專利名稱：一種從蜂花粉中提取油脂類化合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從蜂花粉中提取油脂類化合物的方法。
背景技術(shù)：
蜂花粉是蜜蜂采取植物的精細(xì)胞加上蜂蜜、蜜蜂腺體分泌物和唾液等混合而成形成的一種不規(guī)則扁圓形團(tuán)狀物。研究表明，蜂花粉中不僅含有很多營養(yǎng)成分，而且還具有很多與生命科學(xué)相關(guān)的藥效物質(zhì)。蜂花粉中富含油脂類化合物，其中以亞麻酸和棕櫚酸的含量最高，具有重要的營養(yǎng)功能和生理功效。因此，蜂花粉中的油脂類化合物具有很高的利用價值和開發(fā)前景。與此同時，油脂類化合物中的植物留醇經(jīng)大量的臨床實驗證明了在降低膽固醇、抑制前列腺肥大等方面具有顯著功效，目前對花粉中植物留醇的研究從已開始逐漸深入?，F(xiàn)在工業(yè)生產(chǎn)中主要以索氏提取、加熱回流提取(及其它本領(lǐng)域可被用于提取油脂類化合物的方法)等方法提取油脂類化合物，實驗室分析也主要是用這些方法。但現(xiàn)有技術(shù)或方法多是將蜂花粉直接提取，有時會將花粉粉碎后提取，提取效率低、所獲得油脂類化合物得率也較低并且質(zhì)量不好。據(jù)Xiaoyan Wang,Honglun Wang等人(European Journal of Lipid Science andTechnology，2008，111 (2) :155-163)報道，在使用石油醚回流提取油菜花粉所得油脂類化合物得率為7. 42% ；潘建國、段怡和吳惠勤等人(分析測試學(xué)報， 2003,22(001) 74-75)的油菜蜂花粉中脂肪酸的GC-MS分析一文中用石油醚-乙醚混合溶劑索氏提取五小時后得到7. 9% 8. 4%的油脂類化合物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是克服了現(xiàn)有從蜂花粉中提取油脂類化合物的方法， 提取效率不高、產(chǎn)品得率較低的缺陷，提供了一種從蜂花粉中提取油脂類化合物的方法。該方法工藝簡單，降低生產(chǎn)成本，顯著提高了從蜂花粉中的提取油脂類化合物的提取效率和得率，也顯著提高了制得的提取物中油脂類化合物的含量，并且特別得到明顯高比例的植
物甾醇。本發(fā)明的從蜂花粉中提取油脂類化合物的方法，其包括如下步驟將蜂花粉壁外的水溶性物質(zhì)除去，再采用除超臨界二氧化碳萃取以外的本領(lǐng)域常規(guī)提取油脂類化合物方法，從蜂花粉中提取油脂類化合物，即可。其中，所述的花粉壁外的水溶性物質(zhì)是指包裹在花粉壁外的以糖類物質(zhì)為主的極性物質(zhì)，一般包括蜂蜜、蜜蜂唾液分泌物、果糖、蔗糖和葡萄糖等。其中，所述的將蜂花粉花粉壁外的水溶性物質(zhì)除去這一預(yù)處理步驟，將粘裹在花粉壁外的水溶性物質(zhì)除去可減少萃取過程中這些花粉壁外的水溶極性物質(zhì)對于提取的阻滯作用，從而使得對油脂類化合物的萃取效率得到顯著提高。所述的將蜂花粉花粉壁外的水溶性物質(zhì)除去的步驟，較佳的采用水洗除去，更佳的按下述進(jìn)行操作將蜂花粉與水混合攪拌1小時 60小時，即可。其中，水的用量一般較多效果較好，考慮到資源有效利用，所述的水與蜂花粉的用量比較佳的為IL/kg 60L/kg ；所述的攪拌時的溫度較佳的為0°C 60°C，更佳的為40°C，一般室溫也可。所述的將蜂花粉與水混合攪拌之后，一般通過本領(lǐng)域常規(guī)固液分離方法操作將蜂花粉與水分離，較佳的通過離心分離或過濾分離，所述的分離方法在實驗室小規(guī)模實驗時常規(guī)的抽濾即可。所述的離心的條件較佳的為以轉(zhuǎn)速為500r/min 5000r/min離心5min 60min。 其中，所述的蜂花粉與水分離之后，提取油脂類化合物之前，一般將蜂花粉進(jìn)行干燥以滿足提取方法雖蜂花粉水含量的要求，較佳的使用真空加熱干燥，溫度較佳的為50°C 65°C。其中，所述的除超臨界二氧化碳萃取方法以外的本領(lǐng)域常規(guī)提取油脂類化合物方法均為本領(lǐng)域常規(guī)提取油脂類化合物方法，較佳的為索式提取法或回流提取法。