專利名稱：：黃酮類化合物的持久吸收的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用于長(zhǎng)久并持續(xù)釋放黃酮類化合物(特別是含鼠李糖的黃酮類化合物)及在胃腸道中延長(zhǎng)所述黃酮類化合物吸收的方法。還涉及包含所述黃酮類化合物和a-鼠李糖苷酶的組合物。本發(fā)明也包括包含橙皮苷和橙皮素-7-葡糖苷的組合物。
背景技術(shù)：
：黃酮類化合物，或生物類黃酮是大多數(shù)植物中存在的普遍的一組多酚物質(zhì)，其濃縮于種子、水果皮或果皮、樹皮及花中。許多植物藥品含有黃酮類化合物，許多作者已經(jīng)報(bào)道其具有抗細(xì)菌、抗氧化、抗炎、抗變應(yīng)性、抗誘變、抗病毒、抗腫瘤、抗血栓和血管舒張作用。WO2005/058255Al中描述的近期發(fā)展也顯示了含黃烷酮組合物用于改善人類或?qū)櫸锲つw、頭發(fā)和皮毛健康的益處。自然界中，這些化合物主要作為糖苷存在。與糖的這種綴合顯著影響了它們的吸收動(dòng)力學(xué)。例如，黃酮類化合物葡糖苷具有快且早的吸收，而黃酮類化合物蕓香苷(鼠李糖-葡糖苷)具有慢且晚的吸收。對(duì)于黃酮類化合物蕓香苷(如橙皮苷)，因小腸中缺少可以將所述黃酮類化合物蕓香苷的鼠李糖部分去除的a-鼠李糖苷酶，其在哺乳動(dòng)物中生物利用率低并且晚。這導(dǎo)致胃腸道中黃酮類化合物蕓香苷穿過進(jìn)入盲腸的過程費(fèi)時(shí)。JP2003-073279中描述了含長(zhǎng)效黃酮類化合物糖苷的健康食品和飲料，因此食品中包括不同程度糖基化的黃酮類化合物的混合物，使得在整個(gè)胃腸道中發(fā)生吸收。JP2000-078955也描述了通過提供生理學(xué)活性的黃酮類化合物及其衍生物的混合物來改善食品或藥品中黃酮類化合物的吸收的方法。此夕卜，EspinJ.C.等在JournalofAgriculturalandFoodChemistry,2004，52(20)，6136-6142頁中描述了在果汁和綠茶中制備生物可用的葡糖苷黃酮類化合物。這通過用來自棘孢曲霉(j^^^"/wflc"/eW附)的鼠李糖苷酶處理果汁和綠茶來實(shí)現(xiàn)。發(fā)明目的因此仍然需要提供備選方法，通過所述方法黃酮類化合物組合物在哺乳動(dòng)物中具有可控的效果。發(fā)明概述因此，通過獨(dú)立權(quán)利要求的特征解決該需要。從屬權(quán)利要求進(jìn)一步形成了本發(fā)明的中心思想。因此，在本發(fā)明的第一方面中，組合物包含至少一種含鼠李糖的黃酮類化合物和(X-鼠李糖苷酶。制備本發(fā)明的組合物用于化妝品、營(yíng)養(yǎng)及藥物用途。第二方面，本發(fā)明涉及具有(X-鼠李糖苷酶活性的細(xì)菌，其選自巻曲乳才干菌(JLfl"o6fl"7/M51cn's/7tf似51)、才直物乳桿菌(丄a"o6"c/〃附/7/"W/"尸"附)、力口氏孚L桿菌(丄fl"o6""7/附gflMe/*/)、嗜酸乳桿菌(jLflc似6fl"7/"sciVtop/7i)或腸膜明串珠菌(Z^wc銷ostoc附ese/itewVfes)。在其它方面，本發(fā)明涉及a-鼠李糖苷酶在制備包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物的組合物中的用途，所述組合物用于改善所述黃酮類化合物的生物功效和/或生物利用率。在本發(fā)明另一方面，提供了a-鼠李糖苷酶和至少一種含鼠李糖黃酮類化合物在制備用于改善皮膚健康的組合物中的用途。并且，本發(fā)明組合物的化妝品用途代表了本發(fā)明的另一方面。本發(fā)明還涉及的是用于維持和/或提高含鼠李糖黃酮類化合物的生物利用率的方法，所述方法包括步驟提供包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物和a-鼠李糖苷酶的組合物，所述a-鼠李糖苷酶處于基本不能剪切所述黃酮類化合物的鼠李糖部分的狀態(tài)。用于在攝入所述黃酮類化合物后延長(zhǎng)含鼠李糖黃酮類化合物的代謝物的血漿水平的方法是本發(fā)明的另一方面，所述方法包括步驟經(jīng)口提供包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物和a-鼠李糖苷酶的組合物，所述a-鼠李糖苷酶處于基本不能剪切所述黃酮類化合物的鼠李糖部分的狀態(tài)。