專(zhuān)利名稱(chēng)：α-C-苯基-N-叔丁基硝酮的新型兩親衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及由a-C-苯基-N-叔丁基硝酮衍生的新型化合物，它們的制 備方法和它們?cè)谥苽溆糜陬A(yù)防或治療與氧化應(yīng)激有關(guān)的疾病的藥物的用
背景技術(shù)：
與氧化應(yīng)激和含氧自由基物質(zhì)形成有關(guān)的病狀已被Croos C.E.， Arch, Intern. Med. (l訴7) 107, 526-545和Anderson K.M., Ellis G., Bo加miP.， Harris J. E., Medical Hypotheses (1999) 52, 53-57歹lj出。
該列表中提及了很多病狀(超過(guò)70種此類(lèi)病狀)，具體地，其包括 免疫和炎癥性疾病、缺血-再灌注綜合征、動(dòng)脈粥樣硬化、阿爾茨海默氏病、 帕金森氏病、由紫外線(xiàn)和離子輻射引起的損傷、某些形式的化學(xué)致癌作用 和細(xì)胞老化。
機(jī)體中自然產(chǎn)生一些含氧自由基物質(zhì)和含氮自由基物質(zhì)(ROS和 INS),它們由某些特定的酶如可溶性超氧化物歧化酶(sSOD)來(lái)調(diào)節(jié)。捕獲 這些反應(yīng)性極強(qiáng)的自由基物質(zhì)是至關(guān)重要的，因?yàn)樗鼈冊(cè)诩?xì)胞內(nèi)引起不可 逆的損傷。雖然這些自由基物質(zhì)的正常產(chǎn)生易被細(xì)胞調(diào)節(jié)，然而與外部的 氧化應(yīng)激(炎癥性休克和缺血-再灌注綜合征等)或遺傳性缺陷(具體地為線(xiàn) 粒體異常)相關(guān)的自由基的過(guò)量產(chǎn)生則引起細(xì)胞的快速降解(rapid cell degradation)。于是對(duì)人體或動(dòng)物體來(lái)說(shuō)，處理這些大通量(large flux) 的自由基就變得不可能。
存在一些防御細(xì)胞氧化應(yīng)激的機(jī)制，這些機(jī)制能在氧化級(jí)聯(lián)中的不同 水平發(fā)揮作用。這種氧化級(jí)聯(lián)一般由與線(xiàn)粒體中分子氧的部分還原(典型的 缺血再灌注綜合征)相關(guān)的超氧自由基過(guò)量產(chǎn)生引發(fā)。這種超氧自由基能歧 化成過(guò)氧化氫。這兩種物質(zhì)通過(guò)Fenton反應(yīng)并在亞鐵的存在下，可以產(chǎn)生 羥基自由基，羥基自由基具有非常快速且非特異性地與細(xì)胞的任何成分如 脂質(zhì)、DNA或蛋白發(fā)生反應(yīng)的特性，引起這些成分不可逆的損傷，如Stad加anH.R.， BeriettB.S. J. Biol. Chem. (1991) 266, 1720!-17211; Floyd R.A. Carcinogenesis (19卯)11, 1447-1450; Gille J丄，Van Berkel C.G., Joenge H. Carcinogenesis (1994) 15, 2695-2699; HaHiweH B. Muta. Res. (1999) 443, 37-52所描述。通過(guò)NF-kB因子激活某些自殺基因(Bel或p53 基因)，這些自由基物質(zhì)也是造成細(xì)胞凋亡現(xiàn)象的原因，這已被SiebenHst U., FranzosoG., Brown K., Aram. Rev. Cell. Biol. (1994) 10， 405-455描 述。
可溶性SOD負(fù)責(zé)將超氧自由基轉(zhuǎn)化成過(guò)氧化氫，然后后者被谷胱甘 肽依賴(lài)性過(guò)氧化物酶或過(guò)氧化氫酶處理。
存在其它細(xì)胞水平的抗氧化劑保護(hù)，尤其是在膜水平上的，這些水平 的保護(hù)使限制不飽和膜磷脂的氧化成為可能。a-生育酚和P-胡蘿卜素是脂 質(zhì)抗氧化劑的主要例子。
在尋找用于預(yù)防或治療與氧化應(yīng)激有關(guān)的疾病的治療方法中，最有前 景的策略在于盡可能干預(yù)氧化級(jí)聯(lián)的上游，以便在很早的階段防止與自由 基物質(zhì)的極強(qiáng)反應(yīng)性相關(guān)的損傷。
為此，已經(jīng)嘗試?yán)?自旋-捕獲"分子來(lái)捕獲這些高反應(yīng)性自由基， 在"自旋-捕獲"分子中硝酮類(lèi)看起來(lái)是最有效的。
