一種花粉祛癢止痛軟膏及其制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種花粉祛癢止痛軟膏及其制作方法，該軟膏主要由天花粉，白芷，雪上一枝蒿，冰片，樟腦，醋制乳香，醋制沒(méi)藥，薄荷油，桉油及輔料制作成外用軟膏。本發(fā)明根據(jù)花粉祛癢止痛酊組方中各藥物的性質(zhì)，以及該藥物在組方中所起的作用，將其制成軟膏劑，并對(duì)所用基質(zhì)進(jìn)行了篩選，對(duì)基質(zhì)用量進(jìn)行了優(yōu)化，所選基質(zhì)可促進(jìn)藥物其中的大分子藥物在體內(nèi)的吸收，增加藥物透過(guò)率；還可在角質(zhì)層和真皮形成藥物儲(chǔ)庫(kù)，明顯緩釋藥物，藥效顯著增加。還適合各類患者使用。同時(shí)，對(duì)具體制作工藝及參數(shù)進(jìn)行了改進(jìn)，基質(zhì)和本發(fā)明制作工藝結(jié)合，促進(jìn)了白芷中有效成分的溶出，尤其是白芷中有效成歐前胡素的溶出。使得本藥物更加精煉，藥效更加顯著，臨床療效好。
【專利說(shuō)明】
_種花粉祛癢止痛軟當(dāng)及其制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種花粉祛癢止痛軟膏的制作方法，屬于藥品技術(shù)的領(lǐng)域。 技術(shù)背景
[0002] 跌打損傷在日常生活中對(duì)于有些人似乎是家常便飯，中醫(yī)治療跌打損傷有著幾千 年的歷史，古稱"跌打損傷"為諸傷之總論，多因外力作用，或自身姿勢(shì)不正確的情況下用力 過(guò)猛而造成的。中醫(yī)把凡因外力作用于人體而引起的筋骨傷損、瘀血腫痛、氣血不和、經(jīng)絡(luò) 不通以至臟器受損等，統(tǒng)稱為跌打損傷。其主要病理為淤血壅滯，血閉氣阻，故以疼痛、腫脹 為主要表現(xiàn)。治療多以活血通絡(luò)，舒筋行氣，消腫止痛為法，療效也較為明顯。
[0003] 花粉祛癢止痛酊源于少數(shù)民族民間用藥，雪上一枝蒿具有強(qiáng)烈鎮(zhèn)痛作用，為主藥， 輔以白芷、天花粉為臣藥，具有消腫、止癢的作用，助雪上一枝蒿發(fā)揮消炎、止痛功效;痛則 不通，通則不痛，故佐以具有活血化瘀、行氣止痛的乳香，沒(méi)藥。本方具有活血化瘀，消腫止 痛，祛風(fēng)止癢的功效，本方用于活血化瘀，消腫止痛，祛風(fēng)止癢，效果明顯。但由于酊劑中含 有大量的乙醇，皮膚對(duì)乙醇敏感的患者不宜適用，且酊劑在儲(chǔ)存過(guò)程中乙醇容易揮發(fā)，會(huì)影 響藥物的療效。此外，
【申請(qǐng)人】還發(fā)現(xiàn)，采用現(xiàn)有提取工藝制成花粉祛癢止痛制劑中，白芷的 有效成分不易測(cè)出，尤其是歐前胡素的含量不易測(cè)出。使得花粉祛癢止痛制劑的臨床療效 還不夠理想。
[0004] 軟膏，指藥物與適宜基質(zhì)均勻混合制成的具有一定稠度的半固體外用制劑，作為 載體透皮給藥。其作為載體透皮給藥，與其他劑型相比具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，能提高藥物的透皮能 力，可在角質(zhì)層和真皮形成藥物儲(chǔ)庫(kù)，明顯緩釋藥物，達(dá)到長(zhǎng)時(shí)間高劑量的釋放，從而提高 藥物的生物利用度，達(dá)到增加藥效的目的，且易儲(chǔ)存，保質(zhì)期長(zhǎng)，適合各類患者使用。
[0005] 如將花粉祛癢止痛酊制成軟膏，將擴(kuò)大花粉祛癢止痛藥物的適用范圍，更好地為 患者服務(wù)。

【發(fā)明內(nèi)容】
：
[0006] 本發(fā)明的目的在于，提供一種花粉祛癢止痛軟膏及其制作方法。本發(fā)明根據(jù)花粉 祛癢止痛酊組方中各藥物的性質(zhì)，以及該藥物在組方中所起的作用，將其制成軟膏劑，并對(duì) 所用基質(zhì)進(jìn)行了篩選，對(duì)基質(zhì)用量進(jìn)行了優(yōu)化，所選基質(zhì)可促進(jìn)藥物其中的大分子藥物在 體內(nèi)的吸收，增加藥物透過(guò)率;還可在角質(zhì)層和真皮形成藥物儲(chǔ)庫(kù)，明顯緩釋藥物，藥效顯 著增加。還適合各類患者使用。同時(shí)，還對(duì)具體制作工藝及參數(shù)進(jìn)行了改進(jìn)，本發(fā)明基質(zhì)和 本發(fā)明制作工藝結(jié)合，促進(jìn)了白芷中有效成分的溶出，尤其是白芷中有效成歐前胡素的溶 出。使得本藥物更加精煉，藥效更加顯著，臨床療效好。
