一種注射用多肽類藥物的緩釋微球的制備
【專利摘要】本發(fā)明提供一種注射用多肽類藥物的緩釋微球的制備方法，包括以下步驟：(1)稱取明膠溶液、多肽粉末和可降解聚合物；(2)加熱明膠溶液融化，混合多肽粉末和明膠溶液，得到明膠?多肽混合溶液；(3)加熱可降解聚合物粉末得到熔融狀態(tài)的可降解聚合物；(4)混合步驟(3)可降解聚合物與步驟(2)明膠?多肽溶液，得到明膠?多肽?可降解聚合物混合物；(5)熔融擠出所述明膠?多肽?可降解聚合物混合物，得到熱熔擠出物；(6)冷卻并粉碎所述熱熔擠出物，過篩得到多肽類藥物的緩釋微球。本發(fā)明方法獲得的緩釋微球雜質(zhì)降低，減少了給藥次數(shù)，降低了給藥痛苦，提高患者順應(yīng)性。
【專利說明】
一種注射用多肽類藥物的緩釋微球的制備
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及多肽微球的制備方法及由其制備的 多肽類緩釋微球制劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前，緩控釋制劑的制備方法主要通過溶劑溶解分散，例如，在專利EP0052510A公 開的微球制備法、以及專利US3976071A中公開的微球的制備法中，都是利用有機(jī)溶劑溶解 不溶于水的聚合物為前提。雖然這樣多肽藥物能夠充分的分散到聚合物基質(zhì)中，但是會有 有機(jī)溶劑殘留的問題出現(xiàn)，有機(jī)溶劑有低毒性，徹底清除有機(jī)溶劑殘留往往是費用昂貴和 困難。
[0003] 中國專利申請CN1913924A公開了在適當(dāng)控制多肽和賦形劑的含水量的條件下，能 夠使多肽與賦形劑在100°c以上的溫度，大約144-147Γ下短時間內(nèi)熔融混合并擠出的方 法，該方法避免了有機(jī)溶劑的使用，克服了有機(jī)溶劑殘留問題。但是由于高溫使得活性成分 和聚合物有所降解，制備的多肽緩釋制劑工藝雜質(zhì)高達(dá)12%左右，嚴(yán)重的降低了制劑質(zhì)量， 雜質(zhì)量直接影響臨床的不良反應(yīng)和有效性。
[0004] 中國專利CN 102048699 A經(jīng)過工藝優(yōu)化，將工藝溫度降低到70-100度，優(yōu)選出85 度，雜質(zhì)產(chǎn)生有很大改善，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)也有顯著提高。優(yōu)化的工藝產(chǎn)生5%左右的工藝雜質(zhì)。85 度對于一些熱敏感的多肽藥物適用性不強(qiáng)，有效成分會破壞比較嚴(yán)重。
[0005] 實驗顯示，熱熔擠出過程中熱熔擠出溫度直接影響多肽緩釋制劑的雜質(zhì)含量。因 此，本發(fā)明人令人意想不到地發(fā)明了一種多肽緩釋微球的制備方法，將可降解聚合物和多 肽混合物熔融的溫度降到低于70度。工藝過程中沒有使用任何有機(jī)溶劑，從而杜絕了有機(jī) 殘留的問題;而且特定溫控的熱熔擠出步驟解決了最終產(chǎn)品中工藝雜質(zhì)增多的問題，使多 肽緩釋制劑的工藝雜質(zhì)控制在2%以內(nèi)，方便了質(zhì)量控制并降低了用藥安全隱患。而且，由 該方法制備的多肽緩釋制劑不但工藝雜質(zhì)少，而且減少了最初的突釋，具有連續(xù)釋放多肽 有效劑量的優(yōu)勢，從而減少了給藥次數(shù)，降低了給藥痛苦，提高患者順應(yīng)性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明涉及一種注射用多肽類藥物的緩釋微球。
[0007] 注射用多肽類藥物的緩釋微球的制備方法，所述方法包括：
[0008] (1)稱取明膠溶液、多肽粉末和可降解聚合物；
[0009 ] (2)加熱明膠溶液融化，混合多肽粉末和明膠溶液，得到明膠-多肽混合溶液；
