一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑及其制備方法。其目的是為解決生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體后的發(fā)酵液丟棄處理，浪費(fèi)資源、能源、人力、物力和財(cái)力，且存在對(duì)周圍水體及土壤污染的問(wèn)題，滿足市場(chǎng)對(duì)富含冬蟲夏草胞外多糖成分產(chǎn)品的需求。其技術(shù)方案：菌種采集、菌種培養(yǎng)、無(wú)菌分離、低溫培養(yǎng)、純化、菌種鑒定、原始菌種保藏、發(fā)酵性能測(cè)定、液體發(fā)酵、菌液分離、發(fā)酵液濃縮、提取精制冬蟲夏草胞外粗多糖；取發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖相關(guān)輔料，混合均勻后過(guò)篩；制軟材，制粒，干燥，整粒，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑。本發(fā)明產(chǎn)品具有抗腫瘤、抗氧化、增強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞的吞噬能力、提高血清IgG的含量、促進(jìn)體外淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化和抗輻射等作用。
【專利說(shuō)明】
一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑及其制備方法，具體來(lái)說(shuō)，是指對(duì)發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖進(jìn)行分離純化添加輔料制得的顆粒劑及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]發(fā)酵冬蟲夏草菌粉是經(jīng)菌種采集、菌種培養(yǎng)、無(wú)菌分離、低溫培養(yǎng)、純化、菌種鑒定、原始菌種保藏、發(fā)酵性能測(cè)定、液體發(fā)酵、菌液分離、菌絲體干燥等工藝制得。而發(fā)酵液常被作為廢液進(jìn)行處理，由于發(fā)酵液中含有大量微生物和其他功效成分，直接排放會(huì)對(duì)周圍水體及土壤發(fā)生污染，需要經(jīng)過(guò)高溫高壓滅菌處理才可以排放，不僅浪費(fèi)了大量資源、能源、人力、物力和財(cái)力，而且對(duì)周圍環(huán)境存在安全隱患。
[0003]試驗(yàn)表明，發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖具有抗腫瘤、抗氧化、增強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞的吞噬能力、提高血清中IgG的含量、促進(jìn)體外淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化和抗輻射等作用。而冬蟲夏草發(fā)酵液也含有多種功能性有效成分，如對(duì)病菌有抑制作用的多糖、蟲草菌素、多肽類、甘露醇、單糖、有機(jī)酸、多胺、磷脂酰膽堿、微量元素及VB12等成分。它們的生理活性極其豐富多彩，可抗菌、抗癌、抗血小板凝結(jié)、抗輻射、改善和提高記憶力、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫能力、鈣離子拮抗、對(duì)腦和心臟在常壓缺氧下有保護(hù)作用、鎮(zhèn)靜和鎮(zhèn)痛等。
[0004]目前，對(duì)于發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖的研究和生產(chǎn)屬于空白。
[0005]在此基礎(chǔ)上，本發(fā)明的實(shí)施，不僅提供了具有抗腫瘤、增強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞的吞噬能力、提高小鼠血清中IgG的含量、對(duì)體外淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化有促進(jìn)作用和抗輻射等作用的胞外多糖顆粒劑產(chǎn)品，最大限度的利用了冬蟲夏草發(fā)酵液，變廢為寶，還達(dá)到了節(jié)約資源、能源、人力、物力和財(cái)力，降低環(huán)境污染的目的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為解決人工發(fā)酵冬蟲夏草方式生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體后的發(fā)酵液丟棄處理，浪費(fèi)資源、能源、人力、物力和財(cái)力，且存在對(duì)周圍水體及土壤污染的問(wèn)題，并為滿足市場(chǎng)對(duì)富含胞外多糖成分產(chǎn)品的需求，本發(fā)明的目的在于提供一種利用人工發(fā)酵冬蟲夏草方式生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體后的發(fā)酵液生產(chǎn)冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑及其制備方法。該方法生產(chǎn)的冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑具有抗腫瘤、抗氧化、增強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞的吞噬能力、提高血清中IgG的含量、促進(jìn)體外淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化和抗輻射等作用。