[0007] 為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):一種花粉祛癢止痛軟膏，由 按照重量份計(jì)的天花粉30-60份，白芷30-60份，雪上一枝蒿20-50份，冰片1-8份，樟腦1-8 份，醋制乳香10 _30份，醋制沒(méi)藥10-30份，及按體積份計(jì)的薄荷油5_30份、桉油1_8份，甘油 50-80份以及按照重量份計(jì)的阿拉伯膠8-22份、羧甲基纖維素鈉10-30份、白醋0.1-1.0份、 蜂蜜5-17份及純化水15-25份制作而成。
[0008] 前述的花粉祛癢止痛軟膏中，由按照重量份計(jì)的天花粉45份，白芷45份，雪上一枝 蒿34份，冰片4份，樟腦5份，醋制乳香20份，醋制沒(méi)藥20份，及按體積份計(jì)的薄荷油10份、桉 油5份，甘油65份以及按照重量份計(jì)的阿拉伯膠16份、羧甲基纖維素鈉20份、白醋0.5份、蜂 蜜13份及純化水20份制作而成。
[0009] -種花粉祛癢止痛軟膏的制作方法，具體包括以下步驟：
[0010] (1)取天花粉，雪上一枝蒿，醋制乳香，醋制沒(méi)藥粉碎成粗顆粒，混勻，加75-85 %乙 醇浸潤(rùn)20-28小時(shí)，再用75-85 %乙醇分三次浸漬，第一次2-4小時(shí);第二、三次各1-3小時(shí)，合 并浸漬液，濾過(guò)，得混合濾液備用，取白芷，用水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，備用;藥渣加入6-8倍 量的水提取1-3次，每次l_3h，過(guò)濾，合并濾液，濃縮成濃縮液;濾渣再加入3-5倍量75-85 % 的乙醇溶液，回流提取1-3次，每次0.5-1.5h，過(guò)濾，合并濾液，回收乙醇至凈，得醇提取液， 醇提取液、濃縮液和混合濾液合并，得A品；
[0011] (2)另取冰片、樟腦、薄荷油、桉油加75-85 %乙醇溶解，加入A品中，再加75-85 %乙 醇使成800-1100ml，混勻，靜置20-28小時(shí)，取上清液，濾過(guò)，得B品；
[0012] ⑶將甘油和蜂蜜倒入純化水中，攪拌均勻，得C品；
[0013] ⑷向C品中依次加入羧甲基纖維素，攪拌均勻，得D品；
[0014] (5)向D品中依次加入阿拉伯膠、白醋和上述揮發(fā)油，攪拌均勻，得E品；
[0015] (6)E品與B品混勻，即得。
[0016] 前述的花粉祛癢止痛軟膏的制作方法，具體包括以下步驟：
[0017] (1)取天花粉，雪上一枝蒿，醋制乳香，醋制沒(méi)藥粉碎成粗顆粒，混勻，加80%乙醇 浸潤(rùn)24小時(shí)，再用80 %乙醇分三次浸漬，第一次3小時(shí);第二、三次各2小時(shí)，合并3次浸漬液， 濾過(guò)，得混合濾液，備用，取白芷，用水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，備用;藥渣加入7倍量的水提取 2次，每次2h，過(guò)濾，合并濾液，濃縮成常溫下相對(duì)密度為1.10-1.15的濃縮液，備用;濾渣再 加入4倍量80%的乙醇溶液，回流提取2次，每次lh，過(guò)濾，合并濾液，回收乙醇至凈，得醇提 取液，醇提取液、濃縮液和混合濾液合并，得A品；
[0018] (2)另取冰片、樟腦、薄荷油、桉油加80%乙醇溶解，加入A品中，再加80%乙醇使成 1000ml，混勻，靜置24小時(shí)，取上清液，濾過(guò)，得B品；
[0019] ⑶將甘油和蜂蜜倒入純化水中，攪拌均勻，得C品；
[0020] (4)向C品中依次加入羧甲基纖維素，攪拌均勻，得D品；
[0021] (5)向D品中依次加入阿拉伯膠和白醋，攪拌均勻，得E品；
[0022] (6)E品與B品混勻，即得。
[0023]本發(fā)明所述藥物處方中，雪上一枝蒿具有強(qiáng)烈鎮(zhèn)痛作用，為主藥，輔以白芷、天花 粉為臣藥，具有消腫、止癢的作用，助雪上一枝蒿發(fā)揮的消炎、止痛功效，痛則不通，通則不 痛，故佐以具有活血化瘀、行氣止痛的乳香，沒(méi)藥。具有活血化瘀，消腫止痛，祛風(fēng)止癢的功 效。
【申請(qǐng)人】對(duì)花粉止痛制劑進(jìn)行了長(zhǎng)時(shí)間的大量研究，
【申請(qǐng)人】最先以天花粉，白芷，雪上一 枝蒿，冰片，樟腦，醋制乳香，醋制沒(méi)藥，薄荷油及桉油為原料制成酊劑，但因酊劑含大量的 乙醇，皮膚對(duì)乙醇敏感的患者不宜適用，且酊劑在儲(chǔ)存過(guò)程中乙醇容易揮發(fā)，會(huì)影響藥物的 療效。又因軟膏劑作為載體透皮給藥，與其他劑型相比具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，能提高藥物的透皮能 力，可在角質(zhì)層和真皮形成藥物儲(chǔ)庫(kù)，明顯緩釋藥物，可達(dá)到長(zhǎng)時(shí)間高劑量的釋放，從而提 高藥物的生物利用度，達(dá)到增加藥效的目的，因此，
【申請(qǐng)人】考慮將其制成軟膏劑，但是制成 軟膏劑后，基質(zhì)占軟膏劑的絕大部分，除了賦形劑的作用外，同時(shí)也擔(dān)當(dāng)著藥物載體的角 色，對(duì)軟膏劑的質(zhì)量起著重要作用。為確保本發(fā)明軟膏劑質(zhì)量好，藥效佳，
