北美金縷梅提取物的化妝品學(xué)和/或皮膚病學(xué)用圖
【專利說(shuō)明】北美金縷梅提取物的化妝品學(xué)和/或皮膚病學(xué)用途
[0001] 本發(fā)明涉及新的化妝品學(xué)和/或皮膚病學(xué)成分及其化妝品學(xué)或藥物用途，特別是 其皮膚病學(xué)用途，用于增加細(xì)胞外基質(zhì)纖維的形成以及皮膚和/或粘膜(特別是眼睛、唇和 牙齦粘膜)和/或頭皮的彈性。
[0002] 皮膚老化(特別是光致老化)是一種復(fù)雜的現(xiàn)象，其與多種被廣為研究的機(jī)制有 關(guān)，例如ROSs(活性氧）的產(chǎn)生，特別是負(fù)責(zé)氧化現(xiàn)象(脂質(zhì)過(guò)氧化作用和蛋白質(zhì)氧化作用） 的自由基，還例如酶的產(chǎn)生，例如負(fù)責(zé)破壞組織和纖維(例如膠原蛋白和彈性蛋白）的彈性 蛋白酶和金屬蛋白酶。因此這些機(jī)制通常與結(jié)締組織的破壞有關(guān)。
[0003] 因此，天然膠原纖維明確地可以被金屬蛋白酶（MMPs)(特別是麗P-I)降解， 0.00IMED (最小紅斑量)就可以誘導(dǎo)該酶的產(chǎn)生，即相當(dāng)于僅僅暴露于太陽(yáng)3分鐘。該MMP-I 的產(chǎn)生以劑量依賴性模式與暴露的持續(xù)時(shí)間和強(qiáng)度相關(guān)。
[0004] 彈性的降低是暴露于陽(yáng)光產(chǎn)生的主要問(wèn)題之一，但更通常是皮膚老化的問(wèn)題。在 皮膚中包括彈性蛋白原和微纖維成員的彈性纖維能夠提供彈性功能。在老化過(guò)程中并且特 別是在UV壓力的作用下，彈性纖維和膠原纖維的形成減少，MMPs和彈性蛋白酶導(dǎo)致的降解 增加。另外，MMPs和ROSs是導(dǎo)致皮膚損傷的促炎因子。
[0005] 這些機(jī)制在化妝品學(xué)和皮膚病學(xué)領(lǐng)域已經(jīng)被廣泛研究，因此，多種抗氧劑、抗MMPs 或抗彈性蛋白酶成分已經(jīng)因其對(duì)結(jié)締組織的保護(hù)作用而上市。然而，細(xì)胞外基質(zhì)纖維(特別 是彈性纖維和膠原蛋白）的降解的預(yù)防和抑制并不足以預(yù)防內(nèi)在的皮膚老化及其魅力下降 的外貌。另外，沒(méi)有化妝品成分能夠完全抑制氧化應(yīng)激所導(dǎo)致的退化。當(dāng)其發(fā)生時(shí)，已經(jīng)觀 察到的是，在氧化應(yīng)激的作用下，在皮膚深處部分彈性蛋白的合成也有所增加并且以彈性 蛋白聚合物的形式無(wú)序集聚，因此促進(jìn)了彈性的降低。此外，彈力素在氧化應(yīng)激的情況下過(guò) 度表達(dá)，通過(guò)彈性纖維上的谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶而交聯(lián);其促進(jìn)了彈性蛋白聚合物的形成。使用 術(shù)語(yǔ)日光性彈性組織變性(solar elastosis)。
[0006] 因此，申請(qǐng)人注意到，皮膚、粘膜和頭皮的性能(特別是恢復(fù)它們的彈性及其堅(jiān)固 性)的改善特別與增加細(xì)胞外基質(zhì)纖維的質(zhì)量和/或數(shù)量有關(guān)。
