一種益生菌發(fā)酵八珍湯組合物及其制備方法和應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種益生菌發(fā)酵八珍湯組合物，將中藥人參、白術(shù)、茯苓、當(dāng)歸、白芍、川芎、地黃、甘草經(jīng)烘干，粉碎，水浸泡，調(diào)整pH值，淀粉酶酶解，滅菌，接種多株益生菌，發(fā)酵，提取，濃縮，干燥或不干燥，滅菌制成。本發(fā)明進(jìn)行了體外益生菌生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)和對(duì)低白小鼠造血功能的影響實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示：本發(fā)明的益生菌發(fā)酵八珍湯組合物在體外對(duì)人腸道中的主要益生菌具有明顯的生長(zhǎng)促進(jìn)作用；能夠提高低白小鼠白細(xì)胞的水平，特別是提高中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的數(shù)量和比例，在解毒的同時(shí)，提高了小鼠個(gè)體的免疫能力。
【專利說(shuō)明】
-種益生菌發(fā)酵八珍湯組合物及其制備方法和應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種益生菌發(fā)酵中藥組合物及其制備方法和應(yīng)用，尤其設(shè)及一種益生 菌發(fā)酵八珍湯組合物及其制備方法和應(yīng)用，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 八珍湯源自《正體類要》，作為中醫(yī)古方氣血雙補(bǔ)的經(jīng)典方，由人參、地黃、白術(shù)、巧 等、當(dāng)歸、白巧、川號(hào)、甘草組成，具有益氣補(bǔ)血之功效。主治氣血兩虛證。八珍湯是四君子湯 和四物湯的復(fù)方，方中人參與地黃相配，益氣養(yǎng)血，共為君藥；白術(shù)、巧等健脾滲濕，協(xié)人參 益氣健脾，當(dāng)歸、白巧養(yǎng)血和營(yíng)，助熟地補(bǔ)益陰血，均為臣藥;佐W川號(hào)活血行氣，使之補(bǔ)氣 而不滯;甘草益氣和中，調(diào)和諸藥，為使藥。
[0003] 祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為，氣為血帥，血為氣母，精生血，精血同源，互相資生，互為依存。四君 子湯健脾益氣、四物湯補(bǔ)血養(yǎng)血，八珍湯匯兩方之功，奏兩方之效。故八珍湯常用于病后失 調(diào)、久病失治、失血過(guò)多等慢性消耗性疾病。
[0004] 癌癥是現(xiàn)在最常見的慢性消耗性疾病，并且手術(shù)、放療、化療是臨床常用的治療癌 癥的方法，由于多程治療后患者耗氣傷血，屬中醫(yī)虛證。
[0005] 放療、化療藥物在應(yīng)用的過(guò)程中有較強(qiáng)的毒副作用，它不但對(duì)癌細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞 起到了殺傷和抑制作用，對(duì)機(jī)體的正常細(xì)胞，特別是造血系統(tǒng)的祖細(xì)胞產(chǎn)生了抑制，存在著 免疫及造血的雙重抑制，從而在個(gè)體水平上表現(xiàn)為骨髓抑制現(xiàn)象，外周血白細(xì)胞、血小板和 中性粒細(xì)胞數(shù)減少。并且常伴有營(yíng)養(yǎng)不良和免疫功能低下，免疫功能低下可增加感染和腫 瘤復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)性。
