用于預(yù)防和治療神經(jīng)病理性疼痛的藥物組合物及其用圖
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種治療神經(jīng)病理性疼痛特別是糖尿病引發(fā)的神經(jīng)病理性疼痛的藥物組合物，該藥物組合物以瑞替加濱和加巴噴丁為藥物活性成分，藥物組合物中瑞替加濱和加巴噴丁的重量比為1：0.01?500，優(yōu)選為1：0.2?300，進一步優(yōu)選為1：1.5?24。藥物組合物用于糖尿病神經(jīng)病理性疼痛時優(yōu)選為口服給藥，藥物組合物中瑞替加濱和加巴噴丁對神經(jīng)病理性疼痛的治療體現(xiàn)出顯著的協(xié)同作用。該藥物組合物成分明確，治療效果確切，不良作用小，具有很好的醫(yī)療價值。
【專利說明】
用于預(yù)防和治療神經(jīng)病理性疼痛的藥物組合物及其用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，設(shè)及一種西藥藥物組合物及其用途，具體設(shè)及一種含有瑞 替加濱和加己噴下的藥物組合物及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 神經(jīng)病理性疼痛是慢性疼痛的兩種主要類型之一。產(chǎn)生慢性傷害感受性/炎癥性 疼痛時，機體組織受到損傷，并通過傳導(dǎo)傷害感受性刺激的神經(jīng)通路形成疼痛信號的慢性 傳遞。而神經(jīng)病理性疼痛通常沒有組織損傷，或是在外周神經(jīng)損傷后發(fā)生，疼痛傳導(dǎo)通路功 能素亂，導(dǎo)致疼痛信號的異常慢性傳遞。某些情況下（如癌癥），可同時具有運兩種疼痛類 型。
[0003] 形成神經(jīng)病理性疼痛時，可W有明顯的神經(jīng)損傷，也可W沒有。未累及運動神經(jīng)纖 維的神經(jīng)損傷通常難W診斷。損傷可能發(fā)生在周圍或者中樞傷害感受性神經(jīng)通路的任何水 平，但由于分布位置的緣故，周圍神經(jīng)的損傷更為常見。目前神經(jīng)病理性疼痛的產(chǎn)生機制并 未完全明確，但該方面的研究非?；钴S。在許多患者中可能有多種機制的參與運種情況下， 運種情況與其它一些復(fù)雜的慢性疾病非常類似，如哮喘或慢性屯、衰，因此可能需要針對各 種機制的不同藥物來治療。
[0004] 加己噴下（gabapentin，商品名化urontin)，化學(xué)名為1-(氨甲基）環(huán)己燒乙酸，分 子結(jié)構(gòu)與丫-氨基下酸(GABA)相似，是一種新型抗癒痛藥，1994年美國食品與藥物管理局 (FDA)批準(zhǔn)該藥在臨床上用于治療各種癒痛癥。近年研究發(fā)現(xiàn)，加己噴下對神經(jīng)性疼痛 (neuropathicpain)具有較好療效，與阿片類藥聯(lián)合應(yīng)用對治療術(shù)后疼痛具有明顯的協(xié)同 效果。該藥的不良反應(yīng)少，因此可望成為有前途的鎮(zhèn)痛藥。目前應(yīng)用在臨床的加己噴下只有 口服制劑，口服后在小腸主要通過L氨基酸運輸系統(tǒng)吸收。加己噴下的一個顯著藥理特點是 不經(jīng)肝臟降解，不誘導(dǎo)也不抑制肝微粒體酶，與蛋白質(zhì)結(jié)合率極低，因此基本不影響其他抗 癒痛藥和阿片類藥的代謝，但其他藥物可能影響加己噴下的消除。
