N-?；被嶙鳛槿似つw真皮的衰老復(fù)制性成纖維細(xì)胞的遺傳特性的調(diào)節(jié)活性劑的用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及N-?；被嶙鳛槿似つw真皮的衰老復(fù)制性成纖維細(xì)胞的遺傳特性的調(diào)節(jié)活性劑的用途、包含其的抗老化美容用組合物以及意欲延緩皺紋出現(xiàn)和/或減緩人體皮膚細(xì)胞老化的治療方法的實(shí)施，其中N-酰基氨基酸選自N-棕櫚?；彼?、N-棕櫚?；拾彼岷蚇-棕櫚?；惲涟彼?。
【專利說明】N-?；被嶙鳛槿似つw真皮的衰老復(fù)制性成纖維細(xì)胞的遺傳特性的調(diào)節(jié)活性劑的用途
[0001]本申請是申請?zhí)枮?00980133503.3的中國專利申請的分案申請。
發(fā)明領(lǐng)域
[0002]本發(fā)明涉及美容用和藥用活性成分領(lǐng)域，并且還涉及包含其的局部用組合物。
【背景技術(shù)】
[0003]在發(fā)達(dá)國家中對生命期望的增加已經(jīng)持續(xù)地伴隨著無法抑制的對“恢復(fù)青春”的渴望，這在過去30年左右變得更加明顯并且這導(dǎo)致了嘗試延緩(如果看不見消失)皮膚老化跡象如特別是皺紋的出現(xiàn)。這種行為變化已經(jīng)伴隨著致力于皮膚的科學(xué)研究的發(fā)展，并且在約10年中也伴隨著“抗老化”美容用產(chǎn)品市場的快速增長。
[0004]本發(fā)明屬于研究如下新分子或組合物的內(nèi)容:所述新分子或組合物當(dāng)應(yīng)用于皮膚時通過其自身活性產(chǎn)生這種“抗老化”作用。
[0005]皮膚老化·機(jī)制可以以以下方式來解釋:
[0006]皮膚由兩種主要的組織組成:真皮和表皮(其更加淺表)，位于兩者之間的是交界區(qū)一真皮表皮界。
[0007]-真皮是致密和纖維彈件的結(jié)締組織，其產(chǎn)牛和仟何重塑基本上由成纖維細(xì)胞講行，其由細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)組成，細(xì)胞外基質(zhì)由負(fù)責(zé)皮膚美觀性質(zhì)的纖維性(膠原和彈性)分子組成，并且其還由基質(zhì)組成。膠原占真皮干重的98%?；|(zhì)由如下組成:
[0008]-填充細(xì)胞和纖維之間空間的大分子；
[0009]-結(jié)構(gòu)糖蛋白，其允許細(xì)胞與ECM連接并且基本位于真皮表皮界以下；
[0010]-蛋白聚糖，包括糖胺聚糖(GAGs)，它是與蛋白質(zhì)結(jié)合的形式(共價鍵合)，或者雙糖鏈蛋白聚糖。
[0011]-表皮基本上由角質(zhì)形成細(xì)胞組成。這些細(xì)胞在基層增殖，然后逐漸分化形成表皮的各層，同時從底部遷移至表面，在表面處脫落。
[0012]-真皮表皮界(DEJ)是位于表皮的基底角質(zhì)形成細(xì)胞和真皮之間的交界區(qū)。其特征是存在基膜，在基膜中ECM形成薄的和固體的網(wǎng)格。其由五種主要組分組成，即IV型膠原、層粘連蛋白、硫酸乙酰肝素、巢蛋白(或觸覺蛋白)和纖連蛋白。
[0013]ECM和DEJ的完整性以及表皮分化特別取決于負(fù)責(zé)眾多ECM組分的降解的酶MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)的存在。
[0014]許多外源性和內(nèi)源性因素(包括氧化應(yīng)激)造成強(qiáng)調(diào)老化過程中的炎性過程，例如白細(xì)胞介素 _6 (IL-6)的產(chǎn)生(Ramasamy 等人，2005 ;Papanicolaou 等人，2006 ;Vaeto 等人，2007)。在皮膚老化期間，上文所列的一種或其它或數(shù)種DEJ分子被自由基改變。