[0007]為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供一種利用人工發(fā)酵冬蟲夏草方式生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體后的發(fā)酵液生產(chǎn)冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑，包括有:含量介于20%至55%重量百分比的發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖、含量介于20%至60%重量百分比的填充劑、含量介于5%至20%重量百分比的緩釋材料、含量介于I %至5 %重量百分比的粘合劑、含量介于0.5 %至I %重量百分比的崩解劑、以及含量介于0.1%至0.5%重量百分比的矯味劑。
[0008]所述的填充劑選自蔗糖或可溶性淀粉或乳糖或糊精或微晶纖維素中的一種或多種混合物；所述的緩釋材料選自羥丙甲基纖維素或乙基纖維素或醋酸纖維素或乙基纖維素水分散體中的一種或多種混合物；所述的粘合劑選自糊精或聚維酮或乙基纖維素或羥丙基纖維素中的一種或多種混合物；所述的崩解劑選自羧甲基淀粉鈉或微晶纖維素或交聯(lián)羧甲基纖維素鈉或低取代羥丙基纖維素中的一種或多種混合物；所述的矯味劑選自甜菊苷或阿斯巴坦中的一種或兩種混合物；所述的潤(rùn)濕劑選自蒸餾水或食用乙醇中的一種或兩種混合物。
[0009]優(yōu)選的，用于發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑包括有:
[0010]含量為44%重量百分比的發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖，80至100的篩粉；
[0011]含量為40%重量百分比的填充劑，所述填充劑是將含量介于20%至60%重量百分比的乳糖加上含量介于40%至80%重量百分比的可溶性淀粉混合均勻，粉碎過(guò)篩，80至100的篩粉；
[0012]含量為12%重量百分比的緩釋材料，所述緩釋材料是將含量介于10%至30%重量百分比的羥丙基甲基纖維素、含量介于20%至60%重量百分比的乙基纖維素、含量介于10%至70%重量百分比的醋酸纖維素混合均勻，粉碎過(guò)篩，80至100的篩粉；
[0013]含量為3%重量百分比的粘合劑，所述粘合劑是將聚維酮粉碎過(guò)篩，80至100的篩粉；
[0014]含量為0.7%重量百分比的崩解劑，所述崩解劑是將微晶纖維素粉碎過(guò)篩，80至100的篩粉；以及
[0015]含量為0.3%重量百分比的矯味劑,所述矯味劑是將甜菊苷粉碎過(guò)篩,80至100的篩粉。
[0016]本發(fā)明亦有關(guān)于發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖的提取方法。
[0017]本發(fā)明的發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖的提取方法，包括有:利用冬蟲夏草菌株，液體發(fā)酵生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體；發(fā)酵結(jié)束后，提取菌絲體并收集發(fā)酵液；發(fā)酵液用外加熱式三效濃縮器濃縮，各效真空度和蒸發(fā)溫度:一效-0.02?-0.04MPa, 70?90°C ;二效-0.04?-0.06MPa, 60?80°C;三效-0.06?-0.08MPa, 50?70°C，發(fā)酵液濃縮至相對(duì)密度1.20?1.35 ;將濃縮后的發(fā)酵液的pH調(diào)至6.5?8.5，常溫靜置I?4h，3000r/min?10000r/min離心5?20min去除沉淀；將75%?95%的食用乙醇以lL/min?10L/min的流速貼容器壁加入40r/min?500r/min的濃縮發(fā)酵液中，發(fā)酵液中乙醇濃度達(dá)到60%?75%時(shí)停止加入，停止攪拌，O?20°C靜置8?12h后同收上清液并收集沉淀，沉淀即為冬蟲夏草胞外粗多糖；對(duì)所得的粗多糖進(jìn)行提純，干燥，粉碎過(guò)篩，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖。
[0018]優(yōu)選的，用于制備發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖的方法包括有:
[0019]利用冬蟲夏草菌株，液體發(fā)酵生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體；
