一種多糖組合物、制備方法及其用圖
【專利摘要】本發(fā)明涉及保健食品領(lǐng)域，特別涉及中藥組合物及其制備方法、用途以及含有該中藥組合物的藥物、保健食品。本發(fā)明提供了一種中藥組合物，由香菇和蟲草組成，或由香菇多糖和蟲草多糖組成。實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明制得的中藥組合物、藥物或保健食品經(jīng)科學(xué)配伍而成，相得益彰，無(wú)毒副作用。既有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，又有預(yù)防和改善慢性腸炎及其引起的腸胃不適功能，還能調(diào)節(jié)腸道菌群，對(duì)胃黏膜有輔助保護(hù)作用。
【專利說明】
一種多糖組合物、制備方法及其用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及保健食品領(lǐng)域，特別涉及中藥組合物及其制備方法、用途以及含有該 中藥組合物的藥物、保健食品。
【背景技術(shù)】
[0002] 潰瘍性結(jié)腸炎是一種常見的慢性腸道疾病，也是一種多因素、多層次的原因不明 的非特異性炎癥，其病因不明、病程迀延難愈、反復(fù)發(fā)作。主要臨床表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、黏液 膿血便等，國(guó)內(nèi)外流行病學(xué)數(shù)據(jù)顯示，潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病率和患病率均呈現(xiàn)明顯的增高趨 勢(shì)，被世界衛(wèi)生組織列為現(xiàn)代難治病之一。潰瘍性結(jié)腸炎多以氨基水楊酸類藥物、腎上腺糖 皮質(zhì)激素、免疫抑制劑等為主，但大多藥物療效不佳，且有一定的副作用。而多糖做為天然 高分子化合物，由醛糖或酮糖通過苷鏈連接而成，是中草藥的主要活性成分之一，來源廣泛 而且無(wú)毒，具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎、抗腫瘤、抗衰老、抗氧化、降血脂等藥理活性和藥效功能。中 藥多糖在潰瘍性結(jié)腸炎的相關(guān)研究領(lǐng)域中日益受到重視。
[0003] 香菇又名花菇、香蕈、香菌等，為側(cè)耳科植物香蕈的子實(shí)體，是世界第二大食用菌， 有"山珍之王"之稱，是高蛋白、低脂肪的營(yíng)養(yǎng)保健食品。我國(guó)歷代醫(yī)學(xué)家對(duì)香菇均有著名論 述。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)和營(yíng)養(yǎng)學(xué)不斷深入研究，香菇的藥用價(jià)值也不斷被發(fā)掘。香菇中麥角留醇含量 很高，對(duì)防治佝僂病有效;香菇多糖能增強(qiáng)細(xì)胞免疫能力。
[0004] 蟲草為我國(guó)名貴中藥，是一類極具保健功能的大型藥用真菌。它隸屬于真菌界、真 菌門、子囊菌亞門、核菌綱、肉座菌目、麥角菌科。蟲草多糖能引起T、NK以及單核-巨噬細(xì)胞 的活化、增殖及分泌各種淋巴因子，進(jìn)而起到對(duì)機(jī)體的免疫保護(hù)作用。同時(shí)，蟲草多糖具有 抗腫瘤、降血糖、抗氧化、保護(hù)肝臟等作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 有鑒于此，本發(fā)明提供中藥組合物及其制備方法、用途以及含有該中藥組合物的 藥物、保健食品。本發(fā)明所得的中藥組合物、藥物或保健食品經(jīng)科學(xué)配伍而成，相得益彰，無(wú) 毒副作用。既有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，又有預(yù)防和改善慢性腸炎及其引起的腸胃不適功能，還能調(diào)節(jié)腸 道菌群，對(duì)胃黏膜有輔助保護(hù)作用。
[0006] 為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：
[0007] 本發(fā)明提供了一種中藥組合物，由香菇和蟲草組成。
[0008] 在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，中藥組合物中所述香菇的有效成分為香菇多 糖，所述蟲草的有效成分為蟲草多糖。
[0009] 在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，中藥組合物中所述香菇多糖與所述蟲草多糖的 質(zhì)量比優(yōu)選為（1:5)~(5:1)。
[0010]在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，中藥組合物中所述香菇多糖與所述蟲草多糖的 質(zhì)量比更優(yōu)選為(2:4)~(4:2)。
