用于根治性治療或姑息性治療雌性哺乳動物的癌癥的磷雌酚的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及磷雌酚(二磷酸己烯雌酚)在根治性治療或姑息性治療雌性哺乳動物的癌癥的方法中的應(yīng)用，所述方法包括以至少500mg的日劑量口服給藥磷雌酚。本發(fā)明的方法可以治療的癌癥的例子包括乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌。本發(fā)明進(jìn)一步提供了含有至少500mg磷雌酚的口服劑量單元。
【專利說明】
用于根治性治療或姑息性治療雌性哺乳動物的癌癥的磯雌齡
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ] 本發(fā)明設(shè)及憐雌酪(Fosfestrol)在根治性治療（curative heatment)或姑息性 治療(palliative化eatment)雌性哺乳動物的癌癥中的應(yīng)用，所述治療包括W至少500mg 的日用量口服給藥憐雌酪。本發(fā)明的方法可W治療的癌癥的例子包括乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌 和卵巢癌。
[0002] 本發(fā)明還提供了含有至少500mg憐雌酪的口服劑量單元(oral dosage unit)。
【背景技術(shù)】
[0003] 在西方國家，癌癥仍然是死亡的主要原因。無論是男性還是女性。乳腺癌是女性中 最頻繁發(fā)生的癌癥。由于對新的藥物和治療方法的不斷研究，近年來，患有不同類型癌癥的 人群的平均壽命已得到穩(wěn)步提高。盡管如此，仍需要更好的藥物和改善的治療方法。
[0004] 本質(zhì)上，內(nèi)分泌治療補(bǔ)充、阻斷或去除激素。為了減慢或阻止某些癌癥(如乳腺癌） 的生長，合成的激素或其他藥物可能會阻斷機(jī)體的天然激素。有時需要進(jìn)行手術(shù)來去除產(chǎn) 生某激素的腺體。內(nèi)分泌療法也稱為激素的療法化ormonal therapy)、激素療法化ormone therapy)和激素治療化ormone treatment)。
[00化]DES療法
[0006] 已經(jīng)在癌癥的治療中使用的藥物是己締雌酪（diethylstnbestrol，DESKDES是 一種在1938年被首次合成的人工合成的非醬體類雌激素，它被設(shè)計(jì)用于實(shí)現(xiàn)睪丸素的去勢 水平(castrate levels)。睪丸素促使前列腺癌的生長，通過外科手術(shù)去勢來去除睪丸素是 前列腺癌治療中的第一種激素阻斷療法。通過抑制睪丸產(chǎn)生睪丸素，DES被開發(fā)用于實(shí)現(xiàn)化 學(xué)去勢。
[0007] 然而，由于與血栓栓塞毒性相關(guān)聯(lián)，口服給藥DES在前列腺癌的治療中的作用已經(jīng) 受到限制。當(dāng)口服給藥雌激素，例如像DES時，它們會受到腸和肝臟的首過效應(yīng)(first-pass effect),導(dǎo)致在肝臟中促進(jìn)凝血蛋白如纖維蛋白原的合成的高激素濃度。
[000引與癌癥不相關(guān)的死亡，主要是屯、血管根源的，接受每天口服5mg DES的患有前列腺 癌的患者增加了36% (Byar D P:P;roceedings:The Veterans Administration Cooperative Urological Research Group's studies of cancer of the prostate. Cancer(1973)32:1126-30)。評估較低劑量DES的其他研究報道了與用5mg劑量獲 得的對睪丸素抑制的類似的功效和可接受的血栓栓塞毒性。運(yùn)使得采用每天3mg作為最常 用的用于治療前列腺癌的DES 口服劑量。然而，血栓栓塞毒性仍然是一個問題。
