專利名稱：高純度磷脂的制造方法以及以該方法得到的高純度鞘磷脂和縮醛磷脂型甘油磷脂的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及以簡單的操作從生物材料中，優(yōu)選從家禽類中，收率良好地制造作為 功能性食品原料、醫(yī)藥品原料、化妝品原料等有用的高純度鞘磷脂，特別是人型的鞘磷脂和 高純度縮醛磷脂型甘油磷脂的方法，以及以該方法得到的高純度鞘磷脂和高純度縮醛磷脂 型甘油磷脂。
背景技術(shù)：
脂質(zhì)是指在分子中具有長鏈脂肪酸或類似的烴鏈、存在于生物體內(nèi)或生物由來的 物質(zhì)。這種脂質(zhì)能夠分類為簡單脂質(zhì)和復(fù)合脂質(zhì)。簡單脂質(zhì)由C、H和0構(gòu)成，一般可溶于 丙酮，簡單脂質(zhì)的三酰甘油在動物體中作為能量的儲存體存在于脂肪組織中。另一方面，復(fù) 合脂質(zhì)為含有磷酸的P或堿的N等的脂質(zhì)群。因此，復(fù)合脂質(zhì)包括疏水性部分(脂肪酸部 分)和親水性部分(磷酸或堿的部分)，顯示兩親性，一般而言，相對于上述簡單脂質(zhì)可溶于 丙酮，復(fù)合脂質(zhì)不溶于丙酮。這樣的復(fù)合脂質(zhì)是生物膜的構(gòu)成成分。上述復(fù)合脂質(zhì)能夠大致分為(1)甘油磷脂[包括磷脂酰膽堿(別名卵磷脂)、磷脂 酰乙胺醇等]；(2)鞘磷脂(sphingophospholipids)(包括鞘磷脂(sphingomyelin)、神經(jīng) 酰胺氨乙基膦酸等)；C3)鞘糖脂(包括腦苷脂、硫苷脂、神經(jīng)節(jié)苷脂等)以及(4)甘油糖脂 (有存在于微生物或高等植物中的與二酰甘油結(jié)合各種糖類的物質(zhì)等)。另外，上述(2)鞘 氨醇磷脂和( 鞘糖脂總稱為鞘脂。上述甘油磷脂是骨架上具有甘油磷酸的磷脂的總稱，有磷脂酰膽堿(卵磷脂)、磷 脂酰乙胺醇、雙磷脂酰甘油等。該甘油磷脂中，大多為非極性部分為脂肪酸的酯的甘油磷 脂，也有乙烯基醚鍵的縮醛磷脂型的甘油磷脂。該甘油磷脂作為生物膜的構(gòu)成成分是重要的，其中縮醛磷脂型的甘油磷脂由于乙 烯基醚鍵的自由基敏感度較高，因此作為具有抗氧化性的磷脂，近年頗受關(guān)注。最近，有報(bào) 道指出縮醛磷脂型的甘油磷脂通過不同于作為細(xì)胞膜的抗氧化性成分的α-生育酚(維生 素Ε)的機(jī)制，有助于含有膽固醇的磷脂膜的氧化穩(wěn)定性(例如，參考非專利文獻(xiàn)1)，另外， 指出縮醛磷脂型的甘油磷脂不僅參與細(xì)胞膜或脂蛋白的抗氧化性，而且對細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 系統(tǒng)有重要的作用(例如，參考非專利文獻(xiàn)2)。這樣的縮醛磷脂型的甘油磷脂防止癡呆癥中的腦的神經(jīng)細(xì)胞死亡的作用備受期 待，但是實(shí)際情況是仍沒有發(fā)現(xiàn)能夠安全且大量地獲得的供給源。另一方面，鞘磷脂是具有鞘氨醇等的長鏈堿的脂質(zhì)的總稱，如上所述主要包括鞘 糖脂和鞘磷脂。鞘糖脂除含有糖和長鏈脂肪酸之外，還含有長鏈堿的鞘氨醇或植物鞘氨醇 及其它。最簡單的鞘糖脂為腦苷脂，還有在其上帶有硫酸基的硫腦苷脂、帶有數(shù)分子中性糖 的神經(jīng)酰胺低聚己糖苷(七，彡κ才'JK )、帶有唾液酸的神經(jīng)節(jié)苷脂等?？梢?認(rèn)為這些物質(zhì)存在于細(xì)胞表層，參與認(rèn)知機(jī)制。鞘磷脂分為神經(jīng)酰胺1-磷酸的衍生物和神經(jīng)酰胺1-膦酸的衍生物，前者中已知有鞘磷脂，后者中已知有神經(jīng)酰胺氨基乙基膦酸(七，彡F ν -J T > ( -fe 7 F T 7
