專利名稱：用于改善皮膚皺紋的包含野桐提取物的化妝品組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于抑制彈性蛋白酶活性、提高膠原生物合成、并且改善皮膚皺紋的組合物。
背景技術(shù)：
由于各種內(nèi)部和外部因素，人類的皮膚隨年齡增長表現(xiàn)其衰退的功能。根據(jù)皮膚衰老的內(nèi)部特點，形成身體的組分的活性和生物合成由于細(xì)胞的降低活性而顯示下降的趨勢，并且活性氧類攻擊細(xì)胞組分，從而導(dǎo)致其在結(jié)構(gòu)和功能方面的破壞作用。根據(jù)皮膚衰老的外部特點，如紫外線的圍繞皮膚的外因?qū)е缕つw干燥、降低皮膚彈性、以及色素沉積。尤其地，與紫外線相關(guān)的強刺激促使皮膚內(nèi)側(cè)組分的破壞。典型地，活性氧類的增高含量是皮膚內(nèi)細(xì)胞破壞、和促進(jìn)膠原酶生物合成的原因，從而導(dǎo)致膠原和彈性蛋白的降解。
膠原是一種由真皮產(chǎn)生和分泌的不溶性蛋白，其在維持皮膚彈性方面起重要的作用。為了維持皮膚彈性，膠原的產(chǎn)生和降解必須以正常的方式發(fā)生。隨皮膚老化，膠原可能異常地產(chǎn)生和降解。對于膠原的生物合成，已推薦維生素C和各種中醫(yī)藥物(如人參、和板栗殼)的提取物，并且其已被用作化妝品中的活性組分。
如上所述，促進(jìn)膠原生物合成的物質(zhì)是明顯適合的，并且可實際地用于改善皮膚皺紋的化妝品中。
作為用于改善皮膚皺紋的化妝品組合物的例子，韓國專利申請No.1996-000388公開了一種包含維生素A和E的用于改善皮膚皺紋的化妝品組合物，韓國專利申請No.2000-05223建議了一種包含鹿角、天然形成的淤泥成分和魚腥草的用于改善皮膚皺紋的化妝品組合物，并且，韓國專利申請No.1999-031433公開了一種包含作為活性組分的粉狀的紅葡萄提取物的用于改善皮膚皺紋的化妝面霜組合物。
貫穿本專利，參考了各種專利和公開文獻(xiàn)，并且以括號提供引用。為了更充分地描述本發(fā)明、以及與本發(fā)明有關(guān)的技術(shù)的狀態(tài)，通過參考，在此將這些專利和公開文獻(xiàn)公開的實質(zhì)內(nèi)容并入本申請中。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人對研制用于改善皮膚皺紋的新型活性組分已經(jīng)進(jìn)行了深入的調(diào)查，并已發(fā)現(xiàn)，野桐(Mallotus japonicus)提取物對引起皮膚皺紋的彈性蛋白酶的活性和膠原的生物合成施加有效的作用，并且，在改善皮膚皺紋方面，顯示臨床上極優(yōu)的功效。
由此，本發(fā)明的目的是提供一種抑制彈性蛋白酶的活性的組合物。
本發(fā)明的另一目的是提供一種提高膠原生物合成的組合物。
本發(fā)明的另一目的是提供一種用于改善皮膚皺紋的化妝品組合物。
通過以下結(jié)合附加權(quán)利要求的詳細(xì)描述，本發(fā)明的其它目的和優(yōu)點將變得顯而易見。
在本發(fā)明的一個技術(shù)方案中，提供了一種抑制彈性蛋白酶的活性的組合物，其包含作為活性組分的野桐提取物。
在本發(fā)明的另一技術(shù)方案中，提供了一種促進(jìn)膠原生物合成的組合物，其包含作為活性組分的野桐提取物。
在本發(fā)明的再一技術(shù)方案中，提供了一種用于改善皮膚皺紋的化妝品組合物，其包含(a)作為活性組分的野桐提取物；和(b)化妝品可接受的載體。
在致力于滿足本領(lǐng)域的上述需要的過程中，本發(fā)明人力爭篩選多種物質(zhì)，以研制具有極優(yōu)的改善皮膚皺紋的效果的組分。尤其是，本發(fā)明人已集中研制抑制參與皮膚皺紋形成的彈性蛋白酶活性、以及促進(jìn)在改善皮膚皺紋中具有關(guān)鍵作用的膠原生物合成的新物質(zhì)。結(jié)果，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了野桐提取物顯示上述對改善皮膚皺紋有作用的活性。