[0009] 當(dāng)1984年由Leuprolide研究組進(jìn)行的比較3mg的DES和亮丙瑞林化6啡1'〇11(16)在 轉(zhuǎn)移性前列腺癌中的療效和安全性的研究被發(fā)表時，作為前列腺癌的一線療法的DES被代 替。該研究顯示了亮丙瑞林具有相似的治療效果，但大大改善了安全性特征（The Leuprolide Study Group(1984)Leuprolide versus diethylstiIbestrol for metastatic prostate cancer.N Engl J Med;311(20):1281-6)。
[0010]在乳腺癌中的DES療法：
[0011] 20世紀(jì)70年代，它莫西芬(tamoxifen)被引進(jìn)之前，在患有晚期乳腺癌的絕經(jīng)后婦 女中高劑量的DES療法也是內(nèi)分泌治療的選擇。Cole等（A new anti-oestrogenic agent in 1曰te bre曰st c曰ncer.An e曰rly clinic曰1 曰ppr曰is曰1 of ICI46474.Br J C曰ncer 1971,25:270-275)報道了在患有晚期或復(fù)發(fā)性乳腺癌的婦女中它莫西芬的首期臨床試驗(yàn)， 并將他們的結(jié)果與接受己締雌酪化ES)或雄激素的婦女的另一個相似進(jìn)行的試驗(yàn)的結(jié)果進(jìn) 行了比較。他們的結(jié)論是，對于Ξ種試劑，響應(yīng)的水平具有相同的規(guī)則，但它莫西芬的優(yōu)點(diǎn) 是"令人煩惱的副作用'發(fā)生率低。
[0012] 與運(yùn)些早期的發(fā)現(xiàn)相一致的，作為優(yōu)選的雌激素療法的它莫西芬被接受并不是基 于卓越的功效，而是基于在III期臨床試驗(yàn)中證明的改進(jìn)的耐受性（Ingle et al.Randomized clinical trial of diethylstilbestrol versus tamoxifen in postmenopausal women with advanced breast cancer.N Engl J Med 1981,304:16- 21.)。
[OOU]在乳腺癌中DES的重新評估
[0014] 當(dāng)長期的存活率研究如在乳腺癌中DES和它莫西芬之間就反應(yīng)率和進(jìn)展時間而言 沒有顯著差異變得清楚時，對作為用于乳腺癌的治療選擇的DES進(jìn)行了重新評估。然而，存 活率適度且顯著優(yōu)于最初用DES治療的女性(調(diào)整后的P為0.039)，3.0年對2.4年的中間存 活率和5年的存活率分別為35%和16% (Peethambaram et al.Randomized trial of diethylstilbestrol vs. tamoxifen in postmenopausal women with metastatic breast cancer.An updated analysis.Breast Cancer Res Treat,5(1999)4:117-122)。
[0015] 由Lonnin邑等（Hi邑h-dose estrogen treatment in postmenopausal breast cancer patients heavily exposed to endocrine therapy.Breast Cancer Res Treat, 67(2001) :111-116)進(jìn)行的前瞻性II期研究進(jìn)一步表明在積極預(yù)治療的患者中每日口服 15mg的DES是有效的。由于副作用六名患者（19%)停止了治療的事實(shí)說明了如下事實(shí):在所 有患者中高劑量的雌激素并不是可忍受的。
[001 y 憐雌酪療法
[0017] 66 732,286描述了憐雌酪（二憐酸己締雌酪，山日1:115^131:;[化63付01(1;[曲03地曰16) 的合成。憐雌酪被開發(fā)為DES的前藥來實(shí)現(xiàn)睪丸素生成的安全抑制，而不引起由游離的DES 引起的血栓栓塞的副作用。加入憐酸基團(tuán)來失活DES，從而規(guī)避腸和肝臟的首過效應(yīng)并降低 游離的DES的循環(huán)水平。憐雌酪本身被認(rèn)為是沒有活性的，且已知前列腺癌細(xì)胞已經(jīng)增加了 前列腺酸性憐酸酶(PAP)的表達(dá)。據(jù)認(rèn)為，PAP會除去憐酸基團(tuán)并在其作用的附近釋放DES。 [001引20世紀(jì)50年代，憐雌酪被引入并化Honva任霞的名稱銷售，并已在前列腺癌的治療 中成功應(yīng)用多年。由于憐雌酪是DES的前藥且由于DES的高血漿水平與血栓栓塞副作用相關(guān) 聯(lián)，人們并不愿意W高劑量口服給藥憐雌酪，尤其是每天超過360mg的口服劑量。
