專(zhuān)利名稱：含松樹(shù)花粉或松樹(shù)花粉提取物的皮膚外用制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明主要涉及皮膚外用制劑，尤其涉及含有松樹(shù)花粉或松樹(shù)花粉提取物的皮膚外用制劑，它對(duì)粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌有很強(qiáng)的抗菌活性，并有減少黑頭粉刺的效果。
背景技術(shù)：
粉刺被稱為尋常痤瘡，是年輕人的皮膚特征之一。通常，粉刺的誘發(fā)因素并不確定。然而，我們知道這些因素因人而異，多種因素相互作用，導(dǎo)致了粉刺發(fā)病。引起粉刺的第一主要因素是通過(guò)睪酮活躍地產(chǎn)生皮脂的作用，產(chǎn)生了過(guò)量的皮脂。第二主要因素是通過(guò)過(guò)度角質(zhì)化的毛囊堵塞皮膚毛孔，造成過(guò)量的皮脂在皮膚毛孔中積累，促成了黑頭粉刺的形成，使粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌得以繁殖。第三主要因素是粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌分泌一種水解甘油三酯的脂肪酶，而甘油三酯是皮脂腺的過(guò)度生長(zhǎng)和毛囊孔的過(guò)度角質(zhì)化產(chǎn)生的過(guò)量皮脂中的成份之一。這種水解產(chǎn)生游離脂肪酸。
如上所述產(chǎn)生的游離脂肪酸作用于皮膚上皮，就會(huì)產(chǎn)生出各種酶，破壞毛囊壁，引起毛囊周?chē)慕Y(jié)締組織的炎癥反應(yīng)。依據(jù)炎癥程度，會(huì)形成丘疹、膿皰、囊腫、結(jié)節(jié)，而最糟的情況就是留下疤痕。
至今已知道，四環(huán)素一類(lèi)的抗生素作為能對(duì)抗粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌的抗菌藥，已被用來(lái)預(yù)防和治療粉刺，但它們會(huì)引起不良的副作用，如出現(xiàn)痤瘡丙酸桿菌耐藥菌以及光過(guò)敏。我們也知道，水楊酸或維A酸制劑的主要效果是去除角蛋白，過(guò)氧化苯甲酰制劑或外用抗生素及其類(lèi)似物有抑制化膿性細(xì)菌的活性，但它們會(huì)引起許多不良的副作用，也不能完全治愈粉刺。
水楊酸制劑不能用于化膿性皮炎，且會(huì)引起皮膚潮紅和出現(xiàn)紅斑。過(guò)氧化苯甲酰制劑會(huì)引起過(guò)敏性皮炎和使皮膚出現(xiàn)紅斑。據(jù)報(bào)道，連續(xù)使用維A酸制劑，會(huì)引起皮膚潮紅、水腫，發(fā)生色素沉著過(guò)度癥。外用抗生素的缺點(diǎn)在于對(duì)孕婦和哺乳期婦女不一定安全，也不能用于抗生素過(guò)敏病人。此外，最近進(jìn)行了許多旨在尋找對(duì)5α-還原酶有抑制活性的物質(zhì)的研究，結(jié)果找到了幾種物質(zhì)。然而，所發(fā)這些現(xiàn)的物質(zhì)并不十分有效，并難以在實(shí)踐中應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人長(zhǎng)期致力于天然產(chǎn)物的廣泛研究以解決上述問(wèn)題，結(jié)果發(fā)現(xiàn)松樹(shù)花粉及其提取物治療粉刺有很好的效果，并且十分安全，不引起任何副作用。對(duì)這個(gè)發(fā)現(xiàn)的繼續(xù)研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)松樹(shù)花粉及其提取物對(duì)粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌有很強(qiáng)的抗菌活性，并有減少黑頭粉刺，治療粉刺的顯著療效。同時(shí)，它能減少該領(lǐng)域以前治療粉刺藥物的副作用與缺點(diǎn)。在這個(gè)發(fā)現(xiàn)的基礎(chǔ)上，完成了本發(fā)明。