[0015]目前有許多“抗老化”或“抗皺”活性成分。其中一些能夠調(diào)節(jié)正常人成纖維細(xì)胞的表型和/或性質(zhì)。例如，許多美容用活性成分刺激通過成纖維細(xì)胞進(jìn)行的膠原生成。因此，在美容應(yīng)用中所用的LAAs中，有一些具有抗老化生物學(xué)性質(zhì)，例如二棕櫚?；u脯氨酸(Sepilift? DPHP)。
[0016]作為US2006/024375公開的美國專利申請公開:向粉底化妝品中摻入N-棕櫚?；彼帷-棕櫚?；劝彼岷蚇-棕櫚?；“彼岬幕旌衔锂a(chǎn)生了皮膚保護(hù)作用和抗老化作用，這些作用由于其對皮膚的抗炎性質(zhì)和作為P物質(zhì)拮抗劑起作用因而是特別較高的。
[0017]作為US2007/0048396公開的美國專利申請公開了 N-椰油?；被?、天冬氨酸鎂和天冬氨酸鉀的混合物對皮膚的抗炎性質(zhì)。
[0018]另一方面，幾乎沒有“抗老化”活性成分已知能夠引起炎性組分減少、特別是IL-6表達(dá)水平降低。具體而言，雖然某些抗氧化劑能夠減少與老化相關(guān)的IL-6產(chǎn)生(Walston等人，2006 ；Omoigui, 2007)，但是這類作用不一定與調(diào)節(jié)ECM產(chǎn)生或?qū)ζ溥M(jìn)行保護(hù)的能力相關(guān)。相反，一些活性成分如視黃醇被描述為引起發(fā)炎(Kim等人，2003)。另外，一些抗炎藥用分子導(dǎo)致ECM組分如膠原纖維的產(chǎn)生減少(Miltyk等人，1996)。因此，在一方面活性成分的抗炎性質(zhì)和另一方面其抗老化效力之間沒有明顯的相關(guān)性。
[0019]為了使皮膚老化作用可見和然后改正它們，已經(jīng)描述了各種實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。因此，在單層成纖維細(xì)胞培養(yǎng)的情況下，各種刺激在體外可導(dǎo)致老化加速。
[0020]-例如，為了模擬光老化和/或氧化應(yīng)激，能夠使這些細(xì)胞接受紫外輻射的照射(Ma 等人,2001 ；Kawanishi 和 Oikawa, 2004 ；Chen 等人,2007)。
[0021]-通過培養(yǎng)和研究來自老年供體的細(xì)胞也可以在體外復(fù)制老化[Albini等人，(1988) ；Miyoshi 等人，(2006)]。
[0022]-最后，按照Hayflick’ s模型，通過以使得它們進(jìn)行大量群體倍增的方式培養(yǎng)成纖維細(xì)胞可以復(fù)制衰老(Bradley、Hayflick和Schimke, 1976 ；Albini等人,1988)。該過程通常被稱為“復(fù)制衰老”。
[0023]因此，這些原代培養(yǎng)物的實(shí)驗(yàn)性老化模型可用于評價美容用活性成分改正皮膚老化引起的缺陷和/或表型或生物學(xué)功能擴(kuò)大的能力。因此，很多活性成分限制了 UV-照射的成纖維細(xì)胞中的MMP蛋白生成。其它活性成分能夠部分地恢復(fù)晚傳代成纖維細(xì)胞中的基因或蛋白質(zhì)的活性。
[0024]但是，一些研究在細(xì)胞系上進(jìn)行，而不是在原代培養(yǎng)物上進(jìn)行。