[0020]發(fā)酵結(jié)束后，提取菌絲體并收集發(fā)酵液；發(fā)酵液用外加熱式三效濃縮器濃縮，各效真空度和蒸發(fā)溫度:一效-0.025MPa, 80°C ;二效-0.05MPa, 70°C ;三效-0.07MPa, 60°C，發(fā)酵液濃縮至相對(duì)密度1.28 ;
[0021]將濃縮后的發(fā)酵液的pH調(diào)至7.0，常溫靜置1.5h,5000r/min離心1min去除沉淀；
[0022]將95%的食用乙醇以6L/min的流速貼容器壁加入100r/min的去除沉淀后的濃縮發(fā)酵液中，發(fā)酵液中乙醇濃度達(dá)到60%時(shí)停止加入，停止攪拌，4°C靜置8h后回收上清液并收集沉淀，沉淀即為冬蟲夏草胞外粗多糖；
[0023]對(duì)所得的粗多糖進(jìn)行提純，干燥，粉碎過(guò)篩，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖。
[0024]本發(fā)明還有關(guān)于發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑的制備方法。
[0025]本發(fā)明的發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑的制備方法，包括有:取發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖，填充劑，緩釋材料，崩解劑，矯味劑，混合均勻后過(guò)篩，取80?100目篩粉；將粘合劑加入含量為上述組分總重量5?25%的潤(rùn)濕劑中，所述潤(rùn)濕劑是用蒸餾水稀釋至濃度為60%?80%的食用酒精；潤(rùn)濕劑與篩粉混合制軟材，制粒，30?80°C干燥2?12小時(shí)，過(guò)篩，取20?40目篩粉，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑。
[0026]優(yōu)選的，用于制備發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑的方法包括有:
[0027]取發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖，填充劑，緩釋材料，崩解劑，矯味劑，混合均勻后過(guò)篩，取100目篩粉；
[0028]將粘合劑加入含量發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖、填充劑、緩釋材料、崩解劑、矯味劑和粘合劑總重量20%質(zhì)量百分比的潤(rùn)濕劑中，所述潤(rùn)濕劑是用蒸餾水稀釋至濃度為60%的食用酒精；
[0029]潤(rùn)濕劑與篩粉混合制軟材，制粒；
[0030]60°C干燥8小時(shí)，過(guò)篩，取30目篩粉，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑。
[0031]由本發(fā)明可以利用適合商業(yè)化生產(chǎn)的發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑，進(jìn)而提供發(fā)酵冬蟲夏草深加工產(chǎn)品滿足市場(chǎng)需求，達(dá)到本發(fā)明的目的。
【具體實(shí)施方式】
[0032]以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。
[0033](一 )冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑
[0034]實(shí)施例1
[0035]10.0Okg發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑包括有:
[0036]5.0Okg發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖，100的篩粉；
[0037]2.60kg的填充劑，所述填充劑是將0.52kg重量百分比的乳糖加上2.08kg的可溶性淀粉混合均勻，粉碎過(guò)篩，100的篩粉；
[0038]2.0Okg的緩釋材料，所述緩釋材料是將0.20kg的羥丙基甲基纖維素、0.40kg的乙基纖維素、1.40kg的醋酸纖維素混合均勻，粉碎過(guò)篩，100的篩粉；
[0039]0.30kg的粘合劑，所述粘合劑是將0.30kg的聚維酮粉碎過(guò)篩，100的篩粉:
[0040]0.075kg的崩解劑，所述崩解劑是將0.075kg的微晶纖維素粉碎過(guò)篩，100的篩粉；以及
[0041]0.025kg的矯味劑，所述矯味劑是將0.025kg的甜菊苷粉碎過(guò)篩，100的篩粉。
[0042]所述冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑具有21.58IU/g的超氧化物歧化酶的活性。
[0043]實(shí)施例2
[0044]10.0Okg發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑包括有:
[0045]2.0Okg發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖，100的篩粉；
