具有蛋白酶活性的多肽的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及具有蛋白酶活性的分離的多肽和編碼這些多肽的分離的多核苷酸。本發(fā)明還涉及包含這些多核苷酸的核酸構(gòu)建體、載體以及宿主細(xì)胞，連同生產(chǎn)這些多肽以及在例如動(dòng)物飼料和洗滌劑中使用這些多肽的方法。
【專利說(shuō)明】具有蛋白酶活性的多肽
[0001 ] 參考序列表
[0002]本申請(qǐng)包含一個(gè)計(jì)算機(jī)可讀形式的序列表，將其通過(guò)引用結(jié)合在此。
[0003]發(fā)明背景
發(fā)明領(lǐng)域
[0004]本發(fā)明涉及具有蛋白酶活性的分離的多肽和編碼這些蛋白酶的分離的核酸序列。本發(fā)明還涉及包含這些核酸序列的核酸構(gòu)建體,載體和宿主細(xì)胞(包含植物和動(dòng)物細(xì)胞)，以及生產(chǎn)和使用(尤其在動(dòng)物飼料和洗滌劑中使用這些蛋白酶)這些蛋白酶的方法。
[0005]發(fā)明背景
[0006]在動(dòng)物飼料中使用蛋白酶(體內(nèi))，和/或這類的蛋白酶用于處理植物性蛋白(體外)的用途中，注意的是蛋白對(duì)于動(dòng)物和人類是必需營(yíng)養(yǎng)因子。大部分家畜和許多人從植物性蛋白來(lái)源獲得這些必需蛋白。重要的植物性蛋白來(lái)源是例如油籽作物、豆類和谷類。
[0007]當(dāng)例如大豆粉包含在單胃動(dòng)物如豬和家禽的飼料中時(shí)，相當(dāng)比例的大豆餅粉固體未被有效地消化(在小豬、生長(zhǎng)豬和家禽如肉仔雞、蛋雞和公雞中的表觀回腸蛋白消化率僅是80%左右)。
[0008]動(dòng)物的胃腸道 是由一系列各自呈現(xiàn)不同pH環(huán)境的段組成。在單胃動(dòng)物如豬和家禽以及許多魚中，胃展現(xiàn)了低至PH1-2的強(qiáng)酸性pH，而腸展現(xiàn)了在pH6-7范圍內(nèi)的一個(gè)更中性的pH。除了胃和腸之外在胃之前家禽還具有一個(gè)嗉囊，該嗉囊中的pH主要取決于咽下的飼料并因此典型地處于PH4-6的范圍內(nèi)。通過(guò)一種蛋白酶消化蛋白可發(fā)生在整個(gè)消化道中，假如該蛋白酶是有活性的并存活于該消化道的條件下的話。因此，以下這樣的蛋白酶是特別令人希望的的:它是高度地酸穩(wěn)定的以在胃環(huán)境中存活，并且同時(shí)在靶動(dòng)物的寬的生理pH下是有效地有活性的。
[0009]另外，動(dòng)物飼料常常是以丸形式配制的，其中在該造丸過(guò)程中采用蒸汽。因此以下也是令人希望的，在動(dòng)物飼料中使用的蛋白酶能在暴露于蒸汽處理之后保持活性。
[0010]多年以來(lái)，蛋白酶也被用在洗滌劑組合物中用于水解紡織品、硬質(zhì)表面和其他表面(例如皮膚等)上的朊材料。這類洗滌劑組合物可通過(guò)粉末、片或肥皂?xiàng)l以手洗或自動(dòng)化機(jī)器的方式用于紡織品的清潔中，以及作為粉末和片通過(guò)手工或機(jī)器的方式用在餐具洗滌中。
[0011]本發(fā)明的新的S53家族蛋白酶對(duì)于這些目的也是有用的。
[0012]為了生產(chǎn)用于工業(yè)使用的蛋白酶，重要的是生產(chǎn)高產(chǎn)量的蛋白酶，使得可獲得足夠量的該產(chǎn)品以能夠以有利的價(jià)格提供該蛋白酶。
[0013]具有蛋白酶活性的多肽
