專利名稱：：堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子及其組合物在制備美容化妝品中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明提供了堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子的新用途，尤其是公開了堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子及其組合物在制備美容化妝品中的用途，同時(shí)還提供了其生產(chǎn)工藝，屬于生物美容制品
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：本發(fā)明涉及的堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(BasicFibroblastGrowthFactor,簡(jiǎn)稱bFGF)，是主要由大腦和腦垂體中的星形膠質(zhì)細(xì)胞、垂體濾泡及部分神經(jīng)細(xì)胞所分泌的一種促細(xì)胞分裂生長(zhǎng)因子。bFGF的基因定位于染色體4q26227,其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA有多個(gè)拼切位點(diǎn)及多個(gè)翻譯起始位點(diǎn),由此產(chǎn)生多種分子量的bFGF,小分子量18Kd的bFGF多由AUG起始翻譯,分泌到胞外的bFGF以這種亞型多見。高分子量21kD、22.5kD、24kD、34kD的bFGF以CUG為翻譯起始點(diǎn)，主要定位于胞核中。不象其他細(xì)胞分泌性蛋白,bFGF缺少典型的信號(hào)肽,不能通過經(jīng)典的高爾基2內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑分泌到胞外,但具體機(jī)制至今仍不詳。現(xiàn)今研究的bFGF的生物學(xué)活性主要是針對(duì)18Kd的亞型。bFGF能刺激和調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、成肌細(xì)胞、成骨細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞等多種起源于中胚層、神經(jīng)外胚層的細(xì)胞分化增飱，在胚胎發(fā)育、組織愈合中起重要作用。目甜bFGF的研究或應(yīng)用均局限在促進(jìn)神經(jīng)損傷的修復(fù)方面，尚未見有其在美容方面的研究或應(yīng)用。本發(fā)明涉及的hGM-CSF是人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(Humangranulocytemacrophagecolonystimulatingfactor)的簡(jiǎn)稱，是人體內(nèi)分泌的一種重要的促細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的細(xì)胞剌激因子，具有顯著的誘導(dǎo)未成熟的骨髓細(xì)胞前體細(xì)胞增殖和成熟等功能。它由T細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、肥大細(xì)胞、B細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等分泌。根據(jù)其糖基化程度不同，分為9個(gè)以上不同的類型，分子量從14.5-32kd不等。hGM-CSF作為一種強(qiáng)有力的細(xì)胞分裂因子，具有很高的生物活性。極微量hGM-CSF即能強(qiáng)烈促進(jìn)相關(guān)細(xì)胞的增殖和成熟。目前，hGM-CSF的研究和應(yīng)用均局限在治療腫瘤放化療后的白細(xì)胞減少、骨髓移植和再生障礙性貧血等方面，hGM-CSF還作為疫苗佐劑使用。