[0005] 加己噴下(gabapentin)為二代抗癒痛藥，最常用于治療神經(jīng)病理性疼痛。大規(guī)模 雙盲、隨機、安慰劑對照試驗證明，加己噴下治療糖尿病周圍神經(jīng)病變性疼痛和帶狀瘤疹后 疼痛是有效的。在該試驗中，加己噴下的劑量由900mg/日開始滴定，直至最大可耐受劑量 (最高達(dá)3600mg/日），并在試驗維持階段保持穩(wěn)定。疼痛評分改善的同時伴有睡眠、情緒和 生活質(zhì)量的改善。加己噴下用于治療癌癥、幻肢痛、格林一己利綜合征(Guillain-Barr有 symlrome)和脊髓損傷引起的神經(jīng)病理性疼痛也有效。
[0006] 加己噴下化學(xué)結(jié)構(gòu)與GABA相似，對GABA的合成和釋放有一些影響，但其本身并不 與GABA受體結(jié)合，不影響內(nèi)源性GABA的攝取和代謝，其抗痛敏作用也不受GABA受體括抗藥 的影響，因此認(rèn)為作用機制可能與GABA受體無關(guān)。目前認(rèn)為加己噴下的鎮(zhèn)痛作用可能與W 下幾方面機制有關(guān):①加己噴下可能通過抑制P/Q型巧通道而減少神經(jīng)元的巧離子內(nèi)流，進 而減少腦組織內(nèi)君子氨酸(AMPA)受體激活和去甲腎上腺素的釋放。②加己噴下可能是作為 一種NMDA-甘氨酸部位的括抗劑發(fā)揮作用，而D-絲氨酸通過競爭替代加己噴下發(fā)揮逆轉(zhuǎn)作 用③加己噴下的鎮(zhèn)痛作用可能與抑制興奮性氨基酸釋放有關(guān)。
[0007] 瑞替加濱是一種新型抗癒痛藥物，由葛蘭素史克和化leant公司合作開發(fā)，是同時 作為鐘離子通道的開啟者和丫-氨基下酸(GABA)的增強劑。瑞替加濱的雙重作用機制，可W 從不同機制上控制癒痛的發(fā)作，緩解病情。為神經(jīng)元鐘通道開放劑。神經(jīng)元鐘通道開放劑瑞 替加濱(retigabine)治療頑固性癒痛患者的癒痛部分發(fā)作有較好療效。目前國際市場上抗 癒痛藥物的發(fā)展熱點主要集中在高效、低風(fēng)險和低副作用上。瑞替加濱的出現(xiàn)，是間斷發(fā)作 性癒痛治療的一項潛在的重大進步，給間斷發(fā)作性癒痛患者帶來了新的希望。
[0008] 現(xiàn)有的治療神經(jīng)病理性疼痛的藥物中，尚無 W加己噴下和瑞替加濱為活性成分的 藥物組合物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 為了克服現(xiàn)有神經(jīng)性疼痛治療藥物治療效果不理想，副作用大的缺陷，本發(fā)明提 供一種新的神經(jīng)性疼痛治療用藥物組合物，該藥物組合物的優(yōu)點是組分明確，效果確切，治 療效果顯著，毒副作用低。
[0010] 本發(fā)明藥物組合物含有藥物活性成分瑞替加濱和加己噴下，本發(fā)明人通過大量藥 理實驗發(fā)現(xiàn)該藥物組合物在治療神經(jīng)性疼痛時表現(xiàn)出顯著的治療作用。本發(fā)明實施例7證 明瑞替加濱加己噴下藥物組合物對各種神經(jīng)病理性疼痛的治療效果顯著優(yōu)于各單藥組對 神經(jīng)病理性疼痛的治療效果，兩種藥物對神經(jīng)病理性疼痛的治療體現(xiàn)出明顯的協(xié)同作用。 本發(fā)明實施例8表明瑞替加濱和加己噴下組成復(fù)方后，不論與瑞替加濱單藥組相比，還是與 加己噴下單藥組相比，其對糖尿病神經(jīng)病理性疼痛大鼠模型均表現(xiàn)出顯著的治療作用，且 該治療效果隨著治療時間的延長而顯著增強。瑞替加濱和加己噴下在治療糖尿病引發(fā)的神 經(jīng)病理性疼痛方面表現(xiàn)出顯著的協(xié)同作用。