[0019] 考慮到對睪丸素減少的雌激素作用，200mg的憐雌酪的口服劑量被認(rèn)為與3mg的 DES的口服劑量是等效的?；谘褐写呷樗厮降脑黾?，360mg憐雌酪的日口服劑量或 1200mg憐雌酪的日靜脈注射劑量被視為與Img DES的日口服劑量是等效的。臨床結(jié)果表明， 在治療激素依賴性前列腺癌中W每天分成兩次或Ξ次劑量的200-360mg的口服劑量使用憐 雌酪是安全和有效的。
[0020] Oelsch恰ger.等（New Results on the Pharmacokinetics of Fosfestrol, 化ol.Int.43(1988) ,15-21)已經(jīng)表明，憐雌酪和它的單憐酸鹽在靜脈注射給藥(每天1.5g， 共10天)后，在循環(huán)血液中W很少的量僅存在很短的時間，而在口服給藥(360mg)后，在血漿 中并不能檢測到憐酸鹽的痕跡。
[0021] Schneider 等（Effects of d i e thy 1 s t i 1 be s tro 1 and its mono and diphosphate on experimental mammary tumors and prostatic tumors,Urol Int.43, (1988) 10-14)也測試了于體外在MCF-7細(xì)胞中DES、DES二憐酸鹽和DES單憐酸鹽的抑制乳腺 腫瘤的活性。用1、5和ΙΟμΜ濃度的測試化合物解育細(xì)胞4天。在最低濃度下，沒有化合物表現(xiàn) 出任何的生長抑制性。在扣M(2μg/ml)時，二憐酸鹽表現(xiàn)出細(xì)胞生長50%的減少，而DES和 DES單憐酸鹽并沒有表現(xiàn)出任何作用。在最高濃度時，所有的化合物幾乎完全抑制腫瘤細(xì)胞 的生長。作者的結(jié)論是，盡管W相對高的濃度，DES二憐酸鹽和DES單憐酸鹽和DES本身仍表 現(xiàn)了細(xì)胞毒性作用。
[0022] 在同一出版物中，Schneide;r(Discussion of the experimental papers.Urol Int 43( 1988)，23)還指出："我認(rèn)為DES對激素非依賴性腫瘤一般無細(xì)胞毒性作用。關(guān)鍵點(diǎn) 是我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了對前列腺腫瘤(也是激素敏感的腫瘤)的細(xì)胞毒性或直接作用。在我沒有 示出的其他模型中我們也使用了 DES，例如在體內(nèi)用非常高劑量的激素非依賴性乳腺腫瘤， 也沒有作用"。
[00剖在乳腺癌的治療中的憐雌酪療法
[0024] 憐雌酪也已被用于乳腺癌的治療。Rosset等（Palliative treatment of metastatic breast cancer with diethyldioxystiIbene diphosphate(Honvan), Schweiz Med Wochenschr.，（1975)0ct 25; 105(43) :1388-90)進(jìn)行了小規(guī)模研究，其中對 21例轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者口服給藥日劑量100-120mg的憐雌酪。運(yùn)些患者中，33%有客觀緩 解，38.5%保持不變，且28.5%為進(jìn)行性的（progressive)。在一半進(jìn)行性的患者中實(shí)際上 加速了腫瘤生長。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0025] 本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，憐雌酪(二憐酸己締雌酪），如果W至少500mg的高日用量進(jìn) 行口服給藥，可W有效地應(yīng)用于雌性哺乳動物的癌癥的治療中，特別是應(yīng)用于選自乳腺癌、 子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌的癌癥的治療中。本發(fā)明的方法特別適用于運(yùn)些最初為激素敏感的癌 癥的激素不敏感的亞型的治療。