野桐為一種落葉喬木，其屬于大戟科，主要生長在韓國的南部。盡管其高度有時達(dá)到10米，但是，其典型地顯示灌木外貌。野桐的樹皮已通常被用作胃潰瘍、胃炎和肝虛(anhepatia)的治療藥物。
此處使用的術(shù)語“野桐提取物”指從野桐的各種器官和部位(如葉、花、根、莖、枝、樹皮和果實)；優(yōu)選從根、莖、枝和樹皮；更優(yōu)選從根、枝和樹皮；最優(yōu)選從樹皮獲得的物質(zhì)。
在優(yōu)選實施例中，使用各種提取溶劑可以獲得野桐提取物，如提取溶劑為(a)水；(b)含有1～4個碳原子的無水或含水的低級醇(甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等)；(c)低級醇和水的混合物；(d)丙酮；(e)乙酸乙酯；(f)氯仿；(g)乙酸丁酯和(h)1，3-丁二醇。用于獲得野桐提取物的提取溶劑的適當(dāng)量為比野桐的干重高1～20(優(yōu)選1～10)倍。
根據(jù)示例方法，如下所示可以獲得提取物用蒸餾水洗滌并干燥的野桐被剪成小塊，并且加入1～10倍量的提取溶劑。在用冷凝器防止活性組分揮發(fā)的條件下，將浸在溶劑中的野桐在40～100℃下加熱3～20小時以提取?？蛇x擇地，將浸在溶劑中的野桐在4～40℃下加熱1～15天以提取，并且，所得產(chǎn)物在旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)器中徹底干燥。當(dāng)使用1，3-丁二醇作為提取溶劑時，如上所述，在低溫下進(jìn)行提取，然后，調(diào)節(jié)提取物的減少的干重至1％(w/v)。
此外，其它常規(guī)溶劑可以用于制備野桐提取物，并且與上述溶劑顯示相同的效果，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員是顯然的。
根據(jù)本發(fā)明的野桐的提取物包括通過公知的方法進(jìn)行額外純化的提取物，以及通過提取獲得的提取物。例如，可以理解，本發(fā)明的提取物包括使用各種額外的純化方法獲得的活性片段，如使用規(guī)定的分子量截取值的超濾和各種色譜法(根據(jù)大小、電荷、疏水性和親和性而設(shè)計的用于純化)。
根據(jù)本發(fā)明的野桐提取物可以通過如凍干法和噴霧干燥的附加的方法被粉碎。
根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實施例，基于化妝品組合物的總重，化妝品組合物中的野桐提取物的有效量為0.0001～20wt％、更優(yōu)選0.01～10wt％、再更優(yōu)選0.1～5wt％、最優(yōu)選1～3wt％。如果野桐提取物的量低于0.0001wt％，則改善皮膚皺紋的效果可能是微不足道的；當(dāng)野桐提取物的量超過20wt％時，極可能發(fā)生一些如皮膚刺激和制劑不穩(wěn)定的副作用。
此外，除野桐提取物外，本發(fā)明的化妝品組合物可以包含輔劑、以及載體。輔劑的非限制的例子包括防腐劑、抗氧化劑、穩(wěn)定劑、增溶劑、維生素、色素、香味改良劑、或這些組分的混合物。
本發(fā)明的化妝品組合物可以以多種形式被制劑，其非限制的例子包括溶液、懸浮液、乳液、漿糊、軟膏、凝膠、乳霜、洗劑、粉末、皂劑、含表面活性劑的清潔劑、油劑、粉底霜、乳液底霜、蠟劑底霜和噴霧劑。詳細(xì)地，可以以皮膚軟化劑(皮膚洗劑)、收斂洗液、營養(yǎng)乳液(乳液)、營養(yǎng)面霜、按摩霜(message cream)、香精、眼霜、清潔霜、清潔泡沫、清潔水和面膜、噴霧劑和粉末的形式提供本發(fā)明的化妝品組合物。
