率流加 20g/L的亞硝酸鈉溶液,培養(yǎng)2-3天。發(fā)酵結(jié)束后,計(jì)算發(fā)酵過程植物乳桿菌CGMCC NO. 11763 對(duì)亞硝酸鈉的降解速率。結(jié)果發(fā)現(xiàn):在該條件下,XH對(duì)亞硝酸鈉的降解速率可以達(dá)到653mg/ h/L〇
[0063] (5)將對(duì)數(shù)期的菌種IOmL接入裝有2kg預(yù)處理過的白菜中,按照傳統(tǒng)泡菜方法進(jìn)行 加工,每12小時(shí)測(cè)定泡菜中的亞硝酸鹽含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在整個(gè)發(fā)酵過程中,XH菌對(duì)亞硝酸 鈉的分解速率為10.9mg/h/kg白菜。泡菜中的亞硝酸鈉含量始終低于4.8mg/kg,遠(yuǎn)低于國家 標(biāo)準(zhǔn)GB2714-2003中規(guī)定的含量(20mg/kg)。
[0064] 實(shí)施例1
[0065] 本發(fā)明提供一種兒童濕疹用植物提取物組合物,
[0066] 兒童濕疹用植物提取物組合物的各組分重量份數(shù)組成為:山茶籽提取物15,庫拉 索蘆薈提取物10,白柳提取物7,仙人掌提取物5,金盞花提取物3,酵素5,植物乳桿菌菌劑1。
[0067] 庫拉索蘆薈提取物制備方法如下:取庫拉索蘆薈于-23°C冷凍IOmin;立即粉碎至 粒徑0.5mm;置容器中并添加2%的碳酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為8,升溫至40°C,加入混合物料總 重量3 %的混合酶酶解40min,過濾,得濾液;濾液經(jīng)冷凍干燥即得。所述混合酶由果膠酶、纖 維素酶、淀粉酶按質(zhì)量比1:10:1均勻混合。
[0068] 所述金盞花提取物的制備方法包括如下步驟:將金盞花粉碎后加金盞花質(zhì)量4倍 2%的乳酸水溶液并調(diào)節(jié)pH值為5,升溫至45°C,加入金盞花質(zhì)量2%的纖維素酶,保持4小 時(shí),隨后加果膠酶,攪拌均勾,酶解60min,酶解期間于電場(chǎng)強(qiáng)度20-40kV/cm,脈沖時(shí)間400-500ys,脈沖頻率200-300HZ條件下高壓脈沖電場(chǎng)處理5分鐘,上述