硝酮類(lèi)在降低和預(yù)防由生物體系中自由基所引起的損傷方面的治療 作用已在1990年由Oliver C. ， Starke-Read P., Stadman B., Liu G., Carney J., Floyd R. Prac. Natl. Acad. Sd. USA (19卯)87, 5144-5147證明。
這些作者證明在注射a-C-苯基-N-叔丁基硝酮(PBN)后，沙土鼠體內(nèi)由 腦缺血引起的損傷減小。腦缺血伴隨著自由基的產(chǎn)生而大量增加，這些自 由基被PBN捕獲，從而形成更穩(wěn)定的并且因此而反應(yīng)性和毒性更小的自 旋加合物。PBN是自旋捕獲劑，已有大量的生物學(xué)研究與之相關(guān)。
例如，可參考的文獻(xiàn)有Hensley K., Carney J.M., Stewart C.A., Tabatabaie T.，Pye Q.N., Floyd R.A. Int. Rev. Neurobiol. (1997) 40， 229-317。
PBN在腦中發(fā)揮作用有高度的特異性，這可能是由于它的高疏水性， 使其能穿過(guò)血-腦屏障，如ChengH.Y., UuT., FeuersteinG., BaroneF.C. Free Radic. Biol. Med. (1993) 14, 243-250所描述。
最廣為人知和有效的硝酮類(lèi)是a-C-苯基-N-叔丁基硝酮(PBN)、 5,5-二甲基吡咯烷-N-氧化物(DMPO)和新近發(fā)現(xiàn)的分子N-苯亞甲基+二乙氧基 磷?；?l-甲基-乙胺N-氧化物(PBNP沐5-二乙基膦酰基-5-甲基吡咯啉-N-氧化物(DEPMPO)。
PBN的二磺酸鹽衍生物，即NXY-059 (4-〖(叔丁基亞胺基)甲苯-1, 3-二磺酸二鈉N-氧化物〗)，其具有比PBN更強(qiáng)的神經(jīng)保護(hù)活性，其藥理學(xué)研 究和臨床開(kāi)發(fā)正在進(jìn)行，并在以下文獻(xiàn)中被提及-
Kuroda S.,Tsuchidate R.，Sm池M.L.,Maples K.R.， Siesjo B.K. J. Cereb. Blood F!ow Metab. (1999) 19, 778-787;
Lees K.R., Sharma A.K., Barer D.， Ford G.A., Kos加las V., Cheng Y.F.， Odergren T. Stroke (2001) 32， 675-680。
但是，以上提及的化合物中沒(méi)有一個(gè)在低劑量時(shí)具有令人滿(mǎn)意的體內(nèi) (in vivo)或體外(ex vivo)功效，它們的細(xì)胞毒濃度很高Almli L.M.,Hamrick S.E.G., Koshy A.A.， TSuber M.G., Ferriero D.M., Dev.Brain Res.(2001) 132， 121-129; Nakao N., Grasbon-Frodl E.M., WMner H.， Bnmdin P. Neuroscience (1996)73, 185-200。缺少功效可能與藥物的生物利用度不良以及細(xì)胞穿透 問(wèn)題有關(guān)。
因此，仍需要自旋捕獲型的分子，其能夠捕獲自由基并且還能在細(xì)胞 內(nèi)水平被人體或動(dòng)物體轉(zhuǎn)運(yùn)到其耙點(diǎn)。
具體地，需要能夠穿過(guò)細(xì)胞膜并且甚至更大和更困難的挑戰(zhàn)是能夠穿 過(guò)線(xiàn)粒體膜以進(jìn)入產(chǎn)生超氧自由基的區(qū)室的分子。
考慮這一目的，OuariO., PoUdoriA., PucciB.， TordoP., ChalierF. J. Org. Chem. (1999) 64,3554-3556和Gero邁el V.,Kadhom N.,Celabos-Pico I., Ouari O., Polidori A., Munnich A., R欲ig A., Rustin P. Hum. Mol. Genet. (2001) 10,1221-1228提出一種基于全氟碳的PBN的兩親衍生物:TA1PBN。
自<formula>formula see original document page 7</formula>該分子已在呼吸鏈復(fù)合物V(ATP酶)嚴(yán)重缺乏的成纖維細(xì)胞系上測(cè) 試，并且顯示出鼓舞人心的結(jié)果。