本發(fā)明的目的在于提供一種皮膚外用制劑，它有很強(qiáng)的抗粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌的抗菌活性，并有減少黑頭粉刺的效果，因此，在預(yù)防和治療粉刺方面十分有效。它能減少該領(lǐng)域以前用于治療粉刺的藥物的副作用和缺點(diǎn)。
本發(fā)明提供了一種含松樹(shù)花粉或松樹(shù)花粉提取物的皮膚外用制劑，其劑量能有效預(yù)防和治療粉刺。松樹(shù)花粉或松樹(shù)花粉提取物的較佳含量范圍約為皮膚外用制劑總重量的0.05％到50％，為總重量的約1％到20％則更佳，最佳含量范圍約為總重量的2％到10％。含有松樹(shù)花粉或松樹(shù)花粉提取物的皮膚外用制劑可作為治療藥物供藥用，以花露水、霜?jiǎng)?、面膜、皮膚護(hù)理液、粉底霜、防曬霜、嬰兒爽身粉、肥皂、泡沫浴劑、洗發(fā)香波及沐浴露的形式應(yīng)用。
本發(fā)明在實(shí)踐中應(yīng)用的松樹(shù)花粉，傳統(tǒng)上已經(jīng)知道，能有效預(yù)防癱瘓，有效治療慢性腹瀉、癤和皮膚濕疹。因?yàn)樗€有止血作用，松樹(shù)花粉也被用于治療創(chuàng)傷。
我們發(fā)現(xiàn)本發(fā)明在實(shí)踐中應(yīng)用的松樹(shù)花粉提取物對(duì)粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌有很強(qiáng)的抗菌活性，當(dāng)它用作皮膚外用制劑時(shí)，無(wú)論皮膚外用制劑的物理性質(zhì)如何，松樹(shù)花粉提取物均有抗菌效果。此外，從臨床試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)松樹(shù)花粉有治療粉刺的效果，即使長(zhǎng)時(shí)間重復(fù)使用，對(duì)皮膚也不產(chǎn)生任何副作用。
在本發(fā)明實(shí)踐中應(yīng)用的松樹(shù)花粉本身或松樹(shù)花粉提取物被用作皮膚外用制劑，其較佳的含量范圍約是皮膚外用制劑總重量的0.05％到50％。這是因?yàn)槿绻玫乃蓸?shù)花粉或松樹(shù)花粉提取物的含量低于0.05重量％，其治療粉刺和抗菌的作用就不充分。另外，如果所用的含量高于50重量％，治療的協(xié)同作用就不充分，皮膚外用制劑的相穩(wěn)定性就差。松樹(shù)花粉或松樹(shù)花粉提取物含量約是1％到20％重量更佳，而最佳含量約是2％到10％重量。
可用于本發(fā)明皮膚外用制劑的基質(zhì)，實(shí)例包括沐浴用的清潔劑，如傳統(tǒng)的肥皂和泡沫浴劑等，化妝品，如霜?jiǎng)?、護(hù)膚液和粉底霜等?；|(zhì)可以是液體、固體、乳液、糊的任何一種形態(tài)。
發(fā)明的最佳實(shí)施模式在下文中將通過(guò)具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明更詳細(xì)地加以說(shuō)明。但應(yīng)該記住，本發(fā)明并不局限于那些實(shí)施例。
實(shí)施例1評(píng)價(jià)松樹(shù)花粉提取物對(duì)粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌的抗菌活性評(píng)價(jià)松樹(shù)花粉提取物的的抗菌活性實(shí)驗(yàn)是這樣進(jìn)行的將一定濃度的松樹(shù)花粉提取物加到含粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌ATCC 6919的液體培養(yǎng)基中，在厭氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)該混合物，然后測(cè)定松樹(shù)花粉提取物對(duì)粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌生長(zhǎng)的最低抑制濃度(MIC)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下。