[0014]具有蛋白酶活性的多肽、或蛋白酶有時(shí)還被指定為肽酶、朊酶、肽水解酶或蛋白水解酶。蛋白酶可以是在其任一端開始水解肽的外切型蛋白酶或在多肽鏈內(nèi)部發(fā)揮作用的內(nèi)切型蛋白酶(內(nèi)肽酶)。內(nèi)肽酶對(duì)N-和C-末端被封閉的肽底物顯示出活性，該底物與所討論的蛋白酶的特異性有關(guān)。[0015]本文將術(shù)語(yǔ)“蛋白酶”定義為水解肽鍵的酶。蛋白酶的定義也適用于如此處使用的術(shù)語(yǔ)“母體蛋白酶”和“蛋白酶變體”的蛋白酶部分。術(shù)語(yǔ)“蛋白酶”包含任何屬于EC3.4酶組的酶(包含其13個(gè)亞類中的每一個(gè))。該EC編號(hào)指的是酶命名法(Enzyme Nomenclature),1992來(lái)自NC-1UBMB，學(xué)術(shù)出版社(Academic Press)，圣地亞哥，加利福尼亞，包含增刊1-5，各自發(fā)表于歐洲生物化學(xué)雜志(Eur.J.Bio-chem.) 1994，223，1-5 ;歐洲生物化學(xué)雜志(Eur.J.Biochem.) 1995，232，1-6 ;歐洲生物化學(xué)雜志(Eur.J.Biochem.) 1996，237，1-5 ；歐洲生物化學(xué)雜志(Eur.J.Biochem.) 1997，250，1_6 ;以及歐洲生物化學(xué)雜志(Eur.J.Biochem.) 1999，264，610-650。命名定期得以增補(bǔ)和更新；見例如萬(wàn)維網(wǎng)(Wffff)于http://www.chem.qmw.ac.uk/iubmb/en-zyme/index, html。
[0016]本發(fā)明的和根據(jù)本發(fā)明使用的蛋白酶選自由以下各項(xiàng)組成的組:
[0017](a)屬于EC3.4.21.酶組的蛋白酶；和/或
[0018](b)S53肽酶家族的絲氨酸蛋白酶，其包含兩種不同類型的肽酶:三肽氨肽酶(外切型)和內(nèi)切肽酶。
[0019]如在生物化學(xué)雜志(Biochem.J.)290:205-218(1993)和在MEROPS蛋白酶數(shù)據(jù)庫(kù)，發(fā)行9.4(2011年I月31日)(www.merops.ac.uk)中所述的。該數(shù)據(jù)庫(kù)描述于羅林斯(Rawlings), N.D.,巴雷特(Barrett), A.J.& 貝特曼(Bateman)，A.(2010)MEROPS:妝酶數(shù)據(jù)庫(kù)(MEROPS: the peptidase database).核酸研究(Nucleic Acids Res) 38, D227-D233 中。
[0020]S53肽酶家族包含酸起作用的內(nèi)肽酶和三肽-肽酶。
[0021]催化三聯(lián)體的殘基是Glu、Asp、Ser，并且在氧陰離子穴中存在一個(gè)另外的酸性殘基Asp。該Ser殘基在枯草桿菌蛋白酶的Asp、His、Ser三聯(lián)體中是等價(jià)于Ser的親核體，并且該三聯(lián)體的Glu是枯草桿菌蛋白酶中的廣義堿基His的一個(gè)代替物。
[0022]該催化三聯(lián)體或氧陰離子穴的任意氨基酸的突變將導(dǎo)致酶活性的變化和損失。來(lái)自芽孢桿菌19138 (SEQ ID NO: 5)的S53蛋白酶的催化三聯(lián)體和氧陰離子穴的氨基酸的可能是位置 Glu-82、Asp-86、Asp-175 和 Ser-353。
[0023]該S53家族的肽酶傾向于在酸性pH下最有活性(不像同源的枯草桿菌蛋白酶)，并且這可歸因于羧基殘基(尤其Asp)在該氧陰離子穴中的功能的重要性。
[0024]這些氨基酸序列不與S8家族中的那些密切相似，并且這一點(diǎn)與完全不同的活性部位殘基以及關(guān)于最大活性的所得的較低的PH —起，為該家族提供了實(shí)質(zhì)性的差異。
[0025]肽酶單元的蛋白折疊對(duì)于這個(gè)家族的成員來(lái)說(shuō)與枯草桿菌蛋白酶的類似，親族SB類型的實(shí)例。
[0026]關(guān)于本發(fā)明，鑒定并克隆了在低pH (3-4)下對(duì)大豆-玉米粉具有高活性的來(lái)自芽胞桿菌19138的一種新的S53蛋白酶。