尚未發(fā)現(xiàn)hGM-CSF在美容方面的研究和應(yīng)用。另外，將hGM-CSF和bFGF組合在一起，應(yīng)用于人的美容，目前也未見文獻(xiàn)報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明公開了一種堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子在制備美容化妝品中的用途。本發(fā)明還公開了堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子組合物在制備美容化妝品中的應(yīng)用。本發(fā)明的技術(shù)解決方案包括1、以堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子為主要活性成分，采用特殊的真空冷凍干燥工藝及常規(guī)的美容化妝品生產(chǎn)工藝制成化妝品。2、本發(fā)明還提供了一種含有bFGF、hGM-CSF為主要活性成分的美容化妝品(重量份數(shù)比)bFGF110萬AUhGM-CSF3002000ug活性穩(wěn)定劑4~8g活性促進(jìn)劑0.33g蛋白酶抑制劑0.10.6g透皮吸收促進(jìn)劑0.12g所用的蛋白酶抑制劑為硼酸亮氨酸、硼酸纈氨酸、硼酸丙氮酸、N-乙酰半胱氨酸中的任意一種。所用的透皮吸收促進(jìn)劑為月桂氮卓酮、丙二醇、巰基乙酸鈣中的任意一種。所用的活性穩(wěn)定劑為透明質(zhì)酸、甘露醇、右旋糖苷的任意一種；所用的活性促進(jìn)進(jìn)劑為水溶性膠原蛋白。所述的美容化妝品的制備方法，包括以下步驟在bFGF中加入活性穩(wěn)定劑、活性促進(jìn)劑、蛋白酶抑制劑及透皮吸收促進(jìn)劑的任意一種或多種，用純化水配制成水溶液，再采用真空冷凍干燥工藝制成凍干粉。也可在上述歩驟中同時(shí)加入hGM-CSF，制成美容化妝品。本發(fā)明的技術(shù)方案中涉及以下成分活性成分bFGF、hGM-CSF;活性穩(wěn)定劑透明質(zhì)酸、甘露醇、右旋糖苷；活性促進(jìn)劑水溶性膠原蛋白；蛋白酶抑制劑硼酸亮氨酸、硼酸纈氨酸、硼酸丙氨酸、N-乙酰半胱氨酸；透皮吸收促進(jìn)劑佐恩(月桂氮卓酮，Azone)、丙二醇、巰基乙酸鈣。在上述的活性成分中加入活性穩(wěn)定劑、活性促進(jìn)劑、蛋白酶抑制劑及透皮吸收促進(jìn)劑中的任意一種或多種，用低溫純化水配制成水溶液，并置于冰浴中，待分裝。將上述配制而得的水溶液，分裝到西林瓶中，置于真空冷凍干燥機(jī)中進(jìn)行凍干后即得。專用溶媒的制造透皮吸收促進(jìn)劑0.12份蛋白酶抑制劑0.10.6份活性穩(wěn)定劑4~8份丙三醇2~6份pH5.07.4PBS溶液加至100份按上述比例將透皮吸收促進(jìn)齊U、蛋白酶抑制劑、活性穩(wěn)定劑混合，用PBS溶液溶解，加入丙三醇，混勻，分裝，加塞，用流通蒸汽滅菌后即得。凍干粉的制劑制造按上述比例將活性成分、活性穩(wěn)定劑、活性促進(jìn)劑和/或活性穩(wěn)定劑和/或蛋白酶抑制劑和/或透皮吸收促進(jìn)劑，用低溫純化水配制成水溶液，并置于冰浴中；將上述配制而得的水溶液，分裝到西林瓶中，將膠塞半加塞，置于真空冷凍干燥機(jī)中進(jìn)行凍干。凍干工藝及條件為開啟真空冷凍干燥機(jī)，對(duì)制品進(jìn)行預(yù)冷，將制品溫度降至-60°C，降溫時(shí)間為4-5小時(shí)。啟動(dòng)真空泵，將箱內(nèi)真空度抽至0.3Mbar。加溫，升華，升華時(shí)間為14-18小時(shí)，升華完畢，壓塞，箱內(nèi)充入無菌氣體，開箱，取出制品，軋蓋，入庫。產(chǎn)品形式為凍干粉加專用溶媒，使用時(shí)需用專用溶媒作溶解劑。專用溶媒的配方及工藝為將透皮吸收促進(jìn)劑、蛋白酶抑制劑、活性穩(wěn)定劑，用pH5.07.4PBS溶液溶解，加入丙三醇，混勻，分裝，加塞，用10(TC流通蒸汽滅菌30分鐘后即得?