然而，TA1PBN的合成存在困難，這使得難以設(shè)想其以工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)。
國(guó)際申請(qǐng)WO2004/04982描述了a-C-苯基-i^叔丁基硝酮衍生物。這 些自旋捕獲型分子易于合成并且能夠捕獲自由基以及它們具有良好的生 物利用度。這些化合物之一N-[4-(辛-0-乙?；樘酋０眮喖谆?苯亞甲 基〗-N-[l,l-二甲基-2-(N-辛?；?酰氨基〗乙胺N-氧化物或LPBNAH在氧化 老化試驗(yàn)中表現(xiàn)出比PBN更高的生物學(xué)活性(B. Poeggeler等人，Journal of Neurochemistry, 2005, 95， 962-973)。然而，仍然需要具有更高活性和具有 更高生物利用度的化合物。
本申請(qǐng)人將目標(biāo)定為設(shè)計(jì)并制備新的分子，其具有自旋捕獲活性，與 現(xiàn)有技術(shù)的分子相比顯示出增加的生物利用度，而且制備簡(jiǎn)單，從而使展 望工業(yè)規(guī)模的生產(chǎn)成為可能。
本發(fā)明的一個(gè)主題是新的分子，其特征在于它們對(duì)應(yīng)于下面的式(I):
X代表選自以下的親水性基團(tuán)單糖或多糖以及單糖和多糖的氨基化 衍生物、聚環(huán)氧乙烷鏈(polyethylene oxide chain)、肽鏈、和選自季銨、氧

發(fā)明內(nèi)容
化胺、肉堿基團(tuán)、磷酸鹽基團(tuán)、膽堿基團(tuán)、基團(tuán)
基團(tuán)N, g
的離子極性基團(tuán);m代表等于l、 2或3的整數(shù)；
Y代表用于連接親水性取代基團(tuán)X和分子其余部分的間隔臂或鍵； Y選自酯、酰胺、脲、尿烷、醚、硫醚和胺官能團(tuán)和CrC6烴鏈，基
于CrQ烴鏈的基團(tuán)，其任選被酯、酰胺、脲或尿烷官能團(tuán)中的一個(gè)或多
個(gè)間斷和醚、胺或硫醚橋中的一個(gè)或多個(gè)間斷；
Y'代表選自以下的基團(tuán)酯官能團(tuán)-0』-、酰胺官能團(tuán)-、脲
麵丄、尿驚簡(jiǎn)丄、魅橋德繼橋—或
多個(gè)氨基酸和絲氨醇；
n是等于0、 1或2的整數(shù)； m'代表等于1或2的整數(shù)；
X'代表氫原子或任選被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C4-d4烷基鏈。
芳環(huán)上的取代基(X')^-Y-(CH2)n-可以在鄰位、間位或?qū)ξ弧?br> 在本發(fā)明可以使用的單糖中，可以提及葡萄糖、乳糖、果糖、甘露糖、 半乳糖、核糖、麥芽糖和蔗糖。還可以提及開(kāi)鏈的單糖。在氨基糖衍生物 中，具體可以提及葡糖胺和半乳糖胺。在本發(fā)明可以使用的多糖中，可以 提及由一些單糖單元(例如，蔗糖、麥芽糖和乳糖酸)組成的鏈。
當(dāng)式(I)分子的親水性部分X為聚環(huán)氧乙烷鏈時(shí)，后者有利地包含 30~400個(gè)環(huán)氧乙烷單元，優(yōu)選50~60個(gè)環(huán)氧乙烷單元。
優(yōu)選地，肽鏈由天然氨基酸組成，這些天然氨基酸是例如丙氨酸、精 氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氮酸、甘氨酸、組 氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴(lài)氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、 蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸和纈氨酸。
本發(fā)明可以使用的離子和非離子型親水性基團(tuán)的例子在下面的

圖1中<formula>formula see original document page 9</formula>
離子極性頭<formula>formula see original document page 10</formula>
非離子極性頭
圖1:極性頭的一般結(jié)構(gòu) ， 間隔臂Y被基團(tuán)X取代一次或二次,這取決于所述間隔臂是單官能團(tuán) 還是多官能團(tuán)。
基團(tuán)x'可選自例如以下基團(tuán) -辛基；
