一種瑪卡烯、瑪卡酰胺的提取分離方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于生物提取領(lǐng)域，公開了一種瑪卡烯、瑪卡酰胺的提取分離方法，其包括如下步驟：步驟1）浸泡和紫外照射，步驟2）混勻，步驟3）臨界CO2萃取和濃縮，步驟4）石油醚萃取，步驟5）洗脫，步驟6）脫色、濃縮和干燥。本發(fā)明提取工藝，通過浸泡、萃取、洗脫、脫色以及濃縮等工藝，具有收率高、產(chǎn)品純度好、操作工藝簡單等優(yōu)點。
【專利說明】一種瑪卡烯、瑪卡酰胺的提取分離方法
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域
[0002]本發(fā)明屬于生物提取領(lǐng)域，具體涉及一種瑪卡烯、瑪卡酰胺的提取分離方法。
【背景技術(shù)】
[0003]瑪卡(學(xué)名:Lepidium meyenii Walp)，(西班牙語:Maca)。主要出產(chǎn)于南美洲安第斯山脈和中國云南麗江，是一種十字花科植物。葉子橢圓，根莖形似小圓蘿卜，可食用，是一種純天然食品，營養(yǎng)成份豐富。瑪卡的下胚軸可能呈金色或者淡黃色、紅色、紫色、藍色、黑色或者綠色。淡黃色的根最常見，形狀、味道也最好?，斂ǜ缓邌挝粻I養(yǎng)素，對人體有滋補強身的功用。黑色瑪卡是被公認為效果最好的瑪卡，產(chǎn)量極少?，斂ㄔa(chǎn)高海拔山區(qū)，適宜在高海拔、低瑋度、高晝夜溫差、微酸性砂壤、陽光充足的土地中生長;種植地區(qū)主要分布于南美州安第斯山脈以及中國云南麗江的玉龍雪山地區(qū)，這兩大主產(chǎn)區(qū)有較大面積的適種土地。而中國云南其他地區(qū)和新疆、西藏等地區(qū)也有少量種植。
[0004]瑪卡烯是美國華裔植物學(xué)家ZhengB.L發(fā)現(xiàn)的瑪卡特有的兩種獨一無二的活性物質(zhì)，主要成分為:η-節(jié)基十六酞胺、節(jié)基-(92)十八稀酰胺、η-節(jié)基-(92、122)-二稀十八酞胺、節(jié)基_(92、122、152)-二稀十八駄胺、η-節(jié)基十八燒酰胺，及η-節(jié)基辛酰胺、η-節(jié)基-16-羥基-9-氧化-1OE 12Ε 14Ε-辛葵三烯酰胺、η-芐基-16羥基-9，16-二氧-1OE 12Ε 14Ε-辛葵三烯酰胺等17個同系物?，斂０泛同斂ㄏ┰诂斂ㄌ崛∥镏泻繛?.6%。瑪卡酰胺和瑪卡烯是引起性功能改善的主要物質(zhì)，而豐富的氨基酸可幫助人體在中樞神經(jīng)內(nèi)傳遞信息，對性活動更是具有重要的調(diào)控作用。
[0005]目前，有一些研究做過一些瑪卡酰胺和瑪卡烯的提取工作，但是大多存在提取效率低、純度差以及工藝復(fù)雜等缺陷，不適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術(shù)中瑪卡酰胺和瑪卡烯提取工藝提取率低、提取成本高以及操作工藝繁瑣等缺陷，提供了一種瑪卡烯、瑪卡酰胺的提取分離方法。
[0007]本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案來實現(xiàn)的:
一種瑪卡烯、瑪卡酰胺的提取分離方法，其包括如下步驟:步驟I)浸泡和紫外照射，步驟2)混勾，步驟3)臨界CO2萃取和濃縮，步驟4)石油醚萃取，步驟5)洗脫，步驟6)脫色、濃縮和干燥。
[0008]具體地，所述提取分離方法包括如下步驟:
步驟I)浸泡和紫外照射:取瑪卡鮮根為原料，洗凈，浸泡在6%(w/w)的氯化鈉溶液中6小時，然后取出，晾干，粉碎成8-10目的粉末，再用紫外線照射15分鐘；
步驟2)混勻:將步驟I)的粉末與硅藻土按照1:1的質(zhì)量比混合均勻得到混合物；
步驟3)臨界CO2萃取和濃縮:采用臨界CO2萃取方式，用95%的乙醇作為夾帶劑，控制萃取壓力為27.5-29.5MPa，萃取時間為3_4小時，萃取溫度為40 V ;重復(fù)萃取一次，合并兩次萃取液，置于真空蒸發(fā)器中，在真空度為0.82MPa，溫度為43°C的條件下進行蒸發(fā)濃縮得到濃縮液；
步驟4)石油醚萃取:向濃縮液中添加兩倍重量的石油醚，在60-90°C萃取，然后靜置分層，收集下層的水相用于多糖類物質(zhì)的提?。?br> 步驟5)洗脫:將步驟4)所得上層石油醚相進行減壓蒸發(fā)，回收石油醚，殘留液與氧化鋁粉末按照1:1的質(zhì)量比混合攪拌均勻，晾干，然后添加到氧化鋁洗脫柱，用石油醚進行洗脫，收集洗脫液；