；钚苑€(wěn)定劑可用其中的一種或幾種，但三種活性穩(wěn)定劑及一種活性促進(jìn)劑同時(shí)使用效果最佳。透皮吸收促進(jìn)劑及蛋白酶抑制劑在組方中每次一般只用其中的一種，也可幾種合用，其效果類似。以下實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明的美容效果1材料活性成分bFGF和hGM-CSF，均為市售品，也可采用基因工程法自行生產(chǎn)。使用前要進(jìn)行活性測(cè)定，bFGF活性測(cè)定采用的是細(xì)胞增殖/MTT法，hGM-CSF的活性測(cè)定采用的是TF-1細(xì)胞/MTT比色法，兩種方法的具體操作方法均見中國(guó)藥典2005版?；钚苑€(wěn)定劑透明質(zhì)酸、甘露醇、右旋糖苷。市售，化學(xué)純?；钚源龠M(jìn)劑水溶性膠原蛋白，市售，純度大于95%。蛋白酶抑制劑硼酸亮氨酸、硼酸纈氨酸、硼酸丙氨酸、N-乙酰半胱氨酸，市售，化學(xué)純。透皮吸收促進(jìn)劑佐恩(月桂氮卓酮，Azone)、丙二醇、巰基乙酸鈣。市售，化學(xué)純。蛋白酶胃蛋白酶、胰蛋白酶，市售，化學(xué)純。2方法2.1凍干粉制劑的制造參見上文2.2專用溶媒的制造參見上文2.3抗蛋白酶降解試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)品將上述制造的含有活性成分的凍干粉制劑用專用溶媒溶解，制成水溶液，并分別測(cè)定其兩種活性成分的活性，以此活性值作為100%?；钚詼y(cè)定的方法同上。對(duì)照品除不含有蛋白酶抑制劑外，其余同實(shí)驗(yàn)品。用純化水制成水溶液，并分別測(cè)定其兩種活性成分的活性，以此活性值作為100%。蛋白酶溶液將胃蛋白酶及胰蛋白酶，用純化水配成含1%胃蛋白酶及1%的胰蛋白酶的混合水溶液。分別取實(shí)驗(yàn)品及對(duì)照品各20ml，分別加入蛋白酶溶液0.5ml，混勻，置37'C水浴中孵育，分別于不同的時(shí)間取樣，進(jìn)行活性測(cè)定。2.4穩(wěn)定性試驗(yàn)取上述制得的含有兩種活性成分的凍干粉制劑，分別置于室溫及7'C冰箱中，分別于放置不同的時(shí)間后取樣，進(jìn)行含量及活性測(cè)定。2.5美容效果試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)品1:含有bFGF及hGM-CSF的凍干制劑實(shí)驗(yàn)品2:只含有hGM-CSF的凍干制劑實(shí)驗(yàn)品3:只含有bFGF的凍干制劑空白對(duì)照品既不含bFGF也不含hGM-CSF的凍干制劑市售對(duì)照品市售某品牌嫩膚美容產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)品13及空白對(duì)照品，在使用前均用專用溶媒溶解，之后，涂布于面部皮膚，并用特定的方法進(jìn)行導(dǎo)入。分別進(jìn)行如下美容效果試驗(yàn)2.5.1嫩膚、去皺試驗(yàn)選取4055歲老年人200人，男女各半。隨機(jī)分為5組，每組40人，男女各半。每組分別使用上述實(shí)驗(yàn)品或空白對(duì)照品，連續(xù)2個(gè)月，然后分別評(píng)價(jià)其嫩膚、去皺的美容效果。2,5.2祛斑試驗(yàn)選取2035歲面部有色斑的女性160人，隨機(jī)分為4組，每組40人。每組分別使用上述各實(shí)驗(yàn)品或空白對(duì)照品，連續(xù)2個(gè)月，然后分別評(píng)價(jià)其祛斑效果。2.5.3祛痘試驗(yàn)選取1825歲面部有青春痘的人160人，男女各半，隨機(jī)分為4組，每組40人，男女各半。每組分別使用上述各實(shí)驗(yàn)品或空白對(duì)照品，連續(xù)2個(gè)月，然后分別評(píng)價(jià)其祛痘效果。