專利名稱：一種百里香精油的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及精油生產(chǎn)領(lǐng)域，尤其涉及一種百里香精油的生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
百里香為唇形科百里香屬植物的統(tǒng)稱，其精油主要作用成分是百里酚和香芹酚， 可廣泛用于醫(yī)療、美容、烹飪及食品等領(lǐng)域。人們利用百里香精油的歷史悠久，埃及人用來(lái)防腐尸體，羅馬人用來(lái)抗菌，希臘人用來(lái)幫助消化，地中海人用來(lái)治療呼吸困難及頑強(qiáng)的皮膚病等等，我國(guó)西部人民早已有用百里香除去牛羊肉膻氣的傳統(tǒng)。隨著對(duì)百里香研究的不斷深入，百里香精油具有較大的開(kāi)發(fā)潛力，其潛在應(yīng)用價(jià)值體現(xiàn)于對(duì)霉菌有良好的抑制作用、刺激白細(xì)胞增殖、強(qiáng)化神經(jīng)、活化腦細(xì)胞、提高記憶力和注意力，也能提振低落的情緒、 精疲力竭的感覺(jué)、以及挫敗的沮喪感等。目前，百里香精油的生產(chǎn)主要以大田百里香為原料，主要采用水蒸氣蒸餾法、有機(jī)溶劑萃取法或超臨界二氧化碳流體萃取法等進(jìn)行精油的提取，但是，采用現(xiàn)有技術(shù)生產(chǎn)的百里香精油提取率較低，為滿足市場(chǎng)需求，原料的取得需要大量耕地進(jìn)行種植，生產(chǎn)周期長(zhǎng)，受氣候和環(huán)境影響較大，不利于大量生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明實(shí)施例所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于，提供一種百里香精油的生產(chǎn)方法，以提高百里香精油的含量，縮短生產(chǎn)周期，并適于大量工業(yè)化生產(chǎn)。為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明實(shí)施例提出了一種百里香精油的生產(chǎn)方法，包括
通過(guò)百里香種子發(fā)芽得到百里香無(wú)菌苗；
將所述百里香無(wú)菌苗切成帶有腋芽的莖段，并將該莖段接種于不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中， 得到不定芽；
將所述不定芽切成小段，并將該小段接種到增殖培養(yǎng)基中，得到百里香組培苗，所述增殖培養(yǎng)基中配置一定濃度的殼聚糖；
采用水蒸氣蒸餾法對(duì)所述百里香組培苗的干樣進(jìn)行處理，得到百里香精油。本發(fā)明實(shí)施例通過(guò)提供一種百里香精油的生產(chǎn)方法，其對(duì)通過(guò)百里香種子發(fā)芽得到的百里香無(wú)菌苗進(jìn)行不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)后獲得百里香組培苗，然后采用水蒸氣蒸餾法對(duì)百里香組培苗的干樣進(jìn)行處理得到百里香精油，由于在增殖培養(yǎng)時(shí)在增殖培養(yǎng)基中配置有一定濃度的殼聚糖，從而大大提高了百里香精油的含量，使該生產(chǎn)方法適于工業(yè)化生產(chǎn)，上述百里香組培苗采用植物離體培養(yǎng)技術(shù)，節(jié)約了寶貴的土地資源，避免了環(huán)境的破壞，并大大縮短了百里香精油的生產(chǎn)周期，實(shí)現(xiàn)了巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。


圖1是本發(fā)明實(shí)施例的百里香精油的生產(chǎn)方法的流程圖。
圖2是本發(fā)明實(shí)施例中的百里香實(shí)生苗中所提取百里香精油的總離子流圖。圖3是本發(fā)明實(shí)施例中未采用殼聚糖的增殖培養(yǎng)基所培育出的百里香組培苗中所提取百里香精油的總離子流圖。圖4是本發(fā)明實(shí)施例中采用濃度為0. 2g/L的殼聚糖的增殖培養(yǎng)基所培育出的百里香組培苗中所提取百里香精油的總離子流圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖，對(duì)本發(fā)明實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。圖1是本發(fā)明實(shí)施例的百里香精油的生產(chǎn)方法的流程圖，參照該圖，該方法主要包括
101，通過(guò)百里香種子發(fā)芽得到百里香無(wú)菌苗，具體地，可將百里香種子在1/2MS培養(yǎng)基上發(fā)芽得到百里香無(wú)菌苗；
