miR-200c-3p在制備CXCR6抑制劑中的用圖
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了miR?200c?3p、miR?200c?3p模擬物或miR?200c?3p激動(dòng)劑在制備CXCR6抑制劑中的用途。本發(fā)明還公開(kāi)了一種CXCR6抑制劑，它是以miR?200c?3p、miR?200c?3p模擬物或miR?200c?3p激動(dòng)劑為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或者輔助性成分制備而成的制劑。本發(fā)明miR?200c?3p、miR?200c?3p模擬物或miR?200c?3p，均可以下調(diào)CXCR6的表達(dá)，抑制乳腺癌的增殖、侵襲、遷移和體內(nèi)成瘤等生物學(xué)活性，可以制備成為CXCR6抑制劑，治療腫瘤，具有良好的臨床應(yīng)用前景。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
m i R-200c-3p在制備CXCR6抑制劑中的用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及miR-200c-3p、miR-200c-3p模擬物或miR-200c-3p激動(dòng)劑在制備CXCR6 抑制劑中的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 近年來(lái)有研究顯示腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移和血管生成等生物學(xué)特性與炎癥 反應(yīng)的趨化因子相關(guān)。趨化因子具有相應(yīng)的受體，趨化因子受體表達(dá)于參與炎癥反應(yīng)的白 細(xì)胞表面，通過(guò)趨化因子的濃度梯度介導(dǎo)白細(xì)胞向炎癥部位的迀移。
[0003] 目前發(fā)現(xiàn)多種趨化因子受體如CXCR4、CXCR5、CXCR6等在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)，其中， CXCR6是一新近發(fā)現(xiàn)的趨化因子受體，它在前列腺癌、卵巢上皮癌、黑色素瘤、結(jié)直腸腺癌、 乳腺癌等多種癌組織細(xì)胞中的表達(dá)與相應(yīng)正常組織細(xì)胞的表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，并且還發(fā)現(xiàn) CXCR6與癌細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移等特性呈正相關(guān)。
[0004] 但是，抑制CXCR6是否能夠治療腫瘤是未知的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明提供了 miR-20〇C-3p及其激動(dòng)劑的用途。
[0006] 本發(fā)明提供了 miR-200c-3p、miR-200c-3p模擬物或miR-200c-3p激動(dòng)劑在制備 CXCR6抑制劑中的用途。
[0007] 所述CXCR6抑制劑是抗腫瘤藥物。優(yōu)選地，所述抗腫瘤藥物是抑制乳腺癌的增殖、 侵襲、迀移和/或體內(nèi)成瘤性的藥物。
[0008] 所述抗腫瘤藥物是抗乳腺癌、和抗腫瘤組織中表達(dá)CXCR6同時(shí)低表達(dá)或無(wú)表達(dá) miR-200c的所有惡性腫瘤的藥物，包括頭頸部腫瘤(鼻咽癌、口腔癌、口咽癌、下咽癌、喉癌、 甲狀腺癌、副鼻竇癌）、腦瘤、非小細(xì)胞肺癌、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、結(jié)直腸癌、宮頸癌、 前列腺癌、卵巢上皮癌、惡性黑色素瘤、皮膚癌、骨及軟組織肉瘤等惡性腫瘤。
[0009] 所述miR-200c-3p的核苷酸序列如SEQ ID N0.1所示。
[0010] 所述miR-200c-3p模擬物的核苷酸序列如SEQIDN0·2所示。
[0011 ]所述 miR-200c-3p 激動(dòng)劑是 Agomir 或 EndoFectinTM-Plus 轉(zhuǎn)染試劑。
[0012] 本發(fā)明還提供了 CXCR6抑制劑在制備抗腫瘤藥物中的用途;優(yōu)選地，所述藥物是抗 乳腺癌的藥物。