用于改善皮膚健康的方法也屬于本發(fā)明的一個(gè)方面，所述方法包括步驟經(jīng)口施用包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物和a-鼠李糖苷酶的組合物，或經(jīng)口分別和同時(shí)施用包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物和a-鼠李糖香酶的組合物，所述a-鼠李糖普酶處于基本不能剪切所述黃酮類化合物的鼠李糖部分的狀態(tài)。最后，本發(fā)明包含組合物，所述組合物包含橙皮苷和橙皮素-7-葡糖苷(優(yōu)選比例為70/30至50/50)的混合物。附圖參考附圖中顯示的一些實(shí)施方案，于下文進(jìn)一步描述了本發(fā)明，其中圖la描述了橙皮苷的分子結(jié)構(gòu)，圖lb描述了橙皮素-7-葡糖苷的分子結(jié)構(gòu)，圖lc描述了橙皮素的分子結(jié)構(gòu)，并且圖2是根據(jù)單獨(dú)攝取橙皮素-7-葡糖苷，還是單獨(dú)攝取橙皮苷或消費(fèi)本發(fā)明組合物來比較血漿橙皮素水平的曲線圖。圖3顯示在接近于存在純的a-鼠李糖苷酶(CTRL+)、加氏乳桿菌CNCM1-3795(907EC)的完整細(xì)胞、加氏乳桿菌CNCM1-3795(907CE)的破碎細(xì)胞，或不存在任何細(xì)菌/酶(CTRL-)的小腸(pH6)環(huán)境中，橙皮苷在體外的消失。圖4顯示橙皮素-7-葡糖苷在pH6處的形成(從橙皮苷的起始量(100。/。)開始計(jì)算)，其中CTRL+、CTRL-、907CE和907EC具有與圖3中相同的含義。圖5顯示當(dāng)用加氏乳桿菌(CNCMl-3795)的完整細(xì)胞或破碎細(xì)胞處理橙皮苷時(shí)，橙皮素在pH6處形成。圖6顯示存在純的a-鼠李糖苷酶(CTRL+)、加氏乳桿菌CNCM1-3795(907EC)的完整細(xì)胞、加氏乳桿菌CNCM1-3795(907CE)的破碎細(xì)胞，或不存在任何細(xì)菌/酶(CTRL-)時(shí)，在接近于膳食消化后的胃環(huán)境(pH4)中，橙皮苷在體外的消失。圖7顯示橙皮素-7-葡糖苷在pH4處的形成(從橙皮苷的起始量(100%)開始計(jì)算)，其中CTRL+、CTRL-、卯7CE和卯7EC具有與圖6中相同的含義。圖8圖解TIM1實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。當(dāng)使用加氏乳桿菌(CNCMI-3795)的菌林時(shí)，監(jiān)測(cè)胃及小腸中橙皮苷水解成橙皮素-7-葡糖苷高達(dá)3小時(shí)。該圖顯示細(xì)菌酶在胃中活性低，僅在小腸中水解的橙皮苷的量隨化合物移向胃腸道而減少。圖9圖解當(dāng)使用純的a-鼠李糖苷酶時(shí)，橙皮苷水解成橙皮素-7-葡糖苷的程度。該圖顯示純酶在胃中具有活性，但在胃腸道中活性較低。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及控制哺乳動(dòng)物中含鼠李糖黃酮類化合物吸收的方法，使得攝取所述黃酮類化合物后，在上胃腸道和下胃腸道中或在整個(gè)胃腸道中發(fā)生等量吸收。因此，為了實(shí)現(xiàn)持久和可調(diào)節(jié)的效果，本發(fā)明的基本原則是以可調(diào)方式提供黃酮類化合物的方法，所述黃酮類化合物在哺乳動(dòng)物胃腸道的整個(gè)通道中是至少部分可吸收的形式。通常，黃酮類化合物在上胃腸道及結(jié)腸中是至少部分水解的。才艮據(jù)本發(fā)明，在消化早期(胃、小腸)，a-鼠李糖苷酶的存在一定程度上允許部分剪切含鼠李糖的黃酮類化合物(參考圖3-9)。這導(dǎo)致黃酮類化合物更易吸收并處于消化過程的更早期。此外，結(jié)腸中天然存在的酶促進(jìn)了剪切過程，使得隨后發(fā)生黃酮類化合物在胃腸道中通過時(shí)發(fā)生持續(xù)吸收。因此，本發(fā)明提出包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物和a-鼠李糖苷酶的組合物，其中所述a-鼠李糖苷酶處于基本不能剪切含鼠李糖黃酮類化合物的狀態(tài)。