102，將百里香無(wú)菌苗切成帶有腋芽的莖段，并將該莖段接種于不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中， 得到不定芽，具體地，可選取培養(yǎng)6周左右且生長(zhǎng)健康的無(wú)菌苗，將其切成3cm左右且?guī)в幸秆康那o段，并將莖段接種于不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中以誘導(dǎo)腋芽產(chǎn)生不定芽，其中，不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基以MS為基本培養(yǎng)基，添加有不同濃度的其他組分，包括吲哚乙酸、6-芐基腺嘌呤、 0. 6%的瓊脂和3%的蔗糖；
103，將不定芽切成小段，并將該小段接種到增殖培養(yǎng)基中，得到百里香組培苗，所述增殖培養(yǎng)基中配置一定濃度的殼聚糖，具體地，切取Ig上述誘導(dǎo)的不定芽接種到增殖培養(yǎng)基中以誘導(dǎo)不定芽增殖，而增殖培養(yǎng)基以MS、0. 25mg/L的萘乙酸及0. 25mg/L的6-芐基腺嘌呤為基本培養(yǎng)基，添加有不同濃度的其他組分，包括0. 1-0. 3g/L的殼聚糖、0. 6%的瓊脂和 3%的蔗糖，這樣，由于在增殖培養(yǎng)時(shí)在增殖培養(yǎng)基中配置有一定濃度的殼聚糖，從而大大提高了百里香精油的含量，使該生產(chǎn)方法適于工業(yè)化生產(chǎn)；
104，采用水蒸氣蒸餾法對(duì)百里香組培苗的干樣進(jìn)行處理，得到百里香精油，具體地， 可對(duì)百里香組培苗在23°C下陰干得到干樣并放置到4°C的冰箱里儲(chǔ)存，之后可取干樣 20-30g，對(duì)該干樣進(jìn)行粉碎，并將得到的碎片置于IL圓底燒瓶中，以質(zhì)量體積比1 :10 (m/ ν)加入蒸餾水及數(shù)粒玻璃珠，在微沸狀態(tài)下蒸餾2. 5-3小時(shí)后得到百里香精油，并將百里香精油保存于anlAgilent樣品瓶中，放置在4°C冰箱中待測(cè)。精油成分測(cè)定可采用氣質(zhì)聯(lián)用分析技術(shù)，具體地，可采用氣質(zhì)聯(lián)用儀器所帶有的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫(kù)搜索鑒定其中分離的物質(zhì)，具體參數(shù)如下
色譜條件色譜柱HP-5MS，5%苯甲基聚硅氧烷彈性石英毛細(xì)管柱(尺寸為 30mX 0. 25謹(jǐn)X 0. 25 μ m)，進(jìn)樣口溫度250°C，柱室溫度初始以70°C保持5min之后以8°C / min的升溫速率升至150°C后保持lOmin，之后進(jìn)行第二次升溫，從10°C升至250°C后保持 8min，載氣采用高純氦氣，柱前壓8. UI3Si,流速lml/min，分流比37:1 ；
質(zhì)譜條件接口溫度280°C，電離方式EI，電子能量70eV，離子源溫度250°C，四極桿溫度130°C，調(diào)諧方式為標(biāo)準(zhǔn)調(diào)諧，質(zhì)量掃描方式SCAN，溶劑延遲3min，掃描范圍35-550amu。上述氣質(zhì)聯(lián)用分析方法主要是用HP-5MS色譜柱對(duì)色譜分離條件進(jìn)行優(yōu)化，確定了最佳的分離條件，然后進(jìn)行百里香精油的氣質(zhì)聯(lián)用分析，獲得百里香精油的總離子流色譜圖(TIC)，進(jìn)一步地，可利用該氣質(zhì)聯(lián)用儀器所配備的Nist2008質(zhì)譜庫(kù)進(jìn)行檢索，再對(duì)所得的譜圖進(jìn)行人工核對(duì)和補(bǔ)充檢索，然后用面積歸一法測(cè)得各組分的百分含量，其中就包含百里香精油的含量。具體測(cè)得數(shù)據(jù)如下，其中引入了百里香實(shí)生苗的檢測(cè)，以及未采用殼聚糖的增殖培養(yǎng)基所培育出的百里香組培苗的檢測(cè)
1、百里香實(shí)生苗，即可以101所得的百里香無(wú)菌苗作為檢測(cè)對(duì)象，其通過(guò)水蒸氣蒸餾法所得百里香精油之后，采用上述氣質(zhì)聯(lián)用分析技術(shù)所得的百里香精油的總離子流圖可如圖2所示，通過(guò)面積歸一法測(cè)得百里香精油的含量即為1. 02% ；
2、為了對(duì)比分析，本實(shí)施例中引入了另一種增殖培養(yǎng)基，其以MS為基本培養(yǎng)基，添加有不同濃度的其他組分，包括0-0. 5mg/L的萘乙酸、0-2. Omg/L的6-芐基腺嘌呤、0. 6%的瓊脂和3%的蔗糖，其中未配置殼聚糖，其得到的組培苗通過(guò)水蒸氣蒸餾法所得百里香精油之后，采用上述氣質(zhì)聯(lián)用分析技術(shù)所得的百里香精油的總離子流圖可如圖3所示，通過(guò)面積歸一法測(cè)得百里香精油的含量即為0. 15% ；