[0013] 本發(fā)明還提供了一種CXCR6抑制劑，它是以miR-200c-3p、miR-200c-3p模擬物或 miR-200c-3p激動(dòng)劑為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或者輔助性成分制備而成的制 劑。
[0014] 所述miR-200c-3p的核苷酸序列如SEQ ID N0.1所示。
[0015] 所述miR-200c-3p模擬物的核苷酸序列如SEQIDN0·2所示。
[0016]所述 miR-200c_3p 激動(dòng)劑是 Agomir。
[0017 ]本發(fā)明CXCR6抑制劑可以抑制CXCR6的表達(dá)，進(jìn)而抑制乳腺癌的增殖、侵襲、迀移和 體內(nèi)成瘤性，miR-200c-3p、miR-200c-3p模擬物或miR-200c-3p，均可以下調(diào)CXCR6的表達(dá)， 可以制備成為CXCR6抑制劑，治療腫瘤，具有良好的臨床應(yīng)用前景。
[0018]顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段，在不脫離 本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
[0019]以下通過(guò)實(shí)施例形式的【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō) 明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容 所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
【附圖說(shuō)明】
[0020] 圖1 CXCR6和miRNA在正常乳腺上皮細(xì)胞及三種乳腺癌細(xì)胞中的自然表達(dá)情況。每 個(gè)細(xì)胞系有4個(gè)柱子，從左至右均分別代表CXCR6、miR-200c-3p、miR-375和miR-203的表達(dá)。 CXCR6的相對(duì)表達(dá)量(黑色柱子)對(duì)應(yīng)左側(cè)縱坐標(biāo);其余miRNA的相對(duì)表達(dá)量(條紋柱子)對(duì)應(yīng) 右側(cè)縱坐標(biāo)。
[0021] 圖2自然狀態(tài)下正常乳腺上皮細(xì)胞及三種乳腺癌細(xì)胞的增殖、侵襲和迀移能力。 (A)正常乳腺上皮細(xì)胞及三種乳腺癌細(xì)胞自然情況下的增殖情況。***代表MDA-MB-231與其 他3個(gè)細(xì)胞系相比，P〈0.01; (B)侵襲實(shí)驗(yàn)：正常乳腺上皮細(xì)胞及三種乳腺癌細(xì)胞侵透 Matrigel膠并穿過(guò)微孔膜后，粘附于微孔膜上，采用Giemsa對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色，并于顯微鏡觀(guān) 察計(jì)數(shù)，記錄10個(gè)100倍鏡下細(xì)胞數(shù)，進(jìn)行平均數(shù)和方差計(jì)算。圖為典型照片(上)和平均計(jì) 數(shù)結(jié)果（下）：（C)迀移實(shí)驗(yàn):正常乳腺上皮細(xì)胞及三種乳腺癌細(xì)胞穿過(guò)微孔膜后，粘附于微 孔膜上，采用Giemsa對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色，并于顯微鏡觀(guān)察計(jì)數(shù)，記錄10個(gè)100倍鏡下細(xì)胞數(shù)，進(jìn) 行平均數(shù)和方差計(jì)算。圖為典型照片(上)和平均計(jì)數(shù)結(jié)果(下）。
[0022] 圖 3 在MDA-MB-231 細(xì)胞中過(guò)表達(dá)miR-200c-3p、miR-375及 shRNA 沉默 CXCR6 后 CXCR6 在蛋白水平和mRNA水平的表達(dá)情況。所有圖中，BC均為自然狀態(tài)下的231細(xì)胞，NC-mi均為 mimic陰性對(duì)照，200c_mi代表mimic轉(zhuǎn)染miR-200c_3p的實(shí)驗(yàn)組，375-mi代表mimic轉(zhuǎn)染miR-375的實(shí)驗(yàn)組，sh-NC為shRNA的陰性對(duì)照，sh-R6為shRNA干擾CXCR6表達(dá)的實(shí)驗(yàn)組，200c-mi、375-mi和sh-CXCR6均以BC為空白對(duì)照。（A)mimic轉(zhuǎn)染miR-200c-3p后，miR-200c-3p的表 達(dá)情況；（B)mimic轉(zhuǎn)染miR-375后，miR-375的表達(dá)情況；（C)mimic及shRNA轉(zhuǎn)染MDA-MB-231 細(xì)胞后CXCR6在蛋白水平(上)和mRNA水平(下）的表達(dá)情況。
