專利名稱：一種化妝品用燕窩提取物的制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種化妝品用燕窩提取物的制備工藝。
背景技術(shù)：
燕窩為金絲燕或多種同屬燕類用唾液或唾液與絨羽等混合凝結(jié)筑成的巢窩，具有補肺養(yǎng)陰、補虛養(yǎng)胃，有補血、活血，美容養(yǎng)顏，使皮膚光滑、有彈性和減少皺紋，清除暗瘡等功用。目前關(guān)于燕窩在美容養(yǎng)顏方面的利用多為蒸、燉后食用，由于燕窩的水不溶性問題的存在致使燕窩提取物在化妝品中的應(yīng)用受到限制。
燕窩中含有燕窩酸、氨基酸、蛋白質(zhì)、表皮生長因子等多種生物活性成分，因此國內(nèi)外對燕窩的化學(xué)成分進(jìn)行了一定的研究，但主要集中于利用沉淀、離心、電泳、凝膠色譜法提取分離燕窩蛋白，以及燕窩酸解、酶解和堿化處理后燕窩粘蛋白糖鏈和肽鏈組成和結(jié)構(gòu)。研究表明，蛋白質(zhì)類化妝品原料的分子量分布范圍的控制對化妝品的保濕美白性能有一定影響(向智男，寧正祥。動物性原料成分在護(hù)膚品中的應(yīng)用.日用化學(xué)工業(yè)，2006，32(1)38～42)。目前關(guān)于燕窩的水解工藝的研究應(yīng)用多數(shù)為提高產(chǎn)率的食品、藥品和化妝品行業(yè)通用型的制備工藝，對于適用于化妝品行業(yè)的工藝研究較少，對于兼顧分子量分布、產(chǎn)物活性和產(chǎn)率的工藝研究尚未見報道，而且存在收率低，制備工藝復(fù)雜，生產(chǎn)周期長等缺點。
已經(jīng)公開的關(guān)于燕窩水解工藝的專利CN1085046A，CN1057674A，CN1858225A。CN1085046A公開了一種燕窩的酶法水解加工方法，其基本工藝是采用多種植物蛋白酶、細(xì)菌蛋白酶或試劑型蛋白酶，或者采用兩種或兩種以上的復(fù)合酶，原料經(jīng)浸泡、煮沸、調(diào)pH值、加酶水解、再煮沸、過濾、離心、干燥等工藝，制成含水量低于5％的白色或黃色的水溶性燕窩粉末。該工藝過程工藝較為復(fù)雜，生產(chǎn)周期長，并涉及到高溫煮沸過程，易對燕窩中的熱不穩(wěn)定性活性成分造成影響，也未涉及到工藝對分子量分布影響的控制。CN1057674A公開了一種燕窩、白扁豆水不溶物的生化提取方法，其工藝是將經(jīng)水煮沸提取后的燕窩渣、白扁豆渣加水用木瓜酶進(jìn)行酶解，將水解后的濾液和水煮提取液合并得到燕窩提取物。該工藝雖然工藝得到一定簡化，但也直接涉及到水煮工藝，未考慮水煮條件對熱不穩(wěn)定性成分活性的影響，未提到工藝和分子量分布間的關(guān)系。CN1858225A公開了一種燕窩多肽的制備方法和用途，其基本工藝為燕窩原料經(jīng)冷凍粉碎、無花果蛋白酶水解、沉淀過濾、冷凍干燥或噴物干燥后得到分子量分布在200～1000D之間的燕窩多肽提取物。雖然該工藝提到了對分子量分布的要求，但未提到工藝條件和分子量分布之間的關(guān)系。這幾種工藝均未提及到超聲提取的方法和堿性蛋白酶在燕窩水解工藝中的應(yīng)用，對于提取工藝和分子量分布之間的關(guān)系未進(jìn)行闡明。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種化妝品用燕窩提取物的制備工藝。