[0025]現(xiàn)在，以它們以事實(shí)上不受限的方式使群體翻倍的能力表征細(xì)胞系。該過程相應(yīng)于無限增殖化(Goldstein, 1990 ；Rhim, 1991 ；Macieira-Coelho, 2000)。因此，通常認(rèn)為:與對等的原代培養(yǎng)物相比，細(xì)胞系顯示出某些差異。因此，它們不反映生理現(xiàn)實(shí)，特別是對于老化而言。而且，在人成纖維細(xì)胞的原代培養(yǎng)物的情況下，大多數(shù)研究采用來源于包皮的細(xì)胞進(jìn)行。但是，與來源于成人真皮的人成纖維細(xì)胞相比，這些包皮表現(xiàn)出特定的性質(zhì)(Jelaska 和 Korn, 1998 ；Khorramizadeh 等人,1999 ；Saguet 等人,2006)。具體而言，通常認(rèn)為這些成纖維細(xì)胞表現(xiàn)出增加的增殖能力。它們對氧化應(yīng)激的敏感性也表現(xiàn)出不同(Saguet等人，2006)。因此，使用與最終將被抗老化活性成分所靶向的那些細(xì)胞相同來源的細(xì)胞、即成人真皮的細(xì)胞更具有相關(guān)性。現(xiàn)在，據(jù)我們所知，沒有N-?；被嵋呀?jīng)被描述為能夠以減少炎癥并同時促進(jìn)ECM生成或保護(hù)的方式調(diào)節(jié)來源于成人真皮的復(fù)制衰老性成纖維細(xì)胞(replicative senescent fibroblasts)的遺傳特性。

【發(fā)明內(nèi)容】
[0026]根據(jù)第一方面，本發(fā)明的主題是作為調(diào)節(jié)人皮膚真皮的復(fù)制衰老性成纖維細(xì)胞的遺傳特性的活性劑的N-?；被?，所述N-?；被徇x自N-棕櫚?；彼?、N-棕櫚酰基甘氨酸、N-棕櫚?；惲涟彼岷蚇-椰油?；彼?。
[0027]根據(jù)第二方面，本發(fā)明的主題還有N-?；被嵩趯?shí)施意欲延緩皺紋出現(xiàn)和/或減緩人體皮膚細(xì)胞老化的治療方法中的用途，所述N-?；被徇x自N-棕櫚?；彼?、N-棕櫚?；拾彼?、N-棕櫚?；惲涟彼岷蚇-椰油?；彼帷?br> [0028]表述“調(diào)節(jié)人皮膚真皮的復(fù)制衰老性成纖維細(xì)胞的遺傳特性”更特別地指如上文定義的N-酰基氨基酸具有下述性質(zhì)中的一種或其它、數(shù)種或全部:
[0029]-其引起編碼促炎細(xì)胞因子IL-6的基因的表達(dá)水平降低；
[0030]-其引起編碼MMP-1的基因的表達(dá)水平降低，MMP-1是參與細(xì)胞外基質(zhì)降解的金屬蛋白酶；
[0031 ]-其引起編碼促炎蛋白、serpin2B或PA1-2 (纖維蛋白溶酶原激活物抑制劑_2)的基因的表達(dá)水平降低(Kessler-Becker等人，2004)；
[0032]-其引起編碼真皮組分皮膚橋蛋白(dermatopontin)(DPT)的基因的表達(dá)水平增加，皮膚橋蛋白是細(xì)胞外基質(zhì)的組分之一(Okamoto和Fujiwara, 2006)；
[0033]-其引起編碼I型膠原(COLlAl)的基因的表達(dá)水平增加，I型膠原是細(xì)胞外基質(zhì)的組分之一；
[0034]-其引起編碼雙糖鏈蛋白聚糖(BGN)的基因的表達(dá)水平增加，雙糖鏈蛋白聚糖是細(xì)胞外基質(zhì)的組分之一；
[0035]-其引起編碼巢蛋白 的基因的表達(dá)水平增加，巢蛋白是真皮表皮界的組分之一(Aumailley 等人，1984)；
[0036]-其引起編碼生腱蛋白C(TNC)的基因的表達(dá)水平增加，生腱蛋白C是真皮表皮界的組分之一(Marionnet等人，2006),并且還參與膠原纖維收縮(Tamaoki等人，2005)；