[0011] 本發(fā)明中瑞替加濱和加己噴下聯(lián)合應(yīng)用組成復(fù)方后，藥物成分明確、性質(zhì)穩(wěn)定、相 互影響較小，便于藥物制劑質(zhì)量控制的建立，有利于生產(chǎn)制備時質(zhì)量的控制，非常適合工 業(yè)化大生產(chǎn)。
[0012] 本發(fā)明所述的藥物組合物包含兩種藥物活性成分：
[0013] 1)瑞替力鴨；
[0014] 2)加己噴下。
[0015] 如上所述的藥物組合物中，瑞替加濱和加己噴下的重量比為1:0.01-500,優(yōu)選地， 瑞替加濱和加己噴下的重量比為1:0.2-300;進一步優(yōu)選地，瑞替加濱和加己噴下的重量比 為1:1.5-24。
[0016] 本發(fā)明藥物組合物種還可W含有制劑工藝上可接受的輔料賦形劑制備成合適的 用藥劑型。本發(fā)明的藥物組合物劑型優(yōu)選為口服藥物劑型。口服藥物劑型可W為片劑、緩控 釋片劑、膠囊劑、日服液、顆粒劑等。所述片劑含有一種或多種如下輔料:淀粉、糊精、低取代 徑丙基纖維素、硬脂酸儀，微晶纖維素，徑丙基纖維素，淀粉漿乳糖、甘露醇、微粉硅膠、交聯(lián) 簇甲基纖維素鋼、交聯(lián)聚乙締化咯燒酬。所述膠囊劑或顆粒劑含有一種或多種如下輔料:可 壓性淀粉、乳糖、低取代徑丙基纖維素、微晶纖維素、微粉硅膠。所述緩釋劑或控釋劑含有一 種或多種如下輔料:可壓性淀粉、乳糖、低取代徑丙基纖維素、微晶纖維素、微粉硅膠、卡波 姆，海藻酸鋼、海藻酸巧，甲殼素。
[0017] 按照本發(fā)明所提供的藥物組合物制備成的藥物劑型中，所述制劑中每一制劑單位 含有加己噴下的有效量為10mg-500mg，含有瑞替加濱的有效量為10mg-250mg。
[0018] 本發(fā)明的另一目的是公開藥物組合物在制備治療神經(jīng)病理性疼痛藥物中的用途。 本發(fā)明藥物組合物對神經(jīng)病理性疼痛取得了良好的治療效果，尤其在治療糖尿病引發(fā)的神 經(jīng)病理性疼痛時取得了明顯的協(xié)同作用，顯著優(yōu)于加己噴下和瑞替加濱單獨用藥時的治療 效果。本發(fā)明藥物組合物治療神經(jīng)病理性疼痛，尤其是糖尿病引發(fā)的神經(jīng)性病理性疼痛時， 優(yōu)選為口服給藥。藥物組合物中，加己噴下的給藥劑量為5mg/kg.d-40mg/kg.d，優(yōu)選為 lOmg/kg. d-40mg/kg. d;瑞替加濱的給藥劑量為 Img/kg. d-3mg/kg. d，優(yōu)選為 1.5mg/kg. d- 2.5mg/kg.d〇
[0019] 本藥物組合物的優(yōu)勢體現(xiàn)在下列方面：
[0020] (1)本發(fā)明藥物組合物中瑞替加濱和加己噴下在治療神經(jīng)病理性疼痛尤其是糖尿 病引發(fā)的神經(jīng)病理性疼痛時，顯著優(yōu)于各單藥治療組，體現(xiàn)出很強的協(xié)同作用。另外，本發(fā) 明藥物組合物在長期用藥過程中體現(xiàn)出效果積累效應(yīng)，因此可W預(yù)期長期用藥可W顯著 改善神經(jīng)病理性疼痛，并可能徹底達(dá)到治愈的目的。
[0021] (2)在治療過程中，合并使用作用機制不同的藥物可W增強對神經(jīng)病理性疼痛的 治療效果，使多種危險因素或并存疾病得到最佳控制，有利于保護神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能，進 一步減少毒副作用發(fā)生率。