【申請(qǐng)人】對(duì)軟膏的 基質(zhì)的選擇及其用量進(jìn)行了大量的研究，
【申請(qǐng)人】經(jīng)過(guò)大量試驗(yàn)得出，選擇甘油拉伯膠、羧甲 基纖維素鈉、白醋、蜂蜜和純化水作為基質(zhì)時(shí)，這樣制成的花粉祛癢止痛軟膏中大分子藥物 在體內(nèi)的吸收提高了，增加藥物透過(guò)率。
[0024] 此外，
【申請(qǐng)人】還對(duì)現(xiàn)有花粉祛癢止痛制劑的制作工藝進(jìn)行了改進(jìn)，現(xiàn)有花粉祛癢 止痛制劑的制作方法方法為:天花粉、白芷、雪上一枝蒿、乳香、沒(méi)藥粉碎成粗顆粒，混勻，加 80 %乙醇浸潤(rùn)24h，再用80 %乙醇分三次浸漬，第一次3小時(shí)，第二、三次各2h，合并3次浸漬 液，濾過(guò)，濾液備用；另取冰片、樟腦、薄荷油、桉油加80%乙醇溶解，加入上述濾液中，再加 80%乙醇使成1000ml，混勻，靜置24h，取上清液，濾過(guò)，即得。但是發(fā)明人在研究過(guò)程中發(fā) 現(xiàn)，采用這種方法制成的花粉祛癢止痛制劑中，白芷的有效成分不易測(cè)出。使得藥物制劑的 臨床療效還不夠理想。發(fā)明人在工藝研究中還發(fā)現(xiàn)，采用本發(fā)明方法將白芷單獨(dú)提取并改 變白芷的提取工藝，這樣制成的花粉祛癢止痛制劑中，白芷的有效成分容易測(cè)出，且測(cè)出的 白芷的有效成分高。這就使得使得本藥物更加精煉，藥效更加顯著，臨床療效好。
【申請(qǐng)人】還 發(fā)現(xiàn)，采用本發(fā)明工藝并配合上述的基質(zhì)，可更好的促進(jìn)白芷中有效成分的溶出，特別是歐 前胡素的溶出，促滲作用更加明顯，從而使花粉祛癢止痛制劑中的歐前胡素提高了，歐前胡 素是白芷的主要活性成分之一，花粉祛癢止痛軟膏中歐前胡素的提高使其臨床效果更好。
[0025] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明根據(jù)花粉祛癢止痛酊組方中各藥物的性質(zhì)，以及該藥物 在組方中所起的作用，將其制成軟膏劑，并對(duì)所用基質(zhì)進(jìn)行了篩選，對(duì)基質(zhì)用量進(jìn)行了優(yōu) 化，所選基質(zhì)可促進(jìn)藥物其中的大分子藥物在體內(nèi)的吸收，增加藥物透過(guò)率;還可在角質(zhì)層 和真皮形成藥物儲(chǔ)庫(kù)，明顯緩釋藥物，藥效顯著增加。還適合各類患者使用。同時(shí)，對(duì)具體制 作工藝及參數(shù)進(jìn)行了改進(jìn)，基質(zhì)和本發(fā)明制作工藝結(jié)合，促進(jìn)了白芷中有效成分的溶出，尤 其是白芷中有效成歐前胡素的溶出。使得本藥物更加精煉，藥效更加顯著，臨床療效好。
[0026]
【申請(qǐng)人】進(jìn)行了下列實(shí)驗(yàn)，可證明本發(fā)明具有有效的效果；
[0027]實(shí)驗(yàn)例1.輔料篩選實(shí)驗(yàn)
[0028] 1實(shí)驗(yàn)材料
[0029]本發(fā)明基質(zhì):配方同實(shí)施例1。
[0030] 對(duì)比基質(zhì)A:單硬脂酸甘油醋4.50g、硬脂酸12.50g、白凡士林15.00g、十二烷基硫 酸鈉1 .〇〇g、硫柳萊O.Olg及蒸餾水69.00g。
[0031] 對(duì)比基質(zhì)B:單硬脂酸甘油醋6.50g、十六醇10.00g、白凡士林5.50g、吐溫-806.0g、 硫柳萊0 · 01g及蒸餾水69 · 00g。
[0032] 對(duì)比基質(zhì)C:單硬脂酸甘油醋4.00g、硬脂酸12.50g、液體石蠟6.00g、羊毛脂5.50g、 白凡士林10.05g、甘油5.10g、三乙醇胺1.00g、硫柳萊O.Olg及蒸餾水69.00g。
[0033] 對(duì)比基質(zhì)D:硬脂酸10.00g、鯨錯(cuò)醇9.01g、白凡士林11.00g、液體石錯(cuò)5.60g、甘油 6.00g、吐溫-802.50g、三乙醇胺4.00g及十二烷基硫酸鈉1.20g。
[0034]工藝:按比例分別稱取上述輔料和藥物(實(shí)施例1中的B品），稱取各組分置水浴恒 溫至70-73Γ，勻速攪拌至冷卻，無(wú)菌分裝于無(wú)菌塑料軟膏管中備用。所述藥物含天花粉 60g，白]E60g，雪上一枝蒿50g，冰片8g，樟腦8g，醋制乳香30g，醋制沒(méi)藥30g，薄荷油30ml、桉 油 8ml 〇
[0035] 2藥物釋放測(cè)定
[0036] 2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