[0027]為了確定給定蛋白酶是否為絲氨酸蛋白酶和S53家族的蛋白酶，可參考上述手冊(cè)和其中述及的原理?？蓪?duì)所有蛋白酶類型進(jìn)行確定，而不論其是天然發(fā)生或野生型蛋白酶，還是經(jīng)基因工程改造或合成的蛋白酶。
[0028] 可使用任何測(cè)定來(lái)測(cè)量蛋白酶活性，其中采用一種底物，該底物包含與所討論的蛋白酶的特異性有關(guān)的肽鍵。PH測(cè)定和溫度測(cè)定同樣適用于所討論的蛋白酶。pH值測(cè)定的實(shí)例是 pH2、3、4、5、6、7、8、9、10、ll、或 12。溫度測(cè)定的實(shí)例是 15、20、25、30、35、37、40、45、50、55、60、65、70、80、90、或95°C。蛋白酶底物的實(shí)例是膠原蛋白，如天青精交聯(lián)的膠原蛋白(AZCL-膠原蛋白)，或suc-AAPR-pNA。適合的蛋白酶測(cè)定的實(shí)例在實(shí)驗(yàn)部分中描述。
[0029]相關(guān)技術(shù)說(shuō)明
[0030]從芽胞桿菌分離的S53蛋白酶是本領(lǐng)域已知的。一個(gè)實(shí)例是凝結(jié)芽孢桿菌，從其中已經(jīng)指定了與本發(fā)明的SEQ ID NO:5具有41.3%和37.2%的一致性的兩種S53蛋白酶，并且芽胞桿菌MN-32與本發(fā)明的SEQ ID NO: 5具有39.5%的一致性。
[0031]在諾埃爾(Noelling)等人，‘產(chǎn)溶媒細(xì)菌丙酮丁醇梭桿菌的基因組序列和比較分析(Genome sequence and comparative analysis of the solvent-producing bacteriumClostridium acetobutylicum) ’ 細(xì)菌學(xué)雜志(J Bacteriol.) 183:4823-4838 (2001)中，披露了與本發(fā)明的SEQ ID NO:5具有65.9%的一致性的一種可能的周質(zhì)天冬氨酰蛋白酶(UNIPR0T:Q97LD7，SEQ ID NO:9) ?該公開表明它是一種絲氨酸蛋白酶。具有UNIPR0T編號(hào)R)K735的相同序列也被胡(Hu)等人在‘在丙酮丁醇梭桿菌EA2018中的比較基因組和轉(zhuǎn)錄組分析顯示與溶媒形成和木糖利用相關(guān)的遺傳特征(Comparative genomicand transcriptomic analysis revealed genetic characteristics related to solventformation and xylose utilization in Clostridium acetobutylicum EA2018) ’, BMC 基因組學(xué)(BMC Genomics) 12:93-93 (2011)中披露，并且此外，包(Bao)，G 李(Li)，Y 在 2011 年
4月將其提交至 EMBL/GenBank/DDBJ 數(shù)據(jù)庫(kù) UNIPR0T:F7ZTR3。
[0032]在W02005/066339中，來(lái)自脂環(huán)酸芽抱桿菌屬(Alicyclusbacillus sp.)菌株的兩個(gè)序列(SEQ ID N0:29和30)作為絲氨酸-羧基蛋白酶被披露。這些序列與本發(fā)明的SEQID N0:5具有52.3%的一致性。本申請(qǐng)未指出具有SEQ ID NO:29或30的肽的任何特異性用途，但指出包含所披露的各種肽的組合物在洗滌劑、食物、烘焙產(chǎn)品、釀造產(chǎn)品、果汁、動(dòng)物飼料、制漿等中的 用途。
[0033]本發(fā)明提供具有蛋白酶活性的多肽和編碼這些多肽的多核苷酸。本發(fā)明的蛋白酶是S53肽酶家族的絲氨酸蛋白酶。本發(fā)明的蛋白酶展現(xiàn)了 pH特性，尤其是pH穩(wěn)定性特性，這使它們作為用于動(dòng)物飼料和其他應(yīng)用的候選物具有實(shí)質(zhì)性利益。