[0023] 圖 4 過(guò)表達(dá) miR-200c-3p、miR-375 及 shRNA 沉默 CXCR6 后 MDA-MB-231 的增殖、侵襲和 迀移情況。BC為MDA-MB-231細(xì)胞空白對(duì)照組，NC-mi為mimi c陰性對(duì)照組，200c-mi為MDA-MB-231細(xì)胞中mimic過(guò)表達(dá)miR-200c的實(shí)驗(yàn)組，sh-NC為shRNA陰性對(duì)照組，sh-R6為MDA-MB-231 細(xì)胞中shRNA干擾CXCR6表達(dá)組。（A)MDA-MB-231細(xì)胞的增殖實(shí)驗(yàn)，*代表200c-mi與NC-mi及 BC相比，P〈0.001，#代表sh-R6于sh-NC及BC相比，P〈0.001; (B)侵襲實(shí)驗(yàn):上述各組細(xì)胞穿過(guò) 微孔膜后，粘附于微孔膜上，采用Giemsa對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色，并于顯微鏡觀(guān)察計(jì)數(shù)，記錄10個(gè) 100倍鏡下細(xì)胞數(shù)，進(jìn)行平均數(shù)和方差計(jì)算。圖為典型照片(上)和平均計(jì)數(shù)結(jié)果(下）；（C)迀 移實(shí)驗(yàn):上述各組細(xì)胞穿過(guò)微孔膜后，粘附于微孔膜上，采用Giemsa對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色，并于 顯微鏡觀(guān)察計(jì)數(shù)，記錄10個(gè)100倍鏡下細(xì)胞數(shù)，進(jìn)行平均數(shù)和方差計(jì)算。圖為典型照片（上） 和平均計(jì)數(shù)結(jié)果(下）。
[0024] 圖 5 在MDA-MB-231 細(xì)胞中過(guò)表達(dá) miR-200c-3p、miR-375 及 shRNA沉默 CXCR6 后 AKT/ mTOR通路中關(guān)鍵分子的表達(dá)情況。BC為自然狀態(tài)下的231細(xì)胞，NC-mi為mimic陰性對(duì)照組， 200c-mi代表mimic轉(zhuǎn)染miR-200c-3p的實(shí)驗(yàn)組，375-mi代表mimic轉(zhuǎn)染miR-375的實(shí)驗(yàn)組， sh-NC為轉(zhuǎn)染shRNA的陰性對(duì)照，sh-R6為shRNA干擾CXCR6表達(dá)的實(shí)驗(yàn)組。（A)上述各組細(xì)胞 中AKT/mTOR通路的關(guān)鍵分子Akt、p40S6K和4E-BP-1以及它們的磷酸化水平（p-Akt、p-P40S6K和p-4E-BP-l)的表達(dá)情況。
【具體實(shí)施方式】
[0025]實(shí)施例1 miR-200c-3p及其激動(dòng)劑與CXCR6表達(dá)以及乳腺癌的關(guān)系 [0026] 一、實(shí)驗(yàn)材料和檢測(cè)方法
[0027] 1、實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒：
[0032] 2、MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的增值能力實(shí)驗(yàn)步驟：
[0033] (1)將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的各組細(xì)胞消化，用含10%胎小牛血清得培養(yǎng)液配成單個(gè) 細(xì)胞懸液，每組細(xì)胞計(jì)數(shù)2.5xl03個(gè)，接種于96孔培養(yǎng)板，每組共設(shè)5個(gè)復(fù)孔，共接種7塊培養(yǎng) 板。
[0034] (2)每24小時(shí)測(cè)定各組細(xì)胞的吸光度值，共檢測(cè)7天。