2.5.4安全性試驗(yàn)在上述嫩膚去皺試驗(yàn)、祛斑試驗(yàn)及祛痘試驗(yàn)中，同時(shí)觀察其對(duì)皮膚的刺激性、過敏性及其它不良反應(yīng)。3結(jié)果3.1凍干粉制劑的制造結(jié)果經(jīng)上述工藝制造出來的凍干粉制劑，外觀呈疏松的塊狀或粉狀，呈白色或類白色。加水極易溶解，溶解后呈澄清透明的溶液。經(jīng)微生物學(xué)檢測(cè)，未檢出活的微生物，為無菌溶液。超過國(guó)家有關(guān)化妝品的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。3.2專用溶媒的制造結(jié)果經(jīng)上述工藝制造出來的專用溶媒，外觀澄清透明。經(jīng)微生物學(xué)檢測(cè)，未檢出活的微生物，為無菌溶液。超過國(guó)家有關(guān)化妝品的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。3.3抗蛋白酶降解試驗(yàn)結(jié)果表1抗蛋白酶降解試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>由上表可以看出，實(shí)驗(yàn)組在37。C溫度下與胃蛋白酶及胰蛋白酶共同作用30分鐘后，其活性基本不下降，作用1小時(shí)后，其活性仍降低很少。而對(duì)照組在與蛋白酶共同作用IO分鐘后，其活性即只剩原來的四分之一以下。結(jié)果說明，本發(fā)明之制品具有良好的抗蛋白酶降解作用。而用本品進(jìn)行美容護(hù)膚時(shí)，制品在皮膚上的停留并導(dǎo)入的時(shí)間不超過20分鐘，故本發(fā)明之制品的抗蛋白酶降解作用的時(shí)間是足夠的。3.4穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表2穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>從上表可以看出，本發(fā)明之制品，在常溫放置及7。C下放置至36個(gè)月時(shí)，其含量均未見明顯變化；在常溫下放置至18個(gè)月時(shí)，其活性未見明顯變化；在7'C下放賈至30個(gè)月時(shí)，其活性仍未見明顯變化。結(jié)果表明，本發(fā)明之制品，可在常溫下保存18個(gè)月，如置于7"C以下，則保存時(shí)間更長(zhǎng)，可長(zhǎng)達(dá)2.5年以上。3.5美容效果試驗(yàn)結(jié)果3.5.1嫩膚、去皺試驗(yàn)結(jié)果表3嫩膚、去皺試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>hGM-CSF組4077.517.55.0bFGF組4085.012.52.5空白對(duì)照組4000100市售品對(duì)照組40047.552.5由上表可以看出，bFGF、hGM-CSF單獨(dú)使用即有較好的嫩膚去皺效果；bFGF與hGM-CSF合用，嫩膚去皺的效果最佳；不含有bFGF和hGM-CSF的空白對(duì)照組，沒有嫩膚去皺的效果；hGM-CSF與bFGF組、hGM-CSF組及bFGF組的美容效果均顯著優(yōu)于市售對(duì)照品組。3.5.2祛斑試驗(yàn)結(jié)果表4祛斑試驗(yàn)結(jié)果組別例數(shù)(人)祛斑效果(％)顯著一般不明顯bFGF及hGM-CSF組4072.520.07.5hGM-CSF組40復(fù)035.025.0bFGF組4055.035.010.0空白對(duì)照組4000100由上表可以看出，bFGF和hGM-CSF組、hGM-CSF組及bFGF組均具有較好的祛斑效果，其中，hGM-CSF和bFGF組合使用，祛斑效果最佳。3.5.3祛痘試驗(yàn)結(jié)果表5祛痘試驗(yàn)結(jié)果組別例數(shù)(人)祛痘效果(％)顯著一般不明顯bFGF及hGM-CSF組3066.720.013.3hGM-CSF組3060.026.613.4bFGF組3043.336.720.0空白對(duì)照組3000100由上表可以看出，bFGF和hGM-CSF組、hGM-CSF組及bFGF組均具有較好的祛痘效果，其中，hGM-CSF和bFGF合用，祛痘效果最佳。