工子卟水7水 > 酸))。近年來，發(fā)現(xiàn)這些鞘脂的分解代謝物的神經(jīng)酰胺、鞘氨醇、鞘氨醇-1-磷酸等參與 細(xì)胞內(nèi)的信號傳導(dǎo)，備受關(guān)注。另外，發(fā)現(xiàn)鞘脂與膽固醇等一同參與被稱為“筏(raft) ”的 膜微結(jié)構(gòu)域的形成，該微結(jié)構(gòu)域作為信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的場所發(fā)揮重要作用，因而其受關(guān)注程度更 加提高。這樣的鞘脂過去從牛腦中提取、利用，但從安全性的問題，目前利用谷物或真菌由 來的鞘脂。但是，構(gòu)成這些谷物或真菌由來的鞘脂的鞘氨醇堿組成和哺乳動物由來的組成 不同，因此存在生物利用度低于人型的鞘脂的問題。但是，為了從食品、動物組織等的總脂質(zhì)中制造出相對大量的鞘磷脂，以使用硅酸 等的柱色譜法進(jìn)行梯度洗脫而制造，或用溶劑分餾法梯度分餾制造。每一種都需要復(fù)雜的 步驟。在溶劑分餾法中比較常見是向總脂質(zhì)中添加丙酮使復(fù)合脂質(zhì)(磷脂)沉淀(不溶部 分)，將以酯洗凈不溶部分而除去甘油磷酯的物質(zhì)作為粗鞘脂餾分的方法。該餾分中不僅含 有鞘磷脂還含有腦苷脂等的鞘糖脂。另一方面，已知雞皮的磷脂中大量含有人型鞘磷脂和縮醛磷脂型甘油磷脂。非專利文獻(xiàn)1 "J. Lipid Res. ”，第 44 卷，第 164 171 頁(2003 年)非專利文獻(xiàn)2“J. Mol. Neurosci. ”，第 16 卷，263 272 頁；discussion 279 284 頁(2001年)

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明所要解決的問題基于這樣的事實(shí)，本發(fā)明的目的在于提供一種以簡單的操作收率良好地從生物材 料制造高純度鞘磷脂，特別是人型鞘磷脂和高純度縮醛磷脂型甘油磷脂的方法。解決問題的方法為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的發(fā)明人進(jìn)行了深入的研究，其結(jié)果發(fā)現(xiàn)，通過對生物 材料實(shí)施特定的工序，能夠?qū)崿F(xiàn)該目的，基于該知識而完成了本發(fā)明。S卩，本發(fā)明在于提供(1) 一種高純度磷脂的制造方法，其特征在于，包括(A)以脂肪族烴類溶劑和水 溶性酮類溶劑的混合溶劑對從生物材料中提取的干燥總脂質(zhì)進(jìn)行提取處理，分離為以鞘磷 脂為主體的不溶部分和可溶部分的工序；(B)以脂肪族烴類溶劑和水溶性酮類溶劑的混合 溶劑對上述(A)工序中得到的以鞘磷脂為主體的不溶部分進(jìn)行洗凈處理，得到粗制鞘磷脂 的工序；(C)對上述㈧工序中得到的可溶部分進(jìn)行溶劑除去處理之后，以水溶性酮類溶劑 進(jìn)行洗凈處理而得到粗制縮醛磷脂型甘油磷脂的工序；(D)使甘油磷脂水解酶磷脂酶與上 述(B)工序中得到的粗制鞘磷脂作用，對混合存在的甘油磷脂群進(jìn)行水解處理之后，利用 溶劑萃取法得到純度90%以上的鞘磷脂的工序；和(E)使甘油磷脂水解酶磷脂酶與上述 (C)工序中得到的粗制縮醛磷脂型甘油磷脂作用，對混合存在的甘油磷脂群進(jìn)行水解處理 之后，利用溶劑萃取法得到純度40%以上的縮醛磷脂型甘油磷脂的工序；(2)如上述(1)項(xiàng)所述的高純度磷脂的制造方法，其中，生物材料為家禽類；(3)如上述( 項(xiàng)所述的高純度磷脂的制造方法，其中，家禽類為產(chǎn)蛋廢雞和/或種雞廢雞；(4)如上述C3)項(xiàng)所述的高純度磷脂的制造方法，其中，產(chǎn)蛋廢雞由經(jīng)過強(qiáng)制換羽 處理的產(chǎn)蛋雞得到；(5)如上述(1) (4)項(xiàng)中任一項(xiàng)所述的高純度磷脂的制造方法，其中，脂肪族烴 類溶劑為正己烷；(6)如上述(1) ( 項(xiàng)中任一項(xiàng)所述的高純度磷脂的制造方法，其中，水溶性酮 類溶劑為丙酮；(7)以上述(1) (6)項(xiàng)中任一項(xiàng)所述的制造方法得到的、純度為90%以上的高 純度鞘磷脂；(8)以上述(1) (6)項(xiàng)中任一項(xiàng)所述的制造方法得到的、純度為40%以上的高 純度縮醛磷脂型甘油磷脂；(9)如上述(8)項(xiàng)所述的高純度縮醛磷脂型甘油磷脂為純度90%以上的縮醛磷脂 型磷脂酰膽堿；以及(10)如上述(8)項(xiàng)所述的高純度縮醛磷脂型甘油磷脂為純度90%以上的縮醛磷 脂型磷脂酰乙醇胺。發(fā)明的效果 根據(jù)本發(fā)明，能夠提供以簡單的操作從生物材料中，優(yōu)選從家禽類中，收率良好地 制造作為功能性食品原料、醫(yī)藥品原料、化妝品原料等有用的高純度鞘磷脂，特別是人型鞘 磷脂和高純度縮醛磷脂型甘油磷脂的方法，以及以該方法得到的高純度鞘磷脂和高純度縮 醛磷脂型甘油磷脂。


圖1-1是實(shí)施例中從雞皮提取總脂質(zhì)的流程圖。圖1-2是實(shí)施例中從雞胸肉提取總脂質(zhì)的流程圖。圖2是實(shí)施例中從雞皮總脂質(zhì)提取粗制縮醛磷脂和粗制鞘磷脂的流程圖。圖3是實(shí)施例中雞皮由來的磷脂類的HPLC圖譜。圖4是實(shí)施例中從粗制鞘磷脂制造精制鞘磷脂的流程圖。圖5是實(shí)施例中從雞胸肉的總脂質(zhì)制造粗制縮醛磷脂(混合物)和粗制鞘磷脂的 流程圖。圖6是實(shí)施例中從粗制縮醛磷脂制造精制縮醛磷脂(混合物)的流程圖。圖7是實(shí)施例中雞胸肉的磷脂類的HPLC圖譜。圖8是實(shí)施例中精制縮醛磷脂的高度純化及其分離方法的說明圖。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明的高純度磷脂的制造方法包括以下所示的(A)工序、(B)工序、(C)工序、 (D)工序和(E)工序。[ (A)工序]該(A)工序是以脂肪族烴類溶劑和水溶性酮類溶劑的混合溶劑對從生物材料中 提取的干燥總脂質(zhì)進(jìn)行提取處理，分離為以鞘磷脂為主體的不溶部分和可溶部分的工序。