[0035] (3)每次檢測(cè)前每孔細(xì)胞加入20μ1 MTT (5mg/ml用PBS配制，pH= 7 · 4)，在5 %⑶2、 37 °C恒溫、和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育4h。小心吸棄96孔板孔內(nèi)培養(yǎng)液，每孔加入200μ1 DMS0,于振蕩器上振蕩lOmin。將96孔板置于多功能酶標(biāo)儀中，選擇490nm波長(zhǎng)，在多功能酶 標(biāo)儀上測(cè)定各孔光吸收值，記錄結(jié)果，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲 線(xiàn)。
[0036] 3、Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的侵襲和迀移能力(實(shí)驗(yàn)步驟：
[0037] (l)Transwell小室制備：①進(jìn)行侵襲實(shí)驗(yàn)前，需用50mg/LMatrigel 1:8稀釋液包 被Transwell小室底部膜的上室面，4°C風(fēng)干。吸出培養(yǎng)板中殘余液體，每孔加入50ul含10g/ L BSA的無(wú)血清培養(yǎng)液，置于37°C，30min。②進(jìn)行迀移實(shí)驗(yàn)前無(wú)需包被Matrigel，其余同侵 襲實(shí)驗(yàn)。
[0038] (2)制備細(xì)胞懸液：制備細(xì)胞懸液前，進(jìn)行細(xì)胞換液，使各組細(xì)胞在無(wú)血清環(huán)境下 培養(yǎng)12 - 24h，進(jìn)一步去除血清的影響。消化細(xì)胞，終止消化后離心棄去培養(yǎng)液，用PBS液洗 1 - 2遍，用0.05%-0.2% BSA的無(wú)血清培養(yǎng)基重懸。計(jì)數(shù)細(xì)胞1 X 105個(gè)/孔(侵襲實(shí)驗(yàn)）或1_ 50 X 104-50 X 104個(gè)/孔(迀移實(shí)驗(yàn)）。
[0039] (3)接種細(xì)胞:取細(xì)胞懸液100 - 200μ1加入Transwell小室。24孔板作為下室，加入 500-600μ1含10%FBS的細(xì)胞培養(yǎng)液，將Transwell小室架于24孔板孔上，去除下層培養(yǎng)液和 小室間氣泡，使Transwe 11小室底面微孔膜與24孔板孔中培養(yǎng)液充分接觸。在5 % C02、37 °C 恒溫、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-48h。
[0040] (4)結(jié)果統(tǒng)計(jì)：用棉簽擦去基質(zhì)膠和上室內(nèi)的細(xì)胞，用滴管或移液器吸去PBS液，緩 緩沖洗Transwell小室底面，去除殘留的培養(yǎng)液，將Transwell小室瞭干備用。棄去24孔板中 培養(yǎng)液，加入Giemsa染色液，將Transwell小室置于其中，使小室底面微孔膜與24孔板孔中 Giemsa染色液充分接觸，染色15-30min。取出Transwell小室，用滴管或移液器吸去roS液， 緩緩沖洗小室底面l_3min，使之充分脫色。將小室晾干，置于顯微鏡下，在放大倍數(shù)為100倍 的光學(xué)顯微鏡下隨機(jī)取10個(gè)視野對(duì)貼附于聚碳酸酯微孔膜的細(xì)胞計(jì)數(shù)，取其均值代表侵襲 或迀移細(xì)胞數(shù)。
[0041 ] 二、實(shí)驗(yàn)方法
[0042] 1、選取正常乳腺上皮細(xì)胞系(MCF-10A)，較低侵襲性乳腺癌細(xì)胞系(MCF7、SK-BR-3)和高侵襲性乳腺癌細(xì)胞系(MDA-MB-231)，采用All-in One? miRNA qRT-PCR Detection Kit(美國(guó)Genecopoeia公司）（qualitative Real-Time PCR，qRT_PCR)進(jìn)行實(shí)時(shí)焚光定量PCR 檢測(cè)（按照試劑盒上的方法操作)上述4個(gè)細(xì)胞系自然狀態(tài)下CXCR6和miR-200c-3p、miR-375 和miR-203的表達(dá)情況。
[0043]使用MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)上述4個(gè)細(xì)胞系自然狀態(tài)下的增殖能力，使用Transwell實(shí)驗(yàn)檢 測(cè)上述4個(gè)乳腺癌細(xì)胞系自然狀態(tài)下的侵襲和迀移能力。
[0044] 2、選取CXCR6高表達(dá)、miR-200c-3p和miR-375低表達(dá)的高侵襲性乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。