[0011]在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，中藥組合物中所述香菇多糖與所述蟲草多糖的 質(zhì)量比最優(yōu)選為2:3。
[0012] 在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，中藥組合物中所述香菇多糖與所述蟲草多糖為 天然或人工合成。
[0013] 本發(fā)明還提供了所述的中藥組合物的制備方法，取所述香菇或所述蟲草粉碎，以 g/mL計(jì)，按照香菇或蟲草與水的質(zhì)量體積比為(0.5g~2.0g): 5mL的比例混合，在70 °C~75 °C加熱攪拌提取3h，過濾獲得的濾渣按照上述料液比、溫度和時(shí)間繼續(xù)提取兩次，合并三次 提取液，經(jīng)過減壓濃縮和離心獲得澄清濃縮液，按照所述澄清濃縮液與95%乙醇的體積比 為1: (7~10)混合，混勻后于4°C過夜靜置沉淀，離心收集沉淀，經(jīng)過真空冷凍干燥即得。
[0014] 本發(fā)明還提供了所述制備方法制得的中藥組合物。
[0015] 本發(fā)明還提供了所述的中藥組合物和/或所述制備方法制得的中藥組合物在制備 預(yù)防和/或改善慢性腸炎及其引起的腸胃不適的藥物和/或保健食品中的用途。
[0016] 所謂腸胃不適，包括上腹胃脘部不適、胃部疼痛、飯后飽脹、噯氣、返酸，惡心、嘔 吐，消化不良，腸胃絞痛。
[0017] 在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，所述中藥組合物中所述香菇多糖或所述蟲草多 糖的使用劑量分別為300mg/kg。
[0018] 本發(fā)明還提供了一種用于預(yù)防和/或改善慢性腸炎及其引起的腸胃不適的藥物 和/或保健食品，包括所述的中藥組合物和/或所述制備方法制得的所述的中藥組合物以及 藥學(xué)上可接受的輔料。
[0019] 所述藥學(xué)上可接受的輔料包括載體、賦形劑、賦形劑和/或填充劑。
[0020] 在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，所述藥物或所述保健食品的劑型為膠囊、片劑、 顆粒劑、口服液、散劑、袋泡茶。
[0021] 本發(fā)明提供了一種中藥組合物，由香菇和蟲草組成。實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明制得的中藥 組合物、藥物或保健食品經(jīng)科學(xué)配伍而成，相得益彰，無(wú)毒副作用。既有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，又有預(yù)防 和改善慢性腸炎及其引起的腸胃不適功能，還能調(diào)節(jié)腸道菌群，對(duì)胃黏膜有輔助保護(hù)作用。
【具體實(shí)施方式】
[0022] 本發(fā)明公開了中藥組合物及其制備方法、用途以及含有該中藥組合物的藥物、保 健食品，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)工藝參數(shù)實(shí)現(xiàn)。特別需要指出的是， 所有類似的替換和改動(dòng)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā) 明。本發(fā)明的方法及應(yīng)用已經(jīng)通過較佳實(shí)施例進(jìn)行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本發(fā) 明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對(duì)本文所述的方法和應(yīng)用進(jìn)行改動(dòng)或適當(dāng)變更與組合，來實(shí)現(xiàn)和應(yīng) 用本發(fā)明技術(shù)。
[0023] 根據(jù)本發(fā)明第一方面，提供了一種保健食品組合物，所述組合物包含香菇多糖和 蟲草多糖，最優(yōu)選以重量計(jì)2:3的比例混合，任選進(jìn)一步包括醫(yī)學(xué)或食品可接受的載體、賦 形劑、輔料和/或填充劑。
[0024]在本方面一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述香菇多糖或蟲草多糖為天然的或人工合成 的。
[0025]根據(jù)本發(fā)明第二方面，提供一種保健食品組合物的制備方法，所述方法包括，最優(yōu) 選混合以重量計(jì)2:3的比例的香菇多糖和蟲草多糖。
[0026]在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述香菇多糖或蟲草多糖由如下方法制得:將 香菇或蟲草粉碎后，按照香菇或蟲草:水=lg: 5mL的比例加水，在75°C下加熱攪拌提取3h， 過濾獲得的濾渣按照上述料液比、溫度和時(shí)間繼續(xù)提取兩次，合并三次提取液，經(jīng)過減壓濃 縮和離心獲得澄清濃縮液，按照澄清濃縮液:95 %乙醇=1:9的體積比將9倍體積95%乙醇 加入到澄清濃縮液中，混勻后于4°C下過夜靜置沉淀，離心收集沉淀，經(jīng)過真空冷凍干燥即 獲得香菇多糖或蟲草多糖。