-烴基正丁基、叔丁基、異丁基、正戊基、異戊基、正己基、正庚基、
正辛基、正壬基、正癸基、正十一烷基、正十二烷基、正十三烷基、正十
四烷基等；
-氟化烴基可以提及的是對(duì)應(yīng)于式-(CH2)t-(CF2)rF的氟化烴基，其
中r和t代表兩個(gè)整數(shù)，其中14》r+t》4,例如
-(CF2)4F、 -(CF2)5F、 -(CF2)fiF、 -(CF2)7F、 -(CF2)8F、 -(CF2)9F、 -(CF^ 0F、 -(CF2) F、 -(CF2)I2F、 -(CF2)l3F、 -(CF2)14F、 -CH2-(CF2)3F、 -CH2-(CF2 )4F、 -CHr(CF2)5F、 -CH2-(CF2)6F、 -CH2-(CF2)7F 、 -CH2-(CF2)8F、 -CH2-(C F2)9F、 -CH2-(CF2),。F、 -CH2-(CF2) F、 -CH2-(CF2)12F、 -CH2-(CF2)13F、 ，(C H2)2-(CF2)2F、 -(CH2)2-(CF2)3F、 -(CH2)2-(CF2)4F、 -(CH2)2-(CF2)5F、 -(CH2)2-(CF2)6F、 -(CH2)2-(CF2)7F、 -(CH2)2-(CF2)8F、 -(CH2)2-(CF2)9F 、 -(CH2)2-(C F2)10F、 -(CH2)2-(CF2) F、 -(CH2)2-(CF2)12F、 -(CH^HCF^R…-(CH2)13-(CF2)F。
優(yōu)選地，至少滿(mǎn)足下列條件之一
X代表乳糖酰胺或肉堿基團(tuán)或者聚氧乙烯鏈；
m代表1:
m，代表1或2;
n代表1 s
X，選自辛基、庚基、辛基、癸基、十二烷基和CF3(CF2)rCH2CH2-， 其中8》r》6。
本發(fā)明的又一個(gè)主題是用于制備對(duì)應(yīng)于式(I)的化合物的方法，所述方 法的特征在于根據(jù)以下流程圖2，使對(duì)應(yīng)于式(II)的醛和對(duì)應(yīng)于式(III)的羥
胺反應(yīng)
<formula>formula see original document page 11</formula>
流程圖2
其中，X、 m、 Y、 X， 、 m， 、 n和Y，具有與如上相同的定義, 根據(jù)以下流程圖3中所描述的方法制備式(III)的化合物
，X^z +附,-^挈d,
(VI) (V) Z一O玖NHj或甲苯磺?；?br> <formula>formula see original document page 11</formula>流程圖3取決于疏水性基團(tuán)的單鏈或雙鏈性質(zhì)，將在下面說(shuō)明實(shí)施流程圖2的 條件。例如，普通的乳糖酰胺(lactobio加mWe)極性頭選自 a-乳糖酰胺親水性部分的合成
圖i說(shuō)明式(m)化合物的制備，其中-
<formula>formula see original document page 12</formula>
所述親水性部分是從2-甲基-2-硝基丙醇合成的。
醇官能團(tuán)通過(guò)甲苯磺酰化轉(zhuǎn)變?yōu)榘?，隨后被疊氮化鈉取代。在三苯基 膦和氫氧化鈉存在下，通過(guò)Staudinger反應(yīng)，將烷基疊氮化物轉(zhuǎn)化為胺。
這種胺可以與乳糖酸內(nèi)酯(lactobionolactone)反應(yīng)；該反應(yīng)使通過(guò)截 胺鍵接合極性頭成為可能。
隨后在氯化銨存在下，在THF-水混合物中，用4當(dāng)量的鋅將硝基官 能團(tuán)還原成羥胺。
所述還原反應(yīng)使以80%收率獲得化合物1成為可能。
b-基于烴或全氟烴的單鏈?zhǔn)杷圆糠值暮铣?圉2) -
圖2說(shuō)明包含脂肪鏈的式(II)化合物的制備，其中
<formula>formula see original document page 12</formula>6)、 一G—朋-一 (化合物7)。