[0045] 使用microRNA模擬物過(guò)表達(dá)MDA-MB-231細(xì)胞中miR-200c-3p和miR-375的表達(dá)(其 中，過(guò)表達(dá)miR-200c-3p的microRNA模擬物的核苷酸序列是UAAUACUGCCGGGUAAUGAUGGA)，用 qRT-PCR和Western Blot檢測(cè)CXCR6在mRNA和蛋白水平的表達(dá)情況。使用MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)表 達(dá)miR-200c-3p和miR-375后MDA-MB-231細(xì)胞的增殖能力，使用Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)表達(dá) miR-200c-3p和miR-375后MDA-MB-231細(xì)胞的侵襲和迀移能力。
[0046] 3、在MDA-MB-231細(xì)胞中，使用shRNA干擾技術(shù)特異性沉默CXCR6的表達(dá)，用qRT-PCR 檢測(cè)CXCR6在mRNA水平的表達(dá)情況，以及miR-200c-3p、miR-375和miR-203的表達(dá)情況。使用 Western Blot檢測(cè)沉默CXCR6表達(dá)后CXCR6蛋白水平的表達(dá)情況。使用MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)沉默 CXCR6后MDA-MB-231細(xì)胞的增殖能力，使用Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)沉默CXCR6后MDA-MB-231細(xì) 胞的侵襲和迀移能力。
[0047]三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
[0048] l、miR-200c 與 CXCR6 呈負(fù)相關(guān)
[0049] 如圖1所示，miR-200c、miR-375在低表達(dá)CXCR6的乳腺上皮細(xì)胞和乳腺癌細(xì)胞 (MCF-10A、MCF7和SK-BR-3)中表達(dá)較高，而在高表達(dá)CXCR6的乳腺癌細(xì)胞(MDA-MB-231)中表 達(dá)低，即 miR-200c-3p(miR-200c-3p 的核苷酸序列是 SEQ ID N0.1: UAAUACUGCCGGGUAAUGAUGGA)、miR-375與CXCR6在不同乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)的趨 勢(shì)。而miR-203與CXCR6表達(dá)的負(fù)相關(guān)趨勢(shì)不明顯。
[0050] 如圖2所示，miR-200c-3p、miR-375低表達(dá)，CXCR6高表達(dá)的MDA-MB-231細(xì)胞增殖 (圖2A)、侵襲（圖2B)和迀移（圖2C)能力最強(qiáng)，而其他miR-200c-3p、miR-375中/高表達(dá)， CXCR6低表達(dá)的乳腺癌細(xì)胞增殖、侵襲和迀移能力均較弱且它們之間無(wú)明顯差異。
[0051 ] 2、上調(diào)miR-200c可以降低抑制CXCR6的表達(dá)
[0052] 如圖3所示，在MDA-MB-231細(xì)胞中使用Mimic(核苷酸序列是 UAAUACUGCCGGGUAAUGAUGGA)過(guò)表達(dá) miR-200c 和使用RNAi 特異性干擾 CXCR6 均導(dǎo)致 CXCR6 的 mRNA水平和蛋白水平的表達(dá)下調(diào)，且過(guò)表達(dá)miR-200c-3p與shRNA沉默CXCR6的效果相似（圖 3C)〇
[0053] 而過(guò)表達(dá)miR-375不能影響CXCR6的表達(dá)。
[0054] 3、抑制CXCR6表達(dá)可以降低腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和迀移能力
[0055] 使用mimic過(guò)表達(dá)miR-200c-3p和使用shRNA沉默CXCR6均導(dǎo)致MDA-MB-231細(xì)胞的 增殖（圖4A)、侵襲（圖4B)和迀移能力（圖4C)下降，且兩者作用效果相似。而過(guò)表達(dá)miR-375 僅能抑制MDA-MB-231細(xì)胞的侵襲能力（圖4B)。