在該(A)工序中，作為原料使用的生物材料，只要含有鞘磷脂，特別是人型鞘磷脂 和縮醛磷脂型甘油磷脂即可，沒有特別限制，能夠使用各種生物材料，但從易獲得性、目的 物質(zhì)的含量和經(jīng)濟(jì)性等的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選家禽類，其中優(yōu)選為產(chǎn)蛋廢雞或肉雞的種雞廢雞 (雌雄)。作為部位，除了表皮或胸脯肉等，還能夠使用內(nèi)臟、脖子、翅膀、腳、頭部、骨頭等。上述產(chǎn)蛋廢雞是產(chǎn)蛋雞被廢雞化之后的雞。例如白色羽系(Julia)或褐色羽系 (Boris Brown,Sonia)的產(chǎn)蛋雞在平均550日齡時(shí)進(jìn)行間拔處理，使其絕食數(shù)日，進(jìn)行廢雞 化。作為該產(chǎn)蛋廢雞，根據(jù)下述理由優(yōu)選由經(jīng)過強(qiáng)制換羽處理的產(chǎn)蛋雞得到的產(chǎn)蛋廢 雞。上述強(qiáng)制換羽處理是使超過約500日齡的產(chǎn)蛋效率降低的產(chǎn)蛋雞絕食10 14 日，進(jìn)行強(qiáng)制的拔毛操作，通過該處理，產(chǎn)蛋雞的功能再生，能夠使采蛋時(shí)間再延長約200 日。關(guān)于經(jīng)過該強(qiáng)制換羽處理的產(chǎn)蛋雞的廢雞化，以上述為基準(zhǔn)。另外，再次對上述的經(jīng)過強(qiáng)制換羽處理的約700日齡的產(chǎn)蛋雞實(shí)施強(qiáng)制換羽處 理，能夠延長最大采蛋時(shí)間至900日齡(該處理也稱為雙強(qiáng)制換羽處理)。產(chǎn)蛋雞的合適廢雞化時(shí)間為500 950日齡，更優(yōu)選為550 900日齡，更加優(yōu)選 為600 750日齡?？梢哉J(rèn)為，產(chǎn)蛋雞，特別是500日齡以上的養(yǎng)雞條件下，與其它雞相比承受更高的 壓力，其結(jié)果，如以產(chǎn)蛋率提高的形式使功能再生，在加齡狀態(tài)下含有率降低的各種機(jī)能表 達(dá)成分，例如激素、維生素類、細(xì)胞因子等的微量成分等的分泌量亢進(jìn)，抑制伴隨加齡的含 量的降低。另一方面，肉雞的種雞(雌雞、雄雞，種類Chunky、Cobb)廢雞為在平均450日齡 被廢雞化的雞。在重視肉雞的雄性健壯、雌性的健康而進(jìn)行飼養(yǎng)，追求高效地生產(chǎn)健康的受 精卵，一般在較好的環(huán)境下飼養(yǎng)。因此，可以認(rèn)為這種廢雞中機(jī)能表達(dá)成分的含量與最盛期 相比顯示降低的傾向。該肉雞種雞(雌雞、雄雞)的合適的廢雞化時(shí)間為300 550日齡，更優(yōu)選為 370 550日齡，更加優(yōu)選為400 450日齡。在該(A)工序中，首先從生物材料，例如從產(chǎn)蛋廢雞或種雞廢雞的表皮或胸肉等 中，提取總脂質(zhì)，并干燥處理。在使用雞皮時(shí)，優(yōu)選切碎的或粉末化的雞皮，例如根據(jù)需要，可以在脫脂處理并一 定程度除去脂肪成分后，進(jìn)行切碎或粉末化。在雞表皮的脫脂處理中，能夠采用機(jī)械的方 法、溫水浸漬加熱的方法、直接加熱方法、利用脂肪族烴類溶劑(正己烷)的方法等。在使 用雞胸肉時(shí)，優(yōu)選使用胸脯肉碎末。接著，從上述雞皮碎末或粉末或者雞胸肉碎末中，使用溶劑提取總脂質(zhì)，進(jìn)行干燥 而得到干燥總脂質(zhì)。作為溶劑沒有特別限制，能夠使用各種溶劑，但是優(yōu)選為正己烷和異丙 醇的混合溶劑。正己烷和異丙醇的混合溶劑的體積比通常為8 2 4 6，優(yōu)選為7 3 5 · 5 ο提取處理能夠按照通常方法進(jìn)行，另外，對于提取液，按照通常方法，通過使用旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)器等蒸餾除去溶劑，或通過導(dǎo)入氮?dú)獾?