包括如下步驟1)冷凍粉碎后的燕窩過100～150目篩，加入燕窩干重15～30倍量的水，室溫條件下超聲水提1～3小時，過濾；2)濾餅中加入燕窩干重10～50倍量的水，機械攪拌的條件下煮沸20～80分鐘；3)冷卻至室溫，用重量百分比為1～5％的Na2CO3溶液調(diào)pH值至8.0～10之間，加入酶活范圍為20萬～200萬u/g的堿性蛋白酶，加入量為燕窩干重的0.25～2％，在機械攪拌和40～70℃的溫度條件下水解1～6 h；4)80～85℃條件下酶滅活15～30min；5)冷卻至室溫，用重量百分比為1～5％的稀HCl調(diào)pH值至中性；6)過濾，濾液與超聲提取液合并，冷凍干燥后得粉狀燕窩提取物。
所述的超聲提取時水的加入量為燕窩干重的15～25倍。室溫條件下超聲提取時間為1～2小時。超聲提取、過濾后得到的濾餅中水的加入量為燕窩干重的20～40倍。濾餅加水后的煮沸時間為20～60分鐘。酶解工藝所采用的酶為以枯草桿菌酶為主要酶成分的絲氨酸型內(nèi)切酶的堿性蛋白酶，酶活范圍為20萬～150萬u/g。酶解工序中堿性蛋白酶的加入量為燕窩干重的0.5～1.5％。酶解工序中水解溫度控制在50～60℃。酶解工序中水解時間控制在1～4h。
本發(fā)明利用超聲提取結(jié)合酶解技術(shù)制備化妝品用燕窩提取物的工藝，將超聲提取液和水解后的濾液合并后直接冷凍得燕窩提取物，具有操作簡單、生產(chǎn)周期短、產(chǎn)品水溶性好，提取率高，產(chǎn)物的分子量分布合理，保濕、美白、抗皺活性高，穩(wěn)定性好等優(yōu)點，同時克服了常規(guī)水解工藝難以同時兼顧分子量分布和收率、水解過程中煮沸工藝對熱不穩(wěn)定性活性成分的影響等缺點。本發(fā)明的提取工藝適用于來源于白燕、毛燕和血燕的原燕窩、燕窩絲、散燕和燕窩球，對于拓展燕窩在化妝品行業(yè)的應(yīng)用意義重大。


附圖是一種化妝品用燕窩提取物的制備工藝流程簡圖。
具體實施例方式
實施例1冷凍粉碎后的燕窩過100目篩，稱取燕窩粉100g，加入2500ml的水，室溫條件下超聲水提1小時，過濾，濾液冷凍干燥后得粉狀燕窩提取物1.74g，得率為1.74％。產(chǎn)物經(jīng)分子量分布測定，其中10000道爾頓以上的含量占84.34％，2000～6000道爾頓的含量占4.38％。經(jīng)藥理實驗，其美白活性優(yōu)，保濕效果良好。
實施例2冷凍粉碎后的燕窩過100目篩，稱取燕窩粉100g，加入2500ml的水，室溫條件下超聲水提1小時，再加入燕窩干重4000ml的水，保持煮沸20分鐘。接著冷卻至室溫，用重量百分比為2％的Na2CO3溶液調(diào)pH值至8.5，加入酶活范圍為150萬u/g的堿性蛋白酶0.5g，在機械攪拌和50℃的溫度條件下水解1h。水解液在85℃條件下酶滅活20min。然后冷卻至室溫，用重量百分比為1％的稀HCl調(diào)pH值至中性，過濾，酶解后的濾液與超聲提取液合并，冷凍干燥后得粉狀燕窩提取物79g，得率為79％。產(chǎn)物經(jīng)分子量分布測定，其中10000道爾頓以上的含量占7.2％，2000～6000道爾頓的含量占9.8％。經(jīng)藥理實驗，其美白活性一般，保濕效果良好。
實施例3冷凍粉碎后的燕窩過100目篩，稱取燕窩粉100g，加入2500ml的水，室溫條件下超聲水提1小時，過濾，濾液棄去。濾餅中加入燕窩干重4000ml的水，保持煮沸20分鐘。接著冷卻至室溫，用重量百分比為2％的Na2CO3溶液調(diào)pH值至8.5，加入酶活范圍為150萬u/g的堿性蛋白酶0.5g，在機械攪拌和50℃的溫度條件下水解1h。水解液在85℃條件下酶滅活20min。然后冷卻至室溫，用重量百分比為1％的稀HCl調(diào)pH值至中性，過濾，酶解后的濾液冷凍干燥后得粉狀燕窩提取物75g，得率為75％。產(chǎn)物經(jīng)分子量分布測定，其中10000道爾頓以上的含量占7.0％，2000～6000道爾頓的含量占9.6％。經(jīng)藥理實驗，其美白活性較差，保濕效果一般。