衍生物2是在堿性介質(zhì)中通過(guò)3-乙烯基苯甲醛與脂肪族硫醇直接縮合 而得到的。化合物3是從4-氰基苯甲醛合成的。醛官能團(tuán)通過(guò)縮醛化作用 來(lái)保護(hù)并將腈官能團(tuán)還原成胺官能團(tuán)。脂肪鏈的酸官能團(tuán)在其上縮合。在 甲苯中通過(guò)縮合所述胺上脂肪鏈的異氰酸酯來(lái)獲得產(chǎn)物4。這兩個(gè)化合物 的醛官能團(tuán)通過(guò)在乙醛中轉(zhuǎn)縮醛化來(lái)脫保護(hù)。衍生物5、 6和7從4-羧基 苯甲醛合成，所述醛官能團(tuán)通過(guò)縮醛化作用被預(yù)先保護(hù)?；衔?在通過(guò) 用二苯基磷?；B氮化物處理獲得?；B氮化物后得到。通過(guò)在甲苯中加 熱將所述疊氮化物轉(zhuǎn)換成異氰酸酯。脂族醇在DABCO存在下縮合，以便 在轉(zhuǎn)縮醛作用后得到化合物5。在肽偶合劑、二環(huán)已基碳二亞胺的存在下， 通過(guò)酸與脂族胺偶合，和通過(guò)在酸性介質(zhì)在乙醛中將醛脫保護(hù)來(lái)得到。 c-基于烴或全氟烴的雙鏈琉水性部分的合成(圖3): 圖3說(shuō)明從絲氨醇來(lái)合成雙鏈?zhǔn)杷圆糠帧?、 化合物7從4-羧基苯甲醛獲得。所述醛官能團(tuán)通過(guò)縮醛化作用進(jìn)行保 護(hù)。在酸官能團(tuán)在二環(huán)己基碳二亞胺存在下通過(guò)用N-羥基琥珀酰亞胺偶合 活化之后，絲氨醇在所述酸官能團(tuán)上縮合。通過(guò)在甲苯中縮合異氰酸烷基 酯將脂肪鏈縮合在醇官能團(tuán)上。在乙醛中轉(zhuǎn)縮醛化后得到化合物8。 d-衍生于單鏈和雙鏈兩親硝醑的乳糖酸內(nèi)酯的制備(圃4): 各種兩親硝酮是通過(guò)將各種疏水性合成子的醛官能團(tuán)偶合在乳糖酰 胺親水性部分的羥胺基團(tuán)上生成的。所述偶合反應(yīng)在氬氣條件下在THF/ 乙酸混合物中進(jìn)行24小時(shí)。
所有硝酮均通過(guò)反相HPLC (C18柱/甲醇-水洗脫液)進(jìn)行純化。 本發(fā)明的又一個(gè)主題是與如上所定義的對(duì)應(yīng)于式(I)的化合物作為自 由基清除劑的用途。
事實(shí)上，現(xiàn)已證明根據(jù)本發(fā)明的化合物具有與現(xiàn)有技術(shù)化合物相當(dāng)?shù)?捕獲自由基的能力。
這一性質(zhì)使得展望在多個(gè)領(lǐng)域中使用本發(fā)明的分子成為可能 -在治療領(lǐng)域，本發(fā)明的產(chǎn)品可用于預(yù)防和/或治療與氧化應(yīng)激和含氧 自由基物質(zhì)形成有關(guān)的病狀。因而，本發(fā)明的主題是在藥學(xué)上可接受的載體中包含本發(fā)明的化合物 的藥物組合物。本發(fā)明的主題是本發(fā)明的化合物在制備用于預(yù)防和/或治療 自由基作用的藥物的用途。
本發(fā)明的主題還涉及本發(fā)明的化合物在制備用于預(yù)防和/或治療與氧 化應(yīng)激和含氧自由基物質(zhì)形成有關(guān)的病狀的藥物組合物的用途，這些病狀 具體地為免疫和炎癥性疾病、缺血再灌注綜合征、動(dòng)脈粥樣硬化、阿爾茨 海默氏病、帕金森氏病、亨廷頓氏病、由紫外線(xiàn)和離子輻射引起的損傷、 癌癥和細(xì)胞老化。
本發(fā)明的產(chǎn)品可以通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員所知的任何途徑給予，具體 地，通過(guò)靜注或肌注，或者通過(guò)口服或透皮給予。它們可單獨(dú)使用或與其 它活性劑聯(lián)合使用。其劑量和每日給藥量根據(jù)所涉及分子的測(cè)定活性以及 病人的體重進(jìn)行調(diào)整。
-在化妝品領(lǐng)域，本發(fā)明的化合物可用于預(yù)防和/或治療老化作用以及 太陽(yáng)輻射作用。
因而，本發(fā)明的又一個(gè)主題是在化妝品可接受的載體中包含本發(fā)明的 化合物的化妝品組合物。
所述組合物可施用于皮膚或皮膚附件(指甲和毛發(fā))。
該組合物可以以水溶液或油溶液、油包水或水包油乳劑、三相乳劑或 軟膏形式存在。
本發(fā)明的化合物可被加入需要自由基-清除活性的化妝品組合物中護(hù) 膚乳、防曬產(chǎn)品、卸妝產(chǎn)品、皮膚或發(fā)用保護(hù)膜、洗發(fā)劑、化妝用品如唇 膏、擦面粉、粉底、措甲油等。
-在有機(jī)合成領(lǐng)域，本發(fā)明的化合物可用作自由基反應(yīng)中的自由基捕獲劑。
由于它們?cè)诙喾N介質(zhì)中可溶，因此本發(fā)明的化合物易于使用并且可應(yīng) 用于眾多的情況。
具體實(shí)施例方式