，得到干燥總脂質(zhì)。以脂肪族烴類溶劑和水溶性酮類溶劑的混合溶劑對這樣得到的干燥總脂質(zhì)進(jìn)行提取處理，分離為以鞘磷脂為主體的不溶部分(以下，也稱為粗鞘磷脂)和可溶部分。在該(A)工序中，作為干燥總脂質(zhì)提取處理中使用的混合溶劑其中一個(gè)成分的脂 肪族烴類溶劑，可以列舉例如正戊烷、異戊烷、正己烷、異己烷、正庚烷、異庚烷、環(huán)戊烷、環(huán) 己烷等，這些可以單獨(dú)使用1種，也可以混合2種以上使用，但其中優(yōu)選正己烷。另外，作為上述混合溶劑的另一個(gè)成分的水溶性酮類溶劑，例如能夠使用丙酮和/ 或甲乙酮等，但是其中優(yōu)選丙酮。作為混合溶劑，在使用正己烷和丙酮的混合物時(shí)，其比例優(yōu)選體積比為4 6 6 4，更優(yōu)選為 4.5 5. 5 5. 5 4.5。另外，該混合溶劑的使用量相對于每Ig干燥總脂質(zhì)通常為10 30mL。當(dāng)該混合 溶劑的使用量不足IOmL時(shí)，不能充分進(jìn)行提取處理，可能會引起不溶部分中的鞘磷脂的純 度降低或回收率低。另一方面，如果超過30mL，則與使用量成比例地難于發(fā)揮提高鞘磷脂的 純度或回收率的效果?；旌先軇┑膬?yōu)選使用量相對于每Ig干燥總脂質(zhì)為15 25mL。提取 方法能夠按照通常方法進(jìn)行。提取處理液能夠通過實(shí)施離心分離處理，分離成可溶部分和以鞘磷脂為主體的不 溶部分。[ (B)工序]該(B)工序是以脂肪族烴類溶劑和水溶性酮類溶劑的混合溶劑對上述(A)工序中 得到的以鞘磷脂為主體的不溶部分進(jìn)行洗凈處理，得到粗制鞘磷脂的工序。在上述(B)工序中，關(guān)于作為洗凈處理中使用的混合溶劑成分的脂肪族烴化合物 和水溶性酮類化合物，使用如上述(A)工序中所說明的溶劑。作為混合溶劑，在使用正己烷和丙酮的混合物時(shí)，其比例，優(yōu)選體積比為4 6 6 4，更優(yōu)選為 4.5 5. 5 5. 5 4.5。如上操作，得到粗制鞘磷脂。[ (C)工序]該(C)工序是對上述㈧工序中得到的可溶部分進(jìn)行溶劑除去處理之后，以水溶 性酮類溶劑進(jìn)行洗凈處理而得到粗制縮醛磷脂型甘油磷脂的工序。作為該(C)工序中的水溶性酮類溶劑，例如能夠使用丙酮和/或甲乙酮等，但其中 優(yōu)選丙酮。在該(C)工序中，首先，通過蒸餾除去上述(A)工序得到的可溶部分中的溶劑，以 上述水溶性酮類溶劑對殘留部分洗凈處理，得到粗制縮醛磷脂型甘油磷脂。[ (D)工序]該⑶工序是使甘油磷脂水解酶磷脂酶與上述⑶工序中得到的粗制鞘磷脂作 用，對混合存在的甘油磷脂群進(jìn)行水解處理之后，利用溶劑萃取法得到純度90%以上的鞘 磷脂的工序。在該⑶工序中，首先使甘油磷脂水解酶磷脂酶與上述⑶工序中得到的粗制鞘 磷脂作用，對該粗制鞘磷脂中混合存在的甘油磷脂群進(jìn)行水解處理。在該酶反應(yīng)中，作為酶 的磷脂酶的使用量相對于粗制鞘磷脂Ig通常為0. 15 0. 45g，優(yōu)選為0. 2 0. 3g。反應(yīng) 溫度通常為30 70°C，優(yōu)選為45 55°C，pH通常為3. 5 5. 5，優(yōu)選為4 5。另外，反 應(yīng)時(shí)間為1 5小時(shí)左右是充分的。