[0034]本發(fā)明的蛋白酶是具有胰蛋白酶樣特異性的酸性蛋白酶。這些蛋白酶在一個(gè)寬的從3-6的pH的范圍下對(duì)Suc-Ala-Ala-Pro-Arg-pNA具有活性，并在經(jīng)受低至3的pH2小時(shí)之后保持了多于80%的活性。
[0035]在動(dòng)物飼料中使用蛋白酶以改善蛋白在飼料中的消化是已知的。W095/28850披露了一種肌醇六磷酸酶與一種或多種微生物蛋白水解酶組合以改善植物性蛋白的溶解度。W001/58275披露了在動(dòng)物飼料中使用枯草桿菌蛋白酶家族的酸穩(wěn)定性蛋白酶。W001/58276披露了在動(dòng)物飼料中使用與以下蛋白酶相關(guān)的酸穩(wěn)定性蛋白:擬諾卡菌NRRL18262(10R蛋白酶)，連同衍生自白擬諾卡氏菌DSM14010的一種蛋白酶。W004/07222U W004/111220、W004/111223、TO05/035747、和TO05/123911披露了與10R蛋白酶相關(guān)的蛋白酶和它們?cè)趧?dòng)物飼料中的使用。另外，W004/072279披露了其他蛋白酶的使用。
[0036]W004/034776披露了一種枯草桿菌蛋白酶/角蛋白酶，來(lái)自地衣芽孢桿菌的PWD-1，在家禽飼料中的使用。W004/077960披露了一種通過(guò)采用一種細(xì)菌或真菌蛋白酶增加草料或谷物在反芻動(dòng)物中的消化率的方法。
[0037]包含一種蛋白酶的并且銷售以用于在動(dòng)物飼料中使用的商業(yè)產(chǎn)品包含RonoZYME(B) ProAct (DSM NP/ 諾維信公司(Novozymes))、Axtra? (丹尼斯克公司(Danisco))、Avizyme? (丹尼斯克公司)、Porzyme? (丹尼斯克公司)、Allzyme?(奧特奇公司(Alltech))、Versazy me? (生物資源有限公司(BioResources, Int.)、Pou I try grow? (杰夫公司(Jefo))和 Clbenza? DPlOO (諾偉思公司(Novus))。
[0038]發(fā)明概述
[0039]本發(fā)明涉及具有蛋白酶活性的分離的多肽，這些分離的多肽選自由以下各項(xiàng)組成的組:
[0040](a)與 SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6 的多肽，或 SEQ ID NO:2 或 SEQ ID NO:4 的成熟多肽具有至少80%序列一致性的多肽；
[0041](b)由在高嚴(yán)謹(jǐn)度條件、或非常高嚴(yán)謹(jǐn)度條件下與以下各項(xiàng)雜交的多核苷酸編碼的多肽:
[0042]⑴SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列，
[0043](ii)SEQ ID NO:3的成熟多肽編碼序列，或
[0044](iii)⑴或(ii)的全長(zhǎng)互補(bǔ)鏈； [0045](c)由與SEQ ID NO:1或SEQ ID NO: 3的成熟多肽編碼序列具有至少80%序列一致性的多核苷酸編碼的多肽；
[0046](d)包含 SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6 的多肽，或 SEQ ID NO:2 或 SEQ ID NO:4 的成熟多肽的一個(gè)或多個(gè)(若干個(gè))氨基酸的置換、缺失、和/或插入的變體；以及
[0047](e) (a)、(b)、(c)或(d)的多肽的一個(gè)片段，該片段具有蛋白酶活性。
[0048]本發(fā)明還涉及編碼本發(fā)明的多肽的分離的多核苷酸、包含這些多核苷酸的核酸構(gòu)建體、重組表達(dá)載體、以及重組宿主細(xì)胞，并涉及產(chǎn)生這些多肽的方法。