[0010] (3)加熱可降解聚合物粉末得到熔融狀態(tài)的可降解聚合物；
[0011] (4)混合所述步驟(3)可降解聚合物與所述步驟(2)明膠-多肽溶液，得到明膠-多 肽-可降解聚合物混合物；
[0012] (5)熔融擠出所述明膠-多肽-可降解聚合物混合物，得到熱熔擠出物；
[0013] (6)冷卻并粉碎所述熱熔擠出物，過篩得到多肽類藥物的緩釋微球。
[0014] 所述的多肽為亮丙瑞林、曲普瑞林、戈舍瑞林、促黃體激素拮抗劑。
[0015] 所述可降解聚合物指具有可生物降解性質(zhì)的聚合物，可以是人工合成的，如聚乳 酸(PLA)、聚乙交酯(PLG)、聚乙交酯丙交酯共聚物(PLGA)、聚己內(nèi)酯(PCL)及它們的衍生物； 也可以是天然高分子聚合物，如葡聚糖、海藻酸等。
[0016] 優(yōu)選的，可降解聚合物是聚乙交酯丙交酯共聚物，更優(yōu)選所述乙交酯丙交酯共聚 物中包括40~90% (摩爾百分比）乳酸單元和10~60% (摩爾百分比）羥基乙酸單元，更優(yōu)選 所述乙交酯丙交酯共聚物中包括50~85% (摩爾百分比）乳酸單元和15~50% (摩爾百分 比)羥基乙酸單元，例如本發(fā)明【具體實施方式】中提及的重量比。
[0017] 所述步驟(5)中，熔融擠出的溫度為40°C-69°C。
[0018] 所述步驟（5)中，熔融擠出的溫度為46°C。所述步驟（5)中，熔融擠出的溫度為50 cC。
[0019] 所述步驟(5)中，熔融擠出的溫度為57°C。所述步驟(5)中，熔融擠出的溫度為65 °C。所述步驟(5)中，熔融擠出的溫度為66°C。所述步驟(5)中，熔融擠出的溫度為67°C。所述 步驟(5)中，熔融擠出的溫度為68 °C。
[0020] 所述步驟(1)中明膠溶液-多肽與可降解聚合物的重量比為1:1到1:100。
[0021] 所述步驟(1)中明膠溶液-多肽與可降解聚合物的重量比為1:2。優(yōu)選的，所述步驟 (1)中明膠溶液-多肽與可降解聚合物的最佳重量比為1:4。所述步驟（1)中明膠溶液-多肽 與可降解聚合物的重量比為1:5。所述步驟（1)中明膠溶液-多肽與可降解聚合物的重量比 為1:10。所述步驟(1)中明膠溶液-多肽與可降解聚合物的重量比為1:12。所述步驟(1)中明 膠溶液-多肽與可降解聚合物的重量比為1:4。所述步驟(1)中明膠溶液-多肽與可降解聚合 物的重量比為1:21。所述步驟（1)中明膠溶液-多肽與可降解聚合物的重量比為1:37。所述 步驟(1)中明膠溶液-多肽與可降解聚合物的重量比為1:80。所述步驟(1)中明膠溶液-多肽 與可降解聚合物的重量比為1:60。所述步驟(1)中明膠溶液-多肽與可降解聚合物的重量比 為1:50。所述步驟(1)中明膠溶液-多肽與可降解聚合物的重量比為1:90。
[0022] 所述步驟(6)中冷卻溫度為-50°C到-90°C。
[0023]優(yōu)選的，所述步驟(6)中冷卻溫度為-80°C。
[0024] 所述步驟(6)制備的多肽類藥物的緩釋微球還需要冷凍干燥。
[0025] 注射用多肽類藥物的緩釋微球的制備方法，所述方法包括：
[0026] (1)稱取明膠溶液、多肽粉末和可降解聚合物；
[0027] (2)加熱明膠溶液融化，混合多肽粉末和明膠溶液，得到明膠-多肽混合溶液；
[0028] (3)加熱可降解聚合物粉末至液態(tài)，得到熔融狀態(tài)的可降解聚合物；
[0029] (4)降低可降解聚合物溫度，混合所述步驟(3)熔融狀態(tài)可降解聚合物與所述步驟 ⑵明膠-多肽溶液，得到明膠-多肽-可降解聚合物混合物;調(diào)節(jié)溫度，明膠-多肽-可降解聚 合物混合物保持融化狀態(tài)；
[0030] (5)熔融擠出所述明膠-多肽-可降解聚合物混合物，得到熱熔擠出物；
[0031] (6)冷卻并粉碎所述熱熔擠出物，過篩得到多肽類藥物的多肽緩釋微球；