[0027]根據(jù)本發(fā)明第三方面，提供了一種根據(jù)第二方面的方法制備的保健食品組合物。
[0028] 根據(jù)本發(fā)明第四方面，提供了一種組合物在制備預(yù)防和改善慢性腸炎的疾病的藥 物或保健食品中的用途。
[0029] 在本方面一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述藥物或保健食品的劑型為膠囊、片劑、顆粒 劑、口服液、散劑、袋泡茶。
[0030] 通過實(shí)驗(yàn)令人驚奇的發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明所得的保健食品經(jīng)科學(xué)配伍而成，相得益彰，無(wú) 毒副作用。既有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，又有預(yù)防和改善慢性腸炎功能。
[0031] 本發(fā)明目的提供一種具有預(yù)防和改善慢性腸炎功效的保健食品及其制備方法，同 時(shí)確認(rèn)和評(píng)價(jià)香菇多糖和蟲草多糖組合對(duì)慢性腸炎是否具有預(yù)防和改善作用。為實(shí)現(xiàn)上述 目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是建立TNBS(三硝基苯磺酸)誘導(dǎo)的大鼠慢性腸炎模型，以 此確定和評(píng)價(jià)多糖組合對(duì)慢性腸炎預(yù)防和改善作用。具體過程步驟如下：
[0032] 先對(duì)84只SPF級(jí)SD大鼠分成四組，即空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性藥對(duì)照組、香菇 多糖組、蟲草多糖組、香菇多糖+蟲草多糖組，每組14只動(dòng)物，雌雄各半。各組動(dòng)物預(yù)防性給 藥前稱重，然后預(yù)防性給藥1周（香菇多糖組、蟲草多糖組、香菇多糖+蟲草多糖組灌胃給予 相應(yīng)多糖劑量各為300mg/kg，給藥容積為10mL/kg，每天1次，其他三組給予等體積的動(dòng)物飲 用水）。預(yù)防性給藥結(jié)束后，除空白對(duì)照組(給予50%乙醇)外，其他各組采用TNBS(三硝基苯 磺酸)造模。造模方法:動(dòng)物禁食不禁水24h后用3 %戊巴比妥鈉尾靜脈注射麻醉，動(dòng)物麻醉 后，用一次性肛門插管輕柔插入結(jié)腸約8cm后注入造模藥液，大鼠提尾倒置60s讓藥液充分 停留結(jié)腸內(nèi)。造模結(jié)束后各組動(dòng)物繼續(xù)給藥16天(香菇多糖組、蟲草多糖組、香菇多糖+蟲草 多糖組灌胃給予相應(yīng)多糖劑量各為300mg/kg，每天1次，空白對(duì)照組、模型對(duì)照組給予等體 積的動(dòng)物飲用水，陽(yáng)性對(duì)照組給予柳氮磺P比啶腸溶片混懸液，劑量為600mg/kg)。
[0033]實(shí)驗(yàn)期間觀察大鼠的糞便性狀(糞便粘稠度、肛周污穢情況）、攝食情況和精神行 為狀態(tài);測(cè)定統(tǒng)計(jì)動(dòng)物體重及體重增長(zhǎng)，造模后動(dòng)物疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)，脾臟和胸腺的臟 器重量及臟器系數(shù)，并進(jìn)行動(dòng)物結(jié)腸組織病理學(xué)檢查。通過對(duì)模型動(dòng)物的指標(biāo)進(jìn)行分析比 較，令人驚奇的發(fā)現(xiàn)，香菇多糖+蟲草多糖組相比模型對(duì)照組，甚至香菇多糖組或蟲草多糖 組，可顯著增加 TNBS(三硝基苯磺酸)誘導(dǎo)的慢性腸炎模型大鼠的攝食量，并增加其體重;可 顯著降低TNBS(三硝基苯磺酸)誘導(dǎo)的大鼠慢性腸炎模型大鼠的疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)，并降 低其死亡率，增強(qiáng)機(jī)體免疫調(diào)節(jié)能力。
[0034] 本發(fā)明制備的保健食品通過預(yù)防和改善慢性腸炎功能實(shí)驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià)和驗(yàn)證，應(yīng)該 指出的是，所列舉的實(shí)施例不應(yīng)理解為對(duì)本發(fā)明的限制。
[0035] 本發(fā)明提供的中藥組合物及其制備方法、用途以及含有該中藥組合物的藥物、保 健食品中所用原料及試劑均可由市場(chǎng)購(gòu)得。