其中，所述的除超臨界二氧化碳萃取方法以外的本領(lǐng)域常規(guī)提取油脂類化合物方法涉及使用的提取溶劑為本領(lǐng)域常規(guī)使用的提取溶劑，較佳的為乙醚、石油醚和正己烷中的一種或多種。本發(fā)明所用試劑和原料均市售可得。在符合本領(lǐng)域常識的基礎(chǔ)上，本發(fā)明中上述的各技術(shù)特征的優(yōu)選條件可以任意組合得到較佳實例。本發(fā)明的積極進(jìn)步效果在于本發(fā)明提供了一種從蜂花粉中提取油脂類化合物的方法。本發(fā)明方法工藝簡單，降低生產(chǎn)成本，制得的提取物中油脂類化合物破壞少，顯著提高了從蜂花粉中的提取油脂類化合物的提取率和得率，得率最高可達(dá)13%以上，同時也顯著提高了制得的提取物中油脂類化合物的含量，并且油脂類化合物中脂肪酸含量尤其是亞麻酸和棕櫚酸含量高；特別經(jīng)此方法得到了明顯高比例的植物留醇，具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。


圖1中為參考實施例中對照品棕櫚酸甲酯、亞麻酸甲酯和十七烷酸甲酯的氣相色譜圖；圖中編碼對應(yīng)的物質(zhì)分別為a棕櫚酸甲酯，s十七烷酸甲酯，b亞麻酸甲酯。圖2為實施例1中本發(fā)明方法提取油菜蜂花粉油脂類化合物的氣相色譜圖。圖3為實施例1中對比方法直接提取油菜蜂花粉油脂類化合物的氣相色譜圖。圖4為實施例1中本發(fā)明方法提取油菜蜂花粉油脂類化合物的GC-MS圖譜。圖5為實施例1中對比方法直接提取油菜蜂花粉油脂類化合物的GC-MS圖譜。
具體實施例方式下面通過實施例的方式進(jìn)一步說明本發(fā)明，但并不因此將本發(fā)明限制在所述的實施例范圍之中。參考實施例索氏提取物或回流提取物中亞麻酸和棕櫚酸定性測定儀器與材料6890N型氣相色譜儀，包括氫火焰離子化檢測器(FID)和色譜工作站(Agilent公司)。棕櫚酸對照品、亞麻酸對照品(Sigma公司，99% )；十七烷酸(內(nèi)標(biāo)， Merck 公司，99% )。甲酯化精密稱取棕櫚酸、亞麻酸對照品或蜂花粉索氏提取物(或回流提取物)適量，置50mL磨口三角燒瓶中，加內(nèi)標(biāo)十七烷酸約9mg和2mol/L的氫氧化鉀-甲醇溶液4mL， 接上冷凝管，置65°C水浴上加熱，并使溶液沸騰，5min后從冷凝管頂部加入15%的三氟化硼-甲醇溶液5mL，沸騰2min，再從冷凝管頂部加入正己烷2mL，繼續(xù)沸騰lmin。取下冷凝管，即向三角燒瓶中加入飽和氯化鈉溶液，至正己烷液面近三角燒瓶口，取上層正己烷溶液適量，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，得脂肪酸的甲酯化溶液。色譜條件色譜柱為HP-5石英毛細(xì)管柱；載氣為高純氮氣，流速為1. OmL/min ；分流比為30 1 ；進(jìn)樣口溫度為310°C，柱溫程序為升溫至150°C保持3min，之后以5°C /min 升至300°C，保持5min ；甲基化溶液進(jìn)樣量為1 μ L，檢測器為FID。如圖1所示為對照品棕櫚酸甲酯和亞麻酸甲酯，以及內(nèi)標(biāo)十七烷酸甲酯的氣相色譜圖；其中，亞麻酸甲酯的保留時間為18. 185min，棕櫚酸甲酯的保留時間為14. 956min,內(nèi)標(biāo)十七烷酸甲酯的保留時間為16. 799min。索氏提取物或回流提取物的GC-MS定性及半定量分析測定儀器型號ThermoFisherTRACE GC Ultra ITQl 100柱子:Rts-ms 30m*0. 25um*0. 25mm條件 π)度(IOmin)-10 度 /min-250 度(Ιδπ η)-10 度 /min-280