[0037]精密稱取本發(fā)明藥物浸膏5mg于10mL量瓶中，用無(wú)水甲醇溶解并定容，再用移液管 精密吸取5mL于100mL量瓶中，加無(wú)水甲醇溶解并稀釋至刻度，得對(duì)照品溶液。分別吸取對(duì)照 品溶液1，2，3，5，7，9，1 lmL定容至10mL量瓶中，于紫外270nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收值A(chǔ)，以濃度為 橫坐標(biāo)，吸收值為縱坐標(biāo)繪標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程:Y = 〇. 0021X+0.002928，r = 0.9998，歐前胡 素含量在250ug~2750ug內(nèi)線性范圍較好。
[0038] 2.2吸收光譜測(cè)定
[0039] 取花粉祛癢止痛軟膏對(duì)照品，照"標(biāo)準(zhǔn)曲線制備"項(xiàng)下操作，制得對(duì)照品溶液。另取 各軟膏基質(zhì)制成的樣品，照"測(cè)定方法"項(xiàng)下制得各樣品溶液。分別測(cè)定吸收光譜。結(jié)果在 270nm波長(zhǎng)處對(duì)照品和樣品均有最大吸收。
[0040] 2.3空白試驗(yàn)
[0041 ]按處方制備不含歐前胡素的空白制劑，照"測(cè)定方法"項(xiàng)下操作，基本無(wú)吸收。
[0042] 2.4加樣回收率試驗(yàn)
[0043]精密稱取已測(cè)得含量的樣品和歐前胡素對(duì)照品一定量混合后，照"測(cè)定方法"項(xiàng)下 操作，結(jié)果為平均回收率為97.88 %，RDS = 2.2 % ·
[0044] 2.5精密稱取上述5種樣品各4g，分別置于內(nèi)徑為2cm的短玻璃管內(nèi)，無(wú)孔隙，管的 一端用孔徑為0.3微米的醋酸纖維素濾膜封貼并用線繩扎緊，樣品與醋酸纖維素濾膜之間 密貼，無(wú)氣泡。將此面置于裝有l(wèi)〇〇ml、37<X蒸餾水的大試管中，再將大試管置于37°C的恒溫 水浴中，定時(shí)取樣，每次5mL，同時(shí)補(bǔ)加5mL蒸餾水。將間隔一定時(shí)間內(nèi)取得的樣品溶液5mL用 乙酸乙酯萃取3次，回收乙酸乙酯，揮盡溶劑，加無(wú)水甲醇定容于5mL量瓶中，制得各樣品溶 液。另照"標(biāo)準(zhǔn)曲線制備"相下操作測(cè)定A值。代入回歸方程，計(jì)算含量。結(jié)果見(jiàn)表1.
[0045] 表1各種5種樣品釋藥含量測(cè)定結(jié)果
[0046]
[0047] 由表可知，本發(fā)明軟膏組中，藥物釋放速度最大，釋藥含量最大，明顯緩釋藥物，藥 效最佳。
[0048] 實(shí)驗(yàn)例2:藥效學(xué)研究
[0049]
【申請(qǐng)人】對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了主要藥效學(xué)研究，通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說(shuō)明本發(fā)明的有益效果。
[0050] 1、鎮(zhèn)痛試驗(yàn)
[0051 ] 1.1實(shí)驗(yàn)藥物
[0052] 1.1.1本發(fā)明軟膏劑：同實(shí)施例1。
[0053] 1.1.2原輔料酊劑:組方:天花粉45g，白芷45g，雪上一枝蒿34g，冰片4g，樟腦5g，醋 制乳香20g，醋制沒(méi)藥20g，薄荷油10ml、桉油5ml;
[0054]工藝:先取天花粉、白芷、雪上一枝蒿、醋制乳香、醋制沒(méi)藥粉碎，混勻，加80%乙醇 浸潤(rùn)24h，再用80 %乙醇分三次浸漬，第一次3h，第二、三次各2h，合并3次浸漬液，濾過(guò)，濾液 備用；另取冰片、樟腦、薄荷油、桉油加80 %乙醇溶解，加入上述濾液中，再加80 %乙醇使成 1000ml，混勻，靜置24h，取上清液，濾過(guò)，制成酊劑。
[0055] 1.2實(shí)驗(yàn)方法
[0056] 取健康昆明種小鼠48只，雌雄各半，隨機(jī)分為3組，即空白對(duì)照組、本發(fā)明軟膏組 (按照本發(fā)明實(shí)施例1的方法制作)和原輔料酊劑組，每組16只。給藥劑量分別為空白對(duì)照組 (0.5g/kg賦形劑），本發(fā)明組(0.5g/kg本發(fā)明軟膏組），原輔料酊劑組(0.5g/kg)。將小鼠臀 背部脫毛，涂抹相應(yīng)的受試物，涂抹2h，每天給藥1次，連續(xù)給藥3天。于末次經(jīng)藥12h后，各小 鼠腹腔注射0.8%白醋酸溶液0.2ml/只，觀察記錄15min內(nèi)每只小鼠出現(xiàn)扭體反應(yīng)的次數(shù)， 計(jì)算均數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)差，比較組間差異。
[0057] 1.3結(jié)果