假如滿足了合適條件(環(huán)境、pH、溫度等)，a-鼠李糖苷酶通常具有剪切包含鼠李糖部分的底物的能力。然而在本發(fā)明的組合物中，該酶處于基本阻止執(zhí)行其正常功能的狀態(tài)。僅在才聶入組合物后，酶的環(huán)境改變，才使得新環(huán)境(pH、溫度等)允許所述酶變成有活性的，因而剪切所述黃酮類化合物的鼠李糖部分。因此，在本發(fā)明的組合物、用途或方法中，a-鼠李糖苷酶處于基本不能剪切含鼠李糖黃酮類化合物的狀態(tài)。僅在攝入組合物后，a-鼠李糖苷酶才能夠剪切含鼠李糖的黃酮類化合物。該"延遲的"a-鼠李糖苷酶活性保證僅在攝入之后才發(fā)生a-鼠李糖苷酶剪切黃酮類化合物。因此，僅在胃腸道環(huán)境中才發(fā)生a-鼠李糖苷酶活性。這可根據(jù)本發(fā)明的不同實(shí)施方案，通過若千方法來實(shí)現(xiàn)。例如，這可通過使組合物中的a-鼠李糖苷酶處于"失活"的條件下來實(shí)現(xiàn)，即它不能剪切黃酮類化合物的鼠李糖部分。失活的a-鼠李糖苷酶例如是已經(jīng)用抑制劑處理過的a-鼠李糖苷酶，這樣僅當(dāng)遇到胃腸道環(huán)境時(shí)，所述a-鼠李糖苷酶才能夠成為有活性的?；蛘撸M合物中的環(huán)境例如可以通過具有高pH值使得酶"失活"。攝入之后，胃腸道的低pH將為a-鼠李糖苷酶變得有活性提供有利環(huán)境。根據(jù)另一實(shí)施方案，這可通過將組合物中的a-鼠李糖苷酶與黃酮類化合物分離來實(shí)現(xiàn)。分離是使得所述a-鼠李糖苷酶不直接接觸所述黃酮類化合物。例如可通過本領(lǐng)域已知的方法將a-鼠李糖苷酶封裝來進(jìn)行分離。因此，可將酶封裝，使得其僅在胃腸道環(huán)境下才釋放?；蛘撸ㄟ^將a-鼠李糖苷酶封裝在能夠釋放a-鼠李糖苷酶的微生物中，所述a-鼠李糖苷酶不直接接觸組合物中的黃酮類化合物。該"生物封裝，，可通過纟效生物的產(chǎn)(X-鼠李糖苷酶菌林實(shí)現(xiàn)，所述微生物保存在使其呈現(xiàn)低或零代謝速率的環(huán)境(水活度等)下。組合物中的環(huán)境(水活度等)因而使得微生物在這些環(huán)境下不釋放酶。a-鼠李糖苷酶在微生物的細(xì)胞壁內(nèi)或細(xì)胞壁上被"生物封裝"。因此，在本發(fā)明中，"處于基本不能剪切含鼠李糖黃酮類化合物的鼠李糖部分的狀態(tài)中的Ol-鼠李糖苷酶"是指上文描述的任何形式的酶。當(dāng)產(chǎn)生a-鼠李糖苷酶的微生物用于本發(fā)明的組合物或方法時(shí)，其優(yōu)選為細(xì)菌。更優(yōu)選地，所述微生物選自乳桿菌屬(丄ficto6ad〃附)、雙歧桿菌屬(5zyMo6fl"er/w附)、鏈球菌屬(kS^/^co"'M5")、享L球菌屬(Lflctococcws)、腸球菌屬()、芽孢桿菌屬(必fl"'〃MS)、葡萄球菌屬(iS,fl/7/lj;/0C0CC'M51)、明串珠菌屬(丄eWC7WOS似C)、片球菌屬(尸Cflf/oC0CCMS)、酒球菌屬(6^朋COCC附)等。最優(yōu)選地，所述微生物選自巻曲乳桿菌(ATCC33820)、巻曲乳桿菌(CNCM1-3654)、植物乳桿菌(ATCC8014)、植物乳桿菌(CNCM1-3653)、加氏乳桿菌(CNCMI-3795)或其混合物。因此，選自巻曲乳桿菌(ATCC33820)、巻曲乳桿菌(CNCM1-3654)、植物乳桿菌(ATCC8014)、植物乳桿菌(CNCM1-3653)、加氏乳桿菌(CNCMI-3795)的具有a-鼠李糖苷酶活性的微生物是本發(fā)明的一部分。所述微生物優(yōu)選以10、1(^cfu/g的量存在于本發(fā)明的組合物中。更優(yōu)選以109cfu/g的量存在?？蛇M(jìn)一步將能夠產(chǎn)生a-鼠李糖苷酶的微生物封裝。微生物的封裝是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法。化合物。任何這種含鼠李糖黃酮類化合物可選自橙皮苷、蕓香苷、eriotricin、柚皮苷、新橙皮苷、洋芫荽苷、蒙花苷、枸桔苷、櫻桃苷等和來自該列表的任何可能組合，所述組合包含來自該列表的兩種或更多種組分。優(yōu)選地，所述黃酮類化合物是橙皮苷(圖la)。