一種銀杏葉提取物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于一種銀杏葉提取物的制備方法，包括以下步驟：（1）銀杏葉粉的制備：將銀杏葉除去雜質(zhì)后烘干，將烘干后的銀杏葉粉碎，過篩；（2）超臨界CO2萃取：將步驟（1）得到的銀杏葉粉加入到CO2 超臨界萃取器中，加入夾帶劑無水乙醇，進行超臨界萃取，萃取完成后，收集提取物，得到銀杏葉粗提物溶液；（3）銀杏葉粗提物預處理：將銀杏葉粗提物溶液抽濾，濃縮，乙醇溶液稀釋，3~5℃下冷卻10?14小時，再次抽濾后制成上柱液；（4）大孔樹脂純化：上柱液過AB?8樹脂柱，先用純水洗脫，再用乙醇溶液洗脫解析樹脂柱，收集洗脫液；（5）銀杏葉提取物干燥成粉：洗脫液經(jīng)旋蒸濃縮，真空干燥，得到銀杏葉提取物粉末產(chǎn)品。
【專利說明】
一種銀杏葉提取物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于藥物制備領(lǐng)域，具體涉及一種銀杏葉提取物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]心腦血管疾病是一種嚴重威脅人類，特別是50歲以上中老年人健康的常見病，全世界每年死于心腦血管疾病的人數(shù)高達1500萬人，居各種死因首位。而我國每年有300萬人死于心腦血管疾病，占全部死亡的51%，就是說我們國家每100個死亡就有51個是由于心血管病。銀杏葉提取物因具有引起血管擴張，加強對血管的調(diào)節(jié)作用、增加腦血流量、改善腦的營養(yǎng)、改善缺氧時腦能量代謝、抑制血小板活化因子(PAF)，促進血液循環(huán)及腦代謝等功能，在心腦血管用藥中處于比較重要的地位。
[0003]中國是世界上銀杏的原產(chǎn)地之一，是世界上銀杏生產(chǎn)強國，擁有一定的資源優(yōu)勢，并有傳統(tǒng)的中藥加工經(jīng)驗，在銀杏的綜合開發(fā)利用上，完全有條件在國際競爭中爭得一席之地，據(jù)資料數(shù)據(jù)顯示，全國銀杏葉提取物年產(chǎn)量約90t，國內(nèi)每年用于制藥消耗20t，其余70t全部出口到國外，因此，開發(fā)銀杏葉提取物有著廣闊的前景。
[0004]目前，關(guān)于從銀杏葉中提取銀杏葉黃酮的研究較多，較傳統(tǒng)的有水提法、有機溶劑提取法，但是現(xiàn)有的提取工藝大多存在使用溶劑量、料液濃縮量大，目前廣泛應(yīng)用于銀杏葉提取的溶劑比例在10倍以上，嚴重制約了銀杏葉提取的發(fā)展。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種溶劑使用量小、工藝簡單的銀杏葉提取物及其制備方法。
[0006]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是，一種銀杏葉提取物的制備方法，包括以下步驟:
(1)銀杏葉粉的制備:將銀杏葉除去雜質(zhì)后烘干，將烘干后的銀杏葉粉碎，過20-50目篩，得到銀杏葉粉；
(2)超臨界CO2萃取:將步驟(I)得到的銀杏葉粉加入到C02超臨界萃取器中，加入夾帶劑無水乙醇，萃取壓力10-30MPa、萃取溫度30-50°C下進行超臨界萃取，萃取時間為l_3h，
0)2流量20-22 L/h，萃取完成后，收集提取物，得到銀杏葉粗提物溶液；
(3)銀杏葉粗提物預處理:將銀杏葉粗提物溶液抽濾，濃縮至稠膏狀(濃縮至無醇味，近干)，15?20vol%乙醇溶液稀釋，3?5°C下冷卻10-14小時，再次抽濾后制成上柱液；