[0058]各給藥組均能對(duì)抗白醋酸刺激所致的疼痛反應(yīng)，使小鼠扭體次數(shù)明顯減少(見(jiàn)表 2)〇
[0059 ] 表2對(duì)小鼠扭體次數(shù)的影響(η = 12，X 土 s)
[0060]
[0061 ] 注:與原酊劑組比較*Ρ<0·05;
[0062] 與空白對(duì)照組比較#Ρ < 0 · 0 5，##Ρ < 0 · 01
[0063] 1.4結(jié)論
[0064] 以上實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，本發(fā)明軟膏組與原酊劑組均能對(duì)抗白醋酸刺激所致的疼 痛反應(yīng)，但本發(fā)明軟膏組優(yōu)于原酊劑組。
[0065] 2、抗炎實(shí)驗(yàn)
[0066] 2.1實(shí)驗(yàn)藥物
[0067] 2.1.1本發(fā)明軟膏:按實(shí)施例1進(jìn)行制作；
[0068] 2.2.2原輔料酊劑:組方:天花粉45g，白芷45g，雪上一枝蒿34g，冰片4g，樟腦5g，醋 制乳香20g，醋制沒(méi)藥20g，薄荷油10ml、桉油5ml;
[0069] 工藝:先取天花粉、白芷、雪上一枝蒿、醋制乳香、醋制沒(méi)藥粉碎，混勻，加80%乙醇 浸潤(rùn)24h，再用80 %乙醇分三次浸漬，第一次3h，第二、三次各2h，合并3次浸漬液，濾過(guò)，濾液 備用；另取冰片、樟腦、薄荷油、桉油加80 %乙醇溶解，加入上述濾液中，再加80 %乙醇使成 1000ml，混勻，靜置24h，取上清液，濾過(guò)，制成酊劑。
[0070] 2.2實(shí)驗(yàn)方法
[0071] 2.2.1小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)取健康昆明種小鼠48只，雌雄各半，分組、給藥劑量同1.1項(xiàng) 下，連續(xù)給藥6天，第7天將每只小鼠右耳一面涂抹20yL二甲苯，另一面涂抹lOyLjOmin后處 死動(dòng)物，用8mm打孔器打取左右耳同一部位圓片，稱重，計(jì)算腫脹率=(右耳重量-左耳重 量)/左耳重量X 100%。結(jié)果見(jiàn)表3。
[0072] 2.2.2大鼠足跖腫脹實(shí)驗(yàn)取雄性昆明種大鼠48只，隨機(jī)分成3組，分組同2.2.1項(xiàng) 下。大鼠腹部脫毛面積為2.5cmX2.5cm。本發(fā)明軟膏組外敷0.3g/kg，原酊劑組外涂抹0.3g/ kg，空白對(duì)照組外敷空白基質(zhì)0.3g/kg，涂抹2h，每天1次，連續(xù)給藥6天。以容積法測(cè)大鼠右 后足的正常足跖容積(mL)。末次給藥后，大鼠右后足跖皮下注射1%角叉菜膠O.lmL致炎，測(cè) 致炎后5h同一位置的足跖體積。計(jì)算腫脹率=(致炎后足跖厚度一致炎前足跖厚度)/致炎 前足跖厚度X 100%。結(jié)果見(jiàn)表4。
[0073] 表3小鼠扭耳廓腫脹率比較(n = 12，x土s)
[0074]
[0075] 注:與原酊劑組比較*Ρ<0·05;
[0076] 與空白對(duì)照組比較#Ρ< 0 · 05，##Ρ < 0 · 01。
[0077] 表4各組大鼠足腫脹率比較(η = 12，χ土s)
[0078]
[0079] 注:與原酊劑組比較*Ρ<0·05
[0080] 與空白對(duì)照組比較#Ρ < 0 · 0 5，##Ρ < 0 · 01 [0081 ] 2.3結(jié)論
[0082] 結(jié)果表明：本發(fā)明軟膏組與原酊劑組均能降低小鼠扭耳廓腫脹率和大鼠足腫脹 率。與原酊劑組比較，本發(fā)明軟膏組效果更好(Ρ<〇.05)。
[0083] 3、祛癢試驗(yàn)
[0084] 3.1實(shí)驗(yàn)藥物
[0085] 3.1.1本發(fā)明軟膏:羾劑(按實(shí)施例1進(jìn)行制作）；
[0086] 3.2.2原輔料酊劑:組方:天花粉45g，白芷45g，雪上一枝蒿34g，冰片4g，樟腦5g，醋 制乳香20g，醋制沒(méi)藥20g，薄荷油10ml、桉油5ml;
[0087]工藝:先取天花粉、白芷、雪上一枝蒿、醋制乳香、醋制沒(méi)藥粉碎，混勻，加80%乙醇 浸潤(rùn)24h，再用80 %乙醇分三次浸漬，第一次3h，第二、三次各2h，合并3次浸漬液，濾過(guò)，濾液 備用；另取冰片、樟腦、薄荷油、桉油加80 %乙醇溶解，加入上述濾液中，再加80 %乙醇使成 1000ml，混勻，靜置24h，取上清液，濾過(guò)，制成酊劑。
[0088] 3.2實(shí)驗(yàn)方法