[0022] (3)由于在組成固定復(fù)方時，各單藥劑量均有所減少，使藥物的副作用降低，而治 療費用卻大大減少，因此固定復(fù)方給藥使得治療的效益/費用比明顯提高，從而使患者的治 療依從性大大提高。
[0023] (4)本發(fā)明藥物組合物尤其對糖尿病引發(fā)的神經(jīng)病理性疼痛有效，有效地緩解該 類病人的疼痛，且對糖尿病本身也起到一定和緩解作用，從而使患者的生活質(zhì)量大大改善。
【具體實施方式】
[0024] 現(xiàn)通過如下實施例進一步說明本發(fā)明的內(nèi)容，其中實施例1~6為制劑實施方式， 實施例7~8為藥效學(xué)實施方式，但本發(fā)明的應(yīng)用范圍不僅僅限于下列實施例。
[0025] 實施例1加己噴下瑞替加濱復(fù)方片劑的制備 加 E噴了 地雌 瑞替加濱 0. 8g 可壓性淀粉 1淡g
[0026] 環(huán)糊精 10備 潑甲基淀粉鋼 lOg 硬脂酸儀 0. 6呂' 5%PVP的無水乙醇溶液 想量
[0027] 制備工藝:先將加己噴下和環(huán)糊精放入研鉢中研磨混合均勻，依次加入簇甲基淀 粉鋼、可壓性淀粉混合均勻，最后加入瑞替加濱混勻，用5%PVP的無水乙醇溶液作粘合劑制 粒，40°C干燥，整粒，加人硬脂酸儀混勻，壓片，即得。
[0028] 實施例2加己噴下瑞替加濱復(fù)方片劑的制備 加己噴下 日.01館
[0029] 瑞替加濱 8呂 可壓性淀粉 130g 環(huán)糊精 lOg
[0030] 簇甲基淀粉鋼 1峨 硬脂酸鎮(zhèn) 掃.％ 5%PVP的無水藝醇溶液 適量
[0031] 制備工藝:先將加己噴下和環(huán)糊精放入研鉢中研磨混合均勻，依次加入簇甲基淀 粉鋼、可壓性淀粉混合均勻，最后加入瑞替加濱混勻，用5%PVP的無水乙醇溶液作粘合劑制 粒，40°C干燥，整粒，加人硬脂酸儀混勻，壓片，即得。
[0032] 實施例3加己噴下瑞替加濱復(fù)方片劑的制備 加己噴下 1胎 瑞替如濱 如I 微晶纖維素 15始：
[0033] 0 -環(huán)糊精 1胎 簇甲基淀粉鋼 巧昏 微粉硅膠 0. 8g
[0034] 制備工藝:先將加己噴下和β-環(huán)糊精放入研鉢中研磨混合均勻，依次加入簇甲基 淀粉鋼、微晶纖維素、微粉硅膠混合均勻，最后加入瑞替加濱混勻，粉末直接壓片，即得。
[0035] 實施例4加己噴下瑞替加濱膠囊劑的制備 加巴睛下 150呂 瑞替加濱 0.員名
[0036] 微晶纖維素 激:跑 β -環(huán)糊精 10呂 微粉裡膠 1甚
[0037] 制備工藝:先將加己噴下和β-環(huán)糊精放入研鉢中研磨混合均勻，依次加入微晶纖 維素、微粉硅膠混合均勻，最后加入瑞替加濱混勻，裝填膠囊殼，即得。
[0038] 實施例5加己噴下瑞替加濱顆粒劑的制備
[0039] 加芭噴了 巧豎 瑞替加鑽 18替 交聯(lián)簇甲基纖維素鋼 lOg 甲基纖維素 1。當(dāng) 0-環(huán)糊精 1呂宮
[0040] 微晶纖維素 沸始 阿斯臣甜 1.目皂 十二烷基硫酸鋼 就接 5%聚維酬石醇液 逸量 甜攪香精 5:g
[0041] 制備工藝:先將加己噴下與β-環(huán)糊精混合均勻，然后加入瑞替加濱、微晶纖維素、 交聯(lián)簇甲基纖維素鋼、甲基纖維素、十二烷基硫酸鋼過16目篩后混合，后再與甜澄香精、阿 斯己甜混合均勻?；旌衔镉?%聚維酬乙醇液制粒，干燥，整粒，分裝，即得。