1.培養(yǎng)方法粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌ATCC 6919，是從美國(guó)模式培養(yǎng)物保藏所(12301，Parklawn Drive，Rockville，Md.20852，USA)獲得的一株典型粉刺細(xì)菌。在強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基中于37℃培養(yǎng)三天，然后繼代培養(yǎng)直到其活力變強(qiáng)。培養(yǎng)方法如下。
a.液體培養(yǎng)10ml強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基放入帶螺紋蓋的試管中，121℃滅菌20分鐘。滅菌后，馬上在液體培養(yǎng)基上滴入0.5ml另行滅菌的液體石蠟以阻止液體培養(yǎng)基與氧氣接觸。培養(yǎng)基冷卻后，接種細(xì)菌，于37℃培養(yǎng)72小時(shí)。
b.固體培養(yǎng)在強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基中加入1.0％瓊脂以制備保存菌株用的固體培養(yǎng)基。將10ml固體培養(yǎng)基裝入帶螺紋蓋的試管中，121℃滅菌20分鐘.培養(yǎng)基冷卻后，用鉑接種環(huán)接種細(xì)菌，于37℃穿刺培養(yǎng)72小時(shí)。
c.平板培養(yǎng)平板培養(yǎng)的培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基相同。瓊脂培養(yǎng)基倒入平板上并冷卻。當(dāng)平板培養(yǎng)基完全冷卻硬化后，在平板培養(yǎng)基上接種細(xì)菌，并放入?yún)捬跖囵B(yǎng)罐中。將10ml水倒入?yún)捬跖囵B(yǎng)罐的惰性氣體包裝后，用蓋子蓋上厭氧培養(yǎng)罐，在37℃培養(yǎng)細(xì)菌72小時(shí)。
2.松樹(shù)花粉提取物的制備方法a.100g松樹(shù)花粉放入提取容器中，加入2升乙醇，混合均勻，該混合物在60℃抽提三天。
b.抽提所得的提取物質(zhì)經(jīng)Wattman 2號(hào)濾紙過(guò)濾，收集經(jīng)過(guò)濾器流出的濾液，棄去滯留于過(guò)濾器的殘?jiān)?br> c.濾液倒入濃縮用的燒瓶，然后真空濃縮以去除所有的乙醇，余下的水分也經(jīng)濃縮去除。
d.將松樹(shù)花粉提取物的濃縮液于-80℃的深度冷凍裝置中冷凍，經(jīng)冷凍干燥獲得20g松樹(shù)花粉提取物粉劑。
3.松樹(shù)花粉提取物抑制痤瘡丙酸桿菌ATCC 6919生長(zhǎng)效果的實(shí)驗(yàn)a.1ml經(jīng)充分繼代培養(yǎng)的粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌ATCC 6919培養(yǎng)液，接種于9ml強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基，混合均勻，由此獲得10倍的稀釋液。
b.重復(fù)上面(a)的步驟以獲得10-1～10-5倍的稀釋液c.通過(guò)冷凍干燥制備的10g松樹(shù)花粉提取物充分溶解于10ml50％乙醇中，連續(xù)兩倍稀釋?zhuān)玫揭幌盗胁煌瑵舛鹊乃蓸?shù)花粉提取物溶液。這些溶液用0.2μm膜濾器進(jìn)行除菌過(guò)濾。
d.強(qiáng)化梭菌瓊脂培養(yǎng)基滅菌后，冷卻到50℃。將由步驟(c)制備的經(jīng)除菌過(guò)濾的各提取物溶液加入瓊脂培養(yǎng)基，使提取物的最終濃度在10mg/ml到0.1mg/ml之間。然后均勻混合該混合物。
e.分別取1ml從步驟(b)獲得的稀釋培養(yǎng)液倒入培養(yǎng)皿中。把含不同濃度提取物的各瓊脂培養(yǎng)基分配于培養(yǎng)皿中，振搖使其混合均勻，然后靜止，使其凝固。