(4)大孔樹脂純化:上柱液過AB-8樹脂柱，先用純水洗脫，再用20-80vol%的乙醇溶液洗脫解析樹脂柱，收集洗脫液；
(5)銀杏葉提取物干燥成粉:洗脫液經(jīng)旋蒸濃縮，真空干燥，得到銀杏葉提取物粉末產(chǎn)品O
[0007]所述步驟(2)加入的無水乙醇的體積與銀杏葉粉的質(zhì)量比為5 ml: Ig _25ml:lg。
[0008]所述步驟(3)中15?20vol%乙醇溶液與濃縮至稠膏狀的銀杏葉粗提物體積比為10-15:lo
[0009]所述步驟(5)中真空干燥的溫度為50_60°C。
[0010]本發(fā)明中的銀杏葉提取物可以制成膠囊、片劑等常見劑型使用。
[0011]本發(fā)明產(chǎn)生的有益效果是:本發(fā)明中的超臨界CO2萃取綜合了溶劑萃取和蒸餾的兩種功能和特點，能在接近常溫下操作，對熱敏物質(zhì)可適用;粘度小，擴散系數(shù)大，提取速度較快，溶質(zhì)和溶劑的的分離徹底。同時本發(fā)明在超臨界流體萃取中加入夾帶劑乙醇，可以大大提高銀杏葉中有效成分的萃取收率，同時可以避免直接萃取銀杏葉萃取器體積過大的弊端，大大減少了溶劑的使用量，減小料液濃縮量，簡化工藝流程，降低了生產(chǎn)成本。本發(fā)明中制備的銀杏葉提取物粉末的銀杏內(nèi)酯和黃酮醇苷的含量高，并且通過步驟(3)中3~5°C下冷卻I O-14小時，可起到去除部分銀杏葉酸的作用，因此本發(fā)明的銀杏葉提取物毒副作用小，適合于心腦血管疾病需要長期治療的特點。
【具體實施方式】
[0012]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步說明，但本發(fā)明的保護范圍不限于此。
[0013]實施例1
一種銀杏葉提取物的制備方法，包括以下步驟:
(1)銀杏葉粉的制備:將銀杏葉除去雜質(zhì)后在600C下烘干，將烘干后的銀杏葉粉碎，過30目篩，得到銀杏葉粉；
(2)超臨界CO2萃取:取10g過篩后的銀杏葉粉加入到CO2超臨界萃取器中，加入無水1500ml乙醇，萃取壓力20MPa、萃取溫度35°C下進行超臨界萃取，萃取時間為1.5h，C02流量為21 L/h，萃取完成后，收集提取物，得到銀杏葉粗提物溶液；
(3)銀杏葉粗提物預處理:將銀杏葉粗提物溶液抽濾，濃縮至稠膏狀(濃縮至無醇味，近干)，20vol%乙醇溶液稀釋(20vol%乙醇溶液與濃縮至稠膏狀的銀杏葉粗提物體積比為10:1)，4°C下冷卻12小時，再次抽濾后制成上柱液；
(4)大孔樹脂純化:上柱液過AB-8樹脂柱，先用純水洗脫3次，再用70vol%的乙醇溶液洗脫解析樹脂柱，收集洗脫液；
(5)銀杏葉提取物干燥成粉:洗脫液經(jīng)旋蒸濃縮、55°C真空干燥，得到總黃酮含量35.9%、總內(nèi)酯含量21.2%的銀杏葉提取物粉末產(chǎn)品。
[0014]實施例2
一種銀杏葉提取物的制備方法，包括以下步驟:
(1)銀杏葉粉的制備:將銀杏葉除去雜質(zhì)后在600C下烘干，將烘干后的銀杏葉粉碎，過20目篩，得到銀杏葉粉；
(2)超臨界CO2萃取:取SOg過篩后的銀杏葉粉加入到CO2超臨界萃取器中，加入無水2000ml乙醇，萃取壓力30MPa、萃取溫度50 °C下進行超臨界萃取，萃取時間為Ih，⑶2流量為20 L/h，萃取完成后，收集提取物，得到銀杏葉粗提物溶液；
(3)銀杏葉粗提物預處理:將銀杏葉粗提物溶液抽濾，濃縮至稠膏狀(濃縮至無醇味，近干)，15vol%乙醇溶液稀釋(15vol%乙醇溶液與濃縮至稠膏狀的銀杏葉粗提物體積比為15:1)，3°C下冷卻10小時，再次抽濾后制成上柱液；
(4)大孔樹脂純化:上柱液過AB-8樹脂柱，先用純水洗脫3次，再用80vol%的乙醇溶液洗脫解析樹脂柱，收集洗脫液；