[0037]-其引起編碼多效營養(yǎng)因子(PTN)的基因的表達(dá)水平增加，多效營養(yǎng)因子是參與成纖維細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞之間的相互作用的蛋白質(zhì)(Florin等人，2005)；
[0038]-其引起編碼熱激蛋白(HSP90A)的基因的表達(dá)水平增加，熱激蛋白參與調(diào)節(jié)蛋白酶體的活性，蛋白酶體是使得降解受損蛋白質(zhì)成為可能的體系(Morishima等人，2005)；
[0039]-其引起編碼serpinlH(HSP47)的基因的表達(dá)水平增加，serpinlH是參與調(diào)節(jié)膠原纖維形成的蛋白質(zhì)(Kuroda和Tajima, 2004)；
[0040]-其引起編碼波形蛋白的基因的表達(dá)水平增加，波形蛋白是成纖維細(xì)胞細(xì)胞骨架的組分之一(Rappersberger 等人，1990)。
[0041]在如上文定義的用途中使用的N-?；被峥梢允怯坞x酸形式或者部分或全部地是成鹽形式。當(dāng)它是成鹽形式時，其特別包括堿金屬鹽(例如鈉、鉀或鋰鹽)、堿土金屬鹽(例如鈣、鎂或鍶鹽)、銨鹽或氨基醇的鹽(例如(2-羥基乙基)銨鹽)。它還可以包括金屬鹽，例如鋅或錳二價鹽或者鐵、鑭、鈰或鋁三價鹽。通常，所述N-?；被岬某甥}程度還取決于其pKA和其將摻入其中的組合物中的鹽濃度。
[0042]根據(jù)本發(fā)明的另一種特定變通方式，僅一種上文定義的N-?；被岜挥糜诤忻廊輰W(xué)上可接受的介質(zhì)的組合物中。
[0043]根據(jù)本發(fā)明的另一種特定變通方式，使用選自上文定義的那些的N-?；被岬幕旌衔?。
[0044]根據(jù)另一個特定方面，本發(fā)明的主題是如上文定義的用途，其中N-?；被崾荖-棕櫚?；彼?。
[0045]根據(jù)另一個特定方面，本發(fā)明的主題是如上文定義的用途，其中N-?；被崾荖-棕櫚?；拾彼?。
[0046]根據(jù)另一個特定方面，本發(fā)明的主題是如上文定義的用途，其中N-?；被崾荖-棕櫚?；惲涟彼帷?br> [0047]根據(jù)另一個特定方面，本發(fā)明的主題是如上文定義的用途，其中N-酰基氨基酸是N-椰油?；彼?。
[0048]術(shù)語“N-椰油?；彼帷币庥竿ㄟ^使丙氨酸與來源于椰子油的脂肪酸的活化衍生物?；@得的N-?；彼岬幕旌衔铩?br> [0049]如上文定義的N-?；被嵬ǔＭㄟ^使相應(yīng)的氨基酸或其鹽進(jìn)行N-?；@得。
[0050]當(dāng)涉及N-?；被岬幕旌衔飼r，所述混合物例如通過使由所有來源的蛋白質(zhì)的總水解所產(chǎn)生的氨基酸混合物進(jìn)行N-?；@得。
·[0051]本發(fā)明的主題還有意欲延緩皺紋出現(xiàn)和/或減緩細(xì)胞老化的非治療性處置人體的方法，其特征在于給其應(yīng)用含有美容學(xué)上可接受的介質(zhì)和有效量的至少一種N-?；被岬慕M合物，其中所述N-?；被徇x自N-棕櫚酰基丙氨酸、N-棕櫚酰基甘氨酸、N-棕櫚?；惲涟彼岷蚇-椰油?；彼?。
[0052]根據(jù)另一個特定方面，本發(fā)明的主題是如上文定義的方法，其中N-?；被崾荖-棕櫚酰基丙氨酸。
[0053]根據(jù)另一個特定方面，本發(fā)明的主題是如上文定義的方法，其中N-酰基氨基酸是N-棕櫚?；拾彼帷?br> [0054]根據(jù)另一個特定方面，本發(fā)明的主題是如上文定義的方法，其中N-?；被崾荖-棕櫚?；惲涟彼?。
