專利名稱：一種從南極磷蝦中富集磷脂酰肌醇的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從南極磷蝦中富集磷脂酰肌醇的方法。
背景技術(shù)：
南極磷蝦是一種生活在南冰洋的南極洲水域的磷蝦，以群集方式生活，有時密度高達I萬-3萬只/M3，它們可能是地球上最成功的動物物種，據(jù)統(tǒng)計大約有5-50億噸(因統(tǒng)計方法不一樣有較大差異)。目前南極磷蝦漁業(yè)每年約10萬噸，其中80%由日本捕獲，由于南大洋以磷蝦為主食物的須鯨也被殲捕殆盡。有關(guān)科學(xué)家曾根據(jù)旺盛時期鯨類對磷蝦類的攝食量估計大約每年有I. 5億噸由于鯨類資源的衰退而剩余的磷蝦可供捕獲。世界上每年的全部的漁業(yè)產(chǎn)量為0. 99億噸，這標(biāo)志著南極磷蝦有較大的可利用空間。我國正在試探捕南極磷蝦以完善南極磷蝦的捕撈和相關(guān)海上技術(shù)。南極磷蝦的大量捕撈標(biāo)志著深加工技術(shù)的開始。在日本南極磷蝦大多作為料理，而在其他國家則主要作為漁業(yè)的飼料和魚的餌料。南極磷蝦高附加值的研究是其深加工的研究核心。南極磷蝦含有較為豐富的油脂，含有不飽和脂肪酸、蝦青素和磷脂。磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol ;PI)是細胞信號的通路成分,稱為第三信使,信號通路的研究是當(dāng)前生命科學(xué)研究的熱點，也是生物制劑爭相開發(fā)利用的重大課題。已知的信使如第一信使脂類激素和含氮激素，第二信使cAMP等均或為藥物，或為保健成分。第三信使PI在人體、細胞代謝中起著極為重要的生理生化作用。是細胞快速應(yīng)答和緩慢應(yīng)答的啟點、交叉點、關(guān)鍵點。PI就像通信網(wǎng)絡(luò)中控制著信息傳遞方向的接線員，控制著人體生理生化、細胞生與死的進展方向。PI的應(yīng)用開發(fā)備受世界各國關(guān)注，2001年美國開發(fā)出了世界上第一個以PI作為中間體的抗艾滋病藥物(US 6316424. B)?？茖W(xué)家在PI的肌醇環(huán)上接上磺?；鶊F(_S03)，當(dāng)這種藥物插入細胞膜后，暴露在膜外帶有I-幾個磺?；鶊F的肌醇環(huán)有極強的殺病菌、病毒作用，就像細胞全身穿上了盔甲。PI有望成為抗其他病毒藥物的中間體。在流感病毒、SARS、霍亂等菌毒肆虐世界的今天，PI的應(yīng)用具有極其廣闊的前景。日本等國把PI也用于化妝品，作為藥物脂質(zhì)體和日常保健品的原料、食品和藥物的乳化劑(JP 05097873 A2)海產(chǎn)品的保鮮劑；PI還是心、肝、腎等人體重要器官移植前保存液的主要成分，有抗細胞凋亡(W0 99/47101)，也有很好的免疫效果(W0 03/013513 Al)。另外實驗證明PI有抗動脈粥樣硬化的作用，有利尿和治療便秘的作用等。PI因sn-1和sn-2位所聯(lián)接的脂肪酸不一而分子結(jié)構(gòu)和分子量有很大差異。不同動物體PI分子群中各種PI分子種類及其比例有很大差異，即PI是一個分子群。不同的動物體中磷脂中的卵磷脂(PC)、腦磷脂(PE)、PI和磷脂酸，磷酯酰絲氨酸(PS)等比例也有很大差異。南極磷蝦中蝦油(磷脂是油的伴隨物)的磷脂中PC占80%以上，而PS、PE、PA以及溶血性磷脂的總含量低于20%，而PI量很少，因此制備南極磷蝦中的PI，最重要的第一步是PI的富集，然后才能在此基礎(chǔ)上進一步再提取，分離，純化。至今，人們還尚未對南極磷、蝦中的PI進行過研究報道。

發(fā)明內(nèi)容
針對上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了一種從南極磷蝦中富集磷脂酰肌醇的方法，為南極磷蝦中磷脂酰肌醇的深入研究奠定了基礎(chǔ)。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的一種從南極磷蝦中富集磷脂酰肌醇的方法，步驟如下(I)取I公斤冰凍的南極磷蝦，加入到I I. 3升的體積分數(shù)為90 100%的乙醇液中，自然條件下攪拌提取4 6次，每次I 3h，提取液過濾合并，得濾液；(2)將上述得到的濾液于60 65。C和-0. 07 -0. 09MPa條件下濃縮至濾液體積的8 10%，得濃縮提取液；(3)向上述得到的濃縮提取液中加入等體積的正己烷，混勻，靜止分層后，取透明微紅的最下層液；(4)將上述得到的最下層液于50 55° C和-0. 07 -0. 09MPa條件下蒸發(fā)除去正己烷，得油狀液，即為富集了磷脂酰肌醇的產(chǎn)品，該產(chǎn)品中含磷脂2. 70 2. 76% (質(zhì)量分數(shù))，其中PI占磷脂的50. 5 51. 92% (質(zhì)量分數(shù))。