[0026] 出乎意料的是，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，當(dāng)W如此高的劑量給藥時，憐雌酪不會產(chǎn)生 嚴(yán)重的副作用，如血栓栓塞毒性或甚至死亡。
[0027] 不希望受理論的束縛，假設(shè)已經(jīng)在過去觀察到的口服給藥的DES (~3毫克每日）的 毒性作用，不是由DES本身引起的，而是由氧化的DES代謝物引起的。
[0028] 當(dāng)DES被口服給藥時，它受到強(qiáng)烈的腸和肝臟的代謝。口服給藥的DES的代謝作用 通過氧化、隨后的綴合或通過直接綴合而發(fā)生。主要的氧化反應(yīng)是芳環(huán)的徑基化，W及在乙 基基團(tuán)處，隨后的綴合。另外，已經(jīng)觀察到了己二締的形成。所形成的綴合物是硫酸鹽，或葡 糖巧酸或兩者的組合。
[0029] 本發(fā)明的發(fā)明人認(rèn)為：與口服給藥DES相比，口服給藥憐雌酪較不易于被氧化。因 此，與口服給藥DES相比，口服給藥憐雌酪可W實(shí)現(xiàn)更高的DES血漿水平，但是氧化的DES代 謝物的水平則實(shí)質(zhì)上更低，因此具有顯著更小的毒性副作用。
[0030]因此，本發(fā)明提供了一種通過給藥高口服劑量的憐雌酪實(shí)現(xiàn)具有有限副作用的游 離DES的血漿水平在1微克/ml W上的方法。
[0031 ]本發(fā)明還設(shè)及含有至少500mg憐雌酪的口服劑量單元。
【具體實(shí)施方式】
[0032] 本發(fā)明的第一個方面設(shè)及用于根治性治療或姑息性治療雌性哺乳動物的癌癥的 方法中的憐雌酪(二憐酸己締雌酪），所述方法包括W至少500mg的日劑量口服給藥憐雌酪。
[0033] 本文中所用的術(shù)語"憐雌酪"是指兩個徑基基團(tuán)均被憐酸化的己締雌酪部分。術(shù)語 "憐雌酪"還包括藥學(xué)上可接受的憐雌酪的鹽。
[0034] 本文中所用的術(shù)語"藥學(xué)上可接受的鹽"是指安全且有效地在哺乳動物中使用，并 且具有所需的生物活性的本發(fā)明的化合物的鹽。關(guān)于藥物化合物的藥學(xué)上可接受的鹽的抗 衡離子的描述可W參見P.Heinrich Stahl,Camille G.Wermuth化ds.),Handbook of Pharmaceutical Salts,Properties,Selection and Use,Wiley VCH(2002)。
[0035] 在本發(fā)明的DES憐酸鹽中的己締雌酪部分可W是反式形式或順式形式。當(dāng)然，也可 使用反式和順式形式的混合物。
[0036] 本文中所用的術(shù)語"癌癥"是指設(shè)及不受調(diào)節(jié)的細(xì)胞生長的惡性新生物。在癌癥 中，細(xì)胞分裂和生長無法控制，形成惡性腫瘤，并侵入機(jī)體的附近組織。
[0037] 本文中所用的術(shù)語"根治性治療"是指旨在治愈疾病或改善與疾病相關(guān)的癥狀的 治療。
[0038] 本文中所用的術(shù)語"姑息性治療"是指并不旨在治愈疾病而是提供緩解的治療或 療法。
[0039] 本文中所用的術(shù)語"口服"，除非另外指出，是"每次口服(per oral)"的同義詞。
[0040] 本文中所用的術(shù)語"劑量"是指給藥于哺乳動物的藥物活性物質(zhì)的量。因此，術(shù)語 "劑量"并不包括被給藥的"劑量單元"的任何載體或其它藥學(xué)上可接受的賦形劑的部分。
[0041] 在本文件及其權(quán)利要求中，動詞"包括"及其變形被用于W其非限制性意義來表示 該詞后面的項(xiàng)目都被包括在內(nèi)，但并不排除未具體提及的項(xiàng)目。另外，通過不定冠詞"一個 (a)"或"一個(an)"限定的元件并不排除一個W上的元件的存在的可能性，除非上下文明確 要求有一個且僅有一個元件。因此不定冠詞"一個(a)"或"一個(an)"通常是指"至少一個"。