[0056] 如圖5所示，在MDA-MB-231細(xì)胞中使用Mimic過(guò)表達(dá)miR-200c和使用RNAi特異性干 擾CXCR6均導(dǎo)致CXCR6下游的Akt/mTOR通路關(guān)鍵分子p70S6K和4E-BP-1的激活(磷酸化水平） 受到抑制，Akt的表達(dá)亦受到抑制，且兩者作用效果相當(dāng)，而過(guò)表達(dá)miR-375進(jìn)輕度抑制Akt 和P70S6K的磷酸化水平。
[0057]四、實(shí)驗(yàn)結(jié)論：
[0058] 結(jié)果表明，miR-200c-3p或其激動(dòng)劑(核苷酸序列是UAAUACUGCCGGGUAAUGAUGGA的 mimic)在乳腺癌中可以抑制CXCR6的表達(dá)，進(jìn)而抑制CXCR6下游的Akt/mTOR通路的激活，從 而抑制乳腺癌的增殖、侵襲、迀移和體內(nèi)成瘤等生物學(xué)活性。
[0059]綜上，CXCR6的抑制劑可以有效抑制CXCR6的表達(dá)，抑制乳腺癌的增殖、侵襲、迀移 和體內(nèi)成瘤性等，降低乳腺癌的惡性程度，而miR-200c-3p或其激動(dòng)劑（核苷酸序列是 UAAUACUGCCGGGUAAUGAUGGA的mimi c)可以抑制CXCR6，可以作為CXCR6抑制劑，在乳腺癌的基 因治療方面將具有較強(qiáng)的潛力和廣闊的應(yīng)用前景。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. miR-200c-3p、miR-200c-3p模擬物或miR-200c-3p激動(dòng)劑在制備CXCR6抑制劑中的用 途。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于:所述CXCR6抑制劑是抗腫瘤藥物。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于:所述抗腫瘤藥物是抗乳腺癌、和抗腫瘤組 織中表達(dá)CXCR6同時(shí)低表達(dá)或無(wú)表達(dá)miR-200c的所有惡性腫瘤包括頭頸部腫瘤（如，鼻咽 癌、口腔癌、口咽癌、下咽癌、喉癌、甲狀腺癌、副鼻竇癌）、腦瘤、非小細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌、 食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、結(jié)直腸癌、宮頸癌、前列腺癌、卵巢上皮癌、惡性黑色素瘤、皮膚 癌、骨及軟組織肉瘤等惡性腫瘤的藥物。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于:所述miR-200c-3p的核苷酸序列如SEQ ID NO. 1所示。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于:所述miR-200c-3p模擬物的核苷酸序列如 SEQIDN0.2**。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于：所述miR-200c-3p激動(dòng)劑是Agomir或 EndoFectinTM-Plus 轉(zhuǎn)染試劑。 7. CXCR6抑制劑在制備抗腫瘤藥物中的用途;優(yōu)選地，所述藥物是抗乳腺癌的藥物。8. -種CXCR6抑制劑，其特征在于：它是以miR-200c-3p、miR-200c-3p模擬物或miR-200c-3p激動(dòng)劑為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或者輔助性成分制備而成的制劑。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的CXCR6抑制劑，其特征在于:所述miR-200c-3p的核苷酸序列如 SEQIDN0.1所示;所述miR-200c-3p模擬物的核苷酸序列如SEQIDN0.2所示。10. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的CXCR6抑制劑，其特征在于：所述miR-200c-3p激動(dòng)劑是 Agomir〇
【文檔編號(hào)】A61K31/7088GK105833274SQ201610145133
【公開(kāi)日】2016年8月10日
【申請(qǐng)日】2016年3月14日
【發(fā)明人】陳念永
【申請(qǐng)人】四川大學(xué)華西醫(yī)院