(5)銀杏葉提取物干燥成粉:洗脫液經(jīng)旋蒸濃縮、50°C真空干燥，得到總黃酮含量36.9%、總內(nèi)酯含量22.3%的銀杏葉提取物粉末產(chǎn)品。
[0015]實施例3
一種銀杏葉提取物的制備方法，包括以下步驟:
(1)銀杏葉粉的制備:將銀杏葉除去雜質(zhì)后在600C下烘干，將烘干后的銀杏葉粉碎，過50目篩，得到銀杏葉粉；
(2)超臨界CO2萃取:取120g過篩后的銀杏葉粉加入到CO2超臨界萃取器中，加入無水600ml乙醇，萃取壓力1MPa、萃取溫度30 °C下進行超臨界萃取，萃取時間為3h，CO2流量為22L/h，萃取完成后，收集提取物，得到銀杏葉粗提物溶液；
(3)銀杏葉粗提物預處理:將銀杏葉粗提物溶液抽濾，濃縮至稠膏狀(濃縮至無醇味，近干)，18vol%乙醇溶液稀釋(18vol%乙醇溶液與濃縮至稠膏狀的銀杏葉粗提物體積比為12:1)，5°C下冷卻14小時，再次抽濾后制成上柱液；
(4)大孔樹脂純化:上柱液過AB-8樹脂柱，先用純水洗脫3次，再用20vol%的乙醇溶液洗脫解析樹脂柱，收集洗脫液；
(5)銀杏葉提取物干燥成粉:洗脫液經(jīng)旋蒸濃縮、60°C真空干燥，得到總黃酮含量35.3%、總內(nèi)酯含量20.5%的銀杏葉提取物粉末產(chǎn)品。
[0016]動物長期毒性試驗
將本發(fā)明的實施例1中的銀杏葉提取物粉末產(chǎn)品喂食大鼠，三個實驗組分別用140mg/kg(高劑量)、65mg/kg(中劑量)和30mg/kg(低劑量)三個劑量喂食大鼠，與空白對照組(不喂食藥物)進行觀察比較60天，得到如下結(jié)果:體重、血常規(guī)、肝功能、腎功能等指標中，三個實驗組和空白對照組均無顯著差異，三個實施驗組中均未發(fā)現(xiàn)明顯的病理形態(tài)學損害?？芍景l(fā)明的銀杏葉提取物毒副作用小，適合于心腦血管疾病需要長期治療的特點。
【主權(quán)項】
1.一種銀杏葉提取物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)銀杏葉粉的制備:將銀杏葉除去雜質(zhì)后烘干，將烘干后的銀杏葉粉碎，過20-50目篩，得到銀杏葉粉； (2)超臨界CO2萃取:將步驟(I)得到的銀杏葉粉加入到CO2超臨界萃取器中，加入夾帶劑無水乙醇，萃取壓力10-30MPa、萃取溫度30-50°C下進行超臨界萃取，萃取時間為l_3h，萃取完成后，收集提取物，得到銀杏葉粗提物溶液； (3)銀杏葉粗提物預處理:將銀杏葉粗提物溶液抽濾，濃縮，15?20vol%乙醇溶液稀釋，3?5 °C下冷卻10-14小時，再次抽濾后制成上柱液； (4)大孔樹脂純化:上柱液過AB-8樹脂柱，先用純水洗脫，再用20-80vol%的乙醇溶液洗脫解析樹脂柱，收集洗脫液； (5)銀杏葉提取物干燥成粉:洗脫液經(jīng)旋蒸濃縮，真空干燥，得到銀杏葉提取物粉末產(chǎn)品O2.如權(quán)利要求1所述銀杏葉提取物的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)加入的無水乙醇的體積與銀杏葉粉的質(zhì)量比為5 ml: Ig -25ml:lg。3.如權(quán)利要求1所述銀杏葉提取物的制備方法，其特征在于，所述步驟(5)中真空干燥的溫度為50-60 °C。4.如權(quán)利要求1一3任一制備方法所制備的銀杏葉提取物。
【文檔編號】A61P9/00GK106038619SQ201610400134
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年6月8日
【發(fā)明人】湯廣斌, 李桂娟, 趙當歌
【申請人】河南駿化發(fā)展股份有限公司