[0032] (7)冷凍干燥，獲得多肽緩釋微球。
[0033] 現(xiàn)有技術(shù)如US3976071A、CN1913924A、CN 102048699 A等，公開的方法皆為將多肽 類藥物與聚合物混合后，加熱熔融，然后擠壓。多肽類藥物不耐高溫，聚合物融化必須加熱， 為了降低多肽類藥物高溫變性，獲取多肽類藥物和聚合物的液態(tài)混合形式，會采取短時間 高溫的形式，如在CN 102048699A中采用的是85°C左右熔融。但是發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，即使熔融溫 度被降低至85°C左右，雜質(zhì)的生成仍然是另人擔(dān)心問題。發(fā)明人對多肽藥物和聚合物的熔 融液化狀態(tài)進(jìn)行了進(jìn)一步的研究，發(fā)現(xiàn)在熔融液化狀態(tài)，雜質(zhì)的生成有幾個來源：（1)多肽 類藥物會自身斷裂產(chǎn)生雜質(zhì)，斷裂碎片之間聚合又生成新復(fù)雜雜質(zhì)；（2)聚合物自身斷裂產(chǎn) 生雜質(zhì)，斷裂碎片之間聚合又生成新復(fù)雜雜質(zhì)；（3)多肽類藥物與聚合物之間反應(yīng)；（4)(1) 類雜質(zhì)、（2)類雜質(zhì)和(3)類雜質(zhì)之間兩兩互相反應(yīng)。
[0034] 發(fā)明人根據(jù)以上發(fā)現(xiàn)，總結(jié)出要減少雜質(zhì)的生成需要從2個方面入手：（1)降低熔 融溫度；（2)減少多肽類藥物與聚合物在高溫下接觸。因此發(fā)明人提出了本發(fā)明所述的多肽 類藥物緩釋微球的制備方法。
[0035] 在本發(fā)明所述的方法中，先制備得到明膠-多肽混合溶液，熔融狀態(tài)的可降解聚合 物，然后混合所述熔融狀態(tài)的可降解聚合物與明膠-多肽溶液，得到明膠-多肽-可降解聚合 物混合物，多肽被明膠包裹后再與可降解聚合物混合，有效的隔絕了多肽類藥物與可降解 聚合物接觸，減少了（3)類雜質(zhì)和(4)類雜質(zhì);并且明膠也屬于蛋白質(zhì)高分子，反應(yīng)活性比可 降解聚合物低，明膠包裹多肽類藥物后，明膠與多肽類藥物不會相互發(fā)生反應(yīng)。另一方面， 可降解聚合物只要在一定的溫度下吸收足夠的熱量就可以完全熔融，然后在較低的溫度條 件下就可以保持熔融液化狀態(tài)。在現(xiàn)有技術(shù)中為了降低多肽類藥物在高溫的暴露時間，一 般都是使用高溫短時間的操作方式，導(dǎo)致可降解聚合物熔融不完全;而本發(fā)明所述的方法 將涉及的處方材料分別熔融:多肽類藥物和明膠熔融，可降解聚合物熔融，明膠在溫度為28 °C以上時既可以熔融，使得擠壓前的熔融溫度可以降低至70°C以下。
[0036]本發(fā)明所述的方法有效降低了擠壓前熔融的溫度至70°C以下，獲得的緩釋微球雜 質(zhì)被大幅度降低，能夠控制使用本發(fā)明制備的多肽類緩釋微球雜質(zhì)低于1.3%，比現(xiàn)有技術(shù) 公布顯著降低。
【附圖說明】
[0037]圖1:實施例3所述的藥代動力學(xué)圖。
【具體實施方式】
[0038] 實施例1
[0039] 取IOg聚乙交酯丙交酯共聚物顆粒（50/50，]\^ = 20,00003,0.17~0.23乩/^，購自 贏創(chuàng)公司）、0.5g醋酸曲普瑞林粉末，2g明膠溶液。
[0040] 將聚乙交酯丙交酯共聚物顆粒在-HTC條件下通過球磨儀粉碎10分鐘，然后過篩 收集100目以下的顆粒，得到可降解聚合物粉末。然后緩慢加熱使其融化，保持溫度。
[0041] 將醋酸曲普瑞林粉末過篩，收集800目以下的醋酸曲普瑞林粉末。