[0007] 因此，申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)，L0XL(-種為賴氨酰氧化酶(LOX)家族同工型的酶)是在成人彈 性組織生成中缺失的主要環(huán)節(jié)，它能夠使得該賴氨酰氧化酶同工型的合成恢復(fù)活性以便于 獲得對(duì)彈性組織生成的刺激作用。事實(shí)上已經(jīng)證實(shí)，在重建的能夠產(chǎn)生彈性纖維的皮膚模 型上，LOXL合成的激活使其能夠重建功能性彈性組織生成。此外，申請(qǐng)人也證實(shí)了LOXL在疤 痕區(qū)域(cicatricial zones)的表達(dá)不足，同樣在各個(gè)年齡段的人真皮中也是如此，因此在 老化過(guò)程中同樣如此。LOXL是負(fù)責(zé)通過(guò)交聯(lián)而使彈性蛋白成熟的酶，并因此形成功能性的 彈性纖維。因此，申請(qǐng)人已經(jīng)鑒別了能夠刺激LOXL表達(dá)的活性成分(專利申請(qǐng)F(tuán)R 2855968和 FR 2855969，US 2004-0253220和US 2004-0258676)。
[0008] 因此，申請(qǐng)人一直在尋找既能夠增加彈性纖維形成中彈性蛋白關(guān)鍵伙伴的成分 (特別是LOXL和腓骨蛋白5)，同時(shí)也能夠抑制彈力素合成和/或活性的成分。
[0009] 對(duì)于尋找作為現(xiàn)有技術(shù)中所述那些成分的替代物的活性成分的事宜在化妝品學(xué) 和皮膚病學(xué)領(lǐng)域中一直受到人們的極大關(guān)注。此外，還非常需要具有下列性能的活性成分， 其具有增加 LOXL表達(dá)的性能，但其也能夠作用于與彈性組織生成相關(guān)的其它通路，例如增 加腓骨蛋白5表達(dá)、降低彈力素表達(dá)，同時(shí)增加膠原纖維的形成和/或改善其組織。
[0010]申請(qǐng)人出乎意料并驚奇地剛剛發(fā)現(xiàn)了一種新的能夠滿足該需求的成分，因?yàn)槠淠?夠增加細(xì)胞外基質(zhì)纖維的形成，特別是彈性纖維和膠原纖維的形成，因?yàn)槠湓诨瘖y品領(lǐng)域 和藥學(xué)領(lǐng)域中具有多種其它令人產(chǎn)生極大興趣的特性，其可以增加皮膚和/或粘膜和/或頭 皮彈性和堅(jiān)固性，特別是當(dāng)所述皮膚或所述頭皮或所述粘膜被時(shí)間性老化和/或UV-導(dǎo)致的 老化所改變時(shí)。本發(fā)明的成分實(shí)際上具有增加 LOXL表達(dá)的特性，具有抑制彈力素表達(dá)和/或 活性的特性，還具有刺激膠原蛋白和腓骨蛋白-5合成的特性。
[0011]因此，該成分自身能夠獨(dú)立提供完全、有效的并因而完全令人滿意的解決方案，用 于恢復(fù)和/或增加因老化而改變的組織的彈性和/或堅(jiān)固性，特別是皮膚老化，尤其是時(shí)間 性老化或光致老化。此外，它可以與現(xiàn)有技術(shù)中其它藥物組合使用從而加強(qiáng)其特性。因此， 該成分能夠特別有效地解決現(xiàn)有技術(shù)的問(wèn)題。
[0012] 本發(fā)明的成分是一種植物提取物，因此其優(yōu)點(diǎn)在于能夠容易地以工業(yè)化規(guī)模生 產(chǎn)、易于配制并且具有非常高的穩(wěn)定性。另外，其可以容易地自可再生資源提取獲得，這使 其能夠根據(jù)可持續(xù)發(fā)展的原則生產(chǎn)。
[0013] 本發(fā)明的成分為北美金縷梅(Hamamelis virginiana)植物的提取物。
[0014]北美金縷梅是源自北美東部地區(qū)的灌木，其生長(zhǎng)在潮濕的區(qū)域。其也被稱為"迷人 的榛子(witch hazel)"，因?yàn)槠渲l在過(guò)去曾經(jīng)用于鑒定水和黃金，如水探測(cè)杖(water-divining rod)。北美金縷梅是在美國(guó)西北地區(qū)常用的植物，因?yàn)槠渚哂惺諗康奶匦圆⑶乙?于廣泛獲取。其樹(shù)皮中的五倍子單寧和兒茶素單寧可能是其收斂和止血特性的原因。其還 可以用于挫傷、肌肉酸痛、靜脈曲張、痔瘡、乳頭疼痛和炎癥。