魏船 1-生物學(xué)評(píng)估根據(jù)Journal of Neurochemistry, 2005， 95, 962-973中描述的方法進(jìn)行 生物試驗(yàn)。為了評(píng)價(jià)這些新的衍生物的潛在性，我們測(cè)定化合物10減少 和預(yù)防凋亡細(xì)胞死亡現(xiàn)象的能力。過(guò)氧化氫非常廣泛地用作多種細(xì)胞模型 的細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑。因此，在用濃度為50-20(HiM的過(guò)氧化氫處理后， Sprague-Dawley大鼠的胚胎皮層細(xì)胞培養(yǎng)物的成活力大大減少。PBN U0|iM)的加入使得有可能不完全地恢復(fù)這些培養(yǎng)物成活力。相反，以 相同濃度"O[iM)加入化合物IO使得有可能完全恢復(fù)這些培養(yǎng)物的成活 力，從而證明化合物IO在減少氧誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡現(xiàn)象中的效果比PBN的 效果大5-10倍。上述培養(yǎng)物還經(jīng)受線(xiàn)粒體-選擇性氧化應(yīng)激誘導(dǎo)劑，阿霉 素(Kotamraju S.; Ko加rev 3B.A.; Joseph J.; Kalyanaram肪B. / 及o/. CA棚. 2000, 275， 33 585-33 592)。進(jìn)行的觀察與用過(guò)氧化氫誘導(dǎo)所進(jìn)行的觀察 相同。PBN只能防止部分細(xì)胞死亡，而化合物10能讓細(xì)胞成活力完全保 持。這些初步結(jié)果說(shuō)明化合物10在預(yù)防以不同細(xì)胞水平誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡 現(xiàn)象上有很大的能力。它可以減少由用過(guò)氧化氫處理所引起的細(xì)胞內(nèi)損 傷，但相對(duì)于阿霉素，其效果還建議增加該衍生物向線(xiàn)粒體隔室內(nèi)的加入。 線(xiàn)粒體的功能障礙，在細(xì)胞凋亡控制之下的中心細(xì)胞器涉及非常多類(lèi)型的 病狀。衍生物10的抗凋亡性質(zhì)與將其加入線(xiàn)粒體相結(jié)合使得展望其在上 述領(lǐng)域的使用成為可能。
II-實(shí)攤例-乳糖酰胺單鍵賴(lài)爾10的食成(R-CsE^X
l-化合物1的合成
極性頭的化合物1前體可根據(jù)WO 2004/043982中已經(jīng)捕述的方法容 易地從2-甲基-2-硝基丙醇進(jìn)行制備:通過(guò)--連串的三個(gè)歩驟將所述2-甲基 -2-硝基丙醇轉(zhuǎn)變?yōu)?-甲基-2-硝基丙胺，所述三個(gè)步驟為1-將醇官能團(tuán) 活化，形成甲苯磺?；然锏幕撬狨?，2-用疊氮基取代該磺酰酯，3 -通 過(guò)Staudtoger反應(yīng)有選擇地將疊氮基還原成胺。在柳1C的堿性介質(zhì)中將所述2-甲基-2-硝基丙胺與在甲氧基乙醇中乳糖酸內(nèi)酯縮合。在此反應(yīng)之后在 乙酸酐/吡啶的混合物中進(jìn)行羥基的全乙酰化反應(yīng)。最后，根據(jù)文獻(xiàn)中普遍 描述的方法U幼zen E.G.; Dudley R.L.; Shetty R.V. 爿附.Cfe附.Soc. 1979, 101, 243-245),將硝基有選擇地還原成羥胺。所述反應(yīng)在鋅粉和氯化銨 的存在下、在環(huán)境溫度下、在THF/H20的混合物中進(jìn)行。然后將化合物l 容易地用硅膠色譜(洗脫液EtOAc/環(huán)己烷，8:2v/v)進(jìn)行純化,得到白色 粉末，根據(jù)2-甲基-2-硝基丙醇計(jì)算的收率為25%。 Rf=0.52 (洗脫液EtOAc/MeOH， 9:l,v/v)
!HNMR (CDC13) 8 (ppm): 6.62 (1H); 5.58-5.63 (2H); 5.39 (1H); 5.03-5.25 (3H); 4.68 (1H); 4,55 (2H); 4.35 (1H); 3.95-4.21 (3H); 3.27 (2H); 1.99-2.18 (24H); L06(6H).
"CNMR (DMSO) S (ppm): 166.7-170.7 (CO); 101.1 (CH); 78.4, 72.1， 70.8, 70.2, 70.0, 69.5， 69.3, 69.3， 67.6 (CH); 61.7, 61.4, 57.4 (CH2); 45.4 (C); 22.8, 20.9 (CH3).