本發(fā)明的化妝品組合物中包含的化妝品可接受的載體可以根據(jù)制劑的類型變化。例如，軟膏劑、糊膏劑、面霜劑和凝膠劑可以包含動物和植物脂肪、蠟、石蠟、淀粉、黃芪膠、纖維素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨潤土、甲硅烷、滑石粉、氧化鋅、或這些組分的混合物。
在粉末或噴霧制劑中，其可以包含乳糖、滑石粉、甲硅烷、氫氧化鋁、硅酸鈣、聚酰胺粉末和這些組分的混合物。噴霧劑可以額外地包含常規(guī)的推進(jìn)劑，例如，氯氟代烴、丙烷/丁烷或二甲醚。
溶液和乳液制劑可以包含溶劑、增溶劑和乳化劑，如，水、乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1，3-丁二醇、油類，具體地，包含棉籽油、花生油、玉米胚芽油、橄欖油、蓖麻油、和芝麻油、甘油脂肪酸酯、聚乙二醇、山梨聚糖的脂肪酸酯或這些組分的混合物。
懸浮液制劑可以包含液體稀釋劑，例如，水、乙醇、丙二醇；懸浮劑，例如，乙氧化異硬脂醇類、聚氧化乙烯山梨醇酯和聚氧化乙烯山梨聚糖酯；微結(jié)晶纖維素；偏氫氧化鋁(aluminum metahydroxide)；膨潤土；瓊脂和黃芪膠；或這些組分的混合物。
具有表面活性劑的清潔組合物制劑可以包含脂肪醇硫酸酯、脂肪醇醚硫酸酯、磺基琥珀酸單酯、isothinate、咪唑啉衍生物、甲基?；撬狨?、甘草酸酯(sarcocinate)、脂肪酸酰胺醚硫酸酯、烷胺甜菜堿(alkyl amido betain)、脂肪醇、脂肪酸甘油酯、脂肪酸二乙醇胺、植物油、羊毛脂衍生物、乙氧化甘油脂肪酸酯或這些組分的混合物。
本發(fā)明的化妝品組合物具有改善皮膚皺紋的新用途。本發(fā)明的組合物顯示在分子水平對彈性蛋白酶活性的抑制作用、以及對膠原生物合成的促進(jìn)作用、以及作為結(jié)果的極優(yōu)的改善皮膚皺紋的功效。在以下所述的實施例中證明該作用和功效。應(yīng)該理解，皮膚皺紋的改善涵蓋皮膚保護(hù)的通常應(yīng)用(如，防止皮膚皺紋、去除皮膚皺紋和防止皮膚衰老)。
具體實施例方式
以下特定的實施例旨在解釋本發(fā)明，而不應(yīng)理解為限制由附加權(quán)利要求所限定的本發(fā)明的范圍。
實施例1將200g用蒸餾水洗滌并干燥的野桐樹皮放入1.2L水中，在裝有冷凝器的提取器中、在70～90℃下加熱5小時，通過300目的濾布過濾、并保持在5～10℃下放置7～10天熟化，并且通過Whattman No.5濾紙過濾。過濾物在65℃的旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)器中干燥，得到5.9g的野桐干粉。
實施例2在15～35℃下，將200g用蒸餾水洗滌并干燥的野桐樹皮在1.2L的水中浸泡5天，通過300目的濾布過濾，并且通過Whattman No.5濾紙再過濾，然后在旋轉(zhuǎn)真空干燥器中干燥，以濃縮至2倍的濃度。加入0.6L 100％的乙醇，在5～10℃下保持放置7～10天熟化，并且通過Whattman No.5濾紙過濾。過濾物在65℃的旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)器中干燥，得到5.8g的野桐干粉。
實施例3在4～40℃下，將200g用蒸餾水洗滌并干燥的野桐樹皮在1.2L的水中浸泡5天，通過300目的濾布過濾，在5～10℃下保持放置7～10天熟化，并且，通過Whattman No.5濾紙過濾。過濾物在65℃的旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)器中干燥，得到5.4g的野桐干粉。
實施例4～21使用表1中所述的提取溶劑，進(jìn)行與以上實施例3相同的方法，以制備野桐提取物。結(jié)果如表1所示。
表1