[0006] 實(shí)驗(yàn)表明：八珍湯能改善白細(xì)胞減少癥，改善嚴(yán)重的骨髓抑制，并且可降低中性粒 細(xì)胞減少的發(fā)生率，提高機(jī)體免疫，改善中醫(yī)證候及生活質(zhì)量。但是，中藥中的許多成分需 要在腸道菌群的作用下才能轉(zhuǎn)化為有效成分，因此腸道環(huán)境的差異，導(dǎo)致個(gè)體性差異明顯。 尤其是癌癥病人，腸道環(huán)境狀況不佳。
[0007] 同時(shí)，癌癥術(shù)后早期腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)優(yōu)于腸外營(yíng)養(yǎng)，可調(diào)節(jié)機(jī)體的代謝和免疫功能，糾正 手術(shù)創(chuàng)傷所致的免疫抑制，改善預(yù)后。但常規(guī)營(yíng)養(yǎng)支持對(duì)于提高癌術(shù)后機(jī)體免疫力，糾正營(yíng) 養(yǎng)不良等方面的作用存在局限性，近年提出了 "腸內(nèi)免疫營(yíng)養(yǎng)"，其目的是改善營(yíng)養(yǎng)狀況，調(diào) 節(jié)免疫功能和炎癥反應(yīng)，減少術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生。運(yùn)方面的研究目前集中于GH、谷氨酷胺、 精氨酸、ω -3脂肪酸、核巧和核巧酸、中鏈甘油Ξ醋等。但由于價(jià)格昂貴、副作用較多等原 因，在臨床上應(yīng)用不多。

【發(fā)明內(nèi)容】

[000引為了克服上述不足，本發(fā)明提供了一種益生菌發(fā)酵八珍湯組合物。本發(fā)明所述的 益生菌發(fā)酵八珍湯組合物，具體設(shè)及中藥人參、白術(shù)、巧等、當(dāng)歸、白巧、川號(hào)、地黃、甘草，經(jīng) 烘干，粉碎，水浸泡，調(diào)整抑值，酶解，滅菌，接種多株益生菌，發(fā)酵，提取，濃縮，干燥或不干 燥，滅菌，制得發(fā)酵組合物。
[0009] 所述中藥在益生菌發(fā)酵八珍湯組合物中的重量份為:人參1~10份；白術(shù)4~20份； 巧等4~20份;當(dāng)歸4~30份；白巧2~20份;川號(hào)2~20份;地黃4~30份、甘草1~10份。
[0010] 優(yōu)選的，各中藥成分在益生菌發(fā)酵八珍湯組合物中的重量份為:人參5份；白術(shù)10 份;巧等10份;當(dāng)歸15份；白巧10份;川號(hào)8份;地黃15份、甘草5份。
[00川所述的酶為高溫淀粉酶，添加量為中藥材重量的0.1~1.0% 所述的益生菌為雙歧桿菌和乳桿菌。
[0012] 雙歧桿菌選自兩歧雙歧桿菌、短雙歧桿菌、青春雙歧桿菌和嬰兒雙歧桿菌;所述的 乳桿菌選自嗜酸乳桿菌、德氏乳桿菌、植物乳桿菌、干酪乳桿菌和鼠李糖乳桿菌。
[0013] 菌種來(lái)源于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中屯、（CCTCC)(中國(guó)，武漢）或中國(guó)普通微生物菌 種保藏管理中屯、（CGMCC)(中國(guó)，北京）或者從正常人的糞便或腸粘膜組織中分離得到運(yùn)些 細(xì)困困株。
[0014] 本發(fā)明的益生菌發(fā)酵八珍湯組合物的制備方法，包括W下步驟： a. 取中藥復(fù)方中的人參、白術(shù)、巧等、當(dāng)歸、白巧、川號(hào)、地黃、甘草，50-8(TC烘干，粉 碎，加水5~10倍量，水浸泡0.5~1.0小時(shí)，調(diào)整pH6.0 ± 0.2，加熱至80~90 °C，加入高溫淀 粉酶，酶解至使艦試液不變藍(lán)色； b. 將步驟a得到的中藥酶解物，調(diào)整抑7.0±0.5,并于110~121°C下滅菌30~60分鐘， 溫度降至37°C時(shí)，同時(shí)接種預(yù)培養(yǎng)的體積百分比0.5~2.0%的一種或兩種雙歧桿菌的菌液 和預(yù)培養(yǎng)的體積百分比各0.2~1.0%的兩種或者Ξ種乳桿菌的菌液;常規(guī)發(fā)酵16~48小時(shí)， 當(dāng)抑降至4.0W下時(shí)結(jié)束發(fā)酵； C.將步驟b得到的發(fā)酵物分離藥渣和發(fā)酵液，藥渣再加乙醇或水5~10倍量，加熱至60 ~80°C，保持0.5~2.0小時(shí)，濾過(guò)，提取液回收乙醇或濃縮，合并濃縮發(fā)酵液，定容或噴霧干 燥，滅菌，即得到益生菌發(fā)酵八珍湯組合物。