[0042] 加熱使明膠融化，明膠融化的溫度為28°C，加入醋酸曲普瑞林粉末融化狀態(tài)混合 均勻。然后，將聚乙交酯丙交酯共聚物熔融態(tài)液體與上述醋酸曲普瑞林明膠混合液體混合 均勻，保持溫度65°C，在熔融狀態(tài)下得到混合物。然后將上述液態(tài)混合物投入到Pharml 1型 雙螺桿擠出機(jī)(購自Thermo Fisher Scientific公司）內(nèi)，調(diào)節(jié)擠出機(jī)的四段控溫區(qū)的恪融 擠出溫度到60 °C左右，對混合物進(jìn)行加熱壓縮熔融擠出，從投料到擠出的全過程時間為30 分鐘，將得到的熔融擠出物在牽引機(jī)牽引成直徑為3mm的長條，同時用自然空氣或冷氣對其 進(jìn)行降溫，使其回到固體狀態(tài)，再通過切粒機(jī)切成長度為3cm的短棒，之后將短棒粉碎，短棒 的粉碎溫度是-80 °C，過篩，過篩收集在200目以下的醋酸曲普瑞林緩釋微球，凍干。
[0043] 實施例2
[0044] 參考CN102048699A的實施例7所述方法制備。
[0045] 取IOg聚乙交酯丙交酯共聚物顆粒（50/50，]\^ = 20,00003,0.17~0.23乩/^，購自 贏創(chuàng)公司）、0.5g醋酸曲普瑞林粉末，根據(jù)CN 102048703 A公開的通用方法制備，其中熔融 擠出的溫度是85°C，短棒的粉碎溫度是_70°C。過篩收集在200目以下的注射用醋酸曲普瑞 林緩釋微球。
[0046] 實施例3
[0047]本發(fā)明方法制備的曲普瑞林緩釋微球與采用中國專利申請CN102048699A所公開 的方法制備的曲普瑞林緩釋微球的雜質(zhì)比較及藥代動力學(xué)對比 [0048] (1)雜質(zhì)含量對比
[0049] 取本發(fā)明實施例1和2制備的緩釋微球進(jìn)行雜質(zhì)對比研究，采用HPLC方法來測定工 藝雜質(zhì)含量分別為1.2%和2.9%，表明用本發(fā)明實施例1方法制備的緩釋微球工藝雜質(zhì)含 量低于實施例2方法制備的緩釋微球(實施例2按照CN102048699A公開的內(nèi)容操作），即應(yīng)用 CN102048699A所公開的通用方法制備緩釋微球時，高溫使聚乙交酯丙交酯共聚物和曲普瑞 林發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，致使活性成分降解，有機(jī)雜質(zhì)含量升高，使得質(zhì)量難以控制，并帶來用藥 安全隱患。而本發(fā)明的緩釋微球制備方法將熔融溫度從85°C降低至70°C左右，如降低至65-66°C，雜質(zhì)的含量降低了58.62%，從2.9%降低至1.2%，降低了用藥安全隱患。
[0050] (2)藥代動力學(xué)對比
[0051] 3.75mg(以曲普瑞林計）的緩釋微球?qū)π坌员雀袢?體重大約Ilkg)的后腿股二頭 肌進(jìn)行肌肉注射。在28天內(nèi)，不同時間點采集血清樣品，分別經(jīng)固相萃取法和有機(jī)溶劑處理 后采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定血清中曲普瑞林的濃度。
[0052]表格1:曲普瑞林藥代動力學(xué)實驗數(shù)據(jù)
[0054] 表格1中的"時間(h)"是指雄性比格犬注射緩釋微球起，至采集血清樣品時的時間 間隔。以表格1繪制的藥代動力學(xué)曲線見附圖1。
[0055] 實施例1和2制備的曲普瑞林緩釋微球藥代動力學(xué)實驗數(shù)據(jù)表明，實施例1和2制備 的曲普瑞林緩釋微球釋放特性相似，本發(fā)明改進(jìn)后制備方法實施例1制備的曲普瑞林緩釋 微球無明顯的突釋現(xiàn)象，給藥600小時內(nèi)釋放平穩(wěn)。
[0056] 實施例4
[0057] 取100g聚乙交酯丙交酯共聚物顆粒（75/25，]\^ = 20,00003,0.17~0.23乩/^，購自 贏創(chuàng)公司）、0.5g醋酸曲普瑞林粉末，0.5g明膠溶液。