3.6安全性試驗(yàn)結(jié)果表6安全性試驗(yàn)結(jié)果例數(shù)(人)安全性試驗(yàn)結(jié)果(％)皮膚刺激性過敏反應(yīng)其它不良反應(yīng)72001.10.7經(jīng)720人使用后，未發(fā)現(xiàn)對(duì)皮膚有刺激性，只發(fā)現(xiàn)8人面部輕度過敏，有5人局發(fā)癢或潮紅。10本發(fā)明將bFGF和hGM-CSF應(yīng)用于美容時(shí)，解決了三個(gè)嚴(yán)重的問題，否則其將無法實(shí)際應(yīng)用。艮P:(1)bFGF及hGM-CSF在常溫下難以保持其生物學(xué)活性。在常溫下放置短時(shí)間后，其即失去其生物學(xué)活性，故其生產(chǎn)、運(yùn)輸、保存都成為不可逾越的鴻溝，使其實(shí)際應(yīng)用難以實(shí)現(xiàn)。另外，其發(fā)揮生物學(xué)活性需特定的pH值、離子強(qiáng)度及溫度，故制成霜?jiǎng)┑瘸Ｒ娀瘖y品劑型，其將不具有任何生物學(xué)活性。(2)bFGF及hGM-CSF易被蛋白酶降解而失去活性。bFGF及hGM-CSF的化學(xué)本質(zhì)為蛋白多肽類，人皮膚表面存在大量的蛋白酶，在bFGF接觸皮膚后，會(huì)很快被皮膚表面的蛋白酶降解而失去活性。(3)bFGF及hGM-CSF難以透皮吸收。bFGF及hGM-CSF均是大分子生物活性物質(zhì)，在正常情況下，其難以透過皮膚進(jìn)行吸收。本發(fā)明成功地解決了上述難題，使bFGF及hGM-CSF應(yīng)用于美容成為現(xiàn)實(shí)。本發(fā)明的有益效果在于將bFGF及與hGM-CSF組合用于外用美容，兩種生物活性成分聯(lián)合應(yīng)用，通過補(bǔ)充促進(jìn)細(xì)胞代謝和增殖的生物活性因子，從根本上改善皮膚的生理狀態(tài)，促進(jìn)皮膚組織的修復(fù)和代謝；使皮膚異常細(xì)嫩年輕；淡化色斑，平復(fù)皺紋；減輕R曬對(duì)皮膚的損傷；并具有顯著抗衰老作用。故嫩膚美容效果顯著，且安全可靠，無副作用。bFGF及hGM-CSF聯(lián)合應(yīng)用，其組方中各成分可相互協(xié)同，較單用bFGF或hGM-CSF，可顯著促進(jìn)人上皮組織的生成和增殖，美容效果顯著增強(qiáng)。將透皮吸收促進(jìn)劑應(yīng)用于bFGF和域hGM-CSF的美容組方中，解決了bFGF及hGM-CSF難以透皮吸收的問題，顯著地提高了其美容效果。將蛋白酶抑制劑應(yīng)用于bFGF及hGM-CSF的美容組方中，解決了bFGF及hGM-CSF易被蛋白酶降解的問題，保持了bFGF及hGM-CSF的活性，促進(jìn)了bFGF及hGM-CSF的吸收，顯著地提高了其嫩膚美容的效果。將bFGF及hGM-CSF制成凍干粉制劑，解決了其在常溫下易失去活性的問題。該配方制成的凍干粉劑，可在常溫下可保持活性18個(gè)月；在07卩冷庫中，可保持活性2.5年以上。故可常溫運(yùn)輸和保存，如置于冷庫或冰箱中保持，效果更佳。解決了bFGF及hGM-CSF的生產(chǎn)、運(yùn)輸和保存時(shí)無法保持活性的問題，使bFGF及hGM-CSF的實(shí)際應(yīng)用成為現(xiàn)實(shí)。其制造工藝合理，適合于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。具體實(shí)施方式通過以下實(shí)施例進(jìn)一歩舉例描述本發(fā)明，并不以任何方式限制本發(fā)明，在不背離本發(fā)明的技術(shù)解決方案的前提下，對(duì)本發(fā)明所作的本領(lǐng)域普通技術(shù)人員容易實(shí)現(xiàn)的任何改動(dòng)或改變都將落入本發(fā)明的權(quán)利要求范圍之內(nèi)。