[0046]6.0Okg的填充劑，所述填充劑是將1.20kg重量百分比的乳糖加上4.80kg的可溶性淀粉混合均勻，粉碎過(guò)篩，100的篩粉；
[0047]1.34kg的緩釋材料，所述緩釋材料是將0.134kg的羥丙基甲基纖維素、0.268kg的乙基纖維素、0.938kg的醋酸纖維素混合均勻，粉碎過(guò)篩，100的篩粉；
[0048]0.1Okg的粘合劑，所述粘合劑是將0.30kg的聚維酮粉碎過(guò)篩，100的篩粉；
[0049]0.05kg的崩解劑，所述崩解劑是將0.05kg的微晶纖維素粉碎過(guò)篩，100的篩粉；以及
[0050]0.0lkg的矯味劑，所述矯味劑是將0.0lkg的甜菊苷粉碎過(guò)篩，100的篩粉。
[0051]所述冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑具有5.62IU/g的超氧化物歧化酶的活性。
[0052]( 二 )用于制備發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖的方法
[0053]實(shí)施例3
[0054]利用冬蟲夏草菌株，液體發(fā)酵生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體；
[0055]發(fā)酵結(jié)束后，提取菌絲體并收集發(fā)酵液；發(fā)酵液用外加熱式三效濃縮器濃縮，各效真空度和蒸發(fā)溫度:一效-0.04MPa,70°C ;二效-0.06MPa,60°C:三效-0.08MPa，50°C，發(fā)酵液濃縮至相對(duì)密度1.22 ;
[0056]將50L濃縮后的發(fā)酵液的pH調(diào)至6.5，常溫靜置1.5h，3000r/min離心20min去除沉淀；
[0057]將75%的食用乙醇以lL/min的流速貼容器壁加入40 r/min的去除沉淀后的濃縮發(fā)酵液中，發(fā)酵液中乙醇濃度達(dá)到60%時(shí)停止加入，停止攪拌，(TC靜置8h后回收上清液并收集沉淀，沉淀即為冬蟲夏草胞外粗多糖，得粗多糖3.62kg ；
[0058]對(duì)所得的粗多糖進(jìn)行提純，干燥，粉碎過(guò)篩，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖。
[0059]實(shí)施例4
[0060]利用冬蟲夏草菌株，液體發(fā)酵生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體；
[0061]發(fā)酵結(jié)束后，提取菌絲體并收集發(fā)酵液；發(fā)酵液用外加熱式三效濃縮器濃縮，各效真空度和蒸發(fā)溫度:一效-0.02MPa,90°C ;二效-0.04MPa,80°C ;三效-0.06MPa，80°C，發(fā)酵液濃縮至相對(duì)密度1.31 ;
[0062]將50L濃縮后的發(fā)酵液的pH調(diào)至8.5，常溫靜置4h，10000r/min離心5min去除沉淀；
[0063]將95%的食用乙醇以10L/min的流速貼容器壁加入500r/min的去除沉淀后的濃縮發(fā)酵液中，發(fā)酵液中乙醇濃度達(dá)到75%時(shí)停止加入，停止攪拌，20°C靜置12h后回收上清液并收集沉淀，沉淀即為冬蟲夏草胞外粗多糖，得粗多糖4.28kg ；
[0064]對(duì)所得的粗多糖進(jìn)行提純，干燥，粉碎過(guò)篩，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖。
[0065](三)用于制備發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑的方法
[0066]實(shí)施例5
[0067]取發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖，填充劑，緩釋材料，崩解劑，矯味劑，混合均勻后過(guò)篩，取80目篩粉；
[0068]將粘合劑加入含量發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖、填充劑、緩釋材料、崩解劑、矯味劑和粘合劑總重量25%質(zhì)量百分比的潤(rùn)濕劑中，所述潤(rùn)濕劑是用蒸餾水稀釋至濃度為60%的食用酒精；
[0069]潤(rùn)濕劑與篩粉混合制軟材，制粒；
[0070]60°C干燥8小時(shí)，過(guò)篩，取20目篩粉，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑。
[0071]實(shí)施例6
[0072]取發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖，填充劑，緩釋材料，崩解劑，矯味劑，混合均勻后過(guò)篩，取100目篩粉；
[0073]將粘合劑加入含量發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖、填充劑、緩釋材料、崩解劑、矯味劑和粘合劑總重量5%質(zhì)量百分比的潤(rùn)濕劑中，所述潤(rùn)濕劑是用蒸餾水稀釋至濃度為80%的食用酒精；
[0074]潤(rùn)濕劑與篩粉混合制軟材，制粒；