[0042] 實施例6加己噴下瑞替加濱緩釋片劑的制備 化芭噴下 240g 瑞替加濱 lOg 段-環(huán)糊精 lOg 卡波姆 1棚
[0043] 輕丙基纖維素 Kg 8%淀粉漿 適量 硬脂酸儀 1. 5g 制得 1000片
[0044] 制備工藝:稱取處方量的加己噴下，瑞替加濱，卡波姆，徑丙基纖維素，β-環(huán)糊精混 合均勻。另取適宜量的8%淀粉漿溶液，加入混合粉末中，混合均勻后制軟材，通過16目篩制 粒，60°CW下干燥。干燥后完成后用18目篩進行整粒，篩出干粒中的細(xì)粉，與過篩的硬脂酸 儀混勻，然后再與干顆?；旌途鶆颍瑝浩?，即得。
[0045] 實施例7加己噴下瑞替加濱藥物組合物對神經(jīng)病理性疼痛的治療作用
[0046] 1.實驗造模及給藥
[0047] (1)加己噴下瑞替加濱藥物組合物對大鼠甲醒致痛的影響
[004引50只SD大鼠隨機分成5組，每組10只，雌雄各半，造模前Ih灌胃給予各組藥物 (lOml/kg)(如表1所示），模型組灌胃給純水。用10化微量注射器在大鼠左足巧皮下注射2% 的甲醒l(K)yL，注射甲醒后，立即觀察各組大鼠的行為學(xué)變化，每5min記錄1次，持續(xù)化，觀察 者不清楚實驗的分組情況(雙盲）。實驗過程中避免強光，保持環(huán)境安靜。
[0049]將大鼠疼痛分為4級:0級為兩后腳掌平放在地面，活動無異常；1級為注射腳掌輕 微接觸地面，活動時有販行;2級為注射腳掌抬起，不接觸地面;3級為大鼠祿咬或搖動注射 腳掌。
[0化0]痛級（pain intensity scoring,PIS)的計算方法：PIS=(T1+2XT2+3XT3)/(5X 60)，其中ΤΙ，Τ2，Τ3分別是5min內(nèi)出現(xiàn)1，2，3級的時間。
[0051 ]表1實驗大鼠分組及給藥劑量
[0化2]
[0053] (2)加己噴下瑞替加濱藥物組合物對大鼠熱板致痛的影響 [0化4]雌性SD大鼠50只，隨即分為5組，各組動物按表2灌胃給藥（lOml/kg)，模型組灌純 水，每天兩次，第Ξ天下午給藥后半小時進行測定，實驗時控制室溫18°C~2rC。將大鼠置 于熱板儀上（熱板溫度控制在55°C)，用秒表記錄大鼠自放在熱板上至出現(xiàn)祿后足所需時 間，作為該鼠的痛闊值。每只大鼠測量3次痛闊值，每只大鼠2次測量時間間隔40min。
[0055]表2實驗大鼠分組及給藥劑量
[0化6]
[0058] (3)加己噴下瑞替加濱對大鼠熱水致痛的影響
[0059] 50只SD大鼠隨機分5組，每組10只，雌雄各半，灌胃給予各組藥物（lOml/kg)后比測 定痛闊值(如表2)，模型組灌胃給予純水。先將leica攤片機溫度設(shè)定在48°C，測定前預(yù)先在 所有大鼠的尾己上用油性筆作一標(biāo)記，此標(biāo)記與大鼠尾己尖部的距離約為5cm，然后將大鼠 用鼠袋包上，露出尾己，并將大鼠的尾己放入攤片機水內(nèi)，使得液面與大鼠尾己上的標(biāo)記重 合，大鼠尾己與熱水接觸時立刻用秒表記時，記錄大鼠尾己第一次從熱水中縮起的時間，每 只大鼠測量3次致痛時間（每只大鼠2次測量時間間隔為lOmin，否則容易將大鼠燙傷），取3 次致痛時間的均數(shù)為該大鼠的痛闊。
[0060] (4)加己噴下瑞替加濱對冰醋酸致小鼠扭體試驗的影響
[0061] 小鼠腹腔注射醋酸，引起腹腔深部大面積而較持久的疼痛刺激，致使小鼠產(chǎn)生扭 體反應(yīng)，給藥后化，i . P 0.6%醋酸生理鹽水溶液0.1 ml/lOg，記錄自注射醋酸致痛后每只小 鼠在20min內(nèi)出現(xiàn)的扭體反應(yīng)的時間和次數(shù)。