[0049]本發(fā)明還涉及包含本發(fā)明的多肽的組合物，例如動(dòng)物飼料組合物或洗滌劑組合物，連同包含本發(fā)明的多肽的動(dòng)物飼料添加劑。本發(fā)明進(jìn)一步涉及制備用于動(dòng)物飼料的一種組合物以提高動(dòng)物飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的方法，以及處理蛋白以用在動(dòng)物飼料組合物中的方法。
[0050]附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明
[0051]在附圖中:
[0052]圖1顯示來(lái)自芽胞桿菌19138的S53蛋白酶與IOR蛋白酶相比的pH-活性曲線。Suc-AAPR-pNA被用作來(lái)自芽胞桿菌19138的S53蛋白酶的底物。Suc-AAPF-pNA被用作IOR蛋白酶的底物。
[0053]圖2顯示來(lái)自芽胞桿菌19138的S53蛋白酶與IOR蛋白酶相比在37°C下2小時(shí)之后的PH穩(wěn)定性曲線(殘余活性)。
[0054]圖3顯示與IOR蛋白酶在pH6.5下的溫度活性曲線相比來(lái)自芽胞桿菌19138的S53蛋白酶在pH4.0下的溫度活性曲線。
[0055]圖4顯示與IOR蛋白酶在pH9.0下對(duì)10Suc_AAPX-pNA底物的Pl特異性相比來(lái)自芽胞桿菌19138的S53蛋白酶在pH4.0下對(duì)10Suc-AAPX-pNA底物的Pl特異性。
[0056]圖5顯示來(lái)自芽胞桿菌19138的S53蛋白酶與10R蛋白酶相比對(duì)大豆-玉米粉的相對(duì)活性。
[0057]圖6顯示以升高的蛋白酶劑量在砂囊消化物孵育I小時(shí)后與未孵育的樣品相比的游離α-氨基基團(tuán)的水平，并且
[0058]圖7顯示在用來(lái)自芽胞桿菌19138的S53蛋白酶或IOR蛋白酶處理之后并在胃孵育()和完全胃+腸道孵育(口)之后測(cè)量的體外消化樣品中的蛋白水解度(DH，% )。不同的字母表明統(tǒng)計(jì)上顯著的差異。
[0059]序列表綜述
[0060]SEQ ID NO:1是如從芽孢 桿菌19138中分離的DNA序列。
[0061]SEQ ID NO: 2是如從SEQ ID NO:1演繹的氨基酸序列。
[0062]SEQ ID NO: 3是具有HQ標(biāo)記的重組表達(dá)DNA序列的DNA序列。
[0063]SEQ ID NO:4是如從SEQ ID NO: 3演繹的氨基酸序列。
[0064]SEQ ID NO:5是成熟蛋白酶芽孢桿菌19138的氨基酸序列。
[0065]SEQ ID Ν0:6是從SEQ ID N0.3獲得的成熟蛋白酶的氨基酸序列。
[0066]SEQ ID NO: 7 是 IOR 蛋白酶(W005/035747, SEQ ID NO:1)的 DNA 序列。
[0067]SEQ ID NO:8 是 IOR 蛋白酶(W005/035747, SEQ ID NO: 2)的氨基酸序列。
[0068]SEQ ID NO:9是來(lái)自丙酮丁醇梭桿菌(SWISSPR0T:R)K735)的氨基酸序列。
[0069]SEQ ID NO: 10是遲緩芽孢桿菌分泌信號(hào)。
[0070]序列的一致性矩陣
[0071]
【權(quán)利要求】
1.一種具有蛋白酶活性的分離的多肽，該分離的多肽選自由以下各項(xiàng)組成的組:
(a)與SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6 的多肽，或 SEQ ID NO:2 或 SEQ ID NO:4 的成熟多肽具有至少80%序列一致性的多肽； (b)由在高嚴(yán)謹(jǐn)度條件、或非常高嚴(yán)謹(jǐn)度條件下與以下各項(xiàng)雜交的多核苷酸編碼的多肽: (i)SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列， (ii)SEQID NO:3的成熟多肽編碼序列，或 (iii)(i)或Qi)的全長(zhǎng)互補(bǔ)鏈； (c)由與SEQID NO:1或SEQ ID NO: 3的成熟多肽編碼序列具有至少80%序列一致性的多核苷酸編碼的多肽；