[0036] 下面結(jié)合實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明：
[0037] 實(shí)施例1香菇多糖的制備
[0038] 本發(fā)明所述香菇多糖通過以下制備方法制備獲得:將香菇粉碎后，按照香菇:水= 0.5g: 5mL的比例加水，在70 °C下加熱攪拌提取3h，過濾獲得的濾渣按照上述料液比、溫度和 時(shí)間繼續(xù)提取兩次，合并三次提取液，經(jīng)過減壓濃縮和離心獲得澄清濃縮液，按照澄清濃縮 液:95%乙醇=1:7的體積比將7倍體積95%乙醇加入到澄清濃縮液中，混勻后于4°C下過夜 靜置沉淀，離心收集沉淀，經(jīng)過真空冷凍干燥即獲得香菇多糖。
[0039]實(shí)施例2蟲草多糖的制備
[0040] 本發(fā)明所述蟲草多糖通過以下制備方法制備獲得:將蟲草粉碎后，按照蟲草:水= 2.0g: 5mL的比例加水，在75 °C下加熱攪拌提取3h，過濾獲得的濾渣按照上述料液比、溫度和 時(shí)間繼續(xù)提取兩次，合并三次提取液，經(jīng)過減壓濃縮和離心獲得澄清濃縮液，按照澄清濃縮 液:95%乙醇=1:10的體積比將10倍體積95%乙醇加入到澄清濃縮液中，混勻后于4°C下過 夜靜置沉淀，離心收集沉淀，經(jīng)過真空冷凍干燥即獲得蟲草多糖。
[0041] 實(shí)施例3香菇多糖和蟲草多糖組合物的制備
[0042] 將實(shí)施例1制得的香菇多糖和實(shí)施例2制得蟲草多糖以重量計(jì)2: 3的比例混合，制 成包含香菇多糖和蟲草多糖的保健食品組合物。
[0043] 實(shí)施例4香菇多糖和蟲草多糖組合物的制備
[0044] 將實(shí)施例1制得的香菇多糖和實(shí)施例2制得蟲草多糖以重量計(jì)1:5的比例混合，制 成包含香菇多糖和蟲草多糖的保健食品組合物。
[0045] 實(shí)施例5香菇多糖和蟲草多糖組合物的制備
[0046] 將實(shí)施例1制得的香菇多糖和實(shí)施例2制得蟲草多糖以重量計(jì)5:1的比例混合，制 成包含香菇多糖和蟲草多糖的保健食品組合物。
[0047] 實(shí)施例6香菇多糖和蟲草多糖組合物的制備
[0048] 將實(shí)施例1制得的香菇多糖和實(shí)施例2制得蟲草多糖以重量計(jì)2:4的比例混合，制 成包含香菇多糖和蟲草多糖的保健食品組合物。
[0049] 實(shí)施例7香菇多糖和蟲草多糖組合物的制備
[0050] 將實(shí)施例1制得的香菇多糖和實(shí)施例2制得蟲草多糖以重量計(jì)4: 2的比例混合，制 成包含香菇多糖和蟲草多糖的保健食品組合物。
[0051] 實(shí)施例8香菇多糖和蟲草多糖組合對(duì)預(yù)防和改善慢性腸炎功能的驗(yàn)證
[0052] 1、實(shí)驗(yàn)材料
[0053] 1.1、實(shí)驗(yàn)儀器
[0054]電子分析天平(型號(hào):FA_B):湖北好美佳儀器設(shè)備有限公司。
[0055] 1.2、實(shí)驗(yàn)試劑
[0056] TNBS(三硝基苯磺酸），純度>99% (高純級(jí)）：上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司；
[0057]戊巴比妥鈉，純度>99% (高純級(jí)）：北京普博斯生物科技有限公司；
[0058]福爾馬林固定液10% :上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司；
[0059]柳氮磺吡啶腸溶片(規(guī)格0.25g):華潤(rùn)雙鶴藥業(yè)股份有限公司。
[0060] 1.3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與飼料
[00611 SD大鼠84只，SPF級(jí)(無(wú)特定病原體級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，指除清潔動(dòng)物應(yīng)排除的病原外，不 攜帶重要潛在感染或條件致病和對(duì)科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原；飼育在屏障系統(tǒng)中，是通過無(wú) 菌動(dòng)物、悉生動(dòng)物而獲得的），200~300g，50~60天，雄雌各半;購(gòu)于湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng) 物有限公司；
[0062]動(dòng)物維持飼料名稱:實(shí)驗(yàn)鼠生長(zhǎng)繁殖顆粒料（Φ 12mm顆粒），25kg/袋;購(gòu)于湖南斯 萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。
[0063] 2、試驗(yàn)設(shè)計(jì)
[0064] 2.1實(shí)驗(yàn)分組與動(dòng)物造模