[0089]取豚鼠50只，隨機(jī)均分為空白對(duì)照組（空白基質(zhì)），本發(fā)明軟膏組；原輔料酊劑組。 各組豚鼠右后足背部剃毛1.5cmX 1.5cm，分別將受試物均勻涂于剃毛區(qū)，給藥量為每次 0.05g · cnf2,給藥面積約lcm2,每日給藥3次，用藥間隔為lh，給藥第3天，用粗砂紙分別擦傷 剃毛處以傷及表皮，有輕度滲血為度。在傷口局部分別涂受試物或?qū)φ瘴?次，涂藥lOmin 后，分別在每只豚鼠創(chuàng)面處滴0.01 %磷酸組胺〇.〇5mL，此后每隔3min依0.01 % ,0.02%， 0.03%，0.04%，0.05%遞增濃度，每次均為0.0511117只，直至豚鼠出現(xiàn)回頭舔后足時(shí)，記錄 每只豚鼠所給予組胺的總量，以此總量為致癢閾，并比較各組動(dòng)物的致癢閾。結(jié)果本發(fā)明軟 膏與原酊劑均可不同程度地提高豚鼠致癢閾，抑制由組胺引起的皮膚瘙癢，并呈現(xiàn)良好的 量效依賴關(guān)系，且本發(fā)明軟膏的效果優(yōu)于原酊劑，與空白對(duì)照組比較差異有顯著性，見(jiàn)表5。
[0090] 表5對(duì)豚鼠磷酸組胺致癢反應(yīng)的影響
[0091]
[0092] 注：與空白對(duì)照組比較叩〈0 · 05，P〈0 · 01。
[0093] 本發(fā)明軟膏組與原酊劑組比較，+P<0.05。
[0094]實(shí)驗(yàn)例3歐前胡素含量測(cè)定
[0095] 1.1儀器與試藥
[0096] UV-VIS8500分光光度計(jì)(無(wú)錫科達(dá)儀器廠）；電子天平BP121S(北京Sartorius天平 有限公司）；超聲波提取器SB2200(Shanghai Branson，250W)。歐前胡素對(duì)照品（中國(guó)藥品生 物制品檢定所，批號(hào)：0826-9401);本發(fā)明軟膏（按實(shí)施例1進(jìn)行制作）；原酊劑，按藥品標(biāo)準(zhǔn) (WS3-11212 (ZD-1212) -2002-2012Z)上的方法制成的酊劑;其余試劑為分析純。
[0097] 1.2方法與結(jié)果
[0098] 1.2.1溶液的制作取歐前胡素對(duì)照品2.2mg，精密稱定，甲醇定容至100ml，即得對(duì) 照品溶液。取本發(fā)明軟膏約〇.15g，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇80ml，回流提取9h，用 甲醇洗滌并定容至l〇〇ml，濾過(guò)，即得本發(fā)明樣品溶液。取原輔料酊劑約0.15g，精密稱定，置 索氏提取器中，加甲醇80ml，回流提取9h，用甲醇洗滌并定容至100ml，濾過(guò)，即得原酊劑溶 液。
[0099] 1.2.2測(cè)定波長(zhǎng)的選擇在200~400nm分別掃描歐前胡素對(duì)照品，本發(fā)明樣品溶液 及原輔料酊劑溶液，三者在300nm處均有一個(gè)吸收峰，且峰形變化平緩，便于定量測(cè)定，因 此，將300nm作為測(cè)定波長(zhǎng)。
[0100] 1.2.3線性關(guān)系精密吸取歐前胡素對(duì)照品溶液各1、2、3、4、5!111，分別用甲醇定容至 10ml。以甲醇為空白于300nm處測(cè)定。以濃度(C)為橫坐標(biāo)，吸光度(A)為縱坐標(biāo)作圖，得回歸 方程:A = 7418 X 10-3C+711 X 10-3 (r = 019999，η = 5)。結(jié)果表明，歐前胡素對(duì)照品溶液濃度 在2.2~11.Oyg · πιΓ1范圍內(nèi)，吸光度與濃度的線性關(guān)系良好。
[0101 ] 1.2.4重復(fù)性試驗(yàn)分別取本發(fā)明軟膏和原輔料酊劑約0.25g，精密稱定，按"1.2. Γ 方法制作樣品溶液6份，平行測(cè)定，含量分別為3.36、3.39、3.42、3.58、3.37、3.27mg · 。 RSD = 3.01%，3· 35、3· 38、3·43、3· 57、3·38、3· 28mg · = ，表明測(cè)定方法精密 度良好。
[0102] 1.2.5精密度試驗(yàn)取"1.2.4"項(xiàng)下本發(fā)明軟膏和原酊劑的6號(hào)溶液，于300nm處連續(xù) 測(cè)定6次，吸光度的RSD = 0.1022 %，結(jié)果表明精密度良好。
[0103] 1.2.6穩(wěn)定性試驗(yàn)取"1.2.4"項(xiàng)下本發(fā)明軟膏和原酊劑的6號(hào)溶液，于300nm處測(cè)定 吸光度，每隔30min測(cè)定1次，連續(xù)測(cè)定9次，吸光度的RSD = 0.177%，結(jié)果表明，在4h內(nèi)穩(wěn)定 性良好。
[0104] 1.2.7加樣回收試驗(yàn)分別取已知含量的樣品約O.lg，（總香豆素含量以歐前胡素 計(jì)），精密稱定，分別加入相當(dāng)于樣品中含量80%、100%、120%的歐前胡素對(duì)照品，按樣品 溶液制作方法操作。結(jié)果表明，本發(fā)明軟膏和原酊劑中歐前胡素含量的加樣回收率較高，分 別為99.4%和98.9% ;相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.72%和1.92%，較小;準(zhǔn)確度較高。