度(IOmin)接口溫度300度，進(jìn)樣口 280度掃描范圍33 500amu載氣流速1.OmL/min根據(jù)GC-MS總離子流圖中各色譜峰相應(yīng)的質(zhì)譜圖，經(jīng)人工解析及計算機(jī)檢索-質(zhì)譜庫NIST，確定相應(yīng)物質(zhì)結(jié)構(gòu)，并用面積歸一法測定各物質(zhì)的相對百分含量。實施例1本發(fā)明方法準(zhǔn)確稱取3份粉碎過80目的50°C真空干燥箱中干燥M小時后的油菜蜂花粉(安徽宣城市百康蜂業(yè))約10克，加9倍量蒸餾水于室溫條件下攪拌5小時后抽濾，將殘渣于 50°C真空干燥箱中干燥18小時，得到約4. 3克干燥殘渣；將干燥殘渣研磨粉碎過80目篩，置于燒瓶中進(jìn)行回流提取，提取溶劑為沸程 30°C 60°C石油醚，第一次回流提取1小時，第二次回流0. 5小時；其中，回流水浴溫度 700C ；之后將所得到的油脂類化合物用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器減壓揮盡溶劑，即可。對比方法準(zhǔn)確稱取3份粉碎過80目的50°C真空干燥箱中干燥M小時后的油菜蜂花粉(安徽宣城市百康蜂業(yè))約10克，直接用石油醚進(jìn)行回流提取，提取條件與前述本發(fā)明方法的相同，將所得到的油脂類化合物用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器減壓揮盡溶劑，即可。將本發(fā)明方法與對比方法所得提取物分別于50°C真空干燥箱中干燥M小時后準(zhǔn)確稱量，結(jié)果記錄于表1中。表1本發(fā)明方法提取油菜蜂花粉與直接提取油菜蜂花粉所得油脂類化合物得率和提取率(使用沸程30°C 60°C石油醚作為提取溶劑)
權(quán)利要求
1.一種從蜂花粉中提取油脂類化合物的方法，其特征在于其包括如下步驟將蜂花粉壁外的水溶性物質(zhì)除去，再采用除超臨界二氧化碳萃取以外的本領(lǐng)域常規(guī)提取油脂類化合物方法，從蜂花粉中提取油脂類化合物，即可。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的將蜂花粉花粉壁外的水溶性物質(zhì)除去的方法為水洗除去蜂花粉花粉壁外的水溶性物質(zhì)。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述的水洗除去蜂花粉花粉壁外的水溶性物質(zhì)按下述進(jìn)行操作將蜂花粉與水混合攪拌1 60小時，即可。
4.如權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于所述的水與蜂花粉的用量比為lL/kg 60L/kg ；所述的攪拌時的溫度為0°C 60°C。
5.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述的將蜂花粉與水混合攪拌之后通過離心分離或過濾分離；其中，所述的離心的條件為以轉(zhuǎn)速為500r/min 5000r/min離心 5min 60mino
6.如權(quán)利要求1 5任一項所述的方法，其特征在于所述的除超臨界二氧化碳萃取方法以外的本領(lǐng)域常規(guī)提取油脂類化合物方法為索式提取法或回流提取法。
7.如權(quán)利要求1 6任一項所述的方法，其特征在于所述的除超臨界二氧化碳萃取方法以外的本領(lǐng)域常規(guī)提取油脂類化合物方法涉及使用的提取溶劑為乙醚、石油醚和正己烷中的一種或多種。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從蜂花粉中提取油脂類化合物的方法。該方法包括如下步驟將蜂花粉壁外的水溶性物質(zhì)除去，再采用除超臨界二氧化碳萃取以外的本領(lǐng)域常規(guī)提取油脂類化合物方法，從蜂花粉中提取油脂類化合物，即可。該方法工藝簡單，降低生產(chǎn)成本，顯著提高了從蜂花粉中的提取油脂類化合物的提取效率和得率，也顯著提高了制得的提取物中不飽和脂肪酸的含量；特別經(jīng)此方法得到了明顯高比例的植物甾醇。
文檔編號C11B1/10GK102234564SQ20101016947
公開日2011年11月9日 申請日期2010年5月7日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月7日
發(fā)明者楊義芳, 楊必成, 韋瑋 申請人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院