(d)包含SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6 的多肽，或 SEQ ID NO:2 或 SEQ ID NO:4 的成熟多肽的一個(gè)或多個(gè)(若干個(gè))氨基酸的置換、缺失、和/或插入的變體；以及 (e)(a)、(b)、(C)或(d)的多肽的一個(gè)片段，該片段具有蛋白酶活性。
2.如權(quán)利要求1所述的多肽，該多肽是由在高嚴(yán)謹(jǐn)度條件、或非常高嚴(yán)謹(jǐn)度條件下與以下各項(xiàng)雜交的多核苷酸編碼的:
(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列， (ii)SEQID NO:3的成熟多肽編碼序列，或 (iii)(i)或Qi)的全長(zhǎng)互補(bǔ)鏈。
3.如權(quán)利要求1-2中任一項(xiàng)所述的多肽，該多肽包含SEQID NO: 5,SEQ ID NO:6的多肽，或SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4的成熟多肽或由其組成。
4.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的多肽，該多肽是SEQID NO: 5,SEQ ID NO: 6，或SEQ IDNO:2或SEQ ID NO:4的成熟多肽的一個(gè)片段，其中該片段具有蛋白酶活性。
5.如權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的變體多肽，該變體多肽與SEQID NO: 5,SEQ ID NO: 6的多肽，或SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4的成熟多肽具有至少90%序列一致性，并包含其一個(gè)或多個(gè)(若干個(gè))氨基酸的置換、缺失、和/或插入。
6.一種組合物，該組合物包含權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的多肽。
7.—種分離的多核苷酸,該多核苷酸編碼如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的多肽。
8.—種核酸構(gòu)建體或表達(dá)載體,該核酸構(gòu)建體或表達(dá)載體包含如權(quán)利要求7所述的多核苷酸，該多核苷酸可操作地連接至在表達(dá)宿主細(xì)胞內(nèi)指導(dǎo)該多肽產(chǎn)生的一個(gè)或多個(gè)(若干個(gè))控制序列上。
9.一種重組表達(dá)宿主細(xì)胞,該重組表達(dá)宿主細(xì)胞包含如權(quán)利要求8所述的一種多核苷酸，該多核苷酸可操作地連接至指導(dǎo)該多肽產(chǎn)生的一個(gè)或多個(gè)控制序列上。
10.一種產(chǎn)生如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的多肽的方法,該方法包含: (a)培養(yǎng)一種細(xì)胞，在有益于產(chǎn)生該多肽的條件下，處于野生型形式的該細(xì)胞產(chǎn)生該多肽；并且 (b)回收該多肽。
11.一種產(chǎn)生如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的多肽的方法,該方法包含: (a)在有益于產(chǎn)生該多肽的條件下培養(yǎng)如權(quán)利要求9所述的一種宿主細(xì)胞；并且 (b)回收該多肽。
12.用一種多核苷酸轉(zhuǎn)化的一種轉(zhuǎn)基因植物、植物部分或植物細(xì)胞，該多核苷酸編碼如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的多肽。
