固體脂質(zhì)納米粒作為抗抑郁藥物載體的應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明涉及固體脂質(zhì)納米粒作為抗抑郁藥物載體的應(yīng)用。具體為：配制0.1~0.2g姜黃素、0.1~0.3g葉酸、0.5~0.15g卵磷脂和0.001~0.0003g HU?211的混合氯仿溶液共10~20ml，然后加入含0.2~0.3g Myrj52的20~40ml水中，并在1000~1200rpm和70~80°C 下攪拌至混合溶液總體積剩余為5~8ml，再加入10~15ml冰水繼續(xù)在1000~1200rpm和0~4°C 下攪拌2~3小時(shí)。離心棄上清液，冷凍干燥后0~4°C保存。固體脂質(zhì)納米粒作為抗抑郁藥物載體，可以提高抗抑郁藥物的水溶性和穩(wěn)定性，增加藥物的生物利用率，控制藥物的釋放，提高對(duì)抑郁癥治療的靶向性。
【專利說(shuō)明】
固體脂質(zhì)納米粒作為抗抑郁藥物載體的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬生物材料和藥物學(xué)交叉領(lǐng)域，涉及脂質(zhì)納米粒作為抗抑郁藥物載體的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]抑郁癥是一種危害全人類身心健康的常見情感障礙疾病，以顯著而持久的心境低落為主要特征的綜合征。抑郁癥的終生患病率高達(dá)15%，15%的重度抑郁癥可因自殺而導(dǎo)致死亡。
[0003]針對(duì)抑郁癥的發(fā)病機(jī)制，目前的治療藥物存在顯著副作用包括心臟毒性，性功能障礙和睡眠紊亂等，而且某些抗抑郁藥物很難透過(guò)血腦屏障。為解決以上問(wèn)題，本發(fā)明使用了低毒性的具有光譜性的姜黃素和易透過(guò)血腦屏障的地塞比諾(HU-211)。
[0004]盡管姜黃素已被證實(shí)具有抗抑郁作用，但水溶性低和生物相容性差的缺點(diǎn)限制其應(yīng)用，HU-211同樣也存在在生物系統(tǒng)中穩(wěn)定性差的問(wèn)題，基于納米材料所發(fā)展的納米復(fù)合體系為抑郁癥的治療提供了一種新的方法。
[0005]固體脂質(zhì)納米粒(Solid lipid nanoparticles，SLN)是20世紀(jì)90年代初發(fā)展起來(lái)的新一代亞微粒給藥系統(tǒng)，是指以固態(tài)天然或合成的類脂如卵磷脂、三酰甘油等為載體，將藥物包裹或夾嵌于類脂核中制成的固體膠粒給藥系統(tǒng)。SLN被廣泛應(yīng)用于作為抗腫瘤藥物的載體，作為經(jīng)皮給藥系統(tǒng)的載體，作為眼部給藥系統(tǒng)的載體，作為肽類藥物的載體和作為防曬品的載體。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是提供一種固體脂質(zhì)納米粒作為抗抑郁藥物載體的應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明提出的固體脂質(zhì)納米粒作為抗抑郁藥物載體的應(yīng)用，所述抗抑郁藥物主要是指姜黃素和HU-211，具體步驟如下:
配制0.1-0.2g姜黃素、0.1-0.3g葉酸、0.5-0.15g卵磷脂和0.001-0.0003g HU-211 的混合氯仿溶液共10?20ml，然后加入含0.2?0.3g Myrj52的20?40ml水中，并在1000?1200rpm和70-80° C下攪拌至混合溶液總體積剩余為5?8ml，再加入10?15ml冰水繼續(xù)在1000?1200rpm和O?4° C下攪拌2?3小時(shí)。離心棄上清液，冷凍干燥后O?4° C保存。
[0008]本發(fā)明中，所述的固體脂質(zhì)納米粒搭載抗抑郁藥物后的平均粒子直徑為20?300nm，表面zeta電位為-22.0~_21.3 mV。
[0009]固體脂質(zhì)納米粒優(yōu)于其他納米材料復(fù)合體系:(I)生物相容性好；(2)藥物釋放可控；(3)粒徑小使其體內(nèi)循環(huán)時(shí)間長(zhǎng)；(4)載藥量高；(5)生物可降解，生物可相容；(6)低毒性；(7)可透過(guò)血腦屏障。