橙皮苷(圖la)包含蕓香糖(鼠李糖-葡萄糖)部分。在活性a-鼠李糖苷酶的存在下，可在一定程度上將橙皮苷的鼠李糖部分切除以產(chǎn)生橙皮素-7-葡糖苷(圖lb)。同樣，可通過其它酶(例如存在于胃腸道中的葡糖苷酶)進(jìn)一步剪切橙皮素-7-葡糖苷以產(chǎn)生橙皮素(圖lc)。參照?qǐng)D2，可以看出一方面，攝取橙皮素-7-葡萄糖(圖lb)后，橙皮素(圖lc)的血漿水平在攝取后很快顯示尖峰。不希望受理論的束縛，認(rèn)為這是由于存在能夠?qū)⑵咸烟遣糠智谐拿福沟贸绕に厝菀孜?。另一方面，因攝取橙皮苷(圖la)引起的橙皮素血漿水平僅在稍后并以更小程度出現(xiàn)。不希望受理論的束縳，認(rèn)為這是由于僅在穿過胃腸道的較后階段存在能夠剪切橙皮苷的蕓香糖部分的酶。(參考圖2)。9、、、旦、；'此外，根據(jù)本發(fā)明的另一實(shí)施方案，通過包含橙皮苷(圖la)和橙皮素-7-葡糖苷(圖lb)的混合物的組合物也提供了橙皮素的這種持久血漿水平。優(yōu)選地，這些以橙皮苷比橙皮素-7-葡糖苷為70/30至50/50的比例存在于所述組合物中。本發(fā)明組合物中黃酮類化合物的量對(duì)應(yīng)于范圍為0.01mg至lg黃酮類化合物的糖苷配基當(dāng)量的量。優(yōu)選地，所述黃酮類化合物以范圍為10mg至800mg黃酮類化合物的糖苷配基當(dāng)量的量存在。例如，當(dāng)橙皮苷(圖la)用于本發(fā)明的組合物中時(shí)，其以將提供0.01mg至lg，優(yōu)選10mg至800mg相應(yīng)橙皮素(圖lc)的量存在。這通過本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地計(jì)算得到。在本發(fā)明組合物中，a-鼠李糖苷酶以足以提供10-50%的黃酮類化合物糖苷配基或10-50%的糖基化黃酮類化合物形式(其在消化的早期是可吸收的)的量存在。例如，在黃酮類化合物是橙皮苷的情況下，所用a-鼠李糖苷酶的量是足以在上胃腸道(小腸)中提供10-50%的橙皮素-7-葡糖苷(圖lb)或橙皮素(圖lc)的量。這可通過本領(lǐng)域已知的方法(如TNO的TIM-1進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)驗(yàn)證)容易地評(píng)估(參考圖8和9)。優(yōu)選配制本發(fā)明組合物用作營(yíng)養(yǎng)、藥物或化妝品組合物。因此，本發(fā)明組合物可以是干燥組合物、濕組合物或半濕組合物。"干的"指組合物的水活度低于0.6。"半濕的"指組合物的水活度在0.6至0.9之間，"濕的"指組合物的水活度高于0.9。它們可選自液體組合物、干燥組合物或半干燥組合物，如溶液劑、噴霧劑、粉劑、片劑、膠嚢劑、酸乳酪、餅干、奶、飲料、巧克力、冰淇淋、早餐谷類薄片或早餐谷類條、奶粉、豆制品、非乳發(fā)酵產(chǎn)品、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑、食品補(bǔ)充劑、寵物食品、嬰兒配方等。對(duì)于攝食，口服組合物，并且特別是食品補(bǔ)充劑的許多實(shí)施方案是可能的。通過制備糖包衣片劑、明膠膠嚢劑、凝膠劑、乳劑、片劑、膠嚢劑或溶液劑的常用方法制備它們。具體而言，含鼠李糖黃酮類化合物和a-鼠李糖苷酶，或在不同實(shí)施方案中，橙皮苷和橙皮素-7-葡糖苷可摻合到任何其它形式的食品補(bǔ)充劑或濃縮食品中，例如食物條，或壓縮或非壓縮的粉劑中。粉劑可用水、汽水、乳制品或豆制品稀釋，或可摻合到食物條中。組合物可包含常用的賦形劑和成分，例如食品領(lǐng)域中常用的脂肪和/或水性成分、濕潤(rùn)劑、增稠劑、防腐劑、質(zhì)地劑(texturingagent)、調(diào)味劑和/或涂層劑、抗氧化劑、染料。根據(jù)本發(fā)明的其它方面，a-鼠李糖苷酶可用于制備包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物的組合物，其中所述a-鼠李糖苷酶處于基本不能剪切所述黃酮類化合物的鼠李糖部分的狀態(tài)，用于改善所述黃酮類化合物的生物功效和/或生物利用率。"組合物"涵蓋如上描述的本發(fā)明的任何組合物。