[0065]實(shí)驗(yàn)分組:本實(shí)施例采用SPF級(jí)SD大鼠84只，分為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性藥 對(duì)照組、實(shí)施例1制備的香菇多糖組、實(shí)施例2制備的蟲草多糖組、實(shí)施例3制備的香菇多糖+ 蟲草多糖組，每組14只動(dòng)物，雌雄各半。動(dòng)物預(yù)防性給藥前稱重，然后預(yù)防性給藥1周;實(shí)施 例1制備的香菇多糖組、實(shí)施例2制備的蟲草多糖組、實(shí)施例3制備的香菇多糖+蟲草多糖組 灌胃給予相應(yīng)多糖劑量各為300mg/kg，給藥容積為10mL/kg，每天1次，其他三組給予等體積 的動(dòng)物飲用水，其他組的動(dòng)物給予等量飲用水。預(yù)防性給藥結(jié)束后，空白對(duì)照組給予1:1稀 釋的無(wú)水乙醇，其他各組采用TNBS (三硝基苯磺酸)造模。
[0066]造模方法:預(yù)防性給藥結(jié)束后，動(dòng)物禁食不禁水24h后用3%戊巴比妥鈉尾靜脈注 射麻醉，動(dòng)物麻醉后，用一次性肛門插管輕柔插入結(jié)腸約8cm后注入造模藥液，大鼠提尾倒 置60s讓藥液充分停留結(jié)腸內(nèi)。造模結(jié)束后各組動(dòng)物繼續(xù)給藥16天(實(shí)施例1制備的香菇多 糖組、實(shí)施例2制備的蟲草多糖組、實(shí)施例3制備的香菇多糖+蟲草多糖組灌胃給予相應(yīng)多糖 劑量各為300mg/kg，每天1次，空白對(duì)照組、模型對(duì)照組給予等體積的動(dòng)物飲用水，陽(yáng)性對(duì)照 組給予柳氮磺啦啶腸溶片混懸液，劑量為600mg/kg)。
[0067] 2.2觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法
[0068] -般觀察及稱重:每日觀察大鼠的糞便性狀(糞便粘稠度、肛周污穢情況）、攝食情 況和精神行為狀態(tài)，每周稱重兩次;根據(jù)表1的指標(biāo)，計(jì)算造模后動(dòng)物疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)。
[0069] 表1
[0070]
[0071] 注:DAI = (體重下降分?jǐn)?shù)+糞便性狀分?jǐn)?shù)+糞便隱血分?jǐn)?shù))/3
[0072]結(jié)腸肉眼觀察:動(dòng)物給藥結(jié)束后用3%戊巴比妥鈉尾靜脈注射麻醉(30mg/kg)麻醉 后腹主動(dòng)脈取血后處死，取遠(yuǎn)端結(jié)腸約8cm，沿縱軸剪開腸管，0.9 % NaCl溶液沖洗干凈后進(jìn) 行結(jié)腸病變?nèi)庋墼u(píng)分，根據(jù)表2結(jié)腸肉眼評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分。
[0073]表 2
[0074]
[0075] 結(jié)腸病理學(xué)檢查：取距肛門8cm左右受損結(jié)腸，中性福爾馬林固定常規(guī)石蠟制片， Η-E染色，然后進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。對(duì)炎細(xì)胞（中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞)浸潤(rùn)按表3進(jìn)行評(píng) 分。
[0076] 表 3
[0077]
[0078] 此外，還對(duì)預(yù)防性給藥以及造模后動(dòng)物的攝食量、動(dòng)物造模后死亡率、胸腺和脾臟 臟器重量及臟器系數(shù)等數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
[0079] 以上各指標(biāo)，在不同性別、組別中，對(duì)各標(biāo)準(zhǔn)的計(jì)量數(shù)據(jù)(動(dòng)物體重)計(jì)算平均值土 標(biāo)準(zhǔn)差，采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。根據(jù)不同的數(shù)據(jù)類型采用不同的處理方法，P<0.05 時(shí)認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。病理學(xué)檢查出現(xiàn)異常情況則需按其發(fā)生率和程度進(jìn)行組間比 較。方差齊性和正態(tài)分布時(shí)采用one-way AN0VA，各組之間多重比較采用Dunnett-t法檢驗(yàn)； 方差不齊或非正態(tài)分布時(shí)采用Kruskal-Wallis檢驗(yàn)，各組之間多重比較采用Dunnett-t法 檢驗(yàn)。
[0080] 2.3、結(jié)果分析