[0062] 表3實驗大鼠分組及給藥劑量
[0063]
[0064] 2統(tǒng)計學(xué)分析
[0065] 所有數(shù)據(jù)均輸入SPSS 1 1.5進行t檢驗，各組計量數(shù)據(jù)均采用±3表示。
[0066] 3實驗結(jié)果
[0067] 3.1加己噴下瑞替加濱對大鼠甲醒致痛的影響
[0068] 實驗組大鼠單側(cè)足底注入2%甲醒O.lmL后，注射部逐漸紅腫，給藥完畢后動物立 即出現(xiàn)縮足和祿足等行為，在化內(nèi)表現(xiàn)出明顯的雙相反應(yīng)，實驗結(jié)果表明各組藥物均不能 減輕大鼠第一相評分，復(fù)方低劑量組在第二時相第15-20分鐘時段、第25-30分鐘時段和第 40-50分鐘時段評分與模型組相比減輕(P<0.05或P<0.01 )，復(fù)方高劑量組20-60分鐘評分 均低于模型組(P<〇.05或P<0.01)，加己噴下組在第25-35分鐘和40-50分鐘段評分顯著低 于模型組（P<〇. 01)，瑞替加濱組在第25-30分和40-50分鐘時間段評分顯著減輕（P< 0.05)。結(jié)果表明復(fù)方組呈現(xiàn)劑量依賴效應(yīng)，高劑量組評分低于低劑量組，其中在5-10分鐘、 30-35分鐘和50-60分鐘差異具有顯著性意義。加己噴下組評分高于復(fù)方高劑量組，在55-60 時間段差異有統(tǒng)計學(xué)意義。瑞替加濱組評分也高于復(fù)方高劑量組，在第25-40分鐘段差異具 有統(tǒng)計學(xué)意義，而且給藥各組評分的峰值出現(xiàn)的時間均比模型組推后。
[0069] 3.2加己噴下瑞替加濱對大鼠熱板致痛的影響
[0070] 實驗結(jié)果（如表4)表明：復(fù)方低劑量組和復(fù)方高劑量組在給藥后與模型組相比痛 闊值明顯升高(P<〇. 01)，與加己噴下單藥高量組W及瑞替加濱單藥高量組相比痛闊值也 有升高(P<〇.05)，表明加己噴下和瑞替加濱在升高痛闊值方面存在著明顯的協(xié)同作用。其 中復(fù)方組給藥后30min，70min和llOmin后，痛闊值持續(xù)升高表明復(fù)方組在治療方面表現(xiàn)出 持續(xù)得效果積累效應(yīng)。復(fù)方低組在升高痛闊值方面優(yōu)于加己噴下單藥高量組和瑞替加濱單 藥高組，表現(xiàn)出顯著的協(xié)同作用。
[0071 ]表4加己噴下瑞替加濱對大鼠熱板致痛作用的影響
[0072]
[0073] 與模型組相比吁<0.05，*中<0.01;與加己噴下組比咕<0.05，#咕<0.01
[0074] 與瑞替加濱組相比，中<0.05，&中<0.01;
[0075] 3.3加己噴下瑞替加濱對大鼠熱水致痛的影響
[0076] 實驗結(jié)果(如表5)表明：給藥后化測大鼠甩尾時間作為疼痛闊值，復(fù)方低劑量組、 復(fù)方高劑量組、加己噴下組甩尾時間與對照組比較均明顯縮短（P<〇. 01，P<〇. 001，P< 0.01)。
[0077] 表5加己噴下瑞替加濱對大鼠熱水致痛疼痛闊值的影響 [007引
[00巧]與模型組相比，吁〈0.05，*中〈0.01;
[0080]實施例8加己噴下瑞替加濱藥物組合物對糖尿病引發(fā)神經(jīng)病理性疼痛的治療 [0081 ] 1.1實驗動物及實驗用品