[0058] 將聚乙交酯丙交酯共聚物顆粒在-HTC條件下通過球磨儀粉碎10分鐘，然后過篩 收集100目以下的顆粒，得到可降解聚合物粉末。然后緩慢加熱使其融化，保持溫度。
[0059] 將醋酸曲普瑞林粉末過篩，收集800目以下的醋酸曲普瑞林粉末。
[0060] 加熱使明膠融化，明膠融化的溫度為30°C，加入醋酸曲普瑞林粉末融化狀態(tài)混合 均勻。然后，將聚乙交酯丙交酯共聚物熔融態(tài)液體與上述醋酸曲普瑞林明膠混合液體混合 均勻，保持溫度64°C，在熔融狀態(tài)下得到混合物。然后將上述液態(tài)混合物投入到Pharmll型 雙螺桿擠出機(jī)(購自Thermo Fisher Scientific公司）內(nèi)，調(diào)節(jié)擠出機(jī)的四段控溫區(qū)的恪融 擠出溫度到65 °C左右，對混合物進(jìn)行加熱壓縮熔融擠出，從投料到擠出的全過程時間為30 分鐘，將得到的熔融擠出物在牽引機(jī)牽引成直徑為3mm的長條，同時用自然空氣或冷氣對其 進(jìn)行降溫，使其回到固體狀態(tài)，再通過切粒機(jī)切成長度為3cm的短棒，之后將短棒粉碎，短棒 的粉碎溫度是-50 °C，過篩，過篩收集在200目以下的醋酸曲普瑞林緩釋微球，凍干。
[0061] 制備的醋酸曲普瑞林緩釋微球經(jīng)測試，雜質(zhì)含量為1.3%。
[0062] 實施例5
[0063] 取50.5g聚乙交酯丙交酯共聚物顆粒（75/25，]\^=10,00003,0.17~0.23乩/^，購 自贏創(chuàng)公司）、0.5g醋酸曲普瑞林粉末，50g明膠溶液。
[0064]將聚乙交酯丙交酯共聚物顆粒在-HTC條件下通過球磨儀粉碎10分鐘，然后過篩 收集100目以下的顆粒，得到可降解聚合物粉末。然后緩慢加熱使其融化，保持溫度。
[0065] 將醋酸曲普瑞林粉末過篩，收集800目以下的醋酸曲普瑞林粉末。
[0066] 加熱使明膠融化，明膠融化的溫度為35°C，加入醋酸曲普瑞林粉末融化狀態(tài)混合 均勻。然后，將聚乙交酯丙交酯共聚物熔融態(tài)液體與上述醋酸曲普瑞林明膠混合液體混合 均勻，保持溫度66°C，在熔融狀態(tài)下得到混合物。然后將上述液態(tài)混合物投入到Pharml 1型 雙螺桿擠出機(jī)(購自Thermo Fisher Scientific公司）內(nèi)，調(diào)節(jié)擠出機(jī)的四段控溫區(qū)的恪融 擠出溫度到69°C左右，對混合物進(jìn)行加熱壓縮熔融擠出，從投料到擠出的全過程時間為30 分鐘，將得到的熔融擠出物在牽引機(jī)牽引成直徑為3mm的長條，同時用自然空氣或冷氣對其 進(jìn)行降溫，使其回到固體狀態(tài)，再通過切粒機(jī)切成長度為3cm的短棒，之后將短棒粉碎，短棒 的粉碎溫度是-90 °C，過篩，過篩收集在200目以下的醋酸曲普瑞林緩釋微球，凍干。
[0067] 制備的醋酸曲普瑞林緩釋微球經(jīng)測試，雜質(zhì)含量為1.1 %。
[0068] 實施例6
[0069] 取IOg PLA顆粒(Mw= 10，000Da，0 · 17~0 · 23dL/g，購自贏創(chuàng)公司）、0 · 5g醋酸亮丙 瑞林粉末，2.5g明膠溶液。
[0070] 將PLA顆粒在-10°C條件下通過球磨儀粉碎10分鐘，然后過篩收集100目以下的顆 粒，得到可降解聚合物粉末。然后緩慢加熱使其融化，保持溫度。
[0071] 將醋酸亮丙瑞林粉末過篩，收集800目以下的醋酸亮丙瑞林粉末。