13.—種產(chǎn)生如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的多肽的方法,該方法包含: (a)在有益于產(chǎn)生該多肽的條件下培養(yǎng)如權(quán)利要求12所述的一種轉(zhuǎn)基因植物或植物細(xì)胞；并且 (b)回收該多肽。
14.如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的至少一種多肽在以下各項(xiàng)中的用途: (i)在動(dòng)物飼料中； (?)在動(dòng)物飼料添加劑中； (iii)在用于動(dòng)物飼料的組合物的制備中； (iv)用于提高動(dòng)物飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值； (V)用于增加動(dòng)物飼料中的可消化和/或可溶性蛋白； (vi)用于增加動(dòng)物飲食中的蛋白的水解度；和/或 (vii)用于處理蛋白。
15.一種用于提高動(dòng)物飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的方法，其中向該飼料中添加如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的至少一種多肽。
16.—種動(dòng)物飼料添加劑，包含: (i)如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的至少一種多肽；以及 (?)至少一種脂-溶性維生素，和/或 (iii)至少一種水-溶性維生素,和/或 (iv)至少一種微量礦物質(zhì)。
17.如權(quán)利要求16所述的動(dòng)物飼料添加劑，其進(jìn)一步包含淀粉酶、肌醇六磷酸酶、木聚糖酶、半乳聚糖酶、α -半乳糖苷酶、蛋白酶、磷脂酶、和/或β -葡聚糖酶。
18.一種動(dòng)物飼料，具有50至800g/kg的粗蛋白含量，并包含如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的至少一種多肽。
19.一種用于處理蛋白的方法，包含將如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的至少一種多肽添加至至少一種蛋白或蛋白來(lái)源中的步驟。
20.如權(quán)利要求19所述的方法，其中大豆包含在該至少一種蛋白來(lái)源中。
21.如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的至少一種多肽在洗滌劑中的用途。
22.一種洗滌劑組合物，該組合物包含如權(quán)利要求1至5所述的至少一種多肽。
23.如權(quán)利要求22所述的洗滌劑組合物，其中該組合物包含一種或多種其他的酶。
24.如權(quán)利要求23所述的洗滌劑組合物，其中該其他的酶選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成:蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、角質(zhì)酶、纖維素酶、內(nèi)切葡聚糖酶、木葡聚糖酶、果膠酶、果膠裂解酶、黃原膠酶、過(guò)氧化物酶、鹵代過(guò)氧羥基脂肪酸輕化環(huán)氧化酶(haloperoxygenase)、過(guò)氧化氫酶以及甘露聚糖酶，或其任何混合物。
【文檔編號(hào)】C11D3/386GK104024408SQ201280064408
【公開日】2014年9月3日 申請(qǐng)日期:2012年12月20日 優(yōu)先權(quán)日:2011年12月28日
【發(fā)明者】T·霍夫, C·舍霍爾姆, P·R·厄斯特高, K·蓬托皮丹 申請(qǐng)人:諾維信公司