[0015] 本發(fā)明中使用的雙歧桿菌和乳桿菌屬于乳酸菌，為常見益生菌菌株，主要是基于 它們?cè)谌梭w腸道內(nèi)分布的總體廣泛性，W及它們生理學(xué)活性的互補(bǔ)性。乳酸菌發(fā)酵可直接 產(chǎn)生有機(jī)酸、氨基酸等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并且乳酸菌參與多種維生素代謝，能產(chǎn)生維生素 B、葉酸、 煙酸、生物素等供機(jī)體所需。并且，中藥和腸道菌群的相互作用對(duì)中藥藥效的發(fā)揮非常重 要。
[0016] 八珍湯配方中許多中藥成分都是借助腸道細(xì)菌的作用轉(zhuǎn)化為有效成分而達(dá)到治 療作用，尤其是具有水溶性糖部分的葡萄糖巧成分。運(yùn)類化合物通常在腸道內(nèi)難W吸收，生 物利用度低。其原形物藥理活性較小，被認(rèn)為是"天然前體藥物"，經(jīng)腸菌代謝后被水解生成 巧元而發(fā)揮其藥理作用。例如：天然人參中含有人參皂巧肺1，肺2，1^，1^1和20(5)-原人參 二醇等成分。人參皂巧Rbl在腸菌作用下其代謝途徑為人參皂巧Rbl 一人參皂巧Rd 一人參皂 巧F2一 Compound K一20(s)-原人參二醇。人參皂巧Rgl在人體內(nèi)代謝途徑為:人參皂巧Rgl ^人參皂巧化原人參Ξ醇。人參皂巧Re的人體腸內(nèi)菌代謝次生產(chǎn)物有6個(gè)，分別為人參 皂巧Rgl、人參皂巧Rg2、人參皂巧化1、20,25-環(huán)-人參Ξ醇、20(1〇,25-徑基人參皂巧Rg2、 原人參Ξ醇?；?可作用于T細(xì)胞和腹腔巨隧細(xì)胞而產(chǎn)生免疫調(diào)節(jié)作用。原人參二醇類皂巧 成分的腸菌主要代謝產(chǎn)物Compound K對(duì)人組織瘤細(xì)胞(THP-1)分泌與炎癥細(xì)胞因子（化-I 曰，TNF-a，化-8)產(chǎn)生影響，顯示抗癌活性。甘草酸(gly巧rrhizin)在腸道內(nèi)難W吸收，與腸 道菌群作用產(chǎn)生18a-甘草次酸的中間產(chǎn)物，最終代謝為甘草次酸（glycyrrhetie acid)而 被機(jī)體吸收產(chǎn)生藥理活性。甘草巧、異甘草巧也轉(zhuǎn)化為甘草素和異甘草素產(chǎn)生藥理活性。 巧藥巧(paeoniflorin)為雙環(huán)單祗巧類，在與腸道菌群作用下產(chǎn)生4個(gè)代謝產(chǎn)物巧藥巧代 謝素 I，Π ，虹，IV。巧藥巧口服吸收率極低，經(jīng)口服攝入的巧藥巧需在腸道細(xì)菌分泌的β-葡 萄糖巧酶和β-葡萄糖醋酶的催化下轉(zhuǎn)化成其相應(yīng)的巧藥鹽酸硫胺巧元才能發(fā)揮藥理作用， 在化C0-2細(xì)胞上的轉(zhuǎn)運(yùn)研究中發(fā)現(xiàn)巧藥巧的生物利用度比其巧元低40倍。
[0017] 中醫(yī)認(rèn)為"脾胃為后天之本"，要恢復(fù)身體機(jī)能，必須在進(jìn)補(bǔ)的同時(shí)，適當(dāng)強(qiáng)化人體 的消化吸收功能，八珍湯與益生菌共同發(fā)酵后能增加藥物成分的轉(zhuǎn)化和吸收。并且發(fā)酵過(guò) 程中產(chǎn)生大量小分子短鏈脂肪酸，不但可W刺激腸道蠕動(dòng)，并且利于有益細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖， 從而可W改善胃腸道內(nèi)環(huán)境，增強(qiáng)藥物療效。發(fā)酵組合物進(jìn)入腸道可刺激消化道壁引發(fā)免 疫激活產(chǎn)生生物效應(yīng);刺激腸內(nèi)微生態(tài)引發(fā)生物活性物質(zhì)分泌產(chǎn)生生物效應(yīng);促進(jìn)腸內(nèi)微 生態(tài)新的平衡系統(tǒng)建立。