f.瓊脂培養(yǎng)基凝固后，將它們放入?yún)捬跖囵B(yǎng)罐中，然后裝上惰性氣體包裝。瓊脂培養(yǎng)基在37℃培養(yǎng)3天后，計(jì)數(shù)所形成的菌落數(shù)，并與對(duì)照組作比較。然后，計(jì)算松樹(shù)花粉提取物抑制粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌的百分比，所測(cè)得的菌落數(shù)與百分抑制率在以下表2中列出。
從對(duì)粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌的殺菌活性評(píng)估來(lái)看，如以下表1所示，我們發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的松樹(shù)花粉提取物在很低的濃度，約0.016％時(shí)，開(kāi)始出現(xiàn)抗菌活性，在濃度0.1％或0.1％以上時(shí)，則完全殺滅粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌。因此，我們發(fā)現(xiàn)松樹(shù)花粉提取物對(duì)粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌有很強(qiáng)的抗菌效果。
表一對(duì)痤瘡丙酸桿菌ATCC 6919最低抑制濃度(MIC)的測(cè)定結(jié)果提取物濃度(％) 粉刺細(xì)菌的生長(zhǎng)1.0 -0.5 -0.25 -0.125-0.063±0.031+0.016+-沒(méi)有+ 有表二對(duì)痤瘡丙酸桿菌抗菌作用的實(shí)驗(yàn)結(jié)果提取物 對(duì)照 105 2.5 1.25 0.63 0.32 0.16 0.08濃度 組 mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml mg/mlCFU 417 - - - - 2 50123 265(數(shù)目/ml)抑制(％) -100 100 100 100 99.52 88.01 70.5 36.45實(shí)施例2樹(shù)花粉提取物減少黑頭粉刺的效果在測(cè)量黑頭粉刺減少的實(shí)驗(yàn)中，新西蘭白兔作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。為這個(gè)實(shí)驗(yàn)，購(gòu)買(mǎi)了健康雄性白兔(約4月齡，體重2-3kg)，適應(yīng)環(huán)境一星期。在已適應(yīng)環(huán)境的動(dòng)物中，只有用肉眼觀察，看來(lái)健康的動(dòng)物才用于實(shí)驗(yàn)。作為減少黑頭粉刺的供試物，我們使用了濃縮松樹(shù)花粉提取物溶于乙醇的1％溶液。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行如下1ml黑頭粉刺誘導(dǎo)劑肉豆蔻酸異丙酯(IPM)，涂于三十只兔子的雙耳，共七天，每天一次，以此來(lái)誘導(dǎo)黑頭粉刺。選出已形成典型黑頭粉刺的二十五只動(dòng)物，分成五個(gè)試驗(yàn)組，每組5只動(dòng)物。
在測(cè)量黑頭粉刺減少效果的實(shí)驗(yàn)中，lml和上所述制備的含松樹(shù)花粉提取物的供試物，在其上形成黑頭粉刺的右耳上給藥。所給的供試物用棉拭均勻涂布。1ml乙醇作為基質(zhì)給予左耳，每天一次，然后用棉拭均勻涂抹約10次，比較左耳與右耳。
黑頭粉刺的愈合經(jīng)歷兩周，在此給予供試物質(zhì)期間，評(píng)估黑頭粉刺的損傷進(jìn)展程度和減少黑頭粉刺的效果。試驗(yàn)結(jié)束后，供試動(dòng)物組實(shí)施安樂(lè)死，將各動(dòng)物的二耳割下?；捉M織切成約2.5cm×1.5cm大小浸入50℃水中2分鐘，然后從水中取出。剝下表皮后，組織放于載玻片上，使組織的內(nèi)表面向上。干燥后，用立體顯微鏡觀察組織，用細(xì)胞圖像分析儀計(jì)算組織中黑頭粉刺的數(shù)量和面積。結(jié)果列于下面表3中。從表3可以發(fā)現(xiàn)，治療組的黑頭粉刺面積明顯減少了。