步驟6)脫色、濃縮和干燥:往洗脫液中添加3%(w/w)的活性炭，在回流狀態(tài)下保持脫色40min，過濾，濃縮濾液，然后在40-60°C干燥2小時，得到含有瑪卡烯、瑪卡酰胺的提取物。
[0009]優(yōu)選地，所述紫外線的強度為2000uW/cm2。
[0010]所述硅藻土的粒徑為50-100目。
[0011 ] 所述氧化鋁粉末的粒徑為100-200目。
[0012]本發(fā)明取得的有益效果主要但不限于以下幾點:
本發(fā)明提取工藝，通過浸泡、萃取、洗脫、脫色以及濃縮等工藝，具有收率高、產(chǎn)品純度好、操作工藝簡單等優(yōu)點；
本發(fā)明采用臨界CO2萃取方式和石油醚相結(jié)合的方式，提高了收率，避免了單一方式造成的有效成分損失；
提取工藝中采用硅藻土與瑪卡粉末混合，可通過硅藻土的吸附作用，使得細胞壁穩(wěn)定性進一步下降，細胞脹裂過程加劇，提高活性成分的浸出率，同時吸附力較小，容易解離，而且硅藻土的成本小于樹脂等吸附材料，減輕了企業(yè)負擔(dān)；
瑪卡細胞經(jīng)鹽環(huán)境以及強紫外線逆境脅迫，可以誘導(dǎo)活性分子的分泌，而且使得細胞壁處于不穩(wěn)定狀態(tài)，瑪卡烯、瑪卡酰胺等生物堿的浸出相應(yīng)增加，提高了產(chǎn)量；
氧化鋁粉末用于去除雜質(zhì)，提高了產(chǎn)品的純度；
采用本發(fā)明提取分離方法成本較低，而且溶劑消耗少成本低廉，產(chǎn)品純度和收率高，提取時間縮短，操作步驟簡單，工業(yè)化應(yīng)用前景廣闊。
【具體實施方式】
[0013]為了使本技術(shù)領(lǐng)域的人員更好地理解本申請中的技術(shù)方案，下面將結(jié)合本申請具體實施例，對本發(fā)明進行更加清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本申請一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本申請中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都應(yīng)當(dāng)屬于本發(fā)明保護的范圍。
[0014]實施例1
一種瑪卡烯、瑪卡酰胺的提取分離方法，其包括如下步驟:
步驟I):取麗江瑪卡種植區(qū)的瑪卡鮮根(含水率57%)為原料100g，洗凈，浸泡在6%(w/w)的氯化鈉溶液中6小時，然后取出，晾干，粉碎成8目的粉末，再用紫外線照射15分鐘，紫外線強度為2000uW/cm2;
步驟2):將步驟I)的粉末與硅藻土按照1:1的質(zhì)量比混合均勻得到混合物;所述硅藻土的粒徑為50目； 步驟3):采用臨界CO2萃取方式，用95%的乙醇作為夾帶劑，控制萃取壓力為27.5MPa，萃取時間為3小時，萃取溫度為40°C;重復(fù)相同的萃取條件再萃取一次，合并兩次萃取液，置于真空蒸發(fā)器中，在真空度為0.82MPa，溫度為43°C的條件下進行蒸發(fā)濃縮得到濃縮液；
步驟4):向濃縮液中添加兩倍重量的石油醚，在60°C萃取，然后靜置分層，收集下層的水相用于多糖類物質(zhì)的提??；
步驟5):上層石油醚相進行減壓蒸發(fā)，回收石油醚，殘留液與氧化鋁粉末按照1:1的質(zhì)量比混合攪拌均勻，晾干，然后添加到氧化鋁洗脫柱，以距開口處40cm為佳，用石油醚進行洗脫，收集洗脫液；
步驟6):往洗脫液中添加3%(w/w)的活性炭，在回流狀態(tài)下保持脫色40min，過濾，濃縮濾液，然后在40°C干燥2小時，得到含有瑪卡烯、瑪卡酰胺的提取物。
[0015]共獲得瑪卡提取物69.2g，經(jīng)HPLC檢測，瑪卡烯含量為1.71%,瑪卡酰胺含量為0.023%ο
[0016]實施例2
一種瑪卡烯、瑪卡酰胺的提取分離方法，其包括如下步驟:
步驟I):取麗江瑪卡種植區(qū)的瑪卡鮮根(含水率58%)為原料100g，洗凈，浸泡在6%(w/w)的氯化鈉溶液中6小時，然后取出，瞭干，粉碎成10目的粉末，再用紫外線照射15分鐘，紫外線強度為2000uW/cm2;
步驟2):將步驟I)的粉末與硅藻土按照1:1的質(zhì)量比混合均勻得到混合物;所述硅藻土的粒徑為100目；