[0018] 本發(fā)明所述的益生菌發(fā)酵八珍湯組合物可用于制備預(yù)防或治療癌癥患者術(shù)后或 放化療過(guò)程中白細(xì)胞降低的保健食品、藥品。
[0019] 可按照制藥工業(yè)中已知的方法，將本發(fā)明的發(fā)酵組合物與一種或多種醫(yī)藥上可接 受的載體或賦形劑或稀釋劑按適當(dāng)?shù)谋壤旌希匆阎椒ǔ笾瞥珊景l(fā)明發(fā)酵組 合物的制劑。
[0020] 根據(jù)給藥途徑的不同，可按照已知的常規(guī)方法，將本發(fā)明的發(fā)酵八珍湯組合物配 制成適于口服給藥的合劑、乳劑、散劑、顆粒劑、片劑、丸劑、膠囊劑。
[0021] 為了制備適于口服給藥的合劑、乳劑或片劑、散劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑，可W使 用薦糖、乳糖、半乳糖等二糖，或甘露醇、山梨醇等六碳多徑基醇，W及糊精、β-環(huán)糊精、淀 粉、明膠、脂質(zhì)、微晶纖維素等作為載體或賦形劑。必要時(shí)，也可在運(yùn)些口服制劑中加入緩沖 鹽、著色劑、甜味劑、香料、分散劑及表面活性劑。
[0022] 根據(jù)使用目的的不同，本發(fā)明的發(fā)酵八珍湯組合物制劑除含有作為基本活性成分 的發(fā)酵組合物外，還可含有一種或多種具有相同、相似或不同生物學(xué)活性，并對(duì)基本活性成 分表現(xiàn)有輔助或協(xié)同作用，但彼此又互不括抗的天然或合成的其他藥物成份或其混合物。
[0023] 可將本發(fā)明的發(fā)酵組合物直接制成保健食品或藥物，適于癌癥患者術(shù)后使用或放 化療期間預(yù)防或治療白細(xì)胞減少。
[0024] -般說(shuō)來(lái)，本發(fā)明的發(fā)酵組合物的口服給藥劑量可根據(jù)待治療的病癥或病理狀態(tài) 的性質(zhì)、嚴(yán)重程度、病人的年齡、體重、一般健康狀態(tài)，W及病人對(duì)所用藥物的敏感性、耐受 性和給藥方式等因素，按照個(gè)體化的原則由臨床醫(yī)生確定。
[0025] 有益效果:為檢測(cè)本發(fā)明的益生菌發(fā)酵八珍湯組合物具有調(diào)節(jié)有益菌群的作用， 同時(shí)能改善白細(xì)胞減少癥，本發(fā)明分別進(jìn)行了體外益生菌生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)和對(duì)低白小鼠造血功能 的影響實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示:本發(fā)明的益生菌發(fā)酵八珍湯組合物在體外對(duì)人腸道中的主要益生 菌具有明顯的生長(zhǎng)促進(jìn)作用；并且具有明顯提高低白小鼠白細(xì)胞的功能，特別是提高中性 粒細(xì)胞和淋己細(xì)胞數(shù)量和比例，作用優(yōu)于未發(fā)酵八珍湯。
【具體實(shí)施方式】
[0026] 實(shí)施例1:益生菌發(fā)酵八珍湯組合物a的制備 取中藥人參50g;白術(shù)lOOg;巧等lOOg;當(dāng)歸150g;白巧lOOg;川號(hào)80g;地黃150g、甘草 50g。70°C烘干，粉碎過(guò)20目，加水5倍量，水浸泡1. ο小時(shí)，調(diào)整p冊(cè).ο，加熱至80°C，加入1.2g 高溫淀粉酶，酶解0.5小時(shí)，至使艦試液不變藍(lán)色； 將中藥酶解物，調(diào)整PH7.0,并于115°C下滅菌50分鐘，溫度降至37°C時(shí)，同時(shí)接種預(yù)培 養(yǎng)的體積百分比1.0%的短雙歧桿菌(CGMCC 1.2213)的菌液和體積百分比各0.5%的嗜酸乳 桿菌(〔61〇： 1.1854)、植物乳桿菌(〔61〇：1.19)及德氏乳桿菌(〔61〇： 1.1480)的菌液，37 °C發(fā)酵24小時(shí)檢測(cè)pH值，當(dāng)抑值降至4.0 W下時(shí)結(jié)束發(fā)酵;分離藥渣和發(fā)酵液，藥渣再加水8 倍量，加熱至80°C，保持1.0小時(shí)，濾過(guò)，濾液合并發(fā)酵液，減壓濃縮，定容至1000ml;滅菌，即 得到益生菌發(fā)酵八珍湯組合物。