[0072] 加熱使明膠融化，明膠融化的溫度為35°C，加入醋酸亮丙瑞林粉末融化狀態(tài)混合 均勻。然后，將PLA恪融態(tài)液體與上述醋酸亮丙瑞林明膠混合液體混合均勻，保持溫度66 °C， 在熔融狀態(tài)下得到混合物。然后將上述液態(tài)混合物投入到Pharmll型雙螺桿擠出機(jī)(購自 Thermo Fisher Scientific公司）內(nèi)，調(diào)節(jié)擠出機(jī)的四段控溫區(qū)的恪融擠出溫度到69°C左 右，對混合物進(jìn)行加熱壓縮熔融擠出，從投料到擠出的全過程時間為30分鐘，將得到的熔融 擠出物在牽引機(jī)牽引成直徑為3_的長條，同時用自然空氣或冷氣對其進(jìn)行降溫，使其回到 固體狀態(tài)，再通過切粒機(jī)切成長度為3cm的短棒，之后將短棒粉碎，短棒的粉碎溫度是-90 °C，過篩，過篩收集在200目以下的醋酸亮丙瑞林緩釋微球，凍干。
[0073] 制備的醋酸亮丙瑞林緩釋微球經(jīng)測試，雜質(zhì)含量為I. 2%。
[0074] 實施例7
[0075] 取IOg PLG顆粒(Mw = 100，OOODa，0 · 17~0 · 23dL/g，購自贏創(chuàng)公司）、0 · 5g醋酸亮丙 瑞林粉末，5g明膠溶液。
[0076] 將PLG顆粒在-10°C條件下通過球磨儀粉碎10分鐘，然后過篩收集100目以下的顆 粒，得到可降解聚合物粉末。然后緩慢加熱使其融化，保持溫度。
[0077] 將醋酸亮丙瑞林粉末過篩，收集800目以下的醋酸亮丙瑞林粉末。
[0078]加熱使明膠融化，明膠融化的溫度為40°C，加入醋酸亮丙瑞林粉末融化狀態(tài)混合 均勻。然后，將PLA恪融態(tài)液體與上述醋酸亮丙瑞林明膠混合液體混合均勻，保持溫度45°C， 在熔融狀態(tài)下得到混合物。然后將上述液態(tài)混合物投入到Pharmll型雙螺桿擠出機(jī)(購自 Thermo Fisher Scientific公司）內(nèi)，調(diào)節(jié)擠出機(jī)的四段控溫區(qū)的恪融擠出溫度到45°C左 右，對混合物進(jìn)行加熱壓縮熔融擠出，從投料到擠出的全過程時間為30分鐘，將得到的熔融 擠出物在牽引機(jī)牽引成直徑為3_的長條，同時用自然空氣或冷氣對其進(jìn)行降溫，使其回到 固體狀態(tài)，再通過切粒機(jī)切成長度為3cm的短棒，之后將短棒粉碎，短棒的粉碎溫度是-70 °C，過篩，過篩收集在200目以下的醋酸亮丙瑞林緩釋微球，凍干。
[0079] 制備的醋酸亮丙瑞林緩釋微球經(jīng)測試，雜質(zhì)含量為1.0%。
[0080] 實施例8
[0081 ]取IOg PLG顆粒(Mw = 100，OOODa，0 · 17~0 · 23dL/g，購自贏創(chuàng)公司）、0 · 5g醋酸戈舍 瑞林粉末，5g明膠溶液。
[0082] 將PCL顆粒在-10°C條件下通過球磨儀粉碎10分鐘，然后過篩收集100目以下的顆 粒，得到可降解聚合物粉末。然后緩慢加熱使其融化，保持溫度。
[0083] 將醋酸戈舍瑞林粉末過篩，收集800目以下的醋酸戈舍瑞林粉末。
[0084] 加熱使明膠融化，明膠融化的溫度為42°C，加入醋酸戈舍瑞林粉末融化狀態(tài)混合 均勻。然后，將PCL熔融態(tài)液體與上述醋酸戈舍瑞林明膠混合液體混合均勻，保持溫度51°C， 在熔融狀態(tài)下得到混合物。然后將上述液態(tài)混合物投入到Pharmll型雙螺桿擠出機(jī)(購自 Thermo Fisher Scientific公司）內(nèi)，調(diào)節(jié)擠出機(jī)的四段控溫區(qū)的恪融擠出溫度到52°C左 右，對混合物進(jìn)行加熱壓縮熔融擠出，從投料到擠出的全過程時間為30分鐘，將得到的熔融 擠出物在牽引機(jī)牽引成直徑為3_的長條，同時用自然空氣或冷氣對其進(jìn)行降溫，使其回到 固體狀態(tài)，再通過切粒機(jī)切成長度為3cm的短棒，之后將短棒粉碎，短棒的粉碎溫度是-60 °C，過篩，過篩收集在200目以下的醋酸戈舍瑞林緩釋微球，凍干。
[0085] 制備的醋酸戈舍瑞林緩釋微球經(jīng)測試，雜質(zhì)含量為1.0%。