[0105] 1.2.8樣品的測(cè)定分別精密吸取本發(fā)明樣品溶液和原輔料酊劑溶液各0.5g，加 80%乙醇O.lmL，按上述測(cè)定方法操作，根據(jù)回歸方程計(jì)算歐前胡素。其結(jié)果見(jiàn)表6。
[0106] 表6歐前胡素的定結(jié)果
[0107]
[0108] 由表可知，與原酊劑相比，本發(fā)明軟膏中白芷的有效成分歐前胡素的含量更高。
【具體實(shí)施方式】：
[0109] 實(shí)施例1:
[0110] 配方:天花粉45g，白芷45g，雪上一枝蒿34g，冰片4g，樟腦5g，醋制乳香20g，醋制沒(méi) 藥20g，薄荷油10ml、桉油5ml，甘油65ml、阿拉伯膠16g、羧甲基纖維素鈉20g、白醋0.5g、蜂蜜 13g及純化水20g。
[0111] 工藝：
[0112] (1)取天花粉，雪上一枝蒿，醋制乳香，醋制沒(méi)藥粉碎成粗顆粒，混勻，加80%乙醇 浸潤(rùn)24小時(shí)，再用80 %乙醇分三次浸漬，第一次3小時(shí);第二、三次各2小時(shí)，合并3次浸漬液， 濾過(guò)，得混合濾液，備用，取白芷，用水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，備用;藥渣加入7倍量的水提取 2次，每次2h，過(guò)濾，合并濾液，濃縮成常溫下相對(duì)密度為1.10-1.15的濃縮液，備用;濾渣再 加入4倍量80%的乙醇溶液，回流提取2次，每次lh，過(guò)濾，合并濾液，回收乙醇至凈，得醇提 取液，醇提取液、濃縮液和混合濾液合并，得A品；
[0113] (2)另取冰片、樟腦、薄荷油、桉油加80%乙醇溶解，加入A品中，再加80%乙醇使成 1000ml，混勻，靜置24小時(shí)，取上清液，濾過(guò)，得B品；
[0114] (3)將甘油和蜂蜜倒入純化水中，攪拌均勻，得C品；
[0115] (4)向C品中依次加入羧甲基纖維素，攪拌均勻，得D品；
[0116] (5)向D品中依次加入阿拉伯膠、白醋和上述揮發(fā)油，攪拌均勻，得E品；
[0117] (6)E品與B品混勻，即得。
[0118] 用法用量:外用，取適量涂于患處，每天2-3次。
[0119] 實(shí)施例2:
[0120]配方:天花粉30g，白芷30g，雪上一枝蒿20g，冰片lg，樟腦lg，醋制乳香10g，醋制沒(méi) 藥l〇g，薄荷油5ml、桉油lml，甘油50ml、阿拉伯膠8g、羧甲基纖維素鈉10g、白醋0. lg、蜂蜜5g 及純化水15g。
[0121] 工藝：
[0122] 1、取天花粉，雪上一枝蒿，醋制乳香，醋制沒(méi)藥粉碎成粗顆粒，混勻，加85%乙醇浸 潤(rùn)28小時(shí)，再用85 %乙醇分三次浸漬，第一次4小時(shí);第二、三次各3小時(shí)，合并浸漬液，濾過(guò)， 得混合濾液備用，取白芷，用水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，備用;藥渣加入8倍量的水提取3次，每 次3h，過(guò)濾，合并濾液，濃縮成常溫下相對(duì)密度為1.10-1.15的濃縮液，備用;濾渣再加入5倍 量85%的乙醇溶液，回流提取3次，每次1.5h，過(guò)濾，合并濾液，回收乙醇至凈，得醇提取液， 醇提取液、濃縮液和混合濾液合并，得A品；
[0123] 2、另取冰片、樟腦、薄荷油、桉油加80 %乙醇溶解，加入A品中，再加80 %乙醇使成 1000ml，混勻，靜置24小時(shí)，取上清液，濾過(guò)，得B品；
[0124] 3、將甘油和蜂蜜倒入純化水中，攪拌均勻，得C品；
[0125] 4、向C品中依次加入羧甲基纖維素，攪拌均勻，得D品；
[0126] 5、向D品中依次加入阿拉伯膠、白醋和上述揮發(fā)油，攪拌均勻，得E品；
[0127] 6、E品與B品混勻，即得。
[0128] 用法用量:外用，取適量涂于患處，每天2-3次。
[0129] 實(shí)施例3:
[0130]配方:天花粉60g，白芷60g，雪上一枝蒿50g，冰片8g，樟腦8g，醋制乳香30g，醋制沒(méi) 藥30g，薄荷油30ml、桉油8ml，甘油80ml、22g、羧甲基纖維素鈉30g、白醋1.0g、蜂蜜17g及純 化水25g。
[0131] 工藝：
[0132] 1、取天花粉，雪上一枝蒿，醋制乳香，醋制沒(méi)藥粉碎成粗顆粒，混勻，加75 %乙醇浸 潤(rùn)20小時(shí)，再用75 %乙醇分三次浸漬，第一次2小時(shí);第二、三次各1小時(shí)，合并浸漬液，濾過(guò)， 得混合濾液備用，取白芷，用水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，備用；藥渣加入6-8倍量的水提取lh， 過(guò)濾，合并濾液，濃縮成常溫下相對(duì)密度為1.10-1.15的濃縮液，備用；濾渣再加入3倍量 75 %的乙醇溶液，回流提取0.5h，過(guò)濾，合并濾液，回收乙醇至凈，得醇提取液，醇提取液、濃 縮液和混合濾液合并，得A品；