[0027] 實(shí)施例2:益生菌發(fā)酵八珍湯組合物b的制備 取中藥人參lOOOg;白術(shù)800g;巧等800g;當(dāng)歸2000g;白巧2000g;川號(hào)400g;地黃lOOOg、 甘草600gd80°C烘干，粉碎過(guò)40目，加水10倍量，水浸泡1.0小時(shí)，調(diào)整P冊(cè).0，加熱至80°C，加 入15g高溫淀粉酶，酶解1.0小時(shí)，至使艦試液不變藍(lán)色； 將中藥酶解物，調(diào)整PH7.2,并于12rC下滅菌30分鐘，溫度降至37°C時(shí)，同時(shí)接種預(yù)培 養(yǎng)的體積百分比1.0%的兩歧雙歧桿菌(CGMCC 1.5090)的菌液和體積百分比各0.5%的干酪 乳桿菌(〔61〇： 1.3206)、植物乳桿菌(〔61〇：1.19)及鼠李糖乳桿菌(〔61〇：1.26)的菌液， 37°C發(fā)酵40小時(shí)檢測(cè)pH值，當(dāng)抑值降至4.0W下時(shí)結(jié)束發(fā)酵，分離藥渣和發(fā)酵液，藥渣再加 80%乙醇8倍量，加熱至80°C，保持2.0小時(shí)，濾過(guò)，濾液回收乙醇，添加 β-環(huán)糊精包合，合并發(fā) 酵液，濃縮至5000ml，噴霧干燥，福射滅菌，即得到益生菌發(fā)酵八珍湯組合物b。
[0028] 實(shí)驗(yàn)例1:本發(fā)明的益生菌發(fā)酵八珍湯組合物對(duì)腸道益生菌的體外生長(zhǎng)促進(jìn)作用 本實(shí)施例旨在舉例說(shuō)明按本發(fā)明方法制備的發(fā)酵八珍湯組合物對(duì)選自長(zhǎng)雙歧桿菌 (B. longum)、兩歧雙歧桿菌(B.bif idum)和嗜酸乳桿菌化.acido地ilus)等人腸道益生菌的 體外生長(zhǎng)促進(jìn)作用。
[0029] 使用長(zhǎng)雙歧桿菌、兩歧雙歧桿菌和嗜酸乳桿菌作為實(shí)驗(yàn)菌，實(shí)驗(yàn)菌經(jīng)活化后按每 管0.1ml(接種后培養(yǎng)基細(xì)菌濃度為106個(gè)/ml)分別接種于（1)常規(guī)PTYG培養(yǎng)基(每升培養(yǎng)基 含有膜蛋白腺5g、大豆蛋白腺5g、酵母提取物lOg、葡萄糖lOg、鹽溶液40ml、半脫氨酸鹽酸鹽 0.5g、吐溫80 0.1ml、0.1%刃天青1ml) ; (2)本發(fā)明的實(shí)施例1制備的發(fā)酵八珍湯組合物a稀 釋2倍;本發(fā)明的實(shí)施例2制備的發(fā)酵八珍湯組合物b水溶解稀釋10倍(分別使用氨氧化鋼調(diào) pH值至7并滅菌）。接種后將試管置于37Γ下恒溫培養(yǎng)24小時(shí)。培養(yǎng)后收集培養(yǎng)液并稀釋，然 后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。結(jié)果見表1: 表1發(fā)酵八珍湯組合物對(duì)雙歧桿菌及嗜酸乳桿菌生長(zhǎng)的影響
從表1中所示的數(shù)據(jù)可W看出，將雙歧桿菌和嗜酸乳桿菌等已知的益生菌，接種于稀釋 的本發(fā)明發(fā)酵八珍湯組合物中并培養(yǎng)24小時(shí)后，被接種的細(xì)菌數(shù)均增殖到108c化/ml W上。