步驟3):采用臨界CO2萃取方式，用95%的乙醇作為夾帶劑，控制萃取壓力為29.5MPa，萃取時間為4小時，萃取溫度為40°C;重復(fù)相同的萃取條件再萃取一次，合并兩次萃取液，置于真空蒸發(fā)器中，在真空度為0.82MPa，溫度為43°C的條件下進行蒸發(fā)濃縮得到濃縮液；
步驟4):向濃縮液中添加兩倍重量的石油醚，在80°C萃取，然后靜置分層，收集下層的水相用于多糖類物質(zhì)的提??；
步驟5):上層石油醚相進行減壓蒸發(fā)，回收石油醚，殘留液與氧化鋁粉末按照1:1的質(zhì)量比混合攪拌均勻，晾干，然后添加到氧化鋁洗脫柱，以距開口處40cm為佳，用石油醚進行洗脫，收集洗脫液；
步驟6):往洗脫液中添加3%(w/w)的活性炭，在回流狀態(tài)下保持脫色40min，過濾，濃縮濾液，然后在60°C干燥2小時，得到含有瑪卡烯、瑪卡酰胺的提取物。
[0017]共獲得瑪卡提取物67.8g，經(jīng)HPLC檢測，瑪卡烯含量為1.76%，瑪卡酰胺含量為0.021%ο
[0018]對比例I
操作工藝同實施例1，不同在于缺少步驟I)浸泡到氯化鈉溶液和紫外照射的步驟;共獲得瑪卡提取物68.2g，經(jīng)HPLC檢測提取物中瑪卡烯含量為1.08%，瑪卡酰胺含量為0.013%。
[0019]對比例2
操作工藝同實施例1，不同在于缺少步驟2);共獲得瑪卡提取物68.6g，經(jīng)HPLC檢測提取物中瑪卡烯含量為1.54%，瑪卡酰胺含量為0.018%。
[0020]
最后，還需要注意的是，以上列舉的僅是本發(fā)明的若干個具體實施例。顯然，本發(fā)明不限于以上實施例，還可以有許多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能從本發(fā)明公開的內(nèi)容直接導(dǎo)出或聯(lián)想到的所有變形，均應(yīng)認為是本發(fā)明的保護范圍。
【主權(quán)項】
1.一種瑪卡烯、瑪卡酰胺的提取分離方法，其包括如下步驟:步驟I)浸泡和紫外照射，步驟2)混勾，步驟3)臨界CO2萃取和濃縮，步驟4)石油醚萃取，步驟5)洗脫，步驟6)脫色、濃縮和干燥。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取分離方法，其特征在于，所述提取分離方法包括如下步驟: 步驟I)浸泡和紫外照射:取瑪卡鮮根為原料，洗凈，浸泡在6%(w/w)的氯化鈉溶液中6小時，然后取出，晾干，粉碎成8-10目的粉末，再用紫外線照射15分鐘； 步驟2)混勻:將步驟I)的粉末與硅藻土按照1:1的質(zhì)量比混合均勻得到混合物； 步驟3)臨界CO2萃取和濃縮:采用臨界CO2萃取方式，用95%的乙醇作為夾帶劑，控制萃取壓力為27.5-29.5MPa，萃取時間為3-4小時，萃取溫度為40°C ;重復(fù)萃取一次，合并兩次萃取液，置于真空蒸發(fā)器中，在真空度為0.82MPa，溫度為43°C的條件下進行蒸發(fā)濃縮得到濃縮液； 步驟4)石油醚萃取:向濃縮液中添加兩倍重量的石油醚，在60-90°C萃取，然后靜置分層，收集下層的水相用于多糖類物質(zhì)的提??； 步驟5)洗脫:將步驟4)所得上層石油醚相進行減壓蒸發(fā)，回收石油醚，殘留液與氧化鋁粉末按照1:1的質(zhì)量比混合攪拌均勻，晾干，然后添加到洗脫柱，用石油醚進行洗脫，收集洗脫液； 步驟6)脫色、濃縮和干燥:往洗脫液中添加3%(w/w)的活性炭，在回流狀態(tài)下保持脫色40min，過濾，濃縮濾液，然后在40-60°C干燥2小時，得到含有瑪卡烯、瑪卡酰胺的提取物。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提取分離方法，其特征在于，所述紫外線的強度為2000uW/cm2。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提取分離方法，其特征在于，所述硅藻土的粒徑為50-100目。
【文檔編號】A61K36/31GK105832801SQ201610337869
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年5月22日
【發(fā)明人】謝海濤, 謝來賓, 董景峰, 陳佩, 王鵬亭, 柴行, 周秋云
【申請人】深圳市先康達生物科技有限公司