[0015] 金縷梅樹(shù)皮是收斂劑、止血?jiǎng)?、?zhèn)靜劑和補(bǔ)藥。其在體內(nèi)（口服）用于治療腹瀉、結(jié) 腸炎、痢疾、痔瘡、陰道分泌物、月經(jīng)過(guò)多、內(nèi)出血和器官下垂。順式治療藥物(homeopathic remedy)生產(chǎn)自新鮮的樹(shù)皮。其用于治療流鼻血、痔瘡和靜脈曲張。
[0016] 其葉子也是收斂劑，已知可以用作抗菌劑。
[0017] 實(shí)驗(yàn)表明，葉子提取物能夠增加血管阻力并降低毛細(xì)血管滲透性。
[0018] 已經(jīng)公開(kāi)了北美金縷梅提取物對(duì)皮膚組織的保護(hù)活性，其特別是作為抗蛋白酶成 分，尤其是通過(guò)抑制金屬蛋白酶2、3、1和9而保護(hù)皮膚(W0 2006/53415)。而且，提取物以蒸 餾物的形式銷售，稱為"金縷梅"蒸餾物，特別用于抗炎、消毒和收斂作用。然而，北美金縷梅 提取物的這些已知特性沒(méi)有能夠預(yù)見(jiàn)到其通過(guò)使得細(xì)胞外間質(zhì)纖維的形成而具有增加彈 性和/或堅(jiān)固性的特性，特別是彈性纖維和膠原纖維的形成，或者其增加 LOXL表達(dá)、膠原蛋 白合成和腓骨蛋白5合成的特性和/或抑制彈力素表達(dá)和/或活性的特性，這些特性如本發(fā) 明內(nèi)容中發(fā)現(xiàn)。
[0019] 本發(fā)明的北美金縷梅植物提取物的某些特性可以通過(guò)下文中所提供的關(guān)于其對(duì) 細(xì)胞外間質(zhì)纖維(特別是彈性纖維和膠原纖維)活性的實(shí)施例中具體地證實(shí)。
[0020] 因此，本發(fā)明的主旨為北美金縷梅提取物的非治療性化妝品學(xué)用途，用于增加皮 膚和/或粘膜和/或頭皮的細(xì)胞外基質(zhì)纖維的形成。
[0021] 本發(fā)明的主旨還包括北美金縷梅提取物在化妝品學(xué)組合物中的用途，特別是作為 活性成分，用于增加皮膚和/或粘膜和/或頭皮的細(xì)胞外基質(zhì)纖維的形成。
[0022] 本發(fā)明的主旨還包括本發(fā)明的北美金縷梅提取物，用于在病理學(xué)狀態(tài)的護(hù)理和/ 或皮膚病治療中的局部用途，所述病理狀態(tài)與彈性纖維和膠原纖維有關(guān)，優(yōu)選與皮膚和/或 粘膜和/或頭皮的堅(jiān)固性和/或彈性的損失有關(guān)，例如酒糟鼻、毛細(xì)血管擴(kuò)張、日光性彈力組 織變性、病態(tài)皮膚松弛癥和/或妊娠紋。
[0023] 本發(fā)明的主旨還包括化妝護(hù)理和/或治療方法或過(guò)程，其包括將本發(fā)明的北美金 縷梅提取物和/或含有此類提取物的化妝組合物局部施用于至少一處皮膚和/或粘膜和/或 頭皮的區(qū)域，用于增加皮膚和/或粘膜和/或頭皮的細(xì)胞外基質(zhì)纖維的形成。
[0024] 定義
[0025] 根據(jù)本發(fā)明，表述"增加細(xì)胞外基質(zhì)纖維的形成"應(yīng)當(dāng)是指細(xì)胞外基質(zhì)纖維的質(zhì)量 和/或數(shù)量的增加。該增加可以分別相對(duì)于沒(méi)有施用本發(fā)明提取物的細(xì)胞外基質(zhì)纖維的質(zhì) 量和/或數(shù)量進(jìn)行測(cè)定。優(yōu)選該增加可以通過(guò)彈性纖維和膠原纖維組織的可視化和量化方 法測(cè)定，具體描述于實(shí)施例3的免疫標(biāo)記測(cè)定。相對(duì)于不存在本發(fā)明提取物情況下進(jìn)行的測(cè) 定，優(yōu)選該增加至少等于5%，更優(yōu)選等于10%。