本發(fā)明的從南極磷蝦中富集磷脂酰肌醇的方法，在低溫下進行，能夠保證南極磷蝦中的磷脂、DHA, EPA、蝦紅素、動物類黃酮素、不飽和脂肪酸、維生素A、維生素E和微量元素等成分不受到破壞，且富集過程中的上層溶液可以回收再利用，提取后的南極磷蝦可以再用于生產(chǎn)其它產(chǎn)品。經(jīng)本發(fā)明的方法得到的產(chǎn)品，磷脂酰肌醇的富集效率高，產(chǎn)品中含磷脂2. 70 2. 76%，其中磷脂酰肌醇占磷脂的50. 5 51. 92%，可以在此基礎(chǔ)上對磷脂酰肌醇進行進一步的再提取、分離、純化等。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步的說明。實施例I稱冰凍的南極磷蝦500g (含水80%，蝦干物質(zhì)占20%，下同)，加入95%乙醇600mL，在室溫下攪拌3h，倒出上清液并過濾。沉淀再反復(fù)提取4次，共提取5次，提取液過濾合并得濾液；將濾液在60°C，-0. 07MPa條件下蒸發(fā)濃縮至合并濾液體積的10%，得到濃縮提取液；向濃縮提取液中加入同體積的正己烷，搖勻靜置分層，取透明微紅色的最下層液，在52° C，-0. 08MPa條件下蒸發(fā)除去正己烷，得13g油狀液。該液體中磷脂含量為2. 72%，其中PI占磷脂的51. 92%。實施例2稱冰凍的南極磷蝦500g，加入90%乙醇550mL。在室溫下攪拌提取3h，倒出上清液并過濾。沉淀再重復(fù)提取3次，共提取4次，提取液過濾合并得濾液；將濾液在65° C，-0. 09MPa條件下濃縮至合并濾液體積的8%，得到濃縮提取液；向濃縮液中加入同體積的正己烷，搖勻靜置分層，取透明微紅的最下層液，在55° C，-0.09MPa條件下蒸除溶劑，得Ilg油狀液。該液體中磷脂含量為2. 70%，其中PI占磷脂的50. 5%。實施例3
稱冰凍的南極磷奸500g,加入無水乙醇650mL,在室溫下攪拌提取Ih,倒出上清液并過濾。沉淀再重復(fù)提取5次，共提取6次。提取液過濾合并得濾液；將濾液在60° C，-0. 08MPa條件下濃縮至合并濾液體積的10%，得到濃縮提取液；向濃縮液中加入同體積的正己烷，搖勻靜置分層，取透明微紅的最下層液，在50° C，-0.07MPa下蒸除溶劑，得12g油狀液。該液體中磷脂含量為2. 76%，其中PI占磷脂的51. 7%。實施例4稱冰凍的南極磷蝦500g，加入95%乙醇500mL，在室溫條件下攪拌提取2h，倒出上清液并過濾。沉淀再重復(fù)提取4次，共提取5次，提取液過濾合并得濾液；將濾液在65° C，-0. 09MPa條件下濃縮至合并濾液體積的9%，得到濃縮提取液；向該濃縮液中加入同 體積的正己烷，搖勻靜置分層，取透明微紅的最下層液，在50° C，-0. 09MPa條件下蒸發(fā)溶齊U，得12g油狀液，該液體中磷脂含量為2. 74%，其中PI占磷脂的51. 9%。
權(quán)利要求
1.一種從南極磷蝦中富集磷脂酰肌醇的方法，步驟如下 (1)取I公斤冰凍的南極磷蝦，加入到I I.3升的體積分數(shù)為90 100%的乙醇液中，自然條件下攪拌提取4 6次，每次I 3h，提取液過濾合并，得濾液； (2)將上述得到的濾液于60 65°C和-0. 07 -0. 09MPa條件下濃縮至濾液體積的8 10%，得濃縮提取液； (3)向上述得到的濃縮提取液中加入等體積的正己烷，混勻，靜止分層后，取透明微紅的最下層液； (4)將上述得到的最下層液于50 55°C和-0. 07 -0. 09MPa條件下蒸發(fā)除去正己烷，得油狀液，即為富集了磷脂酰肌醇的產(chǎn)品。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從南極磷蝦中富集磷脂酰肌醇的方法，步驟如下(1)取1公斤冰凍的南極磷蝦，加入到1～1.3升的體積分數(shù)為90～100%的乙醇液中，自然條件下攪拌提取4～6次，每次1～3h，提取液過濾合并，得濾液；(2)將上述得到的濾液于60～65°C和-0.07～-0.09MPa條件下濃縮至濾液體積的8～10%，得濃縮提取液；(3)向上述得到的濃縮提取液中加入等體積的正己烷，混勻，靜止分層后，取透明微紅的最下層液；(4)將上述得到的最下層液于50～55°C和-0.07～-0.09MPa條件下蒸發(fā)除去正己烷，得油狀液，即為富集了磷脂酰肌醇的產(chǎn)品，該產(chǎn)品中含磷脂2.70～2.76%，其中PI占磷脂的50.5～51.92%，可以在此基礎(chǔ)上對磷脂酰肌醇進行進一步的再提取、分離、純化等。
文檔編號C11B1/02GK102746941SQ201210249120
公開日2012年10月24日 申請日期2012年7月18日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月18日
發(fā)明者劉代成, 馬夫翠 申請人:山東師范大學(xué)