表3涂敷松樹(shù)花粉提取物2周后黑頭粉刺減少的百分比測(cè)試組組1組2組3組4組5A左耳黑頭粉刺面0.28±0.01 0.30±0.01 0.32±0.02 0.31±0.02 0.29±0.01積數(shù)目(cm2)B右耳黑頭粉刺目0.07±0.01 0.08±0.01 0.10±0.02 0.09±0.02 0.07±0.01面積數(shù)目(cm2)黑頭粉刺減少(％)*7573.3 68.87175.9*黑頭粉刺減少百分比＝(A-B)/A×100實(shí)施例3含松樹(shù)花粉提取物的面膜制劑對(duì)痤瘡丙酸桿菌的抗菌活性為驗(yàn)證松樹(shù)花粉提取物用于面膜制劑時(shí)，上述松樹(shù)花粉提取物對(duì)粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌的抗菌活性，根據(jù)常規(guī)方法制備面膜制劑，并測(cè)定其對(duì)粉刺細(xì)菌的抗菌作用。面膜制劑的組成列于下面表4中。
表4含松樹(shù)花粉提取物的面膜制劑的組成組成 含量(％重量)對(duì)照組 測(cè)試組1 測(cè)試組2 測(cè)試組3 測(cè)試組4 測(cè)試組5高嶺土 15.0 15.015.0 15.0 15.0 15.0甘油5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0乙醇5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0皂土4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0單硬脂酸甘油脂 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0十六醇十八醇混合物 3.0 3.0 3.0 2.0 2.0 2.0聚氧乙烯單硬脂酸酯 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0氧化鈦 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0松樹(shù)花粉氧化物 - 1.0 5.0 10.0 15.0 20.0純化水 61.0 60.056.0 51.0 46.0 41.0
為測(cè)定以上描述的面膜制劑抗痤瘡丙酸桿菌ATCC 6919的效果，100μl充分活化的粉刺細(xì)菌培養(yǎng)液分別經(jīng)10倍、100倍、1000倍稀釋?zhuān)臃N于含適當(dāng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，均勻鋪成平板在厭氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)三天，并測(cè)定生長(zhǎng)的菌落長(zhǎng)的菌落(A)，同時(shí)，將表4中各測(cè)試組的5％溶液100μl和稀釋的粉刺細(xì)菌培養(yǎng)液一起接種于培養(yǎng)皿中，均勻鋪成平板，在厭氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)三天，并測(cè)定生長(zhǎng)的菌落(B)，如此，得出抗菌效果。當(dāng)測(cè)試組出現(xiàn)90％或90％以上的滅菌率時(shí)，就確定為有效。滅菌率根據(jù)以下公式計(jì)算滅菌率＝[(A-B)/A]×100面膜制劑的抗菌效果在下面表5中列出表5含松樹(shù)花粉提取物的面膜制劑對(duì)粉刺細(xì)菌的抗菌效果集落 測(cè)試組對(duì)照組 測(cè)試組1 測(cè)試組2 測(cè)試組3 測(cè)試組4 測(cè)試組5A(CFU/ml)1533141616291473596 1509B(CFU/ml)1050252 69 12 11 6殺菌率(％)31.582.295.899.299.399.6從表5中可以發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比含松樹(shù)花粉提取物的面膜制劑對(duì)粉刺細(xì)菌的抗菌效果很強(qiáng)。還可以發(fā)現(xiàn)，含松樹(shù)花粉提取物5％或5％以上的面膜制劑，滅菌率在95％或95％以上。而含松樹(shù)花粉提取物10％或10％以上的面膜制劑，滅菌率在99％或99％以上。因而可以發(fā)現(xiàn)，松樹(shù)花粉提取物濃度的增加并沒(méi)有引起抗菌效果明顯變化。