實施例4冷凍粉碎后的燕窩過100目篩，稱取燕窩粉100g，加入2500ml的水，室溫條件下超聲水提1小時，過濾。濾餅中加入燕窩干重4000ml的水，保持煮沸20分鐘。接著冷卻至室溫，用重量百分比為2％的Na2CO3溶液調(diào)pH值至8.5，加入酶活范圍為150萬u/g的堿性蛋白酶0.5g，在機械攪拌和50℃的溫度條件下水解1h。水解液在85℃條件下酶滅活20min。然后冷卻至室溫，用重量百分比為1％的稀HCl調(diào)pH值至中性，過濾，酶解后的濾液與超聲提取液合并，冷凍干燥后得粉狀燕窩提取物78g，得率為78％。產(chǎn)物經(jīng)分子量分布測定，其中10000道爾頓以上的含量占6％，2000～6000道爾頓的含量占10％。經(jīng)藥理實驗，其美白活性優(yōu)，保濕活性優(yōu)。
實施例5將冷凍粉碎后的燕窩過150目篩，稱取燕窩粉100g，加入1500ml水，室溫條件下超聲水提1.5小時，過濾。濾餅中加入2500ml水，機械攪拌條件下保持煮沸25min，冷卻至室溫，加堿性蛋白酶0.5g，并調(diào)pH值至9.8。機械攪拌條件下，55℃水浴水解4h，85℃條件下滅活20min，冷卻后調(diào)pH值至7.1，過濾，酶解后的濾液與超聲提取液合并，冷凍干燥后得粉狀燕窩提取物88g，得率為88％。產(chǎn)物經(jīng)分子量分布測定，其中10000道爾頓以上的含量占7％，2000～6000道爾頓的含量占10％。經(jīng)藥理實驗，其美白活性優(yōu)，保濕活性優(yōu)。
實施例6將冷凍粉碎后的燕窩過100目篩，稱取燕窩粉100g，加入2000ml水，室溫條件下超聲水提2小時，過濾，濾餅中加入4000ml水，機械攪拌條件下保持煮沸45min，冷卻至室溫，加堿性蛋白酶1g，并調(diào)pH值至9.3。機械攪拌條件下，55℃水浴水解4h，85℃條件下滅活20min，冷卻后調(diào)pH值至7.2，過濾，將酶解后的濾液與超聲提取液合并，冷凍干燥后得粉狀燕窩提取物90g，得率為90％。產(chǎn)物經(jīng)分子量分布測定，其中10000道爾頓以上的含量占3％，2000～6000道爾頓的含量占15％。經(jīng)藥理實驗，其美白活性優(yōu)，保濕活性優(yōu)。
實施例7將冷凍粉碎后的燕窩過100目篩，稱取燕窩粉100g，加入2000ml水，室溫條件下超聲水提1.5小時，過濾，濾餅中加入4000ml水，機械攪拌條件下保持煮沸60min，冷卻至室溫，加堿性蛋白酶1g，并調(diào)pH值至9.9。機械攪拌條件下，55℃水浴水解1h，85℃條件下滅活20min，冷卻后調(diào)pH值至7.0，過濾，將酶解后的濾液與超聲提取液合并，冷凍干燥后得粉狀燕窩提取物80g，得率為80％。產(chǎn)物經(jīng)分子量分布測定，其中10000道爾頓以上的含量占10％，2000～6000道爾頓的含量占20％。經(jīng)藥理實驗，其美白活性優(yōu)，保濕活性優(yōu)。
實施例8將冷凍粉碎后的燕窩過100目篩，稱取燕窩粉100g，加入2500ml水，室溫條件下超聲水提1小時，過濾，濾餅中加入2500ml水，機械攪拌條件下保持煮沸30min，冷卻至室溫，加堿性蛋白酶1.5g，并調(diào)pH值至9.5。機械攪拌條件下，50℃水浴水解3h，85℃條件下滅活20min，冷卻后調(diào)pH值至7.0，過濾，將酶解后的濾液與超聲提取液合并，冷凍干燥后得粉狀燕窩提取物86g，得率為86％。產(chǎn)物的分子量分布為10000道爾頓以上的含量占6％，2000～6000道爾頓的含量占16％。經(jīng)藥理實驗，其美白活性優(yōu)，保濕活性優(yōu)。