[0081] 動(dòng)物預(yù)防性給藥時(shí)一般觀察未見明顯異常。除空白對(duì)照組外，其他動(dòng)物造模后均 出現(xiàn)拉稀、肛周污穢嚴(yán)重、精神狀態(tài)不佳，皮毛粗糙，攝食量明顯減少。
[0082] 表4為預(yù)防性給藥以及造模后動(dòng)物的攝食量數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。從中可以看出，動(dòng)物預(yù) 防性給藥期間，各組動(dòng)物攝食量未見明顯差別;造模后三天，與模型對(duì)照組比較，實(shí)施例1制 備的香菇多糖組、實(shí)施例2制備的蟲草多糖組、實(shí)施例3制備的香菇多糖+蟲草多糖組的動(dòng)物 個(gè)別時(shí)段攝食量未見明顯差異;但該三組在造模后6-10天、10-13天和13-16天的攝食量明 顯大于模型對(duì)照組，并且令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，實(shí)施例3制備的香菇多糖+蟲草多糖組的動(dòng)物攝 食量比另外兩組更大；相比于空白對(duì)照組，模型對(duì)照組動(dòng)物造模后攝食量減少。由此可知： 實(shí)施例3制備的香菇多糖和蟲草多糖組合可令人驚奇地增加TNBS(三硝基苯磺酸)誘導(dǎo)的慢 性腸炎模型大鼠的攝食量，而且比單獨(dú)使用香菇多糖或蟲草多糖更具優(yōu)勢(shì)(P〈〇.05)。
[0083] 表 4
[0084]
[0086]表5為預(yù)防性給藥以及造模后動(dòng)物的體重?cái)?shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果(體重:x±SD，單位g)。從 中可以看出，造模后相比于空白對(duì)照組，模型對(duì)照組動(dòng)物體重減輕，增重減少；而其他四組 數(shù)據(jù)顯示，實(shí)施例3制備的香菇多糖和蟲草多糖組合更能增加TNBS(三硝基苯磺酸)誘導(dǎo)的 大鼠慢性腸炎模型大鼠的體重，而且比單獨(dú)使用香菇多糖或蟲草多糖更具優(yōu)勢(shì)(P〈〇.05)。 [0087]表 5
[0088]
[0090](續(xù)表5)
[0091]
[0092] 表6為動(dòng)物造模后的疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。相比于空白對(duì)照組，模型對(duì)照 組動(dòng)物的疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)顯著高于空白對(duì)照組(p〈0.01);由表中數(shù)據(jù)可知，實(shí)施例3制 備的香菇多糖和蟲草多糖組合可顯著降低TNBS(三硝基苯磺酸)誘導(dǎo)的大鼠慢性腸炎模型 大鼠的疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI) (p〈0.01)，比單獨(dú)使用香菇多糖或蟲草多糖更具優(yōu)勢(shì)(p〈0.05)。
[0093] 表 6
[0094]
[0095]
[0096] 注：與空白對(duì)照組比較（#p〈0.05，##p〈0.01);與模型對(duì)照組比較（*p〈0.05，**p〈 0·01)〇
[0097] 表7為動(dòng)物造模后死亡率統(tǒng)計(jì)結(jié)果。模型對(duì)照組動(dòng)物造模后死亡率顯著高于空白 對(duì)照組(Ρ〈〇.05)。從數(shù)據(jù)中可知，實(shí)施例3制備的香菇多糖和蟲草多糖組合可降低TNBS(三 硝基苯磺酸)誘導(dǎo)的大鼠慢性腸炎模型大鼠的死亡率，且比單獨(dú)使用香菇多糖或蟲草多糖 更具優(yōu)勢(shì)(Ρ〈〇.〇5)。
[0098] 表 7
[0099]
[0100] 注:與空白對(duì)照組比較(#ρ〈〇. 05)。
[0101]表8為本實(shí)施例動(dòng)物胸腺和脾臟臟器重量及臟器系數(shù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。與空白對(duì)照組比 較，模型對(duì)照組動(dòng)物胸腺臟器重量及臟器系數(shù)均小于空白對(duì)照組，脾臟臟重量及臟器系數(shù) 均大于空白對(duì)照組。相比于模型對(duì)照組，實(shí)施例3制備的香菇多糖和蟲草多糖組動(dòng)物胸腺臟 器重量及臟器系數(shù)均大于模型對(duì)照組，脾臟重量及臟器系數(shù)均小于模型對(duì)照組，說明實(shí)施 例3制備的香菇多糖和蟲草多糖組合可顯著增強(qiáng)機(jī)體免疫調(diào)節(jié)能力，比單獨(dú)使用香菇多糖 或蟲草多糖具有更強(qiáng)(p〈〇. 05)免疫調(diào)節(jié)能力。
[0102] 表8
[0103]
[0104] 注:與空白對(duì)照組比較(#p〈0.05)。