[0042] 激素敏感的癌癥是指在特定激素的存在下生長更快的那類癌癥。運(yùn)種類型的癌癥 通常用激素療法進(jìn)行治療。激素療法設(shè)及阻斷體內(nèi)運(yùn)些激素的生成或作用。因此，激素療法 實(shí)際上是抗激素療法。發(fā)生在雌性哺乳動物中的激素敏感的癌癥的例子包括乳腺癌、子宮 內(nèi)膜癌和卵巢癌。
[0043] 乳腺癌細(xì)胞可W表達(dá)用于確定治療策略的不同類型的標(biāo)記，并給出臨床結(jié)果的指 示。雌激素受體化R)和孕酬受體(PR)標(biāo)記都是激素受體。ER和PR陽性腫瘤的生長受雌激素 和孕酬的刺激。所有乳腺癌患者中75%是ER陽性的。65%的ER陽性人群也是PR陽性的。ER/ PR陽性的乳腺癌具有最有利的臨床結(jié)果，因?yàn)樗麄儗辜に刂委煟缢鞣液头枷慊?抑制劑(aroma化se inhibitors)，是非常敏感的。如果運(yùn)些受體之一不是由腫瘤表達(dá)的，激 素療法則不是那么有效。如果兩種受體都沒有表達(dá)，則腫瘤對激素治療是不敏感的。
[0044] 除了邸和PR，乳腺癌也可W表達(dá)蛋白肥R2/neu。所有乳腺癌中大約20-25 %表達(dá)該 蛋白。與皿R2/neu陰性的腫瘤相比，皿R2/neu的表達(dá)與更具攻擊性的腫瘤和更差的臨床結(jié) 果相關(guān)。對表達(dá)皿R2/neu的乳腺癌用手術(shù)治療并輔助化療和赫賽汀化erceptin)進(jìn)行攻擊 性治療。赫賽汀具體祀向肥R2/neu蛋白并在運(yùn)些細(xì)胞中誘導(dǎo)調(diào)亡。
[0045] 如果上述的Ξ個標(biāo)記都不表達(dá)，則腫瘤是Ξ陰性的（triple negative)。所有乳腺 癌中大約15%是Ξ陰性的。腫瘤生長不依賴于激素或肥R2/neu。因此，Ξ陰性的腫瘤對常規(guī) 的抗激素和赫賽汀治療是不敏感的。目前，對于該亞群的僅有治療選擇是外科手術(shù)、放療和 使用蔥環(huán)類藥物（ant虹acyclines)、紫杉燒（taxanes)、伊沙匹?。╥xab邱ilone)或銷（如順 銷山13913*^))試劑的攻擊性化療。然而，運(yùn)些方法通常具有非常差的臨床結(jié)果。當(dāng)運(yùn)些策 略都失敗了，就沒有其他辦法了。
[0046] 本發(fā)明包括激素-敏感的癌癥和激素-不敏感的癌癥的治療。當(dāng)用于激素-不敏感 (或激素非依賴性)的癌癥的治療時，本發(fā)明方法的治療的優(yōu)勢是特別顯著的。
[0047] 本發(fā)明的方法特別適合于在用激素療法治療激素敏感的癌癥之后發(fā)展的激素-不 敏感的癌癥的治療。
[0048] 本發(fā)明的治療方法有利地適合于治療不會響應(yīng)于用抗雌激素、芳香化酶抑制劑或 17α徑化酶/C17，20裂解酶(CYP17A1)的抑制劑進(jìn)行治療的癌癥。本發(fā)明的方法特別適合于 在用抗雌激素、芳香化酶抑制劑或17α徑化酶/C17，20裂解酶(CYP17Α1)的抑制劑治療激素 敏感的癌癥之后發(fā)展的激素不敏感的癌癥的治療。
[0049] 本發(fā)明的方法特別適合于選自乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌的癌癥的治療。本發(fā) 明的方法在乳腺癌的治療中是特別有效的。根據(jù)特別優(yōu)選的實(shí)施方式，本發(fā)明的方法用于 Ξ陰性的乳腺癌的根治性治療或姑息性治療中。
[0050] 如本文前面所述，在本發(fā)明的上下文中憐雌酪還包括憐雌酪的藥學(xué)上可接受的 鹽。藥學(xué)上可接受的鹽包括由堿金屬如鋼、裡、鐘、W及堿±金屬如巧和儀的陽離子形成的 那些鹽。
[0051] 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，憐雌酪是堿金屬鹽，特別是鋼鹽和/或鐘鹽。更優(yōu)選地，憐雌 酪是鐘鹽形式。
[0052] 本發(fā)明的治療方法可用于治療多種哺乳動物，如人、馬、牛等。本發(fā)明的方法特別 適合于人的治療。
[0053] 憐雌酪的劑量可W根據(jù)具體情況和患者接受的治療而變化?；衔锏闹委熡行?量可W被提供為在將產(chǎn)生臨床顯著結(jié)果的長期治療方案中的重復(fù)劑量。