將生物功效定義為攝取的營(yíng)養(yǎng)物轉(zhuǎn)化成具有顯著生物效應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)物活性形式的比例。它與生物利用率緊密聯(lián)系，將生物利用率定義為物質(zhì)被吸收進(jìn)系統(tǒng)循環(huán)中的程度。通過提高黃酮類化合物的生物功效和/或生物利用率，本發(fā)明提供具有更持久和持續(xù)效應(yīng)的更有效組合物的益處。因此，本發(fā)明也提供用于維持和/或提高含鼠李糖黃酮類化合物的生物利用率的方法，所述方法包括步驟提供包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物和a-鼠李糖苷酶的組合物，所述a-鼠李糖苷酶處于基本不能剪切所述黃酮類化合物的鼠李糖部分的狀態(tài)。攝取橙皮苷(圖la)或攝取橙皮素-7-葡糖苷(圖lc)后與攝取本發(fā)明的組合物后血漿水平的比較顯示出顯著差異。實(shí)際上，攝取本發(fā)明組合物后，橙皮素血漿水平維持了更長(zhǎng)時(shí)間(圖2)。因此，本發(fā)明還包括用于在攝取所述黃酮類化合物后提高含鼠李糖黃酮類化合物的代謝物的血漿水平的方法，所述方法包括步驟經(jīng)口提供包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物和ot-鼠李糖苷酶的組合物，所述a-鼠李糖苷酶處于基本不能剪切所述黃酮類化合物的鼠李糖部分的狀態(tài)。在本發(fā)明方法中，a-鼠李糖苷酶可與包含含鼠李糖黃酮類化合物的組合物分開提供。例如，所述a-鼠李糖苷酶可提供為片劑、膠嚢等以與包含所述黃酮類化合物的組合物被同時(shí)攝取?；蛘撸商峁槔绶蹌┮試姙⒃诤S酮類化合物的組合物上。技術(shù)人員可容易地設(shè)想此處提及的特定實(shí)施方案的多種不同備選方案。另一方面，本發(fā)明組合物可用于化妝品。"化妝品用途"指非治療用途，其可改善人類或?qū)櫸锲つw、皮毛和/或頭發(fā)的美觀方面或舒適度。在該上下文中，化妝品用途可包括防止對(duì)人類或?qū)櫸锏钠つw、皮毛和/或毛發(fā)的損傷和/或改善人類或?qū)櫸锏钠つw、皮毛和/或毛發(fā)。這種損傷特別包括皮膚的光化損傷和老化損傷，如干燥、無規(guī)則色素沉著(特別是雀斑、痣、滴狀色素減少癥和持久的色素沉著過度)、皺紋(顯著的是細(xì)微的表面紋和深皺紋)、星狀假瘢痕、彈性組織變性、無彈性、毛細(xì)血管擴(kuò)張、靜脈湖、粉刺、皮脂腺增生、軟垂疣和脂溢性角化病?；瘖y品用途還對(duì)頭發(fā)和皮毛具有特殊益處，如改善的頭發(fā)或皮毛密度、纖維直徑、色澤、油性、光澤度、皮脂產(chǎn)生，并且可幫助預(yù)防頭發(fā)或皮毛脫落。本發(fā)明還包括治療用途，如皮膚病學(xué)用途。實(shí)際上，a-鼠李糖苷酶和至少一種含鼠李糖黃酮類化合物(其中所述a-鼠李糖苷酶處于基本不能剪切所述黃酮類化合物的狀態(tài))在制備用于改善皮膚健康的組合物中的用途屬于本發(fā)明的另一方面。所述組合物也可用于預(yù)防炎癥或用于改善骨和/或心血管健康。"組合物"涵蓋如上描述的本發(fā)明的任何組合物。在該實(shí)施方案中，本發(fā)明組合物可用于治療和/或預(yù)防皮膚損傷，所述損傷例如由壓力環(huán)境產(chǎn)生，例如通過化學(xué)、生物或物理壓力，例如通過暴露于氧化劑或致癌物，暴露于細(xì)菌、病毒、真菌、來自周圍細(xì)胞和/或微生物的脂類，或暴露于紫外線照射產(chǎn)生。這些損傷還包含光化性角化病、紫癥、櫻桃樣血管性水腫(cherryangiodema)、基底細(xì)胞癌和鱗狀上皮細(xì)胞癌、皮膚燒傷和/或起泡、表皮增生、炎癥、免疫抑制和癌癥，例如非黑素瘤和黑素瘤皮膚癌。量，所述方法包括最小紅斑量(MED)、比色法、經(jīng)皮失水、DNA^f"復(fù)、測(cè)定白細(xì)胞介素和蛋白聚糖的產(chǎn)生、或膠原酶活性、屏障功能或細(xì)胞更新。因此，用于改善皮膚健康的方法也屬于本發(fā)明的一個(gè)方面，所述方法包括步驟經(jīng)口施用包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物和a-鼠李糖苷酶的組合物，或經(jīng)口分別和同時(shí)施用包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物和a-鼠李糖苷酶的組合物，所述a-鼠李糖苷酶處于基本不能剪切所述黃酮類化合物的鼠李糖部分的狀態(tài)。