[0026] 根據(jù)本發(fā)明，術(shù)語(yǔ)"細(xì)胞外基質(zhì)纖維"應(yīng)當(dāng)是指彈性纖維和/或膠原纖維的構(gòu)成蛋 白。彈性纖維的構(gòu)成蛋白優(yōu)選為彈性蛋白、微管蛋白（特別是腓骨蛋白5)和原纖蛋白（特別 是原纖蛋白1)。
[0027] 根據(jù)本發(fā)明，術(shù)語(yǔ)"膠原蛋白"應(yīng)當(dāng)是指I、III、IV、V、VI、VII、XII、XIII、XIV、XVI、 XVII、XXIV和XXIX型膠原蛋白，優(yōu)選皮膚和/或粘膜和/或頭皮的那些蛋白，選自膠原蛋白I、 III、IV、V和VII，優(yōu)選膠原蛋白I型、膠原蛋白II型和膠原蛋白V型，甚至更優(yōu)選膠原蛋白I 型。
[0028] 根據(jù)本發(fā)明，表述"減少?gòu)椥缘鞍拙酆衔锏男纬?應(yīng)當(dāng)是指增加腓骨蛋白5合成和/ 或增加 LOXL表達(dá)和/或減少?gòu)椓λ睾铣珊?或活性。用于測(cè)定彈力素表達(dá)的抑制的模型描述 于實(shí)施例4。
[0029]根據(jù)本發(fā)明，術(shù)語(yǔ)"L0XL"或"hLOXL"（也稱為L(zhǎng)0XL-1)應(yīng)當(dāng)是指賴氨酰氧化酶(LO) 家族的同工型，該家族包括5個(gè)成員：LOX、LOXL、L0XL2、L0XL3和L0XL4，具體描述于下列出版 物:Csiszar等人，賴氨酰氧化酶："一種新的多功能胺氧化酶家族"（Lysyl oxidases: "A novel multifunctional amine oxidase family"），Nucleic Acid Research and Molecular Biology,2001，第70卷，第2 - 28頁(yè)。
[0030] 根據(jù)本發(fā)明，表述"增加 LOXL表達(dá)"應(yīng)當(dāng)是指增加基因編碼的LOXL或其啟動(dòng)子的表 達(dá)，特別是刺激信使RNA編碼的LOXL的合成，也可以是刺激源自該信使RNA的LOXL的合成。該 增加可以在包含至少一種具有LOXL表達(dá)功能的細(xì)胞類型的模型上測(cè)定，最好是成纖維細(xì) 胞，優(yōu)選皮膚成纖維細(xì)胞，通過(guò)使得該細(xì)胞與本發(fā)明提取物接觸測(cè)定，所述接觸使得LOXL基 因和/或蛋白表達(dá)增加大于或等于10%，最好是大于或等于20%，這種增加是相對(duì)于對(duì)照模 型中基因和/或蛋白表達(dá)的水平而言的，對(duì)照模型即沒(méi)有與本發(fā)明提取物接觸的模型。該表 達(dá)的增加優(yōu)選基因表達(dá)的增加。此類模型描述于實(shí)施例2。
[0031] 根據(jù)本發(fā)明，術(shù)語(yǔ)"膠原蛋白表達(dá)"應(yīng)當(dāng)是指膠原蛋白基因表達(dá)，即膠原蛋白mRNA (信使RNA)表達(dá)和/或膠原蛋白表達(dá)。優(yōu)選膠原蛋白表達(dá)。
[0032] 根據(jù)本發(fā)明，表述"增加皮膚和/或粘膜和/或頭皮的堅(jiān)固性和/或彈性"應(yīng)當(dāng)是指 為了美容的目的而分別增加失去堅(jiān)固性和/或彈性皮膚和/或粘膜和/或頭皮的堅(jiān)固性和/ 或彈性，特別是由于內(nèi)在因素的作用而導(dǎo)致的失去，例如皮膚和/或粘膜和/或頭皮的組織 老化，即時(shí)間性老化、細(xì)胞應(yīng)激、非病理性生理性變化(例如飲食的改變）、激素變化，特別是 青春期、妊娠期、更年期或男性更年期。這種堅(jiān)固性和/或彈性的喪失也可以是