[0054] 化合物的實(shí)際劑量將隨因素發(fā)生變化，運(yùn)些因素例如疾病征兆和受試者的特定狀 態(tài)例如年齡、尺寸、適應(yīng)度、癥狀程度、易感因素等，W及其他因素例如時間和給藥途徑，同 時施用的其它藥物或治療。劑量方案可W進(jìn)行調(diào)整W提供最佳的治療反應(yīng)。
[0055] 典型地，本發(fā)明的方法包括W至少700mg，更優(yōu)選850-5000mg，最優(yōu)選1000-1500mg 的日口服用量給藥憐雌酪。
[0056] W不同的方式表達(dá)，優(yōu)選地，W每kg體重至少6mg，更優(yōu)選W每kg體重10-66mg，最 優(yōu)選W每kg體重13-20mg的日用量口服給藥憐雌酪。
[0057] 本發(fā)明方法的治療的持續(xù)時間一般超過7天。更具體地，本發(fā)明的方法具有至少14 天，特別是至少28天的持續(xù)時間。
[0058] 上述日用量可W每日一次進(jìn)行給藥，也可W在或多或少的定期時間內(nèi)W兩次或多 次單獨(dú)的劑量的形式進(jìn)行給藥。根據(jù)特別優(yōu)選的實(shí)施方式，本發(fā)明的治療方法包括每天至 少兩次劑量進(jìn)行口服給藥，更優(yōu)選每天每次至少200mg憐雌酪的至少兩次劑量，甚至更優(yōu)選 地，包括W每天至少200mg憐雌酪的至少3次劑量進(jìn)行口服給藥。
[0059] 按照本發(fā)明方法的特別優(yōu)選的實(shí)施方式，口服給藥憐雌酪W達(dá)到至少化g/ml，更 優(yōu)選至少1.化g/ml和最優(yōu)選至少化g/ml的游離DES的血漿水平。
[0060] 本發(fā)明的另一個方面設(shè)及含有至少500mg憐雌酪的口服劑量單元。
[0061] 本發(fā)明的口服劑量單元可W有利地應(yīng)用在如本文之前所定義的癌癥的根治性治 療或姑息性治療中。
[0062] 口服劑量單元優(yōu)選選自由片劑、顆粒劑、膠囊劑和粉劑和液體組成的組中。甚至更 優(yōu)選的是，口服劑量單元為片劑或膠囊劑。
[0063] 口服劑量單元通常具有0.5-2. Og，更優(yōu)選0.75-1.5g，最優(yōu)選0.8-1.2g之間的重 量。在另一種實(shí)施方式中，口服劑量單元含有10-90重量％，更優(yōu)選20-80重量％之間的藥學(xué) 上可接受的賦形劑。藥學(xué)上可接受的賦形劑適于選自著色劑、調(diào)味劑或掩味劑、稀釋劑、粘 合劑、潤滑劑、崩解劑、穩(wěn)定劑、表面活性劑、助流劑(glidants)、增塑劑、防腐劑、甜味劑和 它們的組合。
[0064] 所述崩解劑有利地選自由乳糖、無水乳糖、交聯(lián)聚乙締化咯燒酬(crospovidone)、 交聯(lián)簇甲基纖維素鋼、徑基乙酸淀粉鋼（sodium starch glycolate)、徑丙基纖維素、波拉 克林鐘（polacrilin potassium)、預(yù)膠化淀粉(pregelatinized starch)、微晶纖維素和它 們的組合組成的組中。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，口服劑量單元含有至多7重量％，優(yōu)選2-5重 量％的崩解劑。
[0065] 本發(fā)明的劑量單元可適當(dāng)?shù)夭扇嚎s片劑的形狀。運(yùn)樣的片劑可W適當(dāng)?shù)匕ú?同組合物的兩層或更多層，例如在包裹于涂層中之前，含有本文所定義的憐雌酪的核屯、。
[0066] 在壓片機(jī)中可W方便地生產(chǎn)本發(fā)明的劑量單元。為了能夠從模具中容易地除去片 劑，劑量單元一般含有0.2-4重量％之間的潤滑劑或滑動劑(gliding agent)。優(yōu)選地，潤滑 劑或滑動劑選自由滑石、硬脂酷富馬酸鋼（sodium stearyl化marate)、硬脂酸儀、硬脂酸 巧、氨化藍(lán)麻油、氨化大豆油、聚乙二醇、淀粉、無水膠態(tài)二氧化娃(anhydrous colloidal silica)和它們的組合組成的組中。
[0067] W下實(shí)施例旨在進(jìn)一步說明本發(fā)明和一些優(yōu)選的實(shí)施方式，并不限制其范圍。