該方法也用于改善心血管和骨健康。將理解本發(fā)明的概念同樣可用作輔助目前所用的藥療法的輔助療法。因?yàn)楸景l(fā)明組合物可容易地與食物材料一起經(jīng)口施用，所以可施用含高含量目的物質(zhì)的特殊臨床食物。此外，本發(fā)明的概念同樣可擴(kuò)展到包含含鼠李糖黃酮類化合物和a-鼠李糖苷酶的組合物的局部應(yīng)用。通過下文描述的非限制性實(shí)施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明。實(shí)施例實(shí)施例1材料橙皮苷酶"Amano"Conc.(A.MANOPHARMACEUTICALCO.LTD.)。在體外通過細(xì)菌粗提物剪切橙皮苷為了測(cè)試細(xì)菌(X-鼠李糖苷酶是否能識(shí)別并剪切作為底物的橙皮苷，在鼠李糖存在下生長(zhǎng)的細(xì)胞的粗提物與橙皮苷在pH4和pH6溫育4小時(shí)和8小時(shí)，并通過HPLC完成分析。在下表中將結(jié)果表示為橙皮苷或其衍生物基于反應(yīng)起始時(shí)總的橙皮苷量(0.08mg/mL)的百分比。用0.08mg橙皮苷/mL(其為旨在獲得終產(chǎn)物的橙皮苷的近似濃度)和3xl09細(xì)菌/mL的粗提物進(jìn)行測(cè)試。結(jié)果顯示兩種菌林均具有a-鼠李糖苷酶和(5-葡糖苷酶活性，并因此根據(jù)反應(yīng)條件，將橙皮苷剪切成為不同程度的橙皮素-7-葡糖苷和糖苷配基。該結(jié)果提示細(xì)菌可用于在原位將橙皮苷部分轉(zhuǎn)化成為橙皮素-7-葡糖苷和糖苷配基。<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>實(shí)施例2將0.2至50mg的橙皮普/g產(chǎn)物與lt)7-1010cfu/(g產(chǎn)物)的a-鼠李糖苦酶活性細(xì)菌混合。所得混合物與合適載體混合。載體可選自發(fā)酵乳、酸乳酪、新鮮干酪、粗制乳、糕點(diǎn)條、早餐谷類薄片或條、飲料、奶粉、豆制品、非乳發(fā)酵產(chǎn)品。權(quán)利要求1.組合物，其包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物和α-鼠李糖苷酶。2.權(quán)利要求1的組合物，其中所述a-鼠李糖苷酶處于基本不能剪切所述黃酮類化合物的鼠李糖部分的狀態(tài)。3.權(quán)利要求1或2的組合物，其中所述a-鼠李糖苷酶不直接與所述黃酮類化合物接觸。4.權(quán)利要求1至3任何一項(xiàng)的組合物，其中所述a-鼠李糖苷酶被封裝。5.權(quán)利要求4的組合物，其中所述a-鼠李糖苷酶被封裝在能產(chǎn)生a-鼠李糖苷酶的微生物中。6.權(quán)利要求5的組合物，其中所述微生物是細(xì)菌。7.權(quán)利要求6的組合物，其中所述微生物選自乳桿菌屬、雙歧桿菌屬、鏈球菌屬、乳球菌屬、腸球菌屬、芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、明串珠菌屬、片球菌屬、酒球菌屬等。8.權(quán)利要求5至7任何一項(xiàng)的組合物，其中所述微生物選自巻曲乳桿菌ATCC33820、巻曲乳桿菌CNCM1-3654、植物乳桿菌ATCC8014、植物乳桿菌CNCM1-3653、加氏乳桿菌CNCM1-3795或其混合物。9.權(quán)利要求5至8任何一項(xiàng)的組合物，其中所述微生物以106-101Gcfu/g的量存在。10.權(quán)利要求5至9任何一項(xiàng)的組合物，其中將能產(chǎn)生a-鼠李糖苷酶的所述孩t生物封裝。11.前述權(quán)利要求的任何一項(xiàng)的組合物，其中所述黃酮類化合物是橙皮苷。12.權(quán)利要求ll的組合物，其中所述a-鼠李糖苷酶以足以在上胃腸道中提供10-50%的橙皮素7-葡糖苷或橙皮素的量存在。13.前述權(quán)利要求任何一項(xiàng)的組合物，其中所述含鼠李糖黃酮類化合物以對(duì)應(yīng)于0.01mg至lg黃酮類化合物的糖苷配基當(dāng)量的量存在。