[0082] 健康雄性SD大鼠120只，體重180~220g，SPF級，山東新時代藥業(yè)新藥安評中屯、提 供。室溫20~25°C，室內(nèi)通風(fēng)良好，氨濃度小于20 X 10-6mL/m3，相對濕度為40%~70%，照 明周期12h，大鼠飼養(yǎng)于不誘鋼鼠籠中，每籠4只，自由攝食、飲水。
[0083] 鏈脈佐菌素（STZ，sigma公司生產(chǎn)，美國）；ZH LU0/B型鼠尾光熱測痛儀、YLS 3E型 電子壓痛儀均購自安徽淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司。
[0084] 1.2造模及篩選
[0085] 120只大鼠隨機留取10只作為正常對照組，其余110只大鼠禁食1化后按75mg . kg- 1 一次性腹腔注射STZ溶液(STZ溶液配制：將STZ溶于抑4.2、0.1 m mol/L巧樣酸緩沖液中， 溶液現(xiàn)用現(xiàn)配，濃度為3.75%(W/V^0.5mL/100g)。
[0086] 血糖測定:造模7d后測尾靜脈血糖，血糖>16m mol/L則為糖尿病大鼠，實驗中有 47只大鼠成功建成DM模型（模型組）。STZ注射前和注射后第7、21、35、49d檢測血糖，血糖低 于16m mol/L則棄用。
[0087] 機械痛闊測定:于STZ注射前(基礎(chǔ)狀態(tài)）、注射后21、35、49d測定機械痛闊。將大鼠 置于裝有音頻放大器的透明有機玻璃固定筒內(nèi)，鼠尾露筒外，在距尾尖5cm處標(biāo)記。大鼠適 應(yīng)環(huán)境15min，待大鼠梳理和探究活動消失后，將鼠尾標(biāo)記處置于電子壓痛儀壓頭處，向鼠 尾施壓(每秒增加 lOg)，當(dāng)大鼠出現(xiàn)疼痛反應(yīng)如嘶鳴、掙扎則停止施壓，記錄施壓數(shù)據(jù)(g)， 連續(xù)測定5次，每次間隔lOmin，取平均值作為機械痛闊值。若壓力值超過500g則剔除。
[0088] 熱痛闊測定:測定時間點、準(zhǔn)備方法同機械痛闊。ZH LU0/B型鼠尾測痛儀的加熱溫 度設(shè)定為49°C，達(dá)到設(shè)定值后將福射光源對準(zhǔn)距尾尖4cm處，記錄從光照開始到鼠尾翅起的 時間（S)。若光照時間超過15s鼠尾仍未翅起則剔除，測定5次，每次間隔lOmin，取均值作為 熱痛闊值。
[0089] 造模結(jié)果:注射鏈脈佐菌素的大鼠經(jīng)血糖測定篩選、機械痛闊和熱痛闊篩選后剩 余大鼠即為造模成功的糖尿病神經(jīng)病理性疼痛大鼠，大鼠造模成功96只，造模成功率為 87.2%。
[0090] 1.3動物分組及給藥
[0091] 選取成功造模的糖尿病神經(jīng)病理性大鼠60只，隨機分成六組，每組十只，分別給予 下列藥物，另增加正常對照組。
[0092] 正常組:灌胃給予等體積的蒸饋水
[0093] 模型組:灌胃給予等體積的蒸饋水
[0094] 加己高組:灌胃給予300mg/kg的加己噴下 [00M]加己低組:灌胃給予lOmg/kg的加己噴下 [00%]瑞替高組:灌胃給予50mg/kg的瑞替加濱 [0097]瑞替低組:灌胃給予Img/kg的瑞替加濱
[009引復(fù)方一組:灌胃給予lOmg/kg的加己噴下和50mg/kg的瑞替加濱的藥物組合物
[0099] 復(fù)方二組:灌胃給予lOmg/kg的加己噴下和Img/kg瑞替加濱的藥物組合物
[0100] 復(fù)方Ξ組:灌胃給予300mg/kg的加己噴下和Img/kg瑞替加濱藥物組合物
[0101] 復(fù)方四組:灌胃給予300mg/kg的加己噴下和50mg/kg瑞替加濱藥物組合物