2-化合物3的合成
帶有基于烴的鏈的化合物3可根據(jù)WO 2004/043982中已經(jīng)描述的方 法容易地從4-氰基苯甲醛進(jìn)行制備通過(guò)一連串的兩個(gè)歩驟將4-氰基苯甲 醛轉(zhuǎn)變?yōu)?-(l,3-二氧環(huán)戊-2-基)芐胺，所述兩個(gè)歩驟為1-以二氧戊環(huán)的 形式保護(hù)醛官能團(tuán)，2-將氰基還原成胺。
根據(jù)已經(jīng)描述的方法(OuariO.; PolidoriA.; PucciB.; TordoR: ChalierF.J. Org. Cfe附.1999,64,3554-3556)，在由DCC和HOBt組成的 肽偶合體系的存在下，將4-(l,3-二氧環(huán)戊-2-基)芐胺與辛酸在二氯甲烷中 縮合，然后通過(guò)在1:1 (v/v)的乙酸/水混合物中處理除去二氧戊環(huán)保護(hù)基。 隨后將化合物3容易地用硅膠色譜(洗脫液環(huán)己烷/EtOAc， 6:4v/v)進(jìn) 行純化,得到白色粉末，根據(jù)4-氰基苯甲醛計(jì)算的收率為40%。Rf=0.47 (洗脫液環(huán)己烷/EtOAc, 6:4v/v)
iHNMR (CDC13) S (ppm): 9.98 (1H); 7.84 (2H); 7.42 (2H); 6.18 (1H); 4.50 (2H); 2.26 (2H); 1.63 (2H); 1.29 (8H); 0.88 (3H).
"C腿R (CDC13) S (ppm): 191.9， 173.0 (CO); 137.0， 139.7 (C); 127.9， 126.8 (CH); 65.3,43.3,36.8, 31.7， 29.3, 29.0， 25.8， 22.6 (CH2); 14.1 (￡H3).
3=化合物10的合成
化合物10是根據(jù)WO 2004/043982中已經(jīng)描述的方法，通過(guò)化合物1 與化合物3縮合得到的在氬氣氣氛下和分子篩4A的存在下，將羥胺1 和苯甲醛衍生物3以化學(xué)計(jì)算量溶解在無(wú)水THF中。把反應(yīng)介質(zhì)帶到60"C 的黑暗中。以0.20當(dāng)量的部分每隔24小時(shí)順次加入羥胺，直到苯甲醛衍 生物耗盡。使用乙酸作為助溶劑使得有可能顯著地增加反應(yīng)動(dòng)力學(xué)，如 PoeggelerB.; DurandG.; PolidoriA.; PappolaM.A.; Vega-Naredo L.; Conto-Montes A.; B6ker J.; Hardeland R.; Pucci B. / JVle"focfe柳.2005， 95, 962-973中已經(jīng)證明。形成的硝酮用硅膠色譜(洗脫液EtOAc/環(huán)己烷， 7:3v/v),然后在Sephadex LH-20樹(shù)脂上通過(guò)篩析色譜法(洗脫液二氯 甲烷/甲醇，l:lv/v)進(jìn)行純化。最后，根據(jù)Zemplen方法，通過(guò)在催化量 的甲醇鈉的存在下在甲醇中進(jìn)行酯交換來(lái)除去極性頭的乙酰基。化合物10 在SephadexLH-20樹(shù)脂上用篩析色譜法(洗脫液甲醇)進(jìn)行純化，得到 收率為70%的白色粉末。
Rf=0.38 (洗脫液EtOAc/MeOH/H20, 7:2:1, v/v)
JHNMR (MeOD) S (ppm): 8.35 (2H); 7.89 (1H); 7.41 (2H); 4.30-4.71 (3H); 4.19 (1H); 3,32-3.卯(13H); 2.28 (2H); 1.61 (8H); 1.33 (8H); 0.93 (3H).
13CNMR (MeOD) S (ppm): 174.2 (￡ONH); 142.4, 135.1 (C); 129.2，129.9, 127.1， 104.3， 81.7， 75.8， 73.3 (CH); 72.5 (C); 71.7， 71.3, 71.1, 68.9 (CH); 62.3, 61.3, 45.7, 42.4, 35.7, 31.5， 28.9, 28.7, 25.7 (CH2); 23.5， 23.4 (CH3); 22.3 (CH2); 13.0 (CH3).