[0055]根據(jù)另一個特定方面，本發(fā)明的主題是如上文定義的方法，其中N-酰基氨基酸是N-椰油?；彼帷?br> [0056]在如上文定義的用途和方法中，N-?；被嵬ǔＳ糜诰植繎?yīng)用于皮膚和粘膜的組合物中。所述的局部應(yīng)用組合物包含0.01%至10%質(zhì)量、更特別是0.1%至5%質(zhì)量、最特別是1%至5%質(zhì)量的所述N-酰基氨基酸。所述的治療或處置或所述的用途通過將所述的局部應(yīng)用組合物應(yīng)用于欲治療的皮膚或粘膜表面來實(shí)施。
[0057]根據(jù)另一個方面，本發(fā)明的主題是“抗老化”美容用組合物，其特征在于其包含
0.01%-10%質(zhì)量、更特別是0.1%_5%質(zhì)量、最特別是1%_5%質(zhì)量的N-酰基氨基酸，所述N-?；被徇x自N-棕櫚?；拾彼?、N-棕櫚?；彼?、N-棕櫚酰基異亮氨酸和N-椰油?；彼?。
[0058]在所述方法或所述用途中使用的組合物通常是稀的水溶液或水-醇溶液的形式；簡單乳劑或復(fù)乳的形式，例如油包水(W/0)、水包油(0/W)或水包油包水(W/0/W)乳劑，其中油是植物或礦物性質(zhì)的；或粉末的形式。也可以將它們分散在或浸潤于織物材料或無紡材料上，不管這些材料是擦拭布(wipes)、紙巾或覆蓋物(clothing)。[0059]如上文定義的N-?；被嵬ǔＥc多種類型的用于美容用配制物的佐劑或活性成分組合，不管它們是脂肪物質(zhì)、有機(jī)溶劑、增稠劑、膠凝劑、軟化劑、抗氧化劑、遮光劑、穩(wěn)定劑、發(fā)泡劑、芳香劑、離子或非離子型乳化劑、填充劑、多價螯合劑、螯合劑、防腐劑、化學(xué)屏蔽劑或無機(jī)屏蔽劑、精油、染料、色素、親水性或親脂性活性劑、潤濕劑(例如甘油)、防腐劑、著色劑、芳香劑、美容用活性劑、無機(jī)或有機(jī)防曬劑、無機(jī)填充劑(例如氧化鐵、氧化鈦和滑石粉)、合成填充劑(例如尼龍和交聯(lián)或非交聯(lián)聚(甲基丙烯酸甲酯))、硅酮高彈體、絲云母或植物提取物或者脂囊泡或通常用于美容品工業(yè)的任意其它成分。
[0060]作為可與如上文定義的N-?；被峤M合的油的實(shí)例，可以提到的有:礦物油，例如液體石臘、液體礦酯、異構(gòu)燒烴或白礦物油(white mineral oils));動物來源的油,例如角鯊烯或角鯊?fù)?；植物油，例如甜杏仁油、椰子油、蓖麻油、西蒙得木油、橄欖油、菜子油、花生油、葵花油、小麥胚芽油、玉米胚芽油、大豆油、棉子油、苜蓿油、罌粟油、南瓜籽油、月見草油、小米油、大麥油、黑麥油、紅花油、燭果油、西番蓮花油、榛子油、棕櫚油、牛油樹脂、杏仁油、美葉油(beauty-leaf oil)、大蒜芥油(sisymbrium oil)、鱷梨油、金蓋花油；乙氧基化植物油；合成油，例如脂肪酸酯，例如肉豆蘧酸丁酯、肉豆蘧酸丙酯、肉豆蘧酸鯨蠟酯、棕櫚酸異丙酯、硬脂酸丁酯、硬脂酸十六烷基酯、硬脂酸異丙酯、硬脂酸辛酯、硬脂酸異鯨蠟酯、油酸十二烷基酯、月桂酸己酯或二辛酸丙二醇酯；衍生自羊毛脂酸(lanolic acid)的酯，例如羊毛脂酸異丙酯或羊毛脂酸異鯨蠟酯，脂肪酸甘油單酯、甘油二酯和甘油三酯，例如三庚酸甘油酯、苯甲酸烷基酯、聚-α -烯烴、聚烯烴如聚異丁烯、合成異烷烴如異十六烷或異十二烷、全氟代油和硅油。在所述硅油中，可以更具體提到的有聚二甲基硅氧烷、甲基苯基聚硅氧烷、胺修飾的硅酮、脂肪酸修飾的硅酮、醇修飾的硅酮、脂肪酸和醇修飾的硅酮、聚醚基團(tuán)修飾的硅酮、環(huán)氧修飾的硅酮、氟基團(tuán)修飾的硅酮、環(huán)狀硅酮和烷基修飾的硅酮。
[0061]作為可以與該活性劑組合的其它脂肪，可以提及的有脂肪醇或脂肪酸。