[0075]60°C干燥8小時(shí)，過(guò)篩，取40目篩粉，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑。
[0076]由上述可知本發(fā)明的具體制造及實(shí)施方法，確實(shí)可以解決目前人工發(fā)酵冬蟲夏草方式生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體后的發(fā)酵液處理方法的弊端。由于發(fā)酵液中含有大量微生物，直接排放會(huì)對(duì)周圍水體及土壤發(fā)生污染，需要經(jīng)過(guò)高溫高壓滅菌處理才可以排放，不僅浪費(fèi)了大量資源、能源、人力、物力和財(cái)力，而且對(duì)周圍環(huán)境存在安全隱患。
[0077]發(fā)酵冬蟲夏草采集不易和生產(chǎn)困難之問(wèn)題，并滿足市場(chǎng)的需求，從而能夠達(dá)成本發(fā)明的目的。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑，其特征在于其所采用的活性成分為發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖，輔以其他藥用輔料，其原料組分如下，各組重量百分比為:發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖20%?55%、填充劑20%?60%、緩釋材料5%?20%、粘合劑1%?5%、崩解劑0.5% ?I %、矯味劑 0.1%?0.5%。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑，其特征在于:所述的填充劑選自蔗糖或可溶性淀粉或乳糖或糊精或微晶纖維素中的一種或多種混合物。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑，其特征在于:所述的緩釋材料選自羥丙基甲基纖維素或乙基纖維素或醋酸纖維素或乙基纖維素水分散體中的一種或多種混合物。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑，其特征在于:所述的粘合劑選自糊精或聚維酮或乙基纖維素或羥丙基纖維素中的一種或多種混合物。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑，其特征在于:所述的崩解劑選自羧甲基淀粉鈉或微晶纖維素或交聯(lián)羧甲基纖維素鈉或低取代羥丙基纖維素中的一種或多種混合物。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑，其特征在于:所述的矯味劑選自甜菊苷或阿斯巴甜中的一種或兩種混合物。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑，其特征在于:所述的發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖通過(guò)以下步驟制得: (1)利用冬蟲夏草菌株，液體發(fā)酵生產(chǎn)菌絲體； (2)發(fā)酵結(jié)束后，提取菌絲體并收集發(fā)酵液； ⑶發(fā)酵液用外加熱式三效濃縮罐濃縮，各效真空度和蒸發(fā)溫度:一效-0.02 ?-0.04MPa，70 ?90 °C ； 二 效-0.04 ?-0.06MPa，60 ?80 °C ；三效-0.06?-0.08MPa, 50?70°C，發(fā)酵液濃縮至相對(duì)密度1.20?L 35 ; (4)將75%?95 %的食用乙醇以lL/min?10L/min的流速貼壁加入40r/min?200r/min的濃縮發(fā)酵液中，發(fā)酵液中乙醇濃度達(dá)到60%?75%時(shí)停止加入，停止攪拌，O?20°C靜置8?12h后收集沉淀得到粗多糖； (5)對(duì)粗多糖進(jìn)行提純，干燥，粉碎后即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖。8.根據(jù)權(quán)利要求1?6所述的一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑，其特征在于:其制備方法如下:取發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖，填充劑，緩釋材料，崩解劑，矯味劑，混合均勻后過(guò)100目篩，潤(rùn)濕劑中加入粘合劑，與篩粉混合制軟材，制粒，30?80°C干燥2?12小時(shí)，過(guò)篩，取20?40目篩粉，即得發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑，其特征在于:所述的潤(rùn)濕劑選自蒸餾水或食用乙醇中的一種或兩種混合物。10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種發(fā)酵冬蟲夏草胞外多糖顆粒劑，其特征在于:所述的潤(rùn)濕劑的用量為5%?25% (重量)。
【文檔編號(hào)】A61P39/06GK105878188SQ201410618258
【公開日】2016年8月24日
【申請(qǐng)日】2014年11月6日
【發(fā)明人】王玉花, 王輝
【申請(qǐng)人】王輝