[0105] 表9為本實(shí)施例三硝基苯磺酸誘導(dǎo)的慢性腸炎大鼠結(jié)腸病變?nèi)庋墼u(píng)分的影響結(jié) 果。與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組動(dòng)物結(jié)腸病變?nèi)庋墼u(píng)分提高(P〈〇.05)。但實(shí)施例3制備 的香菇多糖+蟲草多糖組動(dòng)物結(jié)腸病變?nèi)庋墼u(píng)分與其他四組相比有降低的趨勢(shì)(P〈〇. 05)。
[0106] 表9
[0107]
[0108]注:與空白對(duì)照組比較(#p〈0.05);各受試物組動(dòng)物分值與模型對(duì)照組比較無(wú)顯著 性差異(P>〇.〇5)
[0109] 表10為本實(shí)施例中三硝基苯磺酸誘導(dǎo)的慢性腸炎大鼠結(jié)腸損傷部位炎細(xì)胞浸潤(rùn) 評(píng)分的影響結(jié)果，其顯示模型對(duì)照組動(dòng)物及受試物組（陽(yáng)性對(duì)照組、實(shí)施例1制備的香菇多 糖組、實(shí)施例2制備的蟲草多糖組、實(shí)施例3制備的香菇多糖+蟲草多糖組)動(dòng)物結(jié)腸損傷處 及結(jié)腸正常損傷交接處均可見到黏膜的缺失，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，壞死，嗜酸 性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，隱窩腺擴(kuò)張;黏膜下層大量纖維組織增生，水腫，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，淋巴細(xì)胞 浸潤(rùn)，嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，含鐵血黃素沉積，巨噬細(xì)胞浸潤(rùn);肌層肌纖維消失，中性粒細(xì)胞浸 潤(rùn)，淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，纖維組織增生等;漿膜層增生、水腫、巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)等改變。但相對(duì)模型 對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組，實(shí)施例3制備的香菇多糖和蟲草多糖組合對(duì)TNBS (三硝基苯磺酸)誘 導(dǎo)的大鼠慢性腸炎模型大鼠的結(jié)腸損傷要低(P〈〇.05)。
[0110] 表 10
[0111]
[0113] 綜合以上數(shù)據(jù)結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，實(shí)施例1制備的香菇多糖、實(shí)施例2制備的蟲草多糖 都可以使TNBS(三硝基苯磺酸)誘導(dǎo)的慢性腸炎模型大鼠的攝食量、體重均增加，降低動(dòng)物 造模后的死亡率，增強(qiáng)機(jī)體免疫調(diào)節(jié)能力，減輕動(dòng)物造模后的疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)，減輕結(jié) 腸炎癥狀，同時(shí)令人驚奇的發(fā)現(xiàn)，實(shí)施例3制備的香菇多糖和蟲草多糖組合物的效果更優(yōu)。 因此實(shí)施例3制備的香菇多糖和蟲草多糖組合物具有預(yù)防和改善慢性腸炎作用，而且比單 獨(dú)使用香菇多糖或蟲草多糖更具優(yōu)勢(shì)(P〈〇. 05)。
[0114] 根據(jù)該香菇多糖和蟲草多糖組合物具有預(yù)防和改善慢性腸炎作用，將天然的、人 工的、以及上述實(shí)施例1和實(shí)施例2的制備方法制成的香菇多糖和蟲草多糖，按2:3的比例配 制（即實(shí)施例3制備的組合物，試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)2:3的比例配置效果最出人意料），再加入食用或藥 用輔料，可制備成膠囊、片劑、顆粒劑、□服液、散劑、袋泡茶等各種保健食品的劑型。
[0115] 取實(shí)施例4~實(shí)施例7制備的組合物進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果與實(shí)施例3制備的組 合物的結(jié)果相同或相近，比單獨(dú)使用香菇多糖或蟲草多糖更具優(yōu)勢(shì)(P〈〇.05)。
[0116] 實(shí)施例9不同比例的香菇多糖、蟲草多糖組合物及其功效