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這樣操作，進(jìn)行酶反應(yīng)之后，利用溶劑萃取法分離鞘磷脂。作為溶劑萃取法中使用 的溶劑，優(yōu)選為脂肪族烴類溶劑和水溶性酮類溶劑的組合，作為脂肪族烴類溶劑優(yōu)選正己 烷，作為水溶性酮類溶劑優(yōu)選丙酮。在使用正己烷和丙酮的組合時(shí)，其使用比例通常優(yōu)選體 積比為4 6 6 4，更優(yōu)選為4.5 5. 5 5. 5 4.5。利用溶劑萃取法分離處理后，以脂肪族烴類溶劑和水溶性酮類溶劑的混合溶劑， 優(yōu)選體積比為4 6 6 4的正己烷和丙酮的混合溶劑，對在冰浴中靜置1小時(shí)后通過 離心分離將固液分離得到的固形物進(jìn)行洗凈處理，在冰浴中靜置1小時(shí)后以離心分離等的 方法通過固液分離，得到純度90%以上，優(yōu)選為95%以上，更優(yōu)選為99%以上的高純度鞘磷脂。[ (E)工序]該(E)工序?yàn)槭垢视土字饷噶字概c上述(C)工序中得到的粗制縮醛磷脂 型甘油磷脂作用，對混合存在的甘油磷脂群進(jìn)行水解處理之后，利用溶劑萃取法得到純度 40%以上的縮醛磷脂型甘油磷脂的工序。在該(E)工序中，首先，使甘油酯水解酶磷脂酶與上述(C)工序中得到的粗制縮醛 磷脂型甘油磷脂作用，對該粗制鞘磷脂中混合存在的甘油磷脂群進(jìn)行水解處理。在該酶反 應(yīng)中，作為酶的磷脂酶的使用量相對于粗制縮醛磷脂型甘油磷脂Ig通常為0. 15 0. 45g， 優(yōu)選為0. 2 0. 3g。反應(yīng)溫度通常為30 70°C，優(yōu)選為45 55°C，pH通常為3. 5 5. 5， 優(yōu)選為4 5。另外，反應(yīng)時(shí)間為1 5小時(shí)左右是充分的。這樣操作，進(jìn)行酶反應(yīng)之后，利用溶劑萃取法，提取縮醛磷脂型甘油磷脂。作為溶 劑萃取法中使用的溶劑，優(yōu)選為脂肪族烴類溶劑和低級醇類溶劑的組合，作為脂肪族烴類 溶劑優(yōu)選正己烷，作為低級醇類溶劑優(yōu)選為異丙醇。在使用正己烷和異丙醇的組合時(shí)，其使 用比例通常優(yōu)選體積比為8 2 4 6，更優(yōu)選為7 3 5 5。利用溶劑萃取法提取處理后，對脂肪族烴類溶劑層進(jìn)行水洗，對蒸餾除去該溶劑 得到的固形物成分以脂肪族烴類化合物和水溶性酮類化合物的混合溶劑，優(yōu)選體積比為 4 6 6 4的正己烷和丙酮的混合溶劑進(jìn)行洗凈處理，通過離心分離等的方法固液分 離，得到純度40%以上，優(yōu)選95%以上，更優(yōu)選99%以上的高純度縮醛磷脂型甘油磷脂。另外，作為縮醛磷脂型磷脂酰膽堿，能夠得到純度95%以上，優(yōu)選99. 5%以上的 產(chǎn)物，作為縮醛磷脂型磷脂酰乙醇胺，能夠得到純度95%以上，優(yōu)選99. 5%以上的產(chǎn)物。根據(jù)本發(fā)明的方法，在使用雞皮作為原料時(shí)，能夠從脫油濃縮雞皮中，通常以 0. 2 0. 6質(zhì)量％左右得到純度90%以上的高純度鞘磷脂，以及以0. 3 2質(zhì)量％的比例 得到純度40%以上的高純度·混合縮醛磷脂型甘油磷脂。在使用胸脯肉作為原料時(shí)，能夠 通常以0. 2 1質(zhì)量％左右得到純度40%以上的高純度·混合縮醛磷脂型甘油磷脂，以及 以0. 01 0. 1質(zhì)量％的比例得到純度90%以上的高純度鞘磷脂。鞘磷脂為神經(jīng)酰胺的一級醇羥基與磷酸膽堿的磷酸二酯鍵結(jié)合的物質(zhì)，具有下式 (I)的結(jié)構(gòu)，不僅存在于通常動物體的腦組織，而且還廣泛存在于臟器組織中。