實(shí)施例4在預(yù)防和治療粉刺方面，含松樹(shù)花粉提取物的面膜制劑減少黑頭粉刺的效果為驗(yàn)證含松樹(shù)花粉提取物的面膜制劑減少黑頭粉刺的效果確實(shí)適合于預(yù)防和治療粉刺，將實(shí)施例3制備的用于臨床試驗(yàn)的面膜制劑作為測(cè)試制劑。新西蘭白兔用作實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。為實(shí)驗(yàn)購(gòu)買(mǎi)健康雄性兔子(約4月齡，體重2-3公斤)，適應(yīng)環(huán)境一個(gè)星期。在這些已適應(yīng)環(huán)境的動(dòng)物中，只有肉眼觀察，看來(lái)健康的動(dòng)物才用于實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)進(jìn)行如下。
1ml黑頭粉刺誘導(dǎo)劑內(nèi)豆蔻酸異丙酯(IPM)，涂抹于三十只兔子的兩耳，每天一次，共七天，以誘導(dǎo)黑頭粉刺。選出25只形成典型黑頭粉刺的兔子，分成5個(gè)測(cè)試組，每組由5只動(dòng)物組成。
在測(cè)量黑頭粉刺減少效果的實(shí)驗(yàn)中，取2g實(shí)例3中制備的含松樹(shù)花粉提取物的各面膜制劑，給藥于兔子有黑頭粉刺的一只右耳上，每天一次，然后，所給的面膜制劑用棉拭涂抹均勻。作為對(duì)照組，2g不含松樹(shù)花粉提取物的面膜制劑，給藥于兔子左耳，每天一次，然后用棉拭涂抹均勻約10次。將左耳與右耳相比較。
黑頭粉刺的愈合經(jīng)歷兩周，在涂抹后，將面膜制劑充分洗凈或去除。在面膜制劑給藥期間，評(píng)估黑頭粉刺損傷進(jìn)展程度及黑頭粉刺減少效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組實(shí)施安樂(lè)死，按實(shí)例2描述的過(guò)程計(jì)算黑頭粉刺減少的效果。結(jié)果在下面表6中給出。從表6中可以發(fā)現(xiàn)，治療組的黑頭面積明顯減少了。
實(shí)施例5含松樹(shù)花粉提取物的面膜制劑的臨床試驗(yàn)使用實(shí)例3中制備的面膜制劑進(jìn)行預(yù)防和治療粉刺的臨床試驗(yàn)。該臨床試驗(yàn)在十六歲到三十五歲左右的三十個(gè)男性、三十個(gè)女性志愿者中進(jìn)行，他們患有粉刺，皮膚損害處于表7中的3-9級(jí)。面膜制劑的每個(gè)試驗(yàn)組(包括對(duì)照組)選擇10個(gè)志愿者作測(cè)試。所選用的面膜制劑給志愿者每天涂抹一次，涂抹一個(gè)月。臨床試驗(yàn)的結(jié)果見(jiàn)表8。
表7用肉眼觀察的皮膚級(jí)別級(jí)別 皮膚病情0正常1黑頭粉刺數(shù)目少，面積小，未發(fā)生炎癥的狀態(tài)2黑頭粉刺數(shù)目居中，面積居中，未發(fā)生炎癥的狀態(tài)3部分出現(xiàn)發(fā)炎的小丘疹的狀態(tài)4大面積出現(xiàn)發(fā)炎的小丘疹的的狀態(tài)5大面積出現(xiàn)發(fā)炎的大丘疹狀態(tài)6部分形成有膿的膿皰的狀態(tài)7大量膿離出現(xiàn)的狀態(tài)8部分出現(xiàn)嚴(yán)重結(jié)節(jié)狀囊腫胞囊的狀態(tài)9整個(gè)臉部出現(xiàn)嚴(yán)重囊腫的狀態(tài)表8含松樹(shù)花粉提取物的面膜制劑的臨床試驗(yàn)結(jié)果(人數(shù))效果 測(cè)試組對(duì)照組 測(cè)試組1 測(cè)試組2 測(cè)試組3 測(cè)試組4 測(cè)試組5極好 0 0 6 9 9 10好1 4 3 0 1 0未改變 7 6 1 1 0 0更差 2 0 0 0 0 0副作用 0 0 0 0 0 0總計(jì) 10 10 10 10 10 10上面表8顯示，與對(duì)照組相比，含松樹(shù)花粉提取物的的面膜制劑(測(cè)試組1-5)治療粉刺的效果要好很多。