實施例22將200g用蒸餾水洗滌并干燥的野桐樹皮在1.2L的1，4-丁二醇中浸泡48小時，通過300目的濾布過濾，在5～10℃下保持放置7～10天熟化，并且，通過Whattman No.5濾紙過濾。然后，由減少的干重計算提取物，以調(diào)節(jié)提取物的最終濃度為1％(w/v)。
實施例23
將200g用蒸餾水洗滌并干燥的野桐樹皮放入1.2L的10％乙醇中，在裝有冷凝器的提取器中加熱5小時，通過300目的濾布過濾、并在5～10℃下保持放置7～10天熟化，并且通過Whattman No.5濾紙過濾。然后，過濾物在65℃的旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)器中干燥，得到6.2g的野桐干粉。
實施例24～32使用表2所示的提取溶劑，進(jìn)行與上述實施例23相同的方法，從而得到野桐提取物。結(jié)果如表2所示。
表2

試驗實施例1對彈性蛋白酶活性的抑制作用如下測試實施例1～32中制備的野桐提取物對彈性蛋白酶活性的抑制作用。
以100μg/ml的量使用各野桐提取物。向60μl的緩沖液(用0.267M HCL調(diào)節(jié)至pH8.0的0.267M Tris)中加入20μl的底物溶液(8.8mM彈性蛋白酶底物Succ-Ala-Ala-Ala-p-硝基酰替苯胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，Sigma)，然后，加入100μl的野桐提取物，并且加入20μl的酶溶液(10μg/ml的豬胰腺彈性蛋白酶標(biāo)準(zhǔn)樣品，Sigma)，以在25℃下反應(yīng)15分鐘。在410nm下測量吸收值。對照組包含代替野桐提取物的蒸餾水。根據(jù)以下等式計算抗彈性蛋白酶活性的抑制率抗彈性蛋白酶活性的抑制率(％)＝{(測試組的吸收值-對照組的吸收值)/對照組的吸收值}×100表3野桐提取物對彈性蛋白酶活性的抑制作用(測試濃度為100μg/ml)