實施例9將冷凍粉碎后的燕窩過100目篩，稱取燕窩粉100g，加入2000ml水，室溫條件下超聲水提1.5小時，過濾，濾餅中加入2000ml水，機械攪拌條件下保持煮沸45min，冷卻至室溫，加堿性蛋白酶1.5g，并調(diào)pH值至9.5。機械攪拌條件下，50℃水浴水解4h，85℃條件下滅活20min，冷卻后調(diào)pH值至6.9，過濾，將酶解后的濾液與超聲提取液合并，冷凍干燥后得粉狀燕窩提取物87g，得率為87％。產(chǎn)物的分子量分布為10000道爾頓以上的含量占6％，2000～6000道爾頓的含量占15％。經(jīng)藥理實驗，其美白活性優(yōu)，保濕活性優(yōu)。
實施例10將冷凍粉碎后的燕窩過100目篩，稱取燕窩粉100g，加入2500ml水，室溫條件下超聲水提2小時，過濾，濾餅中加入3000ml水，機械攪拌條件下保持煮沸60min，冷卻至室溫，加堿性蛋白酶1.5g，并調(diào)pH值至9.5。機械攪拌條件下，50℃水浴水解1.5h，85℃條件下滅活20min，冷卻后調(diào)pH值至7.0，過濾，將酶解后的濾液與超聲提取液合并，冷凍干燥后得粉狀燕窩提取物84g，得率為84％。產(chǎn)物的分子量分布為10000道爾頓以上的含量占6％，2000～6000道爾頓的含量占22％。經(jīng)藥理實驗，其美白活性優(yōu)，保濕活性優(yōu)。
本發(fā)明中“加入干燕窩重的15～25倍量的水，室溫條件下超聲水提1～2小時，過濾，液相冷凍干燥”的目的是提取燕窩中的熱不穩(wěn)定性活性成分和去除燕窩中含有的抑制酶水解活性的成分，提高提取率和產(chǎn)物的生物學(xué)活性。室溫下超聲提取工藝的操作在以往已經(jīng)公開的燕窩提取工藝中均未提及到。
本發(fā)明中“控制煮沸時間在25～60分鐘之間”和“控制水解時間在1～4h之間”的目的是既能獲得良好保濕美白性能的適宜分子量分布的產(chǎn)物，又能兼顧水解產(chǎn)物的產(chǎn)率提高。對于水煮時間和水解時間與分子量分布之間的關(guān)系在以往已經(jīng)公開的燕窩提取和水解工藝中均未闡明。
本發(fā)明采用的堿性蛋白酶為以枯草桿菌酶為主要酶成分的絲氨酸型內(nèi)切酶，酶活范圍為20萬～150萬u/g。生產(chǎn)廠家眾多，原料來源廣，只要活力范圍20萬～150萬u/g的堿性蛋白酶均可適用。堿性蛋白酶在燕窩提取工藝中的應(yīng)用尚未見報道。
本發(fā)明中測定分子量的方法為高效液相凝膠色譜法，將分子量的分布范圍分為三大部分6000D以上，2000～6000D之間和2000D以下。具體的分析條件為TSKgelG2000SWXL色譜柱，分子量分級范圍100～10000，流動相乙腈/水/TFA(45/55/0.1)，檢測波長220nm，流速0.5ml/min，進(jìn)樣量5～10ul，柱溫30℃。
本發(fā)明中的保濕性能的評價采用在室溫條件下相對濕度為60％的條件下計算10％樣品溶液的保濕率，以10％甘油水溶液作為陽性對照。以保濕效果優(yōu)于10％的甘油水溶液為優(yōu)，保濕率和10％甘油水溶液相近的為良，以保濕率低于10％甘油溶液20％的為一般，以保濕率低于10％甘油溶液45％的為差。
本發(fā)明的美白性能評價采用酪氨酸酶抑制活性的效果作為評價標(biāo)準(zhǔn)，骨膠原蛋白作為陽性對照，抑制活力用半數(shù)抑制量IC50表示。以IC50值低于骨膠原蛋白質(zhì)20％的為優(yōu)，以IC50值和骨膠原蛋白相近的為良，以IC50值高于骨膠原蛋白20％的為一般，以IC50值高于骨膠原蛋白45％的為差。