主要材料活性成分bFGF及hGM-CSF?？勺孕兄圃?，也可外購購獲得。其主要工藝過程為將bFGF及hGM-CSF工程菌在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，離心取菌體，用PBS液洗滌兩次，置抽提液中抽提。離心取上清，鹽析。離心，取沉淀。將沉淀復(fù)溶，用層析法進(jìn)行純化，收集bFGF及hGM-CSF峰，置-20'C低溫冰柜中凍存。取樣進(jìn)行純度及活性測(cè)定?；钚苑€(wěn)定劑透明質(zhì)酸、甘露醇、右旋糖苷，市售，化學(xué)純。活性促進(jìn)劑水溶性膠原蛋白，市售，純度大于95%。蛋白酶抑制劑硼酸亮氨酸、硼酸纈氨酸、硼酸丙氨酸、N-乙酰半胱氨酸，化學(xué)純。透皮吸收促進(jìn)劑佐恩(月桂氮卓酮，Azone)、丙二醇、巰基乙酸鈣。化學(xué)純。實(shí)施例l:量取bFGF24萬AU、hGM-CSF300700ug、透明質(zhì)酸16g、甘露醇38g、右旋糖苷38g、水溶性膠原蛋白16g、純化水加至100ml;將上述各成分溶解于低溫純化水中，分裝，凍干，即得。實(shí)施例2:量取bFGF4002000ug、透明質(zhì)酸16g、甘露醇38g、右旋糖苷388g、水溶性膠原蛋白16g、純化水加至100ml，將上述各成分溶解于低溫純化水中，分裝，凍干，即得。實(shí)施例3-量取hGM-CSF7002000wg、WGF0.12萬AU、甘露醇38g、右旋糖苷38g、水溶性膠原蛋白l6g、純化水加至100ml，將上述各成分溶解于低溫純化水中，分裝，凍干，即得。實(shí)施例4:量取bFGF410萬AU、hGM-CSF100300yg、甘露醇38g、右旋糖苷38g、透明質(zhì)酸l6g、純化水加至100ml，將上述各成分溶解于低溫純化水中，分裝，凍干，即得。實(shí)施例5:量取bFGF58萬AU、hGM-CSF200400wg、右旋糖苷38g、水溶性膠原蛋白16g、透明質(zhì)酸l6g、純化水加至100ml，將上述各成分溶解于低溫純化水中，分裝，凍干，即得。實(shí)施例6:量取bFGF24萬AU、hGM-CSF300700ug、甘露醇38g、水溶性膠原蛋白i6g、透明質(zhì)酸16g、純化水加至100ml，將上述各成分溶解于低溫純化水中，分裝，凍干，即得。實(shí)施例7:量取bFGF24萬AU、hGM-CSF300700ug、甘露醇38g、透明質(zhì)酸16g、純化水加至100ml，將上述各成分溶解于低溫純化水中，分裝，凍干，即得。實(shí)施例8:量取bFGF24萬AU、hGM-CSF300700ug、右旋糖苷38g、水溶性膠原蛋白l6g、純化水加至100ml，將上述各成分溶解于低溫純化水中，分裝，凍干，即得。實(shí)施例9:量取bFGF24力'AU、甘露醇38g、右旋糖苷38g、水溶性膠原蛋白16g、純化水加至100ml，將上述各成分溶解于低溫純化水中，分裝，凍干，即得。實(shí)施例10:量取bFGF24萬AU、透明質(zhì)酸l6g、甘露醇38g、右旋糖苷38g、純化水加至100ml，將上述各成分溶解于低溫純化水中，分裝，凍千，即得。實(shí)施例ll:量取bFGF24萬AU、透明質(zhì)酸l6g、右旋糖苷38g、水溶性膠原蛋白l6g、純化水加至100ml，將上述各成分溶解于低溫純化水中，分裝，凍干，即得。實(shí)施例12:量取bFGF24力'AU、透明質(zhì)酸l6g、甘露醇38g、水溶性膠原蛋白l6g、純化水加至100ml，將上述各成分溶解于低溫純化水中，分裝，凍干，即得。實(shí)施例13:量取bFGF24萬AU、甘露醇38g、右旋糖苷38g、純化水加至100ml，將上述各成分溶解于低溫純化水中，分裝，凍干，即得。權(quán)利要求1、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子在美容化妝品中的應(yīng)用。