[0062]在可以合并入包含如上文定義的N-?；被岬拿廊萦门渲莆锏脑龀砗?或乳化聚合物中，例如有:丙烯酸或丙烯酸衍生物的均聚物或共聚物、丙烯酰胺均聚物或共聚物、丙烯酰胺衍生物的均 聚物或共聚物、丙烯酰氨基甲基丙磺酸/乙烯基單體/丙烯酸三甲基氨基乙基酯氯化物均聚物或共聚物、植物或生物合成來源的水膠體(例如黃原膠、刺梧桐樹膠、角叉菜膠(carrageenates)、海藻酸鹽)；硅酸鹽；纖維素及其衍生物；淀粉及其親水性衍生物；聚氨基甲酸酯。
[0063]在可用于產(chǎn)生能夠被用于制備含有作為本發(fā)明主題的N-?；被岬腤/0乳劑的凝膠化水相的聚電解質(zhì)型聚合物中，有例如丙烯酸/2-甲基-[(1-氧代-2-丙烯基)氨基]-1-丙磺酸(AMPS)共聚物、丙烯酰胺/2-甲基-[(1-氧代-2-丙烯基)氨基]-1-丙磺酸共聚物、2-甲基-[(1-氧代-2-丙烯基)氨基]-1-丙磺酸/(2-羥基乙基)丙烯酸酯共聚物、2-甲基-[(1-氧代-2-丙烯基)氨基]-1-丙磺酸均聚物、丙烯酸均聚物、丙烯酰基乙基三甲基氯化銨/丙烯酰胺共聚物、AMPS/乙烯吡咯烷酮共聚物、丙烯酸和其基于碳的鏈包括10至30個碳原子的烷基丙烯酸酯的共聚物以及AMPS和其基于碳的鏈包括10至30個碳原子的烷基丙烯酸酯的共聚物。 申請人:分別以如下名稱出售這類聚合物:SimulgelTM EG、Sepigel?305> Simulgel? NS、Simulgel?800 和 Simulgel? A。
[0064]在可用于本發(fā)明的蠟中，可以提及的例如有:蜂蠟；巴西棕櫚蠟；小燭樹蠟；小冠巴西棕臘(ourioury wax)；日本臘(Japan wax);木栓纖維臘(cork fiber wax)或甘鹿臘；石蠟；褐煤蠟；微晶蠟；羊毛蠟；地蠟；聚乙烯蠟；氫化油；硅氧烷蠟；植物蠟；在環(huán)境溫度下為固體的脂肪醇和脂肪酸；在環(huán)境溫度下為固體的甘油酯。
[0065]在可用于本發(fā)明的乳化劑中，可以提及的例如有:脂肪酸、乙氧基化脂肪酸、山梨醇脂肪酸酯、乙氧基化脂肪酸酯、聚山梨酯、聚甘油酯、乙氧基化脂肪醇、蔗糖酯、烷基多苷、脂肪醇硫酸酯和磷酸酯或者烷基多苷與法國專利申請2668080、2734496、2756195、2762317、2784680、784904、2791565、2790977、2807435 和 2804432 中記載的脂肪醇的混合物。
[0066]作為可以與如上文定義的N-?；被峤M合的活性成分的實(shí)例，可以提及的有:具有使顏色變淡和脫色素作用的化合物，例如熊果苷、曲酸、氫醌、鞣花酸、維生素C、磷酸抗壞血酸酯鎂、多酚提取物、葡萄提取物、松樹提取物、酒提取物、橄欖提取物、pond提取物、N-?；鞍踪|(zhì)、N-?；?、N-?；被?、N-?；鞍踪|(zhì)的部分水解物、氨基酸、肽、總蛋白水解物、部分蛋白水解物、多元醇(例如甘油或丁二醇)、尿素、吡咯烷酮羧酸或該酸的衍生物、甘草次酸、α-沒藥醇、糖或糖衍生物、多糖或其衍生物、羥酸(例如乳酸)、維生素、維生素衍生物(例如視黃醇)、維生素E及其衍生物、礦物質(zhì)、酶、輔酶(例如輔酶Q10)、激素或激素樣物質(zhì)、大豆提取物(例如Raffermine?)、小麥提取物(例如Tensine?或Gliadine?)、植物提取物(例如富含單寧的提取物、富含異黃酮的提取物或富含萜的提取物)、淡水藻或鹽水藻提取物、精臘(essential waxes)、細(xì)菌提取物、礦物質(zhì)、通常的脂質(zhì)、諸如神經(jīng)酰胺或磷脂的脂質(zhì)、具有減肥作用的活性劑(例如咖啡因或其衍生物)、對油性皮膚而言具有抗微生物活性或凈化作用的活性劑(例如Lipacide? PVB)、具有供能或刺激性質(zhì)的活性劑(例如Sepitonic? M3或Physiogenyl?)、泛醇及其衍生物(例如Sepicap? MP)、抗老化活性劑(例如S印ilift? DPHP、Lipacide? PVB、S印ivinol?