[0010]為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明利用低溫乳化法，以姜黃素、葉酸、卵磷脂、HU-211和Myr j52為原料合成SLN搭載姜黃素和HU-211復(fù)合體系，并通過(guò)冷凍干燥得到樣品。
[0011]本發(fā)明的有益效果在于:將固體脂質(zhì)納米粒包載姜黃素和HU-211納米復(fù)合材料應(yīng)用于抑郁癥治療，提高了姜黃素和HU-211治療抑郁癥的療效，克服了姜黃素和HU-211的應(yīng)用局限，為抑郁癥的臨床治療提供了新的方法。
【附圖說(shuō)明】
[0012]圖1為SLN搭載姜黃素和HU-211納米復(fù)合體系透射電鏡圖。
[0013]圖2為SLN搭載姜黃素和HU-211納米復(fù)合體系z(mì)eta電位圖。
[0014]圖3為SLN搭載姜黃素和HU-211納米復(fù)合體系釋放藥物的緩釋曲線。
[0015]圖4為SLN搭載姜黃素和HU-211對(duì)抑郁癥模型PC12細(xì)胞的MTT。
[0016]圖5為SLN搭載姜黃素和HU-211改善抑郁癥模型小鼠運(yùn)動(dòng)能力。
[0017]圖6為SLN搭載姜黃素和HU-211組織分布及靶向情況。
【具體實(shí)施方式】
[0018]實(shí)施例1
配制姜黃素(0.1?0.2g)，葉酸(0.1?0.3g)，卵磷脂(0.5?0.15g)和HU-211(0.001?
0.0003g)的混合氯仿溶液共10?20ml，然后加入含Myrj52(0.2?0.3g)的20?40ml水中并在1000?1200rpm和70?80° C下攪拌至混合溶液總體積約剩5?8ml，再加入10?15ml冰水繼續(xù)在1000~1200rpn^P0~4°C下攪拌2?3小時(shí)。離心棄上清，冷凍干燥后O?4°C保存。
[0019]使用1~2%磷鎢酸鈉作為負(fù)染液，取少量材料溶液滴至鋪有碳膜的銅網(wǎng)上，靜置5?1min，用濾紙吸干懸液，再滴加l~2%(w/v)磷媽酸鈉負(fù)染5?1min，于JEOL型透射電子顯微鏡下觀察形態(tài)。材料Zeta電位使用Malvern zeta電位儀測(cè)量。
[0020]實(shí)施例2
2-5ml SLN搭載姜黃素和HU-211納米復(fù)合材料溶液(10mg/ml)放入一個(gè)透析袋(截?cái)啻笮?4,000?20,000 Da)。然后透析袋放入400?500ml PBS溶液(pH 7.4)其中包含8?10%Tween-80 (v/v)并于100?2000rpm和36?38° C下攬摔。在特定的時(shí)間，取出4?5ml溶液，通過(guò)紫外分光光度計(jì)檢測(cè)姜黃素的含量，同樣體積的相同新鮮溶液加入以保持總體積不變。
[0021]實(shí)施例3
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程加入皮質(zhì)酮獲得抑郁癥細(xì)胞模型，PCl 2細(xì)胞培養(yǎng)于96孔板，細(xì)胞鋪板24h后加入藥物，設(shè)置對(duì)照。分組處理:皮質(zhì)酮加PBS，對(duì)照，皮質(zhì)酮加氟西汀，皮質(zhì)酮加HU-211，皮質(zhì)酮加Cur，皮質(zhì)酮加Cur/SLNs，皮質(zhì)酮加Cur/SLNs-HU_211。繼續(xù)培養(yǎng)24h后，每孔加入20μ? MTT溶液(5mg/ml，即0.5%MTT)，繼續(xù)培養(yǎng)4h。終止培養(yǎng)，吸去孔內(nèi)培養(yǎng)液。每孔加入150μ1二甲基亞砜，搖床上低速振蕩10?20min，使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀OD 490/560nm處測(cè)量各孔的吸光值。
[0022]實(shí)施例4