2、一種含有堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子組合物的美容化妝品，主要活性成分為(重量份數(shù)比)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子3002000yg人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子110萬AU3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的美容化妝品，其特征在于人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子3002000ug堿性成纖維細(xì)胞刺激因子110萬AU活性穩(wěn)定劑活性促進(jìn)劑蛋白酶抑制劑透皮吸收促進(jìn)劑48g0.33g0.10.6g0.12g(4、權(quán)利要求2所述的美容化妝品，其特征在于所用的蛋白酶抑制劑為硼酸亮氨酸、硼酸纈氨酸、硼酸丙氨酸、N-乙酰半胱氨酸中的任意一種。5、權(quán)利要求2所述的美容化妝品，其特征在于所用的透皮吸收促進(jìn)劑為月桂氮卓酮、丙二醇、巰基乙酸鈣中的任意一種。6、根據(jù)權(quán)利要求1所述的美容化妝品的制備方法，包括以下步驟在人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落剌激因子、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子中加入活性穩(wěn)定劑、活性促進(jìn)劑、蛋白酶抑制劑、透皮吸收促進(jìn)劑中的任意一種或多種，用純化水配制成水溶液，再采用真空冷凍干燥工藝制成凍干粉；凍干工藝及條件為對(duì)制品進(jìn)行預(yù)冷，使其降至-6(TC，降溫時(shí)間為4-5小時(shí)；抽真空至0.3Mbar;加溫，升華，升華時(shí)間為14-18小時(shí)；至制品中的水分升華完畢，壓塞，箱內(nèi)充入無菌氣體。7、一種與權(quán)利要求1、2、3所述美容化妝品其配合使用的溶媒，由以下重量份數(shù)比的原料制成透皮吸收促進(jìn)劑0.12份蛋白酶抑制劑0.10.6份活性穩(wěn)定劑48份丙三醇2~6份PBS溶液加至100份將透皮吸收促進(jìn)劑+蛋白酶抑制劑+活性穩(wěn)定劑，用PBS溶液溶解，加入丙三醇,混勻，分裝，加塞，用流通蒸汽滅菌后即得。全文摘要本發(fā)明公開了一種堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子及組合物在制備美容化妝品中的用途，同時(shí)還提供了其生產(chǎn)工藝。本發(fā)明利用生物技術(shù)美容，將堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子用于外用美容，并與人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子組合在一起應(yīng)用于美容。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子與人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子兩種生物活性成分聯(lián)合應(yīng)用，各成分相互協(xié)同，通過補(bǔ)充促進(jìn)表皮細(xì)胞代謝和增殖的生物活性因子，從根本上改善皮膚的生理狀態(tài)，促進(jìn)表皮組織的修復(fù)和代謝；可使皮膚異常細(xì)嫩年輕，淡化色斑，平復(fù)皺紋，減輕日曬對(duì)皮膚的損傷，還具有顯著抗衰老作用，嫩膚美容效果顯著，且安全可靠，無副作用。文檔編號(hào)A61Q19/00GK101327172SQ20081005101公開日2008年12月24日申請(qǐng)日期2008年7月23日優(yōu)先權(quán)日2008年7月23日發(fā)明者馮來坤申請(qǐng)人:馮來坤