[0086] 本發(fā)明實施例4-8所述方法制備的緩釋微球，經(jīng)藥代動力學(xué)測試，均沒有明顯的突 釋現(xiàn)象，在測試中釋放平穩(wěn)。
【主權(quán)項】
1. 一種注射用多肽類藥物的緩釋微球的制備方法，其特征在于所述方法包括以下步 驟： (1) 稱取明膠溶液、多肽粉末和可降解聚合物； (2) 加熱明膠溶液融化，混合多肽粉末和明膠溶液，得到明膠-多肽混合溶液； (3) 加熱可降解聚合物粉末得到熔融狀態(tài)的可降解聚合物； (4) 混合所述步驟(3)可降解聚合物與所述步驟(2)明膠-多肽溶液，得到明膠-多肽-可 降解聚合物混合物； (5) 熔融擠出所述明膠-多肽-可降解聚合物混合物，得到熱熔擠出物； (6) 冷卻并粉碎所述熱熔擠出物，過篩得到多肽類藥物的緩釋微球。2. 如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述的多肽為亮丙瑞林、曲普瑞林、戈舍 瑞林、促黃體激素拮抗劑。3. 如權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于所述可降解聚合物指具有可生物降解 性質(zhì)的聚合物，可以是人工合成的，如聚乳酸(PLA)、聚乙交酯(PLG)、聚乙交酯丙交酯共聚 物(PLGA)、聚己內(nèi)酯(PCL)及它們的衍生物;也可以是天然高分子聚合物，如葡聚糖、海藻酸 等。4. 如權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于所述步驟(5)中，熔融擠出的溫度為40 。(:_69。。。5. 如權(quán)利要求/4所述的制備方法，其特征在于所述步驟（5)中，熔融擠出的溫度為65 Γ。6. 如權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于所述步驟（1)中明膠溶液-多肽與可降 解聚合物的重量比為1:1到1:100。7. 如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于所述步驟（1)中明膠溶液-多肽與可降解 聚合物的最佳重量比為1:4。8. 如權(quán)利要求/1所述的制備方法，其特征在于所述方法包括： (1) 稱取明膠溶液、多肽粉末和可降解聚合物； (2) 加熱明膠溶液融化，混合多肽粉末和明膠溶液，得到明膠-多肽混合溶液； (3) 加熱可降解聚合物粉末至液態(tài)，得到熔融狀態(tài)的可降解聚合物； (4) 降低可降解聚合物溫度，混合所述步驟(3)熔融狀態(tài)可降解聚合物與所述步驟(2) 明膠-多肽溶液，得到明膠-多肽-可降解聚合物混合物;調(diào)節(jié)溫度，明膠-多肽-可降解聚合 物混合物保持融化狀態(tài)； (5) 熔融擠出所述明膠-多肽-可降解聚合物混合物，得到熱熔擠出物； (6) 冷卻并粉碎所述熱熔擠出物，過篩得到多肽類藥物的多肽緩釋微球； (7) 冷凍干燥，獲得多肽緩釋微球。
【文檔編號】A61K38/09GK106074393SQ201610415733
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月9日 公開號201610415733.0, CN 106074393 A, CN 106074393A, CN 201610415733, CN-A-106074393, CN106074393 A, CN106074393A, CN201610415733, CN201610415733.0
【發(fā)明人】陳斌, 徐鵬, 陳亭亭, 王濤, 王偉, 陸文岐, 孔祥生, 王燕清, 陳劍
【申請人】麗珠醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司