[0117] 將實(shí)施例1制得的香菇多糖、實(shí)施例2制得蟲草多糖以表11中不同重量計(jì)比例混 合，進(jìn)一步加入醫(yī)學(xué)或食品可接受的載體、賦形劑、賦形劑和/或填充劑。制成包含香菇多 糖、蟲草多糖的保健食品組合物。并按照實(shí)施4中對(duì)預(yù)防和改善慢性腸炎及其引起的腸胃不 適功能的驗(yàn)證方法得到預(yù)防和改善慢性腸炎及其引起的腸胃不適功能的結(jié)果分值。（100分 制，以實(shí)施例3中2:3的混合質(zhì)量比制得的組合物相應(yīng)的預(yù)防和改善慢性腸炎及其引起的腸 胃不適功能記為100分，其他混合比例相應(yīng)的功能試驗(yàn)結(jié)果相比占實(shí)施例4的功能試驗(yàn)結(jié)果 的百分點(diǎn)，記為相應(yīng)的功能分值）。
[0118] 表11不同比例的香菇多糖、蟲草多糖組合物及其功效
[0119]
[0120] 功能試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)香菇多糖、蟲草多糖在（1:5)~(5:1)的混合比例時(shí)相比單獨(dú)的 施用兩種多糖具有更顯著的預(yù)防和改善慢性腸炎及其引起的腸胃不適功能。當(dāng)施用多糖混 合比例為(2:4)~(4:2)時(shí)，效果更顯著。
[0121 ]本發(fā)明所述的保健食品經(jīng)科學(xué)配伍而成，相得益彰，無(wú)毒副作用；既有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值， 又有預(yù)防和改善慢性腸炎功能。
【申請(qǐng)人】聲明，以上內(nèi)容是結(jié)合具體的實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明所 作的進(jìn)一步詳細(xì)說明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說明。對(duì)于本發(fā)明所屬技 術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡(jiǎn)單推演或 替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種中藥組合物，其特征在于，由香菇和蟲草組成。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于，所述香菇的有效成分為香菇多糖， 所述蟲草的有效成分為蟲草多糖。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的中藥組合物，其特征在于，所述香菇多糖與所述蟲草多糖的質(zhì) 量比為（1:5)~(5:1)。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的中藥組合物，其特征在于，所述香菇多糖與所述蟲草多糖的質(zhì) 量比為(2:4)~(4:2)。5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的中藥組合物，其特征在于，所述香菇多糖與所述蟲草多糖的質(zhì) 量比為2:3。6. 根據(jù)權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于，取所述香菇 或所述蟲草粉碎，以g/mL計(jì)，分別按照香燕或蟲草與水的（0.5g~2. Og): 5mL的比例混合，在 70°C~75°C加熱攪拌提取3h，過濾獲得的濾渣按照上述料液比、溫度和時(shí)間繼續(xù)提取兩次， 合并三次提取液，經(jīng)過減壓濃縮和離心獲得澄清濃縮液，按照所述澄清濃縮液與95%乙醇 的體積比為1: (7~10)混合，混勻后于4°C過夜靜置沉淀，離心收集沉淀，經(jīng)過真空冷凍干燥 即得。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法制得的中藥組合物。8. 根據(jù)權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)所述的中藥組合物和/或根據(jù)權(quán)利要求7所述的中藥組合 物在制備預(yù)防和/或改善慢性腸炎及其引起的腸胃不適的藥物和/或保健食品中的用途。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于，所述中藥組合物中，所述香菇多糖或所述 蟲草多糖的使用劑量分別為300mg/kg。10. -種用于預(yù)防和/或改善慢性腸炎及其引起的腸胃不適的藥物和/或保健食品，其 特征在于，包括如權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)所述的中藥組合物和/或如權(quán)利要求7所述的中藥組 合物以及藥學(xué)上可接受的輔料。
【文檔編號(hào)】A61P1/00GK106038613SQ201610379328
【公開日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年5月31日
【發(fā)明人】胡明華, 馬方勵(lì), 王園園, 馬忠華, 秦垂新, 寇秀穎
【申請(qǐng)人】無(wú)限極（中國(guó)）有限公司