[0102] 各給藥組藥物用適量蒸饋水溶解，灌胃給藥，每天給藥一次。給藥7d、14d、21d后， 測定各給藥組大鼠的機械痛闊值和熱痛闊值。各給藥組測定結(jié)果如表所示。
[0103] 表6復(fù)方對糖尿病神經(jīng)病理性大鼠的治療作用
[0104]
[0106] 與正常組相比，**P〈0.01;與模型組相比，咕〈0.05，#胖〈0.01;
[0107] 與加己高組相比，Υρ〈0.05，Wp〈〇. 01;與加己低組相比，中〈0.05，&中〈〇. 01;
[010引與瑞替高組相比，啤〈0.05，@啤〈0.01;與瑞替低組相比，％P〈0.05，％%P〈0.01;
[0109]由上表可W看出，模型組與正常組相比，機械痛闊和熱痛闊下降顯著(P〈0.01)，表 明采用注射鏈脈佐菌素所得糖尿病神經(jīng)病理性疼痛大鼠模型理想，符合實驗需要。加己噴 下僅在高劑量組時對糖尿病神經(jīng)病理性疼痛大鼠機械痛闊和熱痛闊有一定的升高作用，且 其治療效果并不隨治療時間延長而增強。瑞替加濱的高劑量組和低劑量組均不引起糖尿病 神經(jīng)病理性疼痛大鼠的機械痛闊和熱痛闊的改變。但瑞替加濱與加己噴下組成復(fù)方時，貝U 對糖尿病引發(fā)的神經(jīng)病理性疼痛表現(xiàn)出顯著的治療作用，且隨著用藥時間的延長，糖尿病 神經(jīng)病理性疼痛大鼠的機械痛闊和熱痛闊逐漸接近正常大鼠組。復(fù)方組(復(fù)方一、二、Ξ、四 組)無論與瑞替加濱單藥組相比，還是與加己噴下單藥組相比在對糖尿病引發(fā)的神經(jīng)病理 性疼痛方面均表顯著顯著的治療作用，即瑞替加濱和加己噴下在治療糖尿病引發(fā)的神經(jīng)病 理性疼痛方面存在顯著的協(xié)同作用。
【主權(quán)項】
1. 一種神經(jīng)病理性疼痛治療用藥物組合物，其特征在于其藥物活性成分為瑞替加濱和 加巴噴丁。2. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于藥物組合物中瑞替加濱和加巴噴丁的 重量比為1:0.01-500。3. 如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于藥物組合物中瑞替加濱和加巴噴丁的 重量比為1:0.2-300。4. 如權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于藥物組合物中瑞替加濱和加巴噴丁的 重量比為1:1.5-24。5. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于藥物組合物為口服藥物制劑。6. 如權(quán)利要求1-5所述的藥物組合物，其特征在于所述口服藥物制劑為片劑、膠囊劑、 緩釋片劑、顆粒劑。7. 如權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其特征在于所述口服藥物制劑每一制劑單位中含 有加巴噴丁的有效量為10mg-500mg，含有瑞替加濱的有效量為10mg-250mg。8. 權(quán)利要求1所述的藥物組合物在制備治療神經(jīng)病理性疼痛藥物中的用途。9. 如權(quán)利要求8所述的藥物組合物用途，其特征在于所述神經(jīng)病理性疼痛為糖尿病引 發(fā)的神經(jīng)病理性疼痛。
【文檔編號】A61K31/195GK105919990SQ201610496300
【公開日】2016年9月7日
【申請日】2016年6月29日
【發(fā)明人】王傳秀
【申請人】青島云天生物技術(shù)有限公司