3、本實(shí)施例104所得百里香精油的總離子流圖可如圖4所示，通過(guò)面積歸一法測(cè)得百里香精油的含量即為0.21%。不難理解，上述百里香組培苗采用101-103描述的植物離體培養(yǎng)技術(shù)，上述第1點(diǎn)所述百里香實(shí)生苗較第3點(diǎn)所述百里香組培苗在單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)量低，由于百里香組培苗產(chǎn)量高，使得第3點(diǎn)較第1點(diǎn)來(lái)講，節(jié)約了寶貴的土地資源，避免了環(huán)境的破壞，并大大縮短了百里香精油的生產(chǎn)周期，實(shí)現(xiàn)了巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益；而對(duì)比第2點(diǎn)與第3點(diǎn)，不難看出，由于在增殖培養(yǎng)時(shí)在增殖培養(yǎng)基中配置有一定濃度的氯化鈉，從而大大提高了百里香精油的含量，使該生產(chǎn)方法適于工業(yè)化生產(chǎn)。以上所述是本發(fā)明的具體實(shí)施方式
，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1. 一種百里香精油的生產(chǎn)方法，其特征在于，包括通過(guò)百里香種子發(fā)芽得到百里香無(wú)菌苗；將所述百里香無(wú)菌苗切成帶有腋芽的莖段，并將該莖段接種于不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中， 得到不定芽；將所述不定芽切成小段，并將該小段接種到增殖培養(yǎng)基中，得到百里香組培苗，所述增殖培養(yǎng)基中配置一定濃度的殼聚糖；采用水蒸氣蒸餾法對(duì)所述百里香組培苗的干樣進(jìn)行處理，得到百里香精油。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述增殖培養(yǎng)基為混合有MS、0. 25mg/L的萘乙酸、0. 25mg/L的6-芐基腺嘌呤、0. 1-0. 3g/L的殼聚糖、0. 6%的瓊脂和3%的蔗糖的培養(yǎng)基。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，采用水蒸氣蒸餾法對(duì)所述百里香組培苗的干樣進(jìn)行處理具體為對(duì)所述百里香組培苗在23°C下陰干得到所述干樣，對(duì)該干樣進(jìn)行粉碎，并將得到的碎片置于圓底燒瓶中，以質(zhì)量體積比1 :10加入蒸餾水及玻璃珠，在微沸狀態(tài)下蒸餾2. 5-3小時(shí)后得到所述百里香精油。
4.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，通過(guò)百里香種子發(fā)芽得到百里香無(wú)菌苗具體為將所述百里香種子在1/2MS培養(yǎng)基上發(fā)芽得到所述百里香無(wú)菌苗。
5.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為混合有MSJ引哚乙酸、6-芐基腺嘌呤、0. 6%的瓊脂和3%的蔗糖的培養(yǎng)基。
全文摘要
本發(fā)明實(shí)施例公開(kāi)了一種百里香精油的生產(chǎn)方法，其對(duì)通過(guò)百里香種子發(fā)芽得到的百里香無(wú)菌苗進(jìn)行不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)后獲得百里香組培苗，然后采用水蒸氣蒸餾法對(duì)百里香組培苗的干樣進(jìn)行處理得到百里香精油，由于在增殖培養(yǎng)時(shí)在增殖培養(yǎng)基中配置有一定濃度的殼聚糖，從而大大提高了百里香精油的含量，使該生產(chǎn)方法適于工業(yè)化生產(chǎn)，上述百里香組培苗采用植物離體培養(yǎng)技術(shù)，節(jié)約了寶貴的土地資源，避免了環(huán)境的破壞，并大大縮短了百里香精油的生產(chǎn)周期，實(shí)現(xiàn)了巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
文檔編號(hào)C11B9/02GK102295994SQ20111019406
公開(kāi)日2011年12月28日 申請(qǐng)日期2011年7月12日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月12日
發(fā)明者徐世千, 李建國(guó), 李曉東, 楊莉 申請(qǐng)人:深圳職業(yè)技術(shù)學(xué)院