或S印ivital?)、保濕活性劑(例如S印icalm? S,Sepicalm? VG和S印ilift? DPHP)、“抗光老化”抗老化活性劑、保護(hù)真皮表皮界完整性的活性劑、增加細(xì)胞外基質(zhì)組分合成的活性劑、具有減肥、緊膚或排水活性的活性劑(例如咖啡因、茶堿、c.AMP、綠茶、鼠尾草、銀杏、常春藤、馬栗、竹、假葉(ruscus)、假葉樹、積雪草、歐石南、繡線菊、墨角藻、迷迭香或柳)、在皮膚上產(chǎn)生“熱”感的活性劑(例如皮膚毛細(xì)血管循環(huán)的激活劑(實(shí)例:煙酸鹽/酯))或者在皮膚上產(chǎn)生“新鮮”感的產(chǎn)物(實(shí)例:薄荷醇及衍生物)組成。
[0067]作為可摻入本發(fā)明的組合物的防曬劑，可以提及的有在化妝品導(dǎo)則76/768/EEC,(修訂版)，附件VII中出現(xiàn)的所有那些。
[0068]以下實(shí)驗(yàn)研究解釋說明了本發(fā)明，但是不限制本發(fā)明。本發(fā)明提出:如上文定義的N-?；被嵴{(diào)節(jié)來源于成人真皮的復(fù)制衰老性成纖維細(xì)胞的遺傳特性，因而促進(jìn)了細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生或保護(hù)并同時減少了皮膚炎癥，因此能夠延緩皺紋。該研究還證明:所述N-?；被峋幋a促進(jìn)成纖維細(xì)胞與ECM之間的相互作用以及成纖維細(xì)胞與角質(zhì)形成細(xì)胞之間的相互作用的蛋白質(zhì)。所有這些遺傳改變增強(qiáng)了它們的“抗老化”性質(zhì)。
【具體實(shí)施方式】
_9] 本發(fā)明的N-?；被峋蛷?fù)制衰老性人真皮成纖維細(xì)胞而言的“恢復(fù)”效力的i正[0070]方案
[0071]將來源自成人真皮的并且進(jìn)行加速老化(16代培養(yǎng)物)或未進(jìn)行加速老化(8代培養(yǎng)物)的正常人成纖維細(xì)胞在存在或不存在以下四種N-酰基氨基酸中的每一種的情況下培養(yǎng)96小時:N-棕櫚?；拾彼?、N-棕櫚酰基丙氨酸、N-棕櫚?；惲涟彼岷蚇-椰油?；彼?。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時，洗滌并提取細(xì)胞用于基因組分析。該分析通過Q-PCR(定量聚合酶鏈反應(yīng))進(jìn)行。
[0072]結(jié)果
[0073]圖1和2顯示，在老化人成纖維細(xì)胞中測試的N-?；被嵋鸬幕蛘{(diào)節(jié)至少編碼了促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生或限制其降解和/或還有減少皮膚炎癥的蛋白質(zhì)。
[0074]凰！顯示的圖說明了所測試的N-酰基氨基酸中的每一種減少與正常人成纖維細(xì)胞老化有關(guān)的基因過表達(dá)的能力。
[0075]圖2A和2B的圖說明了所測試的N-?；被嶂械拿恳环N補(bǔ)償與正常人成纖維細(xì)胞老化有關(guān)的基因表達(dá)的降低的能力。
[0076]對于這些圖中的每一幅圖，結(jié)果以與年輕細(xì)胞(100%)相比基因表達(dá)的相對水平的改變百分比表示，直方圖上方的百分比表示恢復(fù)百分比，并且所示的縮略語是按照官方Genbank命名法給出的。
[0077]這些圖證明·了以下結(jié)果:
[0078]-棕櫚酰基丙氨酸引起了編碼促炎細(xì)胞因子IL-6和金屬蛋白酶MMP-1的基因的表達(dá)水平降低，并且還引起了編碼皮膚橋蛋白(DPT)和I型膠原(COLlAl)的基因的表達(dá)水平增加。