連續(xù)給藥(皮質(zhì)酮)2?3周建立小鼠抑郁癥模型。之后分別給藥處理2?3周后，運(yùn)用行為學(xué)實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)SLN搭載姜黃素和HU-211納米復(fù)合材料對(duì)動(dòng)物抑郁改善情況。分組處理:PBS，正常對(duì)照，氟西汀，HU-211，Cur，Cur/SLNs, Cur/SLNs-HU-211。轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)是評(píng)價(jià)動(dòng)物運(yùn)動(dòng)能力的重要指標(biāo)。末次給藥后I?2h，將各組小鼠放置在轉(zhuǎn)速為O?40轉(zhuǎn)/分轉(zhuǎn)棒上，記錄小鼠在轉(zhuǎn)棒上的停留時(shí)間。最后，取小鼠心肝脾肺腎腦分析測(cè)定藥物組織分布情況，評(píng)價(jià)材料的分布及是否具有靶向性。
[0023]圖1為SLN搭載姜黃素和HU-211納米復(fù)合體系透射電鏡圖，平均粒子直徑為20?300nmo
[0024]圖2為SLN搭載姜黃素和HU-211納米復(fù)合體系z(mì)eta電位圖，表面zeta電位為-22.0—21.3 mV。
[0025]圖3為SLN搭載姜黃素和HU-211納米復(fù)合體系釋放藥物的緩釋曲線，復(fù)合體系能夠持續(xù)7天緩慢釋放姜黃素，最多可釋放約77%的藥物。
[0026]圖4為SLN搭載姜黃素和HU-211對(duì)抑郁癥模型PC12細(xì)胞的MTT，以正常組細(xì)胞為對(duì)照為100%，單獨(dú)皮質(zhì)酮處理24小時(shí)細(xì)胞存活率為50%，陽(yáng)性藥物組氟西汀處理細(xì)胞存活率為93%，HU-211組細(xì)胞存活率為60%，姜黃素組細(xì)胞存活率為62%，SLN搭載姜黃素組細(xì)胞存活率為65%，SLN搭載姜黃素和HU-211組細(xì)胞存活率為73%。31^搭載姜黃素和冊(cè)-211復(fù)合體系相比于HU-211、姜黃素和SLN搭載姜黃素具有更好的保護(hù)PC12細(xì)胞免受皮質(zhì)酮的毒害。
[0027]圖5為SLN搭載姜黃素和HU-211改善抑郁癥模型小鼠運(yùn)動(dòng)能力，各處理組在轉(zhuǎn)棒上停留時(shí)間分別為247，300，300，247，242，270，293秒，SLN搭載姜黃素和HU-211復(fù)合體系相比于HU-211、姜黃素和SLN搭載姜黃素處理后的小鼠具有更強(qiáng)運(yùn)動(dòng)能力。
[0028]圖6為SLN搭載姜黃素和HU-211組織分布及靶向情況，在腦中分布相比其他組織要高，且SLN搭載姜黃素和HU-211復(fù)合體系相比于姜黃素和SLN搭載姜黃素處理小鼠后，腦中姜黃素濃度要高。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.固體脂質(zhì)納米粒作為抗抑郁藥物載體的應(yīng)用，其特征在于所述抗抑郁藥物主要是指姜黃素和HU-211，具體步驟如下: 配制0.1-0.2g姜黃素、0.1-0.3g葉酸、0.5?0.15g卵磷脂和0.001-0.0003g HU-211 的混合氯仿溶液共10?20ml，然后加入含0.2?0.3g Myrj52的20?40ml水中，并在1000?1200rpm和70-80° C下攪拌至混合溶液總體積剩余為5?8ml，再加入10?15ml冰水繼續(xù)在1000?1200rpm和O?4° C下攪拌2?3小時(shí)，離心棄上清液，冷凍干燥后0~4° C保存。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述的固體脂質(zhì)納米粒搭載抗抑郁藥物后的平均粒子直徑為20~30011111，表面26七3電位為-22.0~-21.3 mV。
【文檔編號(hào)】A61K31/12GK105919973SQ201610262638
【公開日】2016年9月7日
【申請(qǐng)日】2016年4月26日
【發(fā)明人】汪世龍, 朱融融, 賀曉烈
【申請(qǐng)人】同濟(jì)大學(xué)