[0030] 由W上結(jié)果可W看出，按本發(fā)明方法制備的發(fā)酵組合物對(duì)人體腸道中的主要益生 菌具有明顯的生長(zhǎng)促進(jìn)作用。
[0031] 實(shí)驗(yàn)例2:比較八珍湯發(fā)酵前后對(duì)低白小鼠白細(xì)胞的影響 本實(shí)施例旨在利用注射環(huán)憐酷胺使小鼠造血功能受到抑制，造成血虛模型，觀察八珍 湯發(fā)酵前后對(duì)血虛型小鼠的造血功能影響。
[0032] 取實(shí)施例1制備的發(fā)酵組合物a和按相同配方制備的未經(jīng)益生菌發(fā)酵的八珍湯A， 分別濃縮制成相同濃度(藥材:藥液=1:1);取實(shí)施例2制備的發(fā)酵組合物b和按相同配方制 備的未經(jīng)益生菌發(fā)酵的八珍湯B，分別加水溶解稀釋制成相同濃度(藥材:藥液=1:1)，作為 供試樣品。
[0033] 昆明種小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為六組:正常組、模型組、八珍湯A組、八珍湯B組、發(fā) 酵組合物a組、發(fā)酵組合物b組。正常組和模型組每只小鼠每日用生理鹽水0.2ml/10g體重灌 胃，八珍湯A組、八珍湯B組分別用八珍湯A、八珍湯B 0. 2ml/10g體重灌胃，發(fā)酵組合物a組、 發(fā)酵組合物b組分別用發(fā)酵八珍湯組合物a、發(fā)酵八珍湯組合物b 0. 2ml/10g體重灌胃，連 續(xù)10天。第8天正常組腹腔注射生理鹽水O.lml/lOg體重，模型組、八珍湯A組、八珍湯B組、 發(fā)酵組合物a組、發(fā)酵組合物b組分別腹腔注射環(huán)憐酷胺CY O.lml/lOg，連續(xù)3天。
[0034] 小鼠于注射環(huán)憐酷胺(CY)后第4天，分組取尾靜脈血，用全自動(dòng)血象分析儀對(duì)外周 血象進(jìn)行分析檢測(cè)，測(cè)定白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)。結(jié)果用生物統(tǒng)計(jì)學(xué)方法處理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果 見表2: 表2對(duì)小鼠外周血象的影響(x±s)
*與模型組相比，/7沛.05;**與模型組比較，/7沛.※與八珍湯組相比，/7沛.口5。
[0035] 外周血象結(jié)果說(shuō)明環(huán)憐酷胺顯著降低了小鼠外周血中的白細(xì)胞和血小板水平，模 型組較之正常組，其自細(xì)胞計(jì)數(shù)下降了 28.99 %，血小板計(jì)數(shù)下降了 20.08 %，說(shuō)明造模成 功;八珍湯A組、八珍湯B組使其得到一定恢復(fù)。發(fā)酵組合物a組、發(fā)酵組合物b組使其基本恢 復(fù)到正常水平。說(shuō)明八珍湯能對(duì)抗化療藥物CY的毒副作用，一定程度抑制CY所致小鼠外周 血象的降低，發(fā)酵八珍湯組合物能極顯著抑制CY所致小鼠外周血象的降低，效果明顯優(yōu)于 未發(fā)酵八珍湯。
[0036] 另外，對(duì)白細(xì)胞中淋己細(xì)胞及粒細(xì)胞進(jìn)行更詳細(xì)的數(shù)據(jù)檢測(cè)和分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見 表3 : 表3對(duì)小鼠白細(xì)胞的影響(X ± S)
*與模型組比較，P<〇. 05; **與模型組比較，P<0.01; ※與八珍湯組比較，P<〇.05;※※與八珍湯組比較，P<0.01。