14.權(quán)利要求13的組合物，其中所述含鼠李糖黃酮類化合物以對(duì)應(yīng)于10mg至800mg黃酮類化合物的糖苦配基當(dāng)量的量存在。15.前述權(quán)利要求任何一項(xiàng)的組合物，配制所述組合物用作營(yíng)養(yǎng)、藥物或化妝品組合物。16.前述權(quán)利要求任何一項(xiàng)的組合物，其選自液體組合物、干燥組合物或半干燥組合物，如溶液劑、噴霧劑、粉劑、片劑、膠嚢劑、酸乳酪、餅干、奶、飲料、巧克力、冰淇淋、早餐谷類薄片或早餐谷類條、奶粉、豆制品、非乳發(fā)酵產(chǎn)品、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑、食品補(bǔ)充劑、寵物食品、嬰兒配方等。17.包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物和a-鼠李糖苷酶的組合物，其用于提高所述黃酮類化合物的生物功效和/或生物利用率。18.包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物和a-鼠李糖苷酶的組合物，其用于改善皮膚健康。19.具有ot-鼠李糖苷酶活性的細(xì)菌，其選自巻曲乳桿菌、植物乳桿菌、加氏乳桿菌、嗜酸乳桿菌或腸膜明串珠菌。20.權(quán)利要求19的細(xì)菌，其為巻曲乳桿菌ATCC33820、巻曲乳桿菌CNCM1-3654、植物乳桿菌ATCC8014、植物乳桿菌CNCM1-3653或加氏乳桿菌CNCM1-3795。21.a-鼠李糖苷酶在制備包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物的組合物中的用途，所述組合物用于提高所述黃酮類化合物的生物功效和/或生物利用率。22.a-鼠李糖苷酶和至少一種含鼠李糖黃酮類化合物在制備用于改善皮膚健康的組合物中的用途。23.權(quán)利要求21或22的用途，其中所述a-鼠李糖苷酶處于基本不能剪切所述黃酮類化合物的鼠李糖部分的狀態(tài)。24.權(quán)利要求21到23的用途，其中所述a-鼠李糖苷酶不直接與所述黃酮類化合物接觸。25.權(quán)利要求24的用途，其中所述a-鼠李糖苷酶被封裝。26.權(quán)利要求25的用途，其中所述ot-鼠李糖苷酶被封裝在能產(chǎn)生a-鼠李糖苷酶的微生物中。27.權(quán)利要求26的用途，其中所述微生物是細(xì)菌。28.權(quán)利要求27的用途，其中所述微生物選自乳桿菌屬、雙歧桿菌屬、鏈球菌屬、乳球菌屬、腸球菌屬、芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、明串珠菌屬、片球菌屬、酒球菌屬等。29.權(quán)利要求26至28任何一項(xiàng)的用途，其中所述微生物選自巻曲乳桿菌ATCC33820、巻曲乳桿菌CNCM1-3654、植物乳桿菌ATCC8014、植物乳桿菌CNCM1-3653、加氏乳桿菌CNCM1-3795或其混合物。30.權(quán)利要求26至29任何一項(xiàng)的用途，其中所述微生物以106-1010cfu/g的量存在。31.權(quán)利要求26至30任何一項(xiàng)的用途，其中能產(chǎn)生a-鼠李糖苷酶的所述微生物被封裝。32.權(quán)利要求26至31任何一項(xiàng)的用途，其中所述黃酮類化合物是橙皮苷。33.權(quán)利要求32的用途，其中所述a-鼠李糖苷酶以足以在上胃腸道中提供10-50%的橙皮素7-葡糖苷或橙皮素的量存在。134.權(quán)利要求23至33任何一項(xiàng)的用途，其中所述含鼠李糖黃酮類化合物以對(duì)應(yīng)于0.01mg至lg黃酮類化合物的糖苷配基當(dāng)量的量存在。35.權(quán)利要求34的用途，其中所述含鼠李糖黃酮類化合物以對(duì)應(yīng)于10mg至800mg黃酮類化合物的糖苷配基當(dāng)量的量存在。36.權(quán)利要求23至35任何一項(xiàng)的用途，其中所述組合物是酸乳酪、餅干、奶、飲料、巧克力、冰淇淋、早餐谷類薄片或早餐谷類條、奶粉、豆制品、非乳發(fā)酵產(chǎn)品或營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑、食品補(bǔ)充劑、寵物食品、嬰兒配方等形式。