與對(duì)照組相比，松樹(shù)花粉提取物含量為1％的面膜制劑(測(cè)試組1)，略有效果。松樹(shù)花粉提取物含量5％或5％以上的面膜制劑(測(cè)試組2-5)顯示出非常好的治療效果，且未引起任何副作用。這些臨床效果都是用肉眼觀察確定的。
實(shí)施例6為了對(duì)含有松樹(shù)花粉提取物的肥皂、霜?jiǎng)⒒端?、護(hù)膚液及粉底霜制品進(jìn)行臨床試驗(yàn)，含有表9-13中組成的皮膚外用制劑，按照常規(guī)方法加以制備。
表9含松樹(shù)花粉提取物的肥皂制品組成成分 含量(％重量)皂坯93.77香料1.20色素0.01抗氧化劑 0.02松樹(shù)花粉提取物 5.0
表10含松樹(shù)花粉提取物的霜?jiǎng)┲破方M成成分含量(％重量)澳洲堅(jiān)果(Macademia)油 2.0角鯊?fù)?Squalan)3.0硬脂酸 7.0凡士林 3.01，3-丁二醇 7.0聚氧乙烯脫水山梨糖醇單硬脂酸酯1.3自乳化甘油單硬脂酸酯 2.7乙二胺四乙酸鈉 0.05甘油 4.0香料 0.25防腐劑 適量抗氧化劑適量松樹(shù)花粉提取物 10.0純凈水 余量表11含松樹(shù)花粉提取物的花露水制品組成成分含量(％重量)檸檬酸 0.1水楊酸 0.51，3-丁二醇5.0聚氧乙烯油基醚 0.8乙醇30.0香料0.15防腐劑 適量松樹(shù)花粉提取物 2.0純凈水 余量表12含松樹(shù)花粉提取物的護(hù)膚液制品組成成分 含量(％重量)硬脂酸 0.5乙醇10.0凡士林 1.0有鯊?fù)?squalan) 2.5液體石蠟 6.0聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯 1.51，3-丁二醇 8.0乙二胺四乙酸鈉0.05三乙醇胺 0.8香料 0.20防腐劑適量抗氧化劑 適量松樹(shù)花粉提取物4.0純凈水余量表13含松樹(shù)花粉提取物的粉底霜制品組成成分 含量(％重量)硬脂酸 2.01，3-丁二醇 2.0鯨蠟硬脂醇 0.5液體羊毛臘 1.5液體石蠟3.5肉豆蔻酸異丙酯 4.5羧乙基纖維素鈉 0.3皂土 1.0甘油 1.0二氧化鈦 5.0滑石粉 6.0色素 適量香料 0.15防腐劑 適量抗氧化劑 適量松樹(shù)花粉提取物 2.0純凈水 余量預(yù)防和治療粉刺的臨床試驗(yàn)，使用表9～13給出組成的各制品，在5個(gè)男性和5個(gè)女性志愿者中進(jìn)行，他們每個(gè)人的皮膚損害符合表7中的3～9級(jí)。粉底霜制品僅用于女性，肥皂、霜?jiǎng)⒆o(hù)膚液和花露水制品每天使用二次，使用一個(gè)月，粉底霜制劑每天使用一次，使用一個(gè)月。然后，評(píng)估使用制品的結(jié)果。評(píng)估結(jié)果時(shí)，根據(jù)表7的皮膚級(jí)別，在臨床試驗(yàn)前和后以肉眼觀察各志愿者在臨床試驗(yàn)前后的皮膚損害。當(dāng)志愿者的皮膚損害在臨床試驗(yàn)后提高了3級(jí)或3級(jí)以上時(shí)，即被鑒定為效果極好，當(dāng)皮膚損害在臨床試驗(yàn)后提高1或2個(gè)級(jí)別時(shí)，即被鑒定為良好。評(píng)估結(jié)果如下表14所示。