[0037]實(shí)驗(yàn)結(jié)果充分說(shuō)明了發(fā)酵八珍湯組合物不但能夠提高白細(xì)胞的水平，也能提高中 性粒細(xì)胞和淋己細(xì)胞的數(shù)量，在解毒的同時(shí)，提高了小鼠個(gè)體的免疫能力。并且益生菌發(fā)酵 八珍湯組合物提高中性粒細(xì)胞和淋己細(xì)胞效果優(yōu)于未發(fā)酵八珍湯。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種益生菌發(fā)酵八珍湯組合物，其特征在于，將中藥人參、白術(shù)、茯苓、當(dāng)歸、白芍、川 芎、地黃、甘草經(jīng)烘干，粉碎，水浸泡，調(diào)整pH值，淀粉酶酶解，滅菌，接種多株益生菌，發(fā)酵， 提取，濃縮，干燥或不干燥，滅菌，即得； 所述中藥在益生菌發(fā)酵八珍湯組合物中的重量份為:人參1~10份；白術(shù)4~20份;茯苓 4~20份；當(dāng)歸4~30份；白芍2~20份;川芎2~20份;地黃4~30份、甘草1~10份； 所述的益生菌為雙歧桿菌和乳桿菌。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的益生菌發(fā)酵八珍湯組合物，其特征在于，所述中藥在益生菌發(fā) 酵八珍湯組合物中的重量份為:人參5份；白術(shù)10份;茯苓10份；當(dāng)歸15份；白芍10份;川芎8 份;地黃15份、甘草5份。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的益生菌發(fā)酵八珍湯組合物，其特征在于，所述的酶為高溫淀粉 酶，添加量為中藥材重量的0.1-1.0%。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的益生菌發(fā)酵八珍湯組合物，其特征在于，所述的雙歧桿菌選自 兩歧雙歧桿菌、短雙歧桿菌、青春雙歧桿菌和嬰兒雙歧桿菌;所述的乳桿菌選自嗜酸乳桿 菌、德氏乳桿菌、植物乳桿菌、干酪乳桿菌和鼠李糖乳桿菌。5. 權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的益生菌發(fā)酵八珍湯組合物的制備方法，其特征在于，步驟 如下： a. 取中藥復(fù)方中的人參、白術(shù)、茯苳、當(dāng)歸、白芍、川考、地黃、甘草，50-80 °C烘干，粉碎， 加水5~10倍量，水浸泡0.5~1.0小時(shí)，調(diào)整pH6.0 ± 0.2，加熱至80~90°C，加入高溫淀粉 酶，酶解至使碘試液不變藍(lán)色； b. 將步驟a得到的中藥酶解物調(diào)整pH7.0 ± 0.5，并于110~121°C下滅菌30~60分鐘，溫 度降至37°C時(shí)，同時(shí)接種預(yù)培養(yǎng)的體積百分比0.5~2.0%的一種或兩種雙歧桿菌的菌液和 預(yù)培養(yǎng)的體積百分比各0.2~1.0%的兩種或者三種乳桿菌的菌液;常規(guī)發(fā)酵16~48小時(shí)，當(dāng) pH降至4.0以下時(shí)結(jié)束發(fā)酵； c. 將步驟b得到的發(fā)酵物分離藥渣和發(fā)酵液，藥渣再加乙醇或水5~10倍量，加熱至60 ~80°C，保持0.5~2.0小時(shí)，濾過(guò)，提取液回收乙醇或濃縮，合并濃縮發(fā)酵液，定容或噴霧干 燥，滅菌，即得。6. 權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的益生菌發(fā)酵八珍湯組合物在制備預(yù)防或治療癌癥患者術(shù) 后或放化療過(guò)程中白細(xì)胞降低的保健食品、藥品中的應(yīng)用。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，將所述的益生菌發(fā)酵八珍湯組合物與一種 或多種醫(yī)藥上可接受的載體或賦形劑或稀釋劑，按照已知的常規(guī)方法，制成適于口服給藥 的合劑、乳劑、散劑、顆粒劑、片劑、丸劑、膠囊劑。
【文檔編號(hào)】A61P7/00GK105878554SQ201610440455
【公開日】2016年8月24日
【申請(qǐng)日】2016年6月20日
【發(fā)明人】吳炳新, 褚新紅, 孫筱林, 陸繼臣, 甄宗武
【申請(qǐng)人】三株福爾制藥有限公司