如表3所示，可以意識到，盡管野桐提取物根據(jù)提取方法顯示了稍微不同的抑制模式，但是其顯示了對彈性蛋白酶活性的相當(dāng)?shù)囊种谱饔谩?br> 試驗實施例2分析對膠原生物合成的作用從韓國細(xì)胞系研究基金會(Korean Cell Line ResearchFoundation)獲得的人正常成纖維細(xì)胞被接種于含有DMEM的96-孔微板中，并且在37℃下孵育24小時。孵育后，用含100ppm野桐提取物的無DMEM的新鮮血清代替微板中的培養(yǎng)基，然后，再孵育24小時。對照組不含野桐提取物。孵育后，使用購自Takara Co.(日本)的試劑盒測量由各孔的上清液中獲得前膠原型IC-肽(PICP)，并且，將測量值轉(zhuǎn)換為ng/ml，其表示新生成的膠原的量。結(jié)果總結(jié)于表4中。
表4野桐提取物對膠原生物合成的作用


如表4所示，可以理解，盡管根據(jù)提取方法，野桐提取物顯示稍微不同的促進(jìn)模式，但是其顯示對膠原生物合成的顯著的促進(jìn)作用。
以下制劑是說明性的，而本發(fā)明的化妝品組合物不受其限制。使用實施例10中獲得的野桐提取物。
制劑1潤膚液(皮膚軟化劑)如表5所示，配制一個含有野桐提取物的潤膚液的例子表5

制劑2收斂洗液如表6所示，配制一個含野桐提取物的收斂洗液的例子。
表6

制劑3營養(yǎng)乳液(乳液洗劑)如以下表7所示，配制一個含有野桐提取物的營養(yǎng)液的例子。
表7

制劑4營養(yǎng)霜如表8所示，配制一個含有野桐提取物的營養(yǎng)霜的例子。
表8

制劑5按摩霜如表9所示，配制一個含有野桐提取物的按摩霜。
表9

制劑6香精如表10所示，配制一個含有野桐提取物的香精的例子。
表10

制劑7面膜如表11所示，配制一個含有野桐提取物的面膜的例子。
表11

試驗實施例3本發(fā)明的化妝品組合物對改善皮膚皺紋的功效通過實際使用估測化妝品組合物對改善皮膚皺紋的功效。使用制劑4中所述的含有2％野桐提取物的營養(yǎng)霜，并且用等量的蒸餾水代替野桐提取物，作為該試驗的對照。最初，被隨機分為兩組，每組20位年齡為30～40歲的婦女被給予制劑4的營養(yǎng)霜或其對照霜。在眼緣部位每日早、晚兩次施用，堅持2個月。通過與對照組比較觀察而評估皮膚皺紋的改善功效。結(jié)果總結(jié)在以下表12中。
表12

如表12所示，根據(jù)本發(fā)明的制劑4與其對照制劑相比顯示了顯著提高的改善皮膚皺紋的作用。此外，在任何使用本發(fā)明的制劑的測試者中無皮膚問題。
已經(jīng)描述了本發(fā)明的優(yōu)選實施例，應(yīng)該理解，落入本發(fā)明的實質(zhì)內(nèi)的變體和修飾對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員是顯然的，并且本發(fā)明的范圍由附加的權(quán)利要求和其等效范圍決定。
權(quán)利要求
1.一種用于抑制彈性蛋白酶活性的組合物，其包括作為活性組分的野桐(Mallotus japonicus)提取物。
2.一種用于促進(jìn)膠原生物合成的組合物，其包含作為活性組分的野桐提取物。
3.一種用于改善皮膚皺紋的化妝品組合物，其包含(a)作為活性組分的野桐提取物；和(b)化妝品可接受的載體。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化妝品組合物，其中，所述野桐提取物源自野桐樹皮。
5.根據(jù)權(quán)利要求3的化妝品組合物，其中，基于組合物的總重量，野桐提取物的含量為0.0001～20wt％。
6.根據(jù)權(quán)利要求3的化妝品組合物，其中，所述組合物為選自溶液、懸浮液、乳液、糊劑、軟膏、凝膠、霜劑、洗劑、粉末、皂劑、含表面活性劑的清潔劑、油劑、粉底霜、乳液底霜、蠟劑底霜和噴霧劑之一的形式。
全文摘要
本發(fā)明涉及抑制用于抑制彈性蛋白酶活性、促進(jìn)膠原生物合成、和改善皮膚皺紋的組合物，其包括作為活性組分的野桐提取物。本發(fā)明的組合物顯示在分子水平抑制彈性蛋白酶活性的作用、促進(jìn)膠原合成的作用，結(jié)果表示出改善皮膚皺紋的優(yōu)異功效。
文檔編號A61Q19/08GK1870971SQ200480031403
公開日2006年11月29日 申請日期2004年4月16日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月24日
發(fā)明者李正魯, 鄭志憲, 趙炳基, 李康泰 申請人:高麗雅娜化妝品股份有限公司