表14含松樹(shù)花粉的不同制品的臨床試驗(yàn)結(jié)果效果 人數(shù)極好 7良好 2未改變 1更差 0副作用 0合計(jì) 10實(shí)施例7為了進(jìn)行松樹(shù)花粉本身預(yù)防和治療粉刺效果的臨床試驗(yàn)，將松樹(shù)花粉與凡士林以1∶2的比率混合制成乳膏制劑。臨床試驗(yàn)在5個(gè)男性與5個(gè)女性志愿者中進(jìn)行，他們的皮膚損害處于表7中3-9級(jí)。每個(gè)志愿者涂抹乳膏制劑，每天一次，涂抹一個(gè)月，然后評(píng)估使用乳膏制劑的結(jié)果。另外，由于松樹(shù)花粉本身的顏色，以及制劑性質(zhì)，形態(tài)方面的原因，使乳膏制劑不適合在戶外使用，而僅在晚上用。評(píng)估結(jié)果時(shí)，根據(jù)表7給出的皮膚級(jí)別，以肉眼觀察各志愿者在臨床試驗(yàn)前后的皮膚損害。當(dāng)志愿者的皮膚損害在臨床試驗(yàn)后提高了3級(jí)或3級(jí)以上時(shí)，即被鑒定為效果極好，當(dāng)皮膚損害在臨床試驗(yàn)后提高1或2個(gè)級(jí)別時(shí)，即被鑒定為良好，評(píng)估結(jié)果如下表15所示。
表15含松樹(shù)花粉制劑的臨床試驗(yàn)結(jié)果效果 人數(shù)極好 4良好 4未改變 2更差 0副作用 0總計(jì) 10從表15給出的結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，根據(jù)含松樹(shù)花粉本身的制劑的性質(zhì)和形態(tài)，松樹(shù)花粉提取物自身也可用于預(yù)防和治療粉刺。然而考慮到使用時(shí)感覺(jué)和對(duì)粉刺細(xì)菌的抗菌作用，我們寧愿使用松樹(shù)花粉提取物而不是松樹(shù)花粉本身。
工業(yè)應(yīng)用如上所述，我們發(fā)現(xiàn)在本發(fā)明實(shí)踐中所用的松樹(shù)花粉或松樹(shù)花粉提取物對(duì)粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌有很強(qiáng)的抗菌作用和減少黑頭粉刺的作用，而且即使長(zhǎng)時(shí)間使用，也不產(chǎn)生任何副作用。因此，松樹(shù)花粉或松樹(shù)花粉提取物可用作各種預(yù)防和治療粉刺的皮膚外用試劑的一種活性成份。
我們已舉例描述了本發(fā)明優(yōu)選的具體實(shí)施方法，本領(lǐng)域的熟練技術(shù)人員會(huì)理解本發(fā)明并不局限于它的具體實(shí)施例。各種改變，修飾和同等物可以替代它的要素，而不偏離本發(fā)明的實(shí)際范圍。
權(quán)利要求
1.一種皮膚外用制劑，它含有松樹(shù)花粉或松樹(shù)花粉提取物，其含量能有效預(yù)防和治療粉刺。
2.如權(quán)利要求1所述的皮膚外用制劑，它是藥用的治療劑形式。
3.如權(quán)利要求1所述的皮膚外用制劑，它是選自花露水、霜?jiǎng)⒚婺?、護(hù)膚液、粉底霜、防曬霜、嬰兒爽身粉的化妝品形式。
4.如權(quán)利要求1所述的皮膚外用制劑，它是選自肥皂、泡沫浴劑、洗發(fā)香波、沐浴露的清潔劑形式。
5.如權(quán)利要求1所述的皮膚外用制劑，其松樹(shù)花粉或松樹(shù)花粉提取物含量約為皮膚外用制劑總重量的0.05％重量到50％重量。
6.如權(quán)利要求5所述的皮膚外用制劑，其松樹(shù)花粉或松樹(shù)花粉提取物含量約為皮膚外用制劑總重量的1％重量到20％重量。
7.如權(quán)利要求6所述的皮膚外用制劑，其松樹(shù)花粉或松樹(shù)花粉提取物含量約為皮膚外用制劑總重量的2％重量到10％重量。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含松樹(shù)花粉或松樹(shù)花粉提取物的皮膚外用制劑。松樹(shù)花粉或松樹(shù)花粉提取物能抑制粉刺細(xì)菌痤瘡丙酸桿菌的生長(zhǎng)，并有減少黑頭粉刺的效果，因而能有效預(yù)防和治療粉刺。松樹(shù)花粉或松樹(shù)花粉提取物的含量為皮膚外用制劑總重量的0.05％到50％較為合適。
文檔編號(hào)A61Q19/10GK1476332SQ01819514
公開(kāi)日2004年2月18日 申請(qǐng)日期2001年10月17日 優(yōu)先權(quán)日2000年10月20日
發(fā)明者李范魯, 張準(zhǔn)桓 申請(qǐng)人:李氏生物有限公司