權(quán)利要求
1、一種化合物，特征在于其對(duì)應(yīng)于式(I)其中X代表選自以下的親水性基團(tuán)單糖或多糖、單糖和多糖的氨基化衍生物、聚環(huán)氧乙烷鏈、肽鏈、和選自季銨、氧化胺、肉堿基團(tuán)、磷酸鹽基團(tuán)、膽堿基團(tuán)、基團(tuán)和基團(tuán)的離子極性基團(tuán)；m代表等于1、2或3的整數(shù)；Y代表用于連接芳環(huán)和親水性取代基團(tuán)X的間隔臂或鍵；Y選自酯、酰胺、脲、尿烷、醚、硫醚和胺這些官能團(tuán)，和基于C1-C6烴鏈的基團(tuán)，其任選被酯、酰胺、脲或尿烷官能團(tuán)中的一個(gè)或多個(gè)間斷和醚、胺或硫醚橋中的一個(gè)或多個(gè)間斷；Y’代表選自以下的基團(tuán)酯官能團(tuán)、酰胺官能團(tuán)、脲官能團(tuán)、尿烷官能團(tuán)、醚橋、硫醚橋、一個(gè)或多個(gè)氨基酸和絲氨醇；m’代表等于1或2的整數(shù)；n等于0、1或2；X’代表氫原子或任選被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C4-C14烷基鏈。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其特征在于X代表選自以下的基團(tuán) 葡萄糖、乳糖、果糖、甘露糖、半乳糖、核糖、麥芽糖、葡糖胺、蔗糖和 乳糖酰胺。
3、 根據(jù)權(quán)利要求l的化合物，其特征在于X代表選自包含30-100個(gè) 環(huán)氧乙烷單元，優(yōu)選50-60個(gè)單元的聚環(huán)氧乙烷鏈的基團(tuán)。團(tuán)、膽堿基團(tuán)、基團(tuán)的離子極性基團(tuán);
4、根據(jù)權(quán)利要求l的化合物，其特征在于X代表選自以下的基團(tuán)<formula>formula see original document page 3</formula>
5、 根據(jù)權(quán)利要求l的化合物，其特征在于至少滿(mǎn)足下列條件之一 X代表選自以下的基團(tuán)乳糖酰胺、肉堿或者聚氧乙烯鏈；m代表1 ;m'代表1或2;n等于1;X，選自辛基、癸基、十二烷基和CF3(CF2》CH2CH2-; 8 6。
6、 一種用于制備權(quán)利要求1至5任意一項(xiàng)中對(duì)應(yīng)于式(I)的化合物的 方法，所述方法的特征在于根據(jù)以下流程圖2，使對(duì)應(yīng)于式(II)的醛和對(duì)應(yīng) 于式(III)的羥胺進(jìn)行反應(yīng)<formula>formula see original document page 3</formula>
7、根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其特征在于根據(jù)以下流程圖3所描述的 方法制備式(III)的化合物<formula>formula see original document page 4</formula>流程圖3 。
8、 藥物組合物，其在藥學(xué)可接受的載體中包含至少一種權(quán)利要求1 至5任意一項(xiàng)中對(duì)應(yīng)于式①的化合物。
9、 權(quán)利要求1至5任意一項(xiàng)中對(duì)應(yīng)于式(I)的化合物在制備用于預(yù)防 和/或治療自由基作用的藥物中的用途。
10、 權(quán)利要求1至5任意一項(xiàng)中對(duì)應(yīng)于式(I)的化合物在制備用于預(yù)防 或治療與氧化應(yīng)激和含氧自由基物質(zhì)形成有關(guān)的病狀的藥物中的用途。
11、 根據(jù)權(quán)利要求10的用途，用于預(yù)防或治療選自以下的病狀免 疫和炎癥性疾病、缺血-再灌注綜合征、動(dòng)脈粥樣硬化、阿爾茨海默氏病、 帕金森氏病、由紫外線(xiàn)和離子輻射引起的損傷、亨廷頓氏病、癌癥和細(xì)胞 老化。
12、 化妝品組合物，其特征在于所述化妝品組合物在化妝品可接受的 載體中包含至少一種權(quán)利要求1至5任意一項(xiàng)中對(duì)應(yīng)于式(I)的化合物。
13、 一種用于預(yù)防和/或治療老化作用的化妝治療方法，其特征在于將 權(quán)利要求12的組合物施用于皮膚或皮膚附件。
14、 權(quán)利要求1至5任意一項(xiàng)中對(duì)應(yīng)于式(I)的化合物作為自由基反應(yīng) 中的自由基捕獲劑在有機(jī)合成中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及由α-C-苯基-N-叔丁基硝酮衍生的化合物，其制備方法以及它們?cè)谥苽漕A(yù)防或治療與氧化應(yīng)激相關(guān)的疾病的藥物的用途。
文檔編號(hào)A61Q17/04GK101421288SQ200780013106
公開(kāi)日2009年4月29日 申請(qǐng)日期2007年3月15日 優(yōu)先權(quán)日2006年3月17日
發(fā)明者安格·波利多里, 格雷戈里·迪朗, 讓-皮埃爾·薩勒, 貝爾納·普奇 申請(qǐng)人:Ts制藥公司;阿維尼翁大學(xué)