[006引實(shí)施例
[00~]實(shí)施例1
[0070] 對DES和憐雌酪在激素-敏感的(MCF-7)和激素-不敏感的(MDA-MB231)乳腺細(xì)胞系 中的體外直接細(xì)胞毒性進(jìn)行了試驗(yàn)。
[0071] 在37°C、5%C02和濕潤條件下，在含有10%(v/v)熱滅活的胎牛血清(FBS)和2mM 心谷氨酷胺(生長培養(yǎng)基)的RPMI1640中體外培養(yǎng)細(xì)胞。收獲細(xì)胞，洗涂，在生長培養(yǎng)基中重 懸并計(jì)數(shù)。在測定培養(yǎng)基(RPMI 1640+1% (v/v)熱滅活的FBS+和2mM心谷氨酷胺）中重懸細(xì) 胞至0.5-1 X105個細(xì)胞/毫升（取決于細(xì)胞類型），并接種到96孔測定板(Corning,黑色壁 板)中，且50μ1/孔等份。
[0072] 在加入化合物之前，在37°C、5 %濕潤的C〇2中0/州障育板。將DES溶解于100 %DMS0 中，儲液濃度(stock concentration)為60mM。將憐雌酪溶于無菌水中，儲液濃度為60mM。
[0073] 隨后將所有化合物的儲液進(jìn)行連續(xù)稀釋，且細(xì)胞在其中暴露的終濃度為：300、 150、75、37.5、18.75、9.4、4.7、2.3、1.2和0.6μM。陽性對照為順銷。在l%FBS培養(yǎng)基中稀釋 順銷至儲液濃度為ImM。順銷儲液被連續(xù)稀釋且細(xì)胞在其中暴露的終濃度為：100、50、25、 12.5、6.3、31、1.6、0.8、0.4、0.2μΜ。
[0074] 在加入化合物后，將板在37°C、5%濕潤的C〇2下解育72小時。用Cell Titer Blue麼 (Promega)法評估細(xì)胞的生存能力。在每個測試/空白孔中加入10μ1的Cell Titer Blue?試 劑。在分析前，將板在37 °C、5 %濕潤的C化下解育3小時。用Flex 11站讀板（Flex II s化tion plate reader)進(jìn)行巧光測定。激發(fā)波長為57化m，發(fā)射波長為600皿，切斷波長為 590nm。原始數(shù)據(jù)通過Gra地化d Prism處理W計(jì)算平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差和1C日日值。
[0075] 得到的結(jié)果如表1所示。
[0076] 表 1
[0077]
[007引結(jié)論:運(yùn)些結(jié)果表明，在MC巧和MDA-MB231乳腺癌細(xì)胞系中，在體外DES和憐雌酪都 是有細(xì)胞毒性的。在兩種化合物中，DES是最具有細(xì)胞毒性的。運(yùn)一發(fā)現(xiàn)與5油1161(164専±的 文章形成鮮明的對比，其中，5證1161(164専±的文章顯示(a)憐雌酪比DES更具有細(xì)胞毒性和 (b)DES在激素非依賴性的乳腺腫瘤中沒有細(xì)胞毒性。
[0079] 實(shí)施例2
[0080] 在晚期乳腺癌患者中進(jìn)行I期患者研究，W探索在運(yùn)些患者中口服憐雌酪治療的 副作用。
[0081] 設(shè)及的所有患者都經(jīng)歷了至少一種前治療。
[0082] 患者口服憐雌酪進(jìn)行治療，每天3次，每次250mg，共治療4周。每天總的憐雌酪的劑 量為750mg。在該研究期間均停止所有其他的治療。
[0083] 治療伴有輕微的毒性但并沒有發(fā)現(xiàn)血栓栓塞的副作用。
[0084] 結(jié)論
[0085] 運(yùn)項(xiàng)研究表明對乳腺癌患者使用憐雌酪是安全的。
[0086] 實(shí)施例3