[0079]-棕櫚?；拾彼嵋鹆司幋aIL-6和MMP-1的基因的表達(dá)水平降低，并且還引起了編碼DPT、巢蛋白(NID)、生腱蛋白C(TNC)、多效營養(yǎng)因子(PTN)和熱激蛋白(HSP90A)的基因的表達(dá)水平增加。
[0080]-棕櫚?；惲涟彼嵋鹆司幋aIL-6和serpin2B的兩種基因的表達(dá)水平降低，并且還引起了編碼DPT、C0L1A1、雙糖鏈蛋白聚糖(BGN)、NID、TNC、PTN、HSP90A、serpinlH(HSP47)和波形蛋白的基因的表達(dá)水平增加。
[0081]-椰油?；彼嵋鹆司幋aIL-6的基因的表達(dá)水平降低，并且還引起了編碼DPT、NID、TNC、PTN和HSP90A的基因的表達(dá)水平增加。
[0082]除了它們的抗老化性質(zhì)、特別是它們保護(hù)細(xì)胞外基質(zhì)或促進(jìn)其產(chǎn)生的能力以外，所測試的所有N-酰基氨基酸都表現(xiàn)出抗炎作用。一方面與其它刺激的活性成分相比，或者另一方面與能夠引起基質(zhì)產(chǎn)生減少的抗炎分子相比，這種雙重效力賦予了它們明確的優(yōu)點(diǎn)。最后，這些LAA能夠引起其它基因調(diào)節(jié)，從而增強(qiáng)它們的抗老化效力。
[0083]本發(fā)明的N-?；被岬摹翱拱櫋毙ЯΦ捏w內(nèi)i正明
[0084]方皇
[0085]為了對具有皮膚老化皺紋的45-76歲的高加索人個體(約20名志愿者/組)的臉部進(jìn)行每日兩次局部應(yīng)用，將所測試的N-酰基氨基酸配制成在乳化劑對MontanoVTM202和 Montanov?82、增稠劑 Sepiplus?400 和 Montanox?60D 中的 1% 乳膏凝膠。
[0086]參比的市售脂肽產(chǎn)品也按照相同的實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行測試。
[0087]為本研究所選的解剖區(qū)域是眼周圍區(qū)域(魚尾紋)。[0088]治療周期為42天。
[0089]以前已經(jīng)通過將測試制劑的貼劑應(yīng)用48小時證明了沒有皮膚刺激性。
[0090]結(jié)果
[0091]結(jié)果以與參比市售脂肽產(chǎn)品相比總皺紋表面積和皺紋數(shù)表示。
[0092]N-棕櫚?；彼崾箍偘櫦y表面積減少15%。
[0093]N-棕櫚酰基甘氨酸、N-棕櫚?；惲涟彼岷蚇-椰油?；彼岱謩e使皺紋數(shù)減少 35%、40% 和 33%。
[0094]圖3歸納了在測試開始時和在用(A)參比脂肽或(B)N-棕櫚?；拾彼崦咳諆纱翁幹眠_(dá)42天后治療區(qū)域(魚尾紋)的各種照片。
[0095]美容用配制物實(shí)施例
[0096]
【權(quán)利要求】
1.意欲延緩皺紋出現(xiàn)和/或減緩細(xì)胞老化的非治療性處置人體的方法，其特征在于給其應(yīng)用含有美容學(xué)上可接受的介質(zhì)和有效量的至少一種N-?；被岬慕M合物，其中所述N-?；被徇x自N-棕櫚?；拾彼岷蚇-棕櫚?；惲涟彼?。
2.如權(quán)利要求1所定義的方法，其中N-酰基氨基酸是N-棕櫚?；彼?。
3.如權(quán)利要求1所定義的方 法，其中N-酰基氨基酸是N-棕櫚?；惲涟彼?。
【文檔編號】A61Q19/08GK103432011SQ201310346813
【公開日】2013年12月11日 申請日期:2009年7月24日 優(yōu)先權(quán)日:2008年8月29日
【發(fā)明者】C·斯托爾茨, S·杜蒙特, C·塔耶布瓦 申請人:化工產(chǎn)品開發(fā)公司Seppic