[0133] 2、另取冰片、樟腦、薄荷油、桉油加80 %乙醇溶解，加入A品中，再加80 %乙醇使成 1000ml，混勻，靜置24小時(shí)，取上清液，濾過(guò)，得B品；
[0134] 3、將甘油和蜂蜜倒入純化水中，攪拌均勻，得C品；
[0135] 4、向C品中依次加入羧甲基纖維素，攪拌均勻，得D品；
[0136] 5、向D品中依次加入阿拉伯膠、白醋和上述揮發(fā)油，攪拌均勻，得E品；
[0137] 6、E品與B品混勻，即得。
[0138] 用法用量:外用，取適量涂于患處，每天2-3次。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種花粉祛癢止痛軟膏，其特征在于：由按照重量份計(jì)的天花粉30-60份，白芷30-60 份，雪上一枝蒿20-50份，冰片1-8份，樟腦1-8份，醋制乳香10-30份，醋制沒(méi)藥10-30份，及按 體積份計(jì)的薄荷油5_30份、桉油1 -8份，甘油50-80份以及按照重量份計(jì)的阿拉伯膠8-22份、 羧甲基纖維素鈉10-30份、白醋0.1-1.0份、蜂蜜5-17份及純化水15-25份制作而成。2. 如權(quán)利要求1所述的花粉祛癢止痛軟膏，其特征在于：由按照重量份計(jì)的天花粉45 份，白芷45份，雪上一枝蒿34份，冰片4份，樟腦5份，醋制乳香20份，醋制沒(méi)藥20份，及按體積 份計(jì)的薄荷油10份、桉油5份，甘油65份以及按照重量份計(jì)的阿拉伯膠16份、羧甲基纖維素 鈉20份、白醋0.5份、蜂蜜13份及純化水20份制作而成。3. -種如權(quán)利要求1或2所述花粉祛癢止痛軟膏的制作方法，其特征在于:具體包括以 下步驟： (1) 取天花粉，雪上一枝蒿，醋制乳香，醋制沒(méi)藥粉碎成粗顆粒，混勻，加75-85%乙醇浸 潤(rùn)20-28小時(shí)，再用75-85 %乙醇分三次浸漬，第一次2-4小時(shí);第二、三次各1-3小時(shí)，合并浸 漬液，濾過(guò)，得混合濾液備用，取白芷，用水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，備用;藥渣加入6-8倍量的 水提取1-3次，每次l_3h，過(guò)濾，合并濾液，濃縮成濃縮液;濾渣再加入3-5倍量75-85 %的乙 醇溶液，回流提取1-3次，每次0.5-1.5h，過(guò)濾，合并濾液，回收乙醇至凈，得醇提取液，醇提 取液、濃縮液和混合濾液合并，得A品； (2) 另取冰片、樟腦、薄荷油、桉油加75-85%乙醇溶解，加入A品中，再加75-85%乙醇使 成800-1100ml，混勻，靜置20-28小時(shí)，取上清液，濾過(guò)，得B品； (3) 將甘油和蜂蜜倒入純化水中，攪拌均勻，得C品； (4) 向C品中依次加入羧甲基纖維素，攪拌均勻，得D品； (5) 向D品中依次加入阿拉伯膠、白醋和上述揮發(fā)油，攪拌均勻，得E品； (6) E品與B品混勻，即得。4. 如權(quán)利要求3所述的花粉祛癢止痛軟膏的制作方法，其特征在于：具體包括以下步 驟： (1) 取天花粉，雪上一枝蒿，醋制乳香，醋制沒(méi)藥粉碎成粗顆粒，混勻，加80%乙醇浸潤(rùn) 24小時(shí)，再用80 %乙醇分三次浸漬，第一次3小時(shí)；第二、三次各2小時(shí)，合并3次浸漬液，濾 過(guò)，得混合濾液，備用，取白芷，用水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，備用；藥渣加入7倍量的水提取2 次，每次2h，過(guò)濾，合并濾液，濃縮成常溫下相對(duì)密度為1.10-1.15的濃縮液，備用;濾渣再加 入4倍量80%的乙醇溶液，回流提取2次，每次lh，過(guò)濾，合并濾液，回收乙醇至凈，得醇提取 液，醇提取液、濃縮液和混合濾液合并，得A品； (2) 另取冰片、樟腦、薄荷油、桉油加80 %乙醇溶解，加入A品中，再加80 %乙醇使成 1000ml，混勻，靜置24小時(shí)，取上清液，濾過(guò)，得B品； (3) 將甘油和蜂蜜倒入純化水中，攪拌均勻，得C品； (4) 向C品中依次加入羧甲基纖維素，攪拌均勻，得D品； (5) 向D品中依次加入阿拉伯膠和白醋，攪拌均勾，得E品； (6) E品與B品混勻，即得。
【文檔編號(hào)】A61K31/045GK105935379SQ201610471154
【公開(kāi)日】2016年9月14日
【申請(qǐng)日】2016年6月24日
【發(fā)明人】龍鳳榮, 李珂, 王瑤, 孫敏
【申請(qǐng)人】貴州弘康藥業(yè)有限公司