權(quán)利要求
1.一種高純度磷脂的制造方法，其特征在于，包括(A)以脂肪族烴類溶劑和水溶性酮類溶劑的混合溶劑對從生物材料中提取的干燥總脂 質(zhì)進(jìn)行提取處理，分離為以鞘磷脂為主體的不溶部分和可溶部分的工序；(B)以脂肪族烴 類溶劑和水溶性酮類溶劑的混合溶劑對所述(A)工序中得到的以鞘磷脂為主體的不溶部 分進(jìn)行洗凈處理，得到粗制鞘磷脂的工序；(C)對所述(A)工序中得到的可溶部分進(jìn)行溶劑 除去處理之后，以水溶性酮類溶劑進(jìn)行洗凈處理而得到粗制縮醛磷脂型甘油磷脂的工序； (D)使甘油磷脂水解酶磷脂酶與所述(B)工序中得到的粗制鞘磷脂作用，對混合存在的甘 油磷脂群進(jìn)行水解處理之后，利用溶劑萃取法得到純度90%以上的鞘磷脂的工序；和(E) 使甘油磷脂水解酶磷脂酶與所述(C)工序中得到的粗制縮醛磷脂型甘油磷脂作用，對混合 存在的甘油磷脂群進(jìn)行水解處理之后，利用溶劑萃取法得到純度40%以上的縮醛磷脂型甘 油磷脂的工序。
2.如權(quán)利要求1所述的高純度磷脂的制造方法，其特征在于 生物材料為家禽類。
3.如權(quán)利要求2所述的高純度磷脂的制造方法，其特征在于 家禽類為產(chǎn)蛋廢雞和/或種雞廢雞。
4.如權(quán)利要求3所述的高純度磷脂的制造方法，其特征在于 產(chǎn)蛋廢雞由經(jīng)過強(qiáng)制換羽處理的產(chǎn)蛋雞得到。
5.如權(quán)利要求1 4中任一項(xiàng)所述的高純度磷脂的制造方法，其特征在于 脂肪族烴類溶劑為正己烷。
6.如權(quán)利要求1 5中任一項(xiàng)所述的高純度磷脂的制造方法，其特征在于 水溶性酮類溶劑為丙酮。
7.一種高純度鞘磷脂，其特征在于以權(quán)利要求1 6中任一項(xiàng)所述的制造方法得到，純度為90%以上。
8.一種高純度縮醛磷脂型甘油磷脂，其特征在于以權(quán)利要求1 6中任一項(xiàng)所述的制造方法得到，純度為40%以上。
9.如權(quán)利要求8所述的高純度縮醛磷脂型甘油磷脂，其特征在于 其為純度90%以上的縮醛磷脂型磷脂酰膽堿。
10.如權(quán)利要求8所述的高純度縮醛磷脂型甘油磷脂，其特征在于 其為純度90%以上的縮醛磷脂型磷脂酰乙醇胺。
全文摘要
本發(fā)明在于提供一種以簡單的操作收率良好地從生物材料制造高純度鞘磷脂和高純度縮醛磷脂型甘油磷脂的方法。該高純度磷脂的制造方法包括(A)以特定的混合溶劑對從生物材料中提取的干燥總脂質(zhì)進(jìn)行提取處理，分離為不溶部分和可溶部分的工序；(B)以特定的混合溶劑對上述(A)工序中得到的不溶部分進(jìn)行洗凈處理，得到粗制鞘磷脂的工序；(C)以水溶性酮類溶劑對上述(A)工序中得到的可溶部分進(jìn)行洗凈處理而得到粗制縮醛磷脂型甘油磷脂的工序；(D)使酶與上述(B)工序中得到的粗制鞘磷脂作用，得到純度90％以上的鞘磷脂的工序；和(E)使酶與上述(C)工序中得到的粗制縮醛磷脂型甘油磷脂作用，得到純度40％以上的縮醛磷脂型甘油磷脂的工序。
文檔編號C11B3/02GK102099453SQ20098012849
公開日2011年6月15日 申請日期2009年6月19日 優(yōu)先權(quán)日2008年6月20日
發(fā)明者名達(dá)義剛, 馬渡志郎 申請人:丸大食品株式會社, 醫(yī)療法人社團(tuán)布庫思, 有限會社梅田事務(wù)所