[0087] 通過直接壓制來制備1kg的一批500mg的憐雌酪片劑。將AP巧日賦形劑過0.85mm篩。 在V型混合機(jī)中將500g憐雌酪四鋼（fosfestrol tetrasodium)與435g娃化微晶纖維素 (Silicified Mic;rocrys1:alline Cellulose Jrosolv smcc 90?)和50g交聯(lián)簇甲基纖維素 鋼(Ac-di-Sol?)混合20分鐘。向混合物中加入15g硬脂酸儀并繼續(xù)混合5分鐘。使用粒形沖 壓機(jī)（caplet shaped punches),在Korsch邸0上制備每片lOOOmg的片劑。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 用于根治性治療或姑息性治療雌性哺乳動物的癌癥的方法中的磷雌酚(二磷酸己烯 雌酚），所述方法包括以至少500mg的日用量口服給藥磷雌酚。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療中的磷雌酚，其中，所述癌癥為激素-不敏感的癌癥。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于治療中的磷雌酚，其中，所述激素-不敏感的癌癥在用抗 雌激素、芳香化酶抑制劑或17α羥化酶/Cl7，20裂解酶(CYP17A1)的抑制劑治療激素敏感的 癌癥之后發(fā)展而成。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于治療中的磷雌酚，其中，所述激素-不敏感的癌癥在用17α 羥化酶/C17,20裂解酶(CYP17A1)的抑制劑，尤其是阿比特龍，治療激素敏感的癌癥之后發(fā) 展而成。5. 根據(jù)前述任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的用于治療中的磷雌酚，其中，所述癌癥選自由乳 腺癌、子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌組成的組中。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于治療中的磷雌酚，其中，所述癌癥為乳腺癌。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的用于治療中的磷雌酚，其中，所述乳腺癌為三陰性的乳腺癌。8. 根據(jù)前述任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的用于治療中的磷雌酚，其中，所述方法包括以 500-5000mg的日用量口服給藥磷雌酚。9. 根據(jù)前述任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的用于治療中的磷雌酚，其中，所述方法包括在最 少7天的期間內(nèi)以至少500mg的日用量口服給藥磷雌酚。10. 根據(jù)前述任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的用于治療中的磷雌酚，其中，所述方法包括以每 千克體重至少6mg的用量口服給藥磷雌酚。11. 根據(jù)前述任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的用于治療中的磷雌酚，其中，所述方法包括口服 給藥磷雌酚以使游離DES的血漿水平達(dá)lμg/ml以上。12. 根據(jù)前述任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的用于治療中的磷雌酚，其中，所述方法包括每天 至少兩次口服給藥磷雌酚。13. 根據(jù)前述任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的用于治療中的磷雌酚，其中，所述哺乳動物為 人。14. 含有至少500mg磷雌酚的口服劑量單元。15. 根據(jù)權(quán)利要求14所述的口服劑量單元，其中，所述口服劑量單元為片劑或膠囊劑。16. 根據(jù)權(quán)利要求14或15所述的口服劑量單元，其中，所述口服劑量單元具有0.5-2. Og 的重量。17. 根據(jù)權(quán)利要求14-16中任意一項(xiàng)所述的口服劑量單元，其中，所述口服劑量含有l(wèi)ogo 重量 ％ 的藥學(xué)上可接受的賦形劑。
【文檔編號】A61P35/00GK105899214SQ201380063623
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2013年10月14日
【發(fā)明人】J·J·普拉特尤維, M·德布里, E·克魯姆佩爾
【申請人】變色蜥制藥公司