本發(fā)明方法得到的粉狀燕窩提取物，在水中的溶解度大于5％，分子量在6000道爾頓以上的分子含量不超過10％，2000～6000道爾頓的分子含量不低于8％，2000道爾頓以下的分子含量不低于70％，保濕美白性能優(yōu)于同樣量的燕窩其它提取物和動物膠原類提取物。
權(quán)利要求
1.一種化妝品用燕窩提取物的制備工藝，其特征在于包括如下步驟1)冷凍粉碎后的燕窩過100～150目篩，加入燕窩干重15～30倍量的水，室溫條件下超聲水提1～3小時，過濾；2)濾餅中加入燕窩干重10～50倍量的水，機械攪拌的條件下煮沸20～80分鐘；3)冷卻至室溫，用重量百分比為1～5％的Na2CO3溶液調(diào)pH值至8.0～10之間，加入酶活范圍為20萬～200萬u/g的堿性蛋白酶，加入量為燕窩干重的0.25～2％，在機械攪拌和40～70℃的溫度條件下水解1～6h；4)80～85℃條件下酶滅活15～30min；5)冷卻至室溫，用重量百分比為1～5％的稀HCl調(diào)pH值至中性；6)過濾，濾液與超聲提取液合并，冷凍干燥后得粉狀燕窩提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種化妝品用燕窩提取物的制備工藝，其特征在于所述的超聲提取時水的加入量為燕窩干重的15～25倍。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種化妝品用燕窩提取物的制備工藝，其特征在于所述的室溫條件下超聲提取時間為1～2小時。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種化妝品用燕窩提取物的制備工藝，其特征在于超聲提取、過濾后得到的濾餅中水的加入量為燕窩干重的20～40倍。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種化妝品用燕窩提取物的制備工藝，其特征在于濾餅加水后的煮沸時間為20～60分鐘。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種化妝品用燕窩提取物的制備工藝，其特征在于酶解工藝所采用的酶為以枯草桿菌酶為主要酶成分的絲氨酸型內(nèi)切酶的堿性蛋白酶，酶活范圍為20萬～150萬u/g。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種化妝品用燕窩提取物的制備工藝，其特征在于酶解工序中堿性蛋白酶的加入量為燕窩干重的0.5～1.5％。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種化妝品用燕窩提取物的制備工藝，其特征在于酶解工序中水解溫度控制在50～60℃。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種化妝品用燕窩提取物的制備工藝，其特征在于酶解工序中水解時間控制在1～4h。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種化妝品用燕窩提取物的制備工藝。步驟如下1)燕窩冷凍粉碎過篩，加入燕窩干重20倍量的水，室溫下超聲水提1小時，過濾；2)濾餅中加入燕窩干重30倍量的水，機械攪拌條件下煮沸60分鐘；3)冷卻至室溫，Na
文檔編號A61Q19/00GK101084873SQ20071006942
公開日2007年12月12日 申請日期2007年6月19日 優(yōu)先權(quán)日2007年6月19日
發(fā)明者李英華, 呂秀陽, 鄭興芳, 梁文權(quán), 潘炳雄, 劉秀芳 申請人:浙江大學(xué), 佛山市順德區(qū)萬盈家用化學(xué)品有限公司