37.權(quán)利要求1至16任何一項(xiàng)的組合物的化妝品用途。38.權(quán)利要求37的用途，其用于預(yù)防對(duì)人類或?qū)櫸锲つw、皮毛和/或毛發(fā)的損傷和/或改善人或?qū)櫸锲つw、皮毛和/或毛發(fā)。39.用于維持和/或提高含鼠李糖黃酮類化合物的生物利用率的方法，所述方法包括步驟提供包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物和a-鼠李糖苷酶的組合物。40.用于在攝取含鼠李糖黃酮類化合物后延長(zhǎng)所述含鼠李糖黃酮類化合物的代謝物的血漿水平的方法，所述方法包括步驟經(jīng)口提供包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物和a-鼠李糖苷酶的組合物。41.權(quán)利要求39或40任何一項(xiàng)的方法，其中所述a-鼠李糖苷酶處于基本不能剪切所述黃酮類化合物的鼠李糖部分的狀態(tài)。42.權(quán)利要求39至41的方法，其中所述a-鼠李糖苷酶不與所述黃酮類化合物直接接觸。43.權(quán)利要求42的方法，其中所述a-鼠李糖普酶與包含含鼠李糖黃酮類化合物的組合物分開提供。44.權(quán)利要求43的方法，其中所述a-鼠李糖苷酶被封裝。45.權(quán)利要求44的方法，其中將所述a-鼠李糖苷酶封裝入能產(chǎn)生a-鼠李糖苷酶的微生物中。46.權(quán)利要求45的方法，其中所述微生物是細(xì)菌。47.權(quán)利要求46的方法，其中所述微生物選自乳桿菌屬、雙歧桿菌屬、鏈球菌屬、乳球菌屬、腸球菌屬、芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、明串珠菌屬、片球菌屬、酒球菌屬等。48.權(quán)利要求45至47任何一項(xiàng)的方法，其中所述微生物選自巻曲乳桿菌ATCC33820、巻曲乳桿菌CNCM1-3654、植物乳桿菌ATCC8014、植物乳桿菌CNCM1-3653、加氏乳桿菌CNCM1-3795或其混合物。49.權(quán)利要求45至48任何一項(xiàng)的方法，其中所述微生物以10、1010cfu/g的量存在。50.權(quán)利要求45至49任何一項(xiàng)的方法，其中能產(chǎn)生a-鼠李糖苷酶的所述微生物被封裝。51.權(quán)利要求39至50任何一項(xiàng)的方法，其中所述黃酮類化合物是橙皮苷。52.權(quán)利要求51的方法，其中a-鼠李糖苷酶以足以在上胃腸道中提供10-50%的橙皮素7-葡糖苷或橙皮素的量存在。53.權(quán)利要求41至52任何一項(xiàng)的方法，其中所述含鼠李糖黃酮類化合物以對(duì)應(yīng)于0.01mg至lg，優(yōu)選對(duì)應(yīng)于10mg至800mg黃酮類化合物的糖苷配基當(dāng)量的量存在。54.用于改善皮膚健康的方法，其包括步驟施用包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物和a-鼠李糖苷酶的組合物，或分別和同時(shí)施用包含至少一種含鼠李糖黃酮類化合物和a-鼠李糖苷酶的組合物，所述a-鼠李糖苷酶處于基本不能剪切所述黃酮類化合物的鼠李糖部分的狀態(tài)。55.包含橙皮苷和橙皮素-7-葡糖苷的混合物的組合物。56.權(quán)利要求55的組合物，其中所述橙皮苷和橙皮素-7-葡糖苷以70/30至50/50的比例存在于所述組合物中。全文摘要本發(fā)明涉及用于長(zhǎng)期并持續(xù)釋放黃酮類化合物，特別是含鼠李糖黃酮類化合物，和延長(zhǎng)所述黃酮類化合物在胃腸道中的吸收的方法。還涉及包含所述黃酮類化合物和α-鼠李糖苷酶的組合物。也包括包含橙皮苷和橙皮素-7-葡糖苷的組合物。文檔編號(hào)A61Q19/00GK101516392SQ200780035415公開日2009年8月26日申請(qǐng)日期2007年8月22日優(yōu)先權(quán)日2006年8月24日發(fā)明者G·威廉森,I·揚(yáng)科維奇,M·里查爾,M·